MDR1基因荧光定量检测与Ⅲ期卵巢上皮性癌的相关性

目的 探讨Ⅲ期卵巢上皮性癌患者癌组织、癌旁组织、外周血白细胞及腹水中多药耐药（MDR1）基因表达率及MDR1 cDNA拷贝数与预后的关系。方法 应用荧光定量PCR（FQ-PCR）技术，对78例Ⅲ期卵巢癌患者癌组织、癌旁组织及外周血和47例卵巢癌患者腹水中MDR1 cDNA含量进行检测。结果 ①Ⅲ期卵巢上皮性癌组织、癌旁组织、外周血白细胞和腹水中MDR1阳性（〉10^2拷贝／ml）表达率分别为65．4％，38．5％，35．9％和44．7％；对照组外周血白细胞MDR1 cDNA定量结果均为阴性；②卵巢癌组织中MDR1 cDNA含量≥lOS拷贝／nil者对应外周血和腹水中MDR1表达率为89．3％和90．5％；MDR1 cDNA含量〈105拷贝／ml者对应外周血和腹水中MDR1表达率为13．0％和7．7％；③外周血MDR1 cDNA含量≥105拷贝／ml的卵巢癌患者肿瘤近期复发率为54．5％（6／11）；MDR1 cDNA含量〈105拷贝／nil的患者近期复发率为23．5％（4／17）；外周血MDR1表达阴性的患者近期复发率为12．0％（6／50）。结论 Ⅲ期卵巢上皮性癌组织中MDR1表达率在一半以上；外周血和腹水中MDR。表达与癌组织MDR1 cDNA含量成正相关；外周血MDR1 cDNA含量≥105拷贝／ml的卵巢癌患者肿瘤近期复发率明显增高。     

用逆转录—多聚酶链反应检测巢癌及大肠癌患者多药耐药基因的表达

应用逆转录－多聚酶链反应检测卵巢癌１２例，大肠癌１５例，肝癌２例肿瘤多药耐药基因表达。以长春新碱敏感细胞株ＫＢ和耐药株ＫＢｒ分别作阴性及阳性对照，卵巢癌患者ＭＤＲ１表达增高者为５０％，大肠癌增高者７５％。     

MDR1、GST-π、p53、HER-2／neu基因表达对卵巢癌近期化疗效果的影响（摘要）

目的评价MDR1、GST－π、p53、HER－2／neu基因过度表达在卵巢癌化疗耐药中的临床价值。方法SABC法检测了49例卵巢癌标本MDR1、GST－π、p53、HER－2／neu基因的表达。结果卵巢癌MDR1、GST－π、p53、HER－2／neu表达阳性者近期化疗有效率分别为14．30％、27．3％、41．67％、24．63％,而表达阴性者近期化疗有效率分别为53．60％（P＜0．05）、56．30％（P＜0．05）、48．20％（P＞0．05）、75．00％（P＜0．05）,MDR1、、HER－2／neu基因表达密切相关。结论卵巢癌MDR1、GST－π、HER－2／neu基因表达明显影响卵巢癌的近期化疗效果,MDR1与HER－2／neu表达的相关性提示晚期卵巢癌MDRI表达可能与疾病的进展有关而非仅由化疗所诱发,HER－2／neu似有可能作为卵巢癌耐药评价标志的一个补充,但p53基因突变与卵巢癌化疗耐药的关系尚待阐明。     

多药耐药基因MDR1在胃肠癌的表达及其临床意义

目的为探索研究胃肠道癌患者的癌细胞中多药耐药基因（MDR1）与肿瘤分化程度及淋巴转移的关系。方法采用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）的方法检测了30例胃癌、大肠癌患者的多药耐药基因（MDR1）的表达。结果提示大肠癌有淋巴转移MDR1-MRNA表达增加。而胃癌MDR1-MRNA基因表达与有淋巴转移有关,表明胃肠道高分化癌MDR1与低分化癌MDR1无明显差异。结论本组实验研究对其指导治疗及判断预后有重要意义。     

