HPLC法测定泽泻汤中泽泻醇A、泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B含量

目的:建立高效液相色谱(HPLC)分析方法同时测定泽泻汤中泽泻醇A、泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B的含量。方法:水煎法制备泽泻汤溶液。HPLC法检测泽泻汤中3种有效成分泽泻醇A、泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B的含量,并进行方法学考察。选用Agilent HC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(78∶22)为流动相等度洗脱,柱温30℃,体积流量1 ml/min,紫外检测器检测波长220 nm,进样量10μl。结果:泽泻醇A在8.3～166.0μg/ml、泽泻醇B在5.4～107.0μg/ml、23-乙酰泽泻醇B在9.3～186.0μg/ml范围内线性关系良好。重复性实验(n=6)泽泻醇A、泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇B的相对标准偏差(RSD)分别为2.37%、2.17%、2.16%;稳定性实验RSD均0.2%;日内/日间精密度实验RSD均1.1%;三者的平均加样回收率分别为99.31%、101.52%、101.76%,RSD分别为2.06%、2.79%、1.66%。测定制备的3批泽泻汤溶液中泽泻醇A、泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B的平均含量分别为139.2、615.1、423.9μg/ml。结论:该方法操作简便,重复性和稳定性好,精密度高,适用于泽泻汤中泽泻醇A、泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B的含量测定。     

HPLC法测定复方泽泻滴丸中23-乙酰泽泻醇B的含量

建立HPLC法测定复方泽泻滴丸中23-乙酰泽泻醇B含量的方法. 方法 采用岛津LC-10AT依利特Hypersil C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm);以乙腈:水=90∶10为流动相;流速为0.8 mL·min-1;检测波长为208nm;柱温:30℃. 结果23-乙酰泽泻醇B在0.012～0.12mg...     

不同等级川泽泻中23-乙酰泽泻醇B含量测定

目的:主要测定不同等级川泽泻中23-乙酰泽泻醇B含量,为饮片的分级标准提供参考。方法:通过HPLC法。结果:23-乙酰泽泻醇B的加样回收率为100.17%,RSD为1.24%符合分析要求。结论:川泽泻单以现代的分析方法测定其中的23-乙酰泽醇B含量很难区分开不同等级的药材,要区分开不同等级的川泽泻还要借鉴传统的分级标准。     

泽泻炮制过程中23-乙酰泽泻醇B的转化

目的分析泽泻中三萜类成分在炮制加工过程中的变化。方法采用超临界流体色谱分离技术(SFC)及HPLC测定方法,对泽泻加工炮制前后的三萜类成分的变化进行研究。结果在泽泻药材加工成生泽泻饮片的烘干(70℃)过程中,有少量23-乙酰泽泻醇B转化成了24-乙酰泽泻醇A和泽泻醇B;而在泽泻盐制(190~200℃)及麸制(160~170℃)过程中,23-乙酰泽泻醇B则大量转化为24-乙酰泽泻醇A和泽泻醇B,两者又进一步转化成了泽泻醇A。结论在高温炮制过程中,泽泻药材中三萜类主成分23-乙酰泽泻醇B出现两条转变途径,一条是氧环开裂并重排生成24-乙酰泽泻醇A,进一步脱乙酰基转化成泽泻醇A;另一条是先脱乙酰基生成泽泻醇B,继而氧环开裂转化成泽泻醇A。     

泽泻中23-乙酰泽泻醇B的含量测定研究

目的 主要是确定泽泻的最佳采收时间、最佳炮制工艺、制定泽泻的定量标准，确保泽泻临床用药安全有效。方法 采用高效液相色谱法测定各样品中23－乙酰泽泻醇B的含量。结果 23－乙酰泽泻醇B的平均回收率为98．80％，符合分析要求。泽泻中23－乙酰泽泻醇B的含量以不低于0．050％为宜。结论 可作为泽泻定量控制的方法。     

