UPLC-MS/MS测定血浆中伊伐布雷定及其活性代谢产物的含量

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中伊伐布雷定及其活性代谢产物(N-去甲伊伐布雷定)的含量。方法 选用Waters Acquity BEH C₁₈(50 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱;流速为0.4 mL·min^-1;电喷雾离子源,多反应监测。伊伐布雷定：[M+H]⁺,m/z 469.3→177.2,N-去甲伊伐布雷定：[M+H]⁺,m/z 455.2→262.2,卡马西平：[M+H]⁺,m/z 237.1→194.2。结果 伊伐布雷定线性范围为0.2~100 ng·mL^-1(r=0.998 1),N-去甲伊伐布雷定线性范围为0.05~25 ng·mL^-1(r=0.993 1);两者日间、日内精密度均<15%,方法回收率>90%,稳定性较好。结论 该方法快速、灵敏、重复性好,适用于血浆中伊伐布雷定及其代谢产物含量测定。     

LC-MS/MS法快速测定人血浆中美沙酮的浓度

目的:建立快速测定人血浆中美沙酮浓度的方法。方法:采用高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC-MS/MS)法。色谱柱为AgilentTCC18,流动相为甲醇-5mmol·L-1甲酸铵(90∶10),流速为1mL·min-1,柱温为25℃,提取剂为醋酸乙酯∶二氯甲烷(4∶1)。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对美沙酮(m/z310.0→264.9)和内标地西泮(m/z285.1→154.0)进行测定。结果:美沙酮血药浓度在2.5～500μg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9990),分析方法的最低定量限为2.5μg·L-1;其高、中、低(300、100、5μg·L-1)3种浓度的平均方法回收率分别为100.23%、101.20%和101.39%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均<10%。结论:本方法简单、快速、灵敏、准确、重现性好,可用于美沙酮的临床血药浓度监测和药动学研究。     

UPLC-MS/MS快速测定大鼠血浆中的氯沙坦及其代谢产物

目的 建立快速测定大鼠体内氯沙坦及其代谢产物（E-3174）浓度的UPLC-MS/MS方法。方法 Waters XEVO TQD三重四级杆液质联用仪, 色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱（100 mm ×2.1 mm,1.7 μm）;流动相为乙腈-水（含0.1%甲酸和0.5%氨水）（60∶40）,流速为0.2 mL·min^-1,柱温30 ℃,内标为地西泮;质谱条件：电喷雾离子化源（ESI）,正离子检测模式;加入200 μL乙腈沉淀蛋白,13 000 r·min^-1离心10 min转移至1.5 mL EP管中取2 μL上样。结果 E-3174的保留时间为1.54 min,线性范围为6.25～800 ng·mL^-1（r=0.999 8）,最低定量限为0.5 ng·mL^-1,回收率为96.6%～98.37%;氯沙坦的保留时间为1.38 min,线性范围为12.5～1 600 ng·mL^-1（r=0.999 6）,最低定量限为1.0 ng·mL^-1,回收率为98.4%～100.6%。两者的日内、日间RSD均〈5%,孵育体系中的其他内源性物质不干扰测定。结论 该方法操作简便,重复性好,适于快速测定大鼠体内氯沙坦及其代谢产物浓度。     

UPLC-MS/MS法同时测定糖尿病模型大鼠血浆中沙格列汀及其代谢产物5-羟基沙格列汀浓度

目的:建立同时测定糖尿病模型大鼠体内沙格列汀及其代谢产物5-羟基沙格列汀血药浓度的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。色谱柱为Waters BEH Shield RP_(18),流动相为10 mmol/L乙酸铵-乙腈(70∶30,V/V),流速为0.3 m L/min,柱温为30℃,进样量为10μL;扫描模式为多反应监测,正离子模式,各离子对为m/z 316.2→180.2(沙格列汀)、m/z 332.3→196.2(5-羟基沙格列汀)、m/z 304.2→153.9(维格列汀,内标)。取6只SD大鼠,复制糖尿病模型后,ig沙格列汀0.53 mg/kg,于给药前及给药后0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0 h经眼眶取血0.25 m L,测定血浆中沙格列汀及其代谢物5-羟基沙格列汀的浓度,采用Win Nonlin 6.1软件计算药动学参数。结果:沙格列汀和5-羟基沙格列汀的质量浓度线性范围为0.1~100(r=0.997 2)、0.2~200 ng/m L(r=0.996 5),定量限分别为0.1、0.2 ng/m L,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于12%,准确度为94.1%~105.4%、91.0%~103.6%,提取回收率分别为72.4%~87.3%、107.0%~115.3%(RSD均小于13.6%,n=6),基质效应分别为105.9%~107.8%、83.5%~88.2%(RSD均小于10.3%,n=6),稳定性的RSD≤11.0%(n=5);药动学参数c_(max)分别为(49.97±11.14)、(16.87±7.35)ng/m L,t_(1/2)分别为(2.88±0.21)、(4.21±0.95)h,AUC_(0-24h)分别为(90.95±7.06)、(49.13±5.33)ng·h/m L(n=6)。结论:本方法简便、准确、专属性强,适用于沙格列汀及其代谢物5-羟基沙格列汀在大鼠体内的药动学研究。     