胃癌病人外周血及肿瘤组织中多药耐药基因表达的相关性

目的 探讨多药耐药基因（MDR1）在胃癌病人外周血中的表达，并观察与肿瘤组织中多药耐药基因（MDR1）表达的相关性。方法 荧光定量RT-PCR法检测胃癌病人外周血及肿瘤组织中MDR1表达水平。结果 病理证实的初治胃癌病人31例，外周血中MDR1阳性率38．7％，肿瘤组织中MDR1阳性率77．4％．肿瘤组织中MDR1阳性者中50％外周血MDR1阳性，而肿瘤组织中MDR1阴性者中外周血MDR1无阳性表达，二者有相关性（P〈0．05）。结论 外周血中MDR1表达与肿瘤组织中MDR1表达具有一致性，前者可作为后者的补充。     

83例大肠癌多药耐药基因的检测

目的：研究复发及多源发大肠癌多药耐药基因的表达。方法：采用逆转录－多聚酶链式反应（RT－PCR）技术对83例大肠癌多药耐药（mdr-1)基因进行了检测。结果：原发大肠癌mdr-1基因表达率30．9％（12／42）,复发大肠癌mdr-1基因表达率61．3％（19／31）,两者有显著差异（P＜0．05）。多源发大肠癌mdr-1基因阳性表达率60％（6／10）。mdr-1基因表达的阳性和阴性与耐药与否的总符合率达10＋16／31（P＜0．05）。结论：大肠癌组织mdr-1基因的表达水平,这对正确判断病人耐药能力的高低,合理术后化疗,判断预后都具有重要意义。     

肺癌患者外周血中多药耐药基因表达检测

目的：检测多药耐药基因（MDR1）在肺癌患者外周血中表达，探讨MDR1的表达与肺癌耐药性之间的关系。方法：采用逆转录-套式-聚合酶链反应（RT-NP-PCR）技术检测40例肺癌患者外周血中MDR1的表达水平，并与40例对照组进行比较。结果：肺癌组中MDR1阳性检出率15%（6/40），其中3例既往有三次化疗病史，2例有二次化疗病史，1例为化疗前检测，且为腺癌。34例阴性者，24例为化疗前检测，对照组无1例阳性。结论：肺癌患者外周血中MDR1表达水平与接受化学药物治疗密切相关。临床上可根据MDR1表达情况，合理制定化疗方案。     

三种肿瘤耐药基因在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨肺耐药蛋白（Lung resistance protein，LRP），多药耐药蛋白（Multldrug resistance—associated protein，MRP）和多药耐药基因（Multidrug resistance，MDR1）的mRNA在非小细胞肺癌（Non-small cell cancer，NSCLC）中共表达及临床意义。方法RT—PCR检测NSCLc冰冻组织中上述耐药基因的mRNA水平。结果LRP、MRP、MDR1mRNA阳性率分别为71．2％、81．8％和37．9％；MRP与、MDR1、MRP与LRP、LRPYUMDR1及MRP、LRPYUMDR1共表达者分别为16．7％（11／66）、53．0％（35／66）、19．7％（13／66）及12．1％（8／66）。LRP与MRP阳性相关（t=0．47，P=0．001），LRP、MRP与MDR1无相关性（r=0．98，P=0．0r77；r=0．25，P=0．053）．3种耐药基因表达在NSCLC各期、各分化组中差异无显著性（P≥0．05）。肺腺癌换了有效组LRP、MBPmRNA（0．53±0．08；0．41±0．01）及鳞癌化疗有效组LRPmRNA表达（0．42±0．03）明显低于换了无效组（1．14±0．3，0．82±0．04，0．97±0．01，P〈0．05）；LRP与MRP、LRP、MRP与MDR1共表达者，中位生存期明显缩短（P〈0．05）。多变量Cox回归分析，仅LRP＋MRP、LRP＋MRP＋MDR1共表达有预后意义。结论非小细胞肺癌原发耐药与LRP、MRP、MDR1共同作用有关。     

大肠癌患者外周血细胞角蛋白-20信使核糖核酸与白细胞介素-10联合检测的临床意义

目的 联合检测大肠癌患者外周血细胞角蛋白－20信使核糖核酸（CK－20 mRNA)与血浆中白细胞介素－10（IL－10）,并评价其临床意义。方法 应用RT－PCR检测大肠癌患者外周血CK－20mRNA；应用ELISA检测其血浆IL－10浓度。结果 对照组25例健康查体者，其外周血中未见CK－20mRNA的表达；观察组46例大肠癌患者，25例外周血中CK－20mRNA表达阳性。大肠癌患者外周血CK－20mRNA的表达与Dukes分期关系为：A组20．0％（1／5），B期27．3％（3／11），C期61．1％（11／18），D期83．3（10／12）；其中C，D期与A，B期比较差异有高度显著性（P＜0．01）。大肠癌患者血浆IL－10浓度明显高于健康查体者，且与Dukes分期显示相关。外周血CK－20mRNA阳性表达的大肠癌患者血浆IL－10水平高于阴性者。结论 联合检测大肠癌患者外周血CK－20mRNA与IL－10，掌握检测大肠癌转移的相关指标，可以及时全面地了解大肠癌患者病情进展情况。     