建泽泻中泽泻醇B-23-乙酸酯含量的HPLC测定

采用高效液相色谱法测定不同商品规格的福建泽泻 (建泽泻 )中泽泻醇 B-2 3 -乙酸酯的含量 ,并对测定方法进行优化。结果表明不同等级的建泽泻中泽泻醇 B-2 3 -乙酸酯含量未见显著差异 ,优化建立的高效液相色谱方法准确、稳定、简便、可行。     

MPLC合p-HPLC法分离制备泽泻中23-乙酰泽泻醇B

目的建立快速制备泽泻药材中23-乙酰泽泻醇B对照品的方法。方法采用中低压正相硅胶柱色谱(MPLC)合高压反相色谱法(p-HPLC),MPLC:硅胶柱:3 cm×13 cm,40 g;流动相:石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱;流速:50 ml/min;p-HPLC:Ultimate XB-C18:21.2 mm×250 mm,10μm;流动相:乙腈-水(65:35);流速:15 mL/min;检测波长:208 nm。结果 MPLC合p-HPLC法一次可以从2 g泽泻乙酸乙酯粗提物中分离制备得到23-乙酰泽泻醇B 40.2 mg。结论建立的MPLC合p-HPLC法简便、快捷、高效地获得泽泻中23-乙酰泽泻醇B对照品。     

正交试验优选泽泻中23-乙酰泽泻醇B的提取工艺

目的 优选泽泻中23-乙酰泽泻醇B的超声提取工艺.方法 采用超快速液相色谱法测定泽泻中23-乙酰泽泻醇B的含量,以乙醇浓度、提取时间、超声功率、料液比为考察因素,以泽泻中23-乙酰泽泻醇B的含量为考察指标,采用L9(34)正交试验优选超声提取工艺条件.结果 最佳提取工艺为提取溶剂95％乙醇,提取时间45 min,超声功率250 W,料液比1∶50.结论 该提取工艺具有效率高、时间短、能耗低、环保等优点,可为泽泻中23-乙酰泽泻醇B的工业化生产和新药开发提供依据.     

双波长HPLC-DAD法测定闽产泽泻三萜类含量

目的为评价闽产泽泻质量,建立双波长HPLC-DAD法测定闽产泽泻中三萜类含量的分析方法。方法色谱柱:Ultimate XB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:乙腈-水(65∶35);流速1 mL/min,检测波长:208和245 nm。结果 23-乙酰泽泻醇C、泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇B的线性范围为2.335~23.35μg/mL、11.14~111.40μg/mL、11.13~111.30μg/mL,平均加样回收率为95.6%、96.4%、97.8%,RSD为2.46%、2.28%、1.77%。结论双波长HPLC法可简便、快捷、准确地用于泽泻中三萜类含量的定量分析。     

六味地黄丸药渣中4种活性成分含量测定及抗氧化活性研究

目的 采用HPLC法测定六味地黄丸药渣中丹皮酚、23-乙酰泽泻醇B、茯苓酸、熊果酸的含量,并评价六味地黄丸药渣及单味饮片(熟地黄、泽泻、牡丹皮、山茱萸)药渣的体外抗氧化活性.方法 Waters Athena C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.08％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱;柱温为35℃...     

高效液相色谱-蒸发光散射法测定泽泻中23-乙酰泽泻醇B

泽泻为泽泻科植物泽泻Alisma orientalis（Sam.）Juzep.除去须根及粗皮的干燥块茎,在历代本草中均有记载,《中国药典》各版中也均有收载.泽泻具有利尿、降血脂、降血压等作用.临床主要用于治疗高血压、高脂血症、水肿胀满、小便不利等症.文献报道,泽泻醇是泽泻利尿和降血脂的有效成分之一.由于23-乙酰泽泻醇B（23-acetyl alisol B）的量在泽泻中较高,故近几年有文献将其作为控制泽泻质量的指标性成分,文献报道的23-乙酰泽泻醇B的测定方法有薄层扫描法和高效液相色谱法,后者多采用紫外末端吸收检测,紫外末端吸收作为检测方法时基线难平衡,测定中干扰大.蒸发光散射检测器（ELSD）为质量通用型检测器,具有灵敏度高、可进行梯度洗脱等优点,本实验建立了HPLC-ELSD法测定泽泻中23-乙酰泽泻醇B的方法.     