UPLC-MS/MS同时测定人血浆中7种抗癫痫药物及1种活性代谢产物的血药浓度

目的 建立超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定人血浆中丙戊酸钠、卡马西平、地西泮、苯妥英钠、苯巴比妥、拉莫三嗪和奥卡西平等7种抗癫痫药物,以及1种活性代谢产物(10,11-二氢-10-羟基卡马西平)的方法,并应用于临床检测.方法 采用C18色谱柱(2.1 mm×l00 mm·1.7 μm),2 mmo...     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平浓度

目的:建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平浓度并进行方法验证,应用于室间质评的样品测定。方法:采用UPLC-MS/MS法,以卡马西平-d8为内标,XSelect CSH C18柱(2.1 mm×75 mm,2.5μm)为分析柱,流动相A为含0.05%甲酸的水溶液,流动相B为含0.05%甲酸的乙腈溶液,流速为0.3 mL·min^-1,梯度洗脱;采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)正离子模式进行检测,用于定量分析的离子对为m/z 237.1→194.1(卡马西平)、m/z 245.0→202.1(卡马西平-d8)。结果:卡马西平在5~1000 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r≥0.9993),批内批间精密度和准确度、回收率和基质效应以及稳定性均符合生物样品测定要求。应用该方法测定的室间质评样品结果全部通过。结论:该方法准确、灵敏、选择性好、重现性高,适用于血浆中卡马西平浓度测定及室间质评。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中阿魏酸和芍药苷的含量

目的:建立一种同时测定人体血浆中阿魏酸和芍药苷的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测技术,分别以羟甲香豆素和栀子苷为内标,采用正离子方式检测,多反应监测模式扫描,检测离子通道为阿魏酸m/z 195.1→151.2和羟甲香豆素m/z 177.1→161.2、芍药苷m/z 503.1→219.2和栀子苷m/z 411.1→216.1。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.5%冰醋酸-乙腈(82∶18,V/V),流速为0.3 ml/min,柱温为40℃。结果:两种成分均在3 min内完成检测。阿魏酸、芍药苷的质量浓度分别在4.5²50.0、37.5250.0、37.5² 000.0 ng/ml范围内与指标成分和内标峰面积比呈良好线性关系,定量限分别为4.5、37.5 ng/ml;高、中、低质量浓度阿魏酸平均加样回收率分别为(91.2±5.7)%、(93.8±7.6)%、(92.7±7.5)%,芍药苷平均加样回收率分别为(90.5±7.6)%、(90.2±4.4)%、(91.7±4.2)%;精密度RSD在5.3%2 000.0 ng/ml范围内与指标成分和内标峰面积比呈良好线性关系,定量限分别为4.5、37.5 ng/ml;高、中、低质量浓度阿魏酸平均加样回收率分别为(91.2±5.7)%、(93.8±7.6)%、(92.7±7.5)%,芍药苷平均加样回收率分别为(90.5±7.6)%、(90.2±4.4)%、(91.7±4.2)%;精密度RSD在5.3%⁹.4%范围内;稳定性RSD<±10%。结论:所建方法分析时间短、专属性好、准确度高,适用于同时测定人血浆中阿魏酸和芍药苷的含量。     

UPLC-MS/MS测定人血浆中长春西汀和阿朴长春胺酸的含量及其应用

目的 建立和验证UPLC-MS/MS测定人血浆中长春西汀和阿朴长春胺酸的方法,并用于临床样品检测。方法 以长春西汀-d5、阿朴长春胺酸-d4为内标,人血浆样品经蛋白沉淀法沉淀处理,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈(2.1 mm×50 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-水(含0.05%甲酸),梯度洗脱,流速0.35 mL·min^-1;电喷雾离子化源正离子监测模式。结果 长春西汀和阿朴长春胺酸线性范围分别为0.04~20.0 ng·mL^-1(r=0.999 7)、0.50~250 ng·mL^-1(r=0.999 6),检测限分别为0.01,0.10 ng·mL^-1,待测物与内标提取回收率均为94.81%~105.0％,基质效应为94.51%~105.0%,RSD均< 5%;批内、批间精密度RSD均<10%。结论 本法特异性强、快速、准确,重复性好,适用于长春西汀临床生物样品检测及生物等效性研究。     

UHPLC-MS/MS测定大鼠尿液中环磷酰胺及其代谢产物浓度

目的 基于超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）,建立测定给予高剂量环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）后大鼠尿液中CTX及其代谢产物脱氯乙基环磷酰胺（dechloroethylcyclophosphamide,DCCTX）、4-酮基环磷酰胺（4-Ketocyclophosphamide ,4-KetoCTX）、羧基磷酰胺（Carboxyphosphamide ,CEPM）浓度的方法。方法 大鼠尿液样品经10%甲醇水溶液直接稀释,离心后取上清液,采用UHPLC-MS/MS法进行检测分析。色谱柱：Agilent poroshell SB-C18 (2.1 mm × 75 mm,2.7 μm);流动相：甲醇-