恶性血液病MDR1及CD34抗原表达和临床意义

目的：探讨急非淋白血病（ANLL）、慢性粒细胞白血病（CML）及骨髓增生异常综合症（MDS）患者多药耐药基因（MDR1）及CD34抗原的表达和化疗疗效的关系。方法：应用流式细胞仪检测ANLL、CML及MDS患者外周血或骨髓MDR1及CD34抗原表达。结果：CML加速／急变期、ANLL复发／初治者及MDS中的RAEB及CMML者的MDR1及CD34阳性率明显增高，并且MDR1及CD34高度相关，匀是化疗疗效的副性指标。结论：联合检测MDR1及CD34对判断ANLL、CML及MDS的病情及预测化疗效果具有重要意义，并对制定合理的化疗方案有较好的参考价值。     

EFFECTS OF MUTATION AND EXPRESSION OF PTEN GENE mRNA ON TUMORIGENESIS AND PROGRESSION OF EPITHELIAL OVARIAN CANCER

PTEN/MMAC1/TEP1phosphotaseandtensinho-mologuedeletedonchromosome10/mutatedinmultipleadvancedcancers/TGF-βregulatedandepit-helialcellenrichedphosphatase1mapstohumanchro-mosomesubband10q32.3andencodesadualspecificproteinphospholipidphosphatasethatisinvolvedinavarietyofsignaltransductionpathways.1PTENin-hibitsshc'sphosphorylationandthereforeblockstheactivationoftheRas/MAP-kinaseMAPKpathwayhe-nceexplainingthetumorsuppressiveeffectofPTEN.2AnothermechanismofPTENisdephosphorylationandina…     

三氧化二砷对卵巢癌细胞抑制作用及机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对卵巢癌细胞HO-8910体外生长的影响及其相关机制.方法：用倒置显微镜对细胞进行观察,用免疫细胞化学染色法检测p53基因表达.结果：（1）三氧化二砷作用浓度在0～12.0 μmol/L时,随着剂量的增加对卵巢癌细胞抑制作用增强.（2）卵巢癌细胞p53基因表达增强.结论：较高浓度三氧化二砷对卵巢癌细胞株HO-8910细胞有生长抑制作用并呈剂量-时间依赖效应 As2O3作用引起卵巢癌细胞HO-8910细胞凋亡的机制与p53基因表达增强有关.     

米非司酮调控卵巢癌细胞表达葡萄糖神经酰氨合成酶并逆转其多药耐药性

目的 观察米非司酮体外逆转COC1/DDP细胞对顺铂的多药耐药性(MDR)以及对细胞葡萄糖神经酰氨合成酶(GCS)表达的影响,初步探讨其增敏机制.方法 以米非司酮为MDR修饰剂,MTT法检测米非司酮对COC1/DDP的增敏效应.RT-PCR技术分析耐药株COC1/DDP的MDR逆转前后以及亲本株COC1细胞的GCS在mRNA水平的表达.结果 米非司酮增强COC1/DDP细胞对DDP敏感性;与COC1相比,COC1/DDP细胞的GCS在mRNA水平的表达增强;米非司酮使GCS表达降低,效应呈剂量依赖关系.结论 无毒性剂量米非司酮可以在体外增加卵巢癌COC1/DDP细胞对DDP的敏感性.作用机制与抑制GCSmRNA表达有关.     