HPLC法同时测定泽泻中2种活性成分的含量

目的 建立高效液相色谱法同时测定泽泻中23-乙酰泽泻醇B和24-乙酰泽泻醇A的含量.方法 采用Diamonsil C18(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(80:20,v/v),流速为0.8 mL/min,检测波长为208 nm,柱温为35℃,进样量为20μL.结果 23-乙酰泽泻醇B和24-乙酰泽泻醇A均在1~50 mg/L(R=0.9995)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,生泽泻的平均回收率分别为99.6%和98.9%,盐泽泻的平均回收率分别为99.1%和99.8%.结论 方法简便、快速、具有良好的重现性和稳定性,可用于泽泻药材的质量控制.     

23-乙酰泽泻醇改善脂多糖诱导的急性肺损伤的作用机制

目的 探讨23-乙酰泽泻醇对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的急性肺损伤的作用机制。方法 8~10周龄C57BL6J雄性小鼠24只,体质量为23.5~27.5g,将其按照随机数字表法分为对照组、模型组(LPS组)、23-乙酰泽泻醇组、LPS+23-乙酰泽泻醇组,每组各6只。小鼠气管内注射200μg LPS诱导急性肺损伤模型;采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色、肺脏湿重/干重比值和炎性指数评价急性肺炎程度;采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)试剂盒检测促炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-1(interleukin-1, IL-1)和白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)的水平;采用试剂盒检测丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶2(mitochondrial superoxide dismutase2, SOD2)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, Gpx)的水平/活性;采用Western blot法检测相关信号分子的改变。结果 HE染色结果显示,LPS组小鼠肺组织炎性浸润明显增多,肺脏湿重/干重比值和炎性指数高于对照组;LPS组小鼠肺脏组织中TNF-α、IL-1和IL-6的水平明显高于对照组;LPS组小鼠的ROS和MDA含量高于对照组,SOD2和Gpx的活性明显低于对照组。LPS+23-乙酰泽泻醇组小鼠的肺脏湿重/干重比值和炎性指数低于LPS组;炎性细胞因子的水平低于LPS组;ROS和MDA含量低于LPS组。但是SOD2和Gpx的活性明显高于LPS组。Western blot法检测结果显示,LPS组小鼠肺脏组织中JNK1/2显著上调,P-ERK1/2明显增加;而LPS+23-乙酰泽泻醇组肺脏组织中JNK1/2和P-ERK1/2的表达低于LPS组。结论 23-乙酰泽泻醇可以通过抑制JNK1/2-ERK1/2减轻LPS诱导的急性肺损伤。23-乙酰泽泻醇可能成为治疗急性肺损伤的治疗手段。     

薄层扫描法测定闽产泽泻中泽泻醇B的含量

为确立泽泻中泽泻醇B的测定方法，采用制备泽泻中主要成分泽泻醇B的标准溶液，薄层色谱分离后，进行光密度扫描测定，结果显示样品中泽泻B含量分别为0．1036％、0．1050％、0．2245％、0．3157％，在1．5h内稳定，回收率101．3％，说明薄层扫描法灵敏、专属，重现性好，简便易行。     

闽产泽泻收获期不同部位萜类成分含量比较

目的考察收获期泽泻不同部位萜类成分含量并进行含量比较。方法以23-乙酰泽泻醇B和泽泻醇B为指标,采用高效液相色谱法Agilent Technologies 1260系统,Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈∶水(75∶25),检测波长208 nm,流速1.0 m L·min-1,柱温30℃。结果收获期泽泻23-乙酰泽泻醇B的含量为芽>块茎>茎>块茎茎皮>须根>叶,而泽泻醇B的含量为块茎>芽>块茎茎皮>茎,须根和叶中未检出。结论收获期泽泻不同部位在两种萜类成分含量存有差异,其中块茎和芽中23-乙酰泽泻醇B和泽泻醇B含量最高,其含量显著高于其它部位,收获期枯萎丢弃的茎和茎皮中也分布有23-乙酰泽泻醇B和泽泻醇B,说明其可能也具有一定的药用价值,具有开发利用的潜在价值。     