小干扰RNA诱导人卵巢癌细胞MDR1基因沉默的研究

目的 采用RNA干扰技术逆转人卵巢癌OVCAR8/TR细胞中多药耐药基因,探讨该技术能否有效地抑制多药耐药基因MDR1的表达,降低该基因编码的糖蛋白P-gp的水平.方法 设计合成针对MDR1的小片段RNA(siRNA),将合成的siRNA用脂质体转染具有多药耐药基因MDR1高表达的人卵巢癌泰素耐药细胞株OVCAR8/TR,用荧光定量RT-PCR检测转染后不同时间点MDR1的mRNA的变化,流式细胞仪定量测定转染后不同时间点P-gp表达的情况.结果 MDR1的siRNA转染细胞48 h基因的抑制达最高,转染的第5 d回到正常水平.阴性对照组mRNA的量与未转染组的mRNA的量差异无统计学意义.P-gp在转染后的72 h其抑制最强,至第5 d时恢复接近正常水平,阴性对照组蛋白表达与未转染组的蛋白表达差异无统计学意义.结论 siRNA能够有效地抑制多药耐药基因MDR1的mRNA和P-gp的表达,为逆转卵巢癌的多药耐药带来了新的希望.     

人卵巢癌顺铂耐药细胞株的建立及耐药机制研究

目的：建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1／DDP,探讨其耐药的机制。方法：采用逐步递增DDP浓度、体外间歇诱导法诱导卵巢癌细胞系COC1,建立卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1／DDP;CCK-8试剂盒（Cell Counting Kit-8）检测各种抗癌药对COC1和COC1／DDP细胞增殖的抑制作用,并计算耐药指数;GSH和GSSG试剂盒检测细胞内谷胱甘肽（glutathione,GSH）的水平;高效液相色谱测定细胞内顺铂的含量。结果：历时5个月建立COC1／DDP,对顺铂耐药性稳定,耐药指数为9．44;与COC1比较,COC1／DDP细胞内GSH的水平增高,顺铂含量下降（P〈0．01）。结论：入卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1／DDP耐药性稳定,耐药机制可能与GSH／GST-π解毒系统活性增强,减少细胞内顺铂含量有关。     

REVERSION OF MULTIDRUG RESISTANCE IN THE P-GLYCOPROTEIN POSITIVE BREAST CANCER CELL LINE（MCF-7／ADR） BY INTRODUCTION OF HAMMERHEAD RIBOZYME

A hammerhead ribozyme which slte-specifically cleaved the GUC position in codon 880 of the mdrl mRNA was designed. The target site was chosen between the two ATP binding sites, which may be impottant for the function of the P-C-p as an ATPodependent pump. A DNA sequence encoding the riboxyme gene was then incorporated into a eukaryotic expression vector (pH 0 Apt-1 neo) and transfeeted into the breast cancer cell line MCF-7/Adr, which is resistant to adrlamycin and expresses the MDR phenmype. The ribozyme was stably expressed in the cell line by the RNA dot blotting assay. The result of Northern blot assay showed that the expressed ribozyme could decrease the level of mdrl mRNA expression by 83.5%; and the expressed ribozyme could inhiblte the formation of P-glycoprotein detected by immuno-cytochemistry assay and could reduce the cell‘‘s resistance to adrimycin; this means that the resistant cells were 1 000-fold mcre resistant than the parental cell line(MCF-7), whereas those cell clones that showed ribozyme expression were only 6-fold more resistant than the parental cell line. These results show that a potentially useful tool is at hand which may inactivate MDR1 mRNA and revert the multidrug resistance phenotype.     

大肠癌病人血清胃泌素水平变化及其意义

采用放射免疫方法测定了３１例大肠癌、１３例非肿瘤者血清标本和２０例大肠癌组织、邻近肿瘤（〈３ｃｍ）及远离肿瘤（５ｃｍ）之结肠粘膜组织匀浆标本中的胃泌素浓度。发现：Ｄｕｋｅｓ Ｃ．Ｄ期大肠癌病人血清胃泌素显著高于非肿瘤者（Ｐ〈０．０５）；血清胃泌素浓度与病程进展呈显著正相关（Ｐ〈０．０５）；直肠癌病人血清胃泌素显著高于非肿瘤（Ｐ〈０．０５）；血清胃泌素水平与肿瘤分化程度无关；肿瘤切除后血清胃泌素显著     

多药耐药基因MDR1在大肠癌的表达及意义

目的探讨多药耐药基因(MDR1基因)在大肠癌组织中的表达及其与临床病理的关系。方法应用RT-PCR方法检测了93例手术切除大肠癌组织中的MDR1 mRNA。结果MDR1 mRNA的阳性率为37.63%,MDR1基因的表达与年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移及Dukes分期等无关。结论化疗前大肠癌组织中MDR1基因即存在较高的表达率,且独立于病理形态学之外。提示化疗前要区别对待,对MDR1基因表达阳性者应合理选择化疗。