HPLC-ELSD测定五苓散中2种泽泻醇的含量

目的 采用HPLC-ELSD测定五苓散中泽泻醇A24-乙酸酯、泽泻醇B23-乙酸酯的含量.方法 色谱柱:大连依利特Hypersil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:乙腈-水(75:25);检测器:Alltech2000型蒸发光散射检测器;流速为0.8 mL·min-1;柱温:室温;ELSD气体:高纯氮气;流速为2.0 L·min-1;漂移管温度:82℃.结果 在五苓散中测定出的泽泻醇A24-乙酸酯、泽泻醇B23-乙酸酯分别在0.330～1.980 μg(r=0.999 5),0.624～4.680μg(r=0.999 4)内呈良好的线性关系.平均回收率分别为101.4%,99.6%,RSD分别为1.7%,3.0%(n=6).结论 采用本法测定五苓散中泽泻醇A24-乙酸酯、泽泻醇B23-乙酸酯的含量,方法简便、可靠、重复性好.     

泽泻药材与饮片的质量标准研究

目的：研究泽泻药材与饮片的质量标准。方法：对泽泻药材与饮片进行性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别,并用高效液相法测定其中23-乙酰泽泻醇B的含量。结果：总结了泽泻药材与饮片的主要鉴别特征;23-乙酰泽泻醇B浓度在0.925-59.2μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系（r=0.9999）;平均回收率为103.24%,RSD=1.53%（n=6）。结论：所建标准可用于泽泻药材与饮片的质量控制。     

HPLC法测定浓缩六味地黄丸中马钱苷含量

目的：建立浓缩六味地黄丸中马钱苷含量测定方法。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法,选用C18柱,以四氢呋喃-乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液（体积比为1∶8∶4∶87）为流动相,检测波长为236nm,柱温40℃。结果：精密度实验RSD为1.18%,稳定性实验RSD为2.18%,重现性实验RSD为1.32%,线性范围0.2355～1.6485μg,标准曲线C=1591665.3A-12161.7（r=0.9996,P〈0.05）,平均加样回收率100.43%,RSD为2.18%。结论：该方法测定浓缩六味地黄丸中马钱苷含量,简便、灵敏、稳定、可靠。     

正交法优选盐炙泽泻的最佳炮制工艺

目的:优选盐炙泽泻的最佳炮制工艺,制定合理的炮制工艺参数。方法:以24-乙酰泽泻醇A及23-乙酰泽泻醇B的含量为指标,分别选择盐用量,炒制温度和炒制时间作为考察因素,采用正交实验法,对泽泻的炙制工艺进行优选。结果:炒制温度对泽泻中两种泽泻醇的含量有显著性影响,最佳炮制工艺为每30g药材,用12mL盐水(含0.6g盐),闷润5h,在110℃下炒制35min。结论:盐炙泽泻的最佳炮制工艺合理可行。     

泽泻配方颗粒三萜类成分在胃液中的稳定性考察

目的以23-乙酰泽泻醇B为指标性成分,考察泽泻配方颗粒在胃液pH值下的稳定性。方法利用旋转蒸发仪简单模拟人体胃的动态过程,以人工胃液为提取溶剂,提取泽泻配方颗粒中23-乙酰泽泻醇B,用薄层色谱法进行初步检识。采用色谱柱C18-AR-ⅡWaters（4．6mm×250mm）为固定相,乙腈-水（73：27）为流动相,检测波长208nm。考察泽泻三萜类成分在胃液pH值下的稳定性。结果在0．5h和1h提取液中未检识到23-乙酰泽泻醇B,说明23-乙酰泽泻醇B在胃液pH值下不稳定,易发生转化。结论该结果可为泽泻的作用成分提供参考,进而指导临床应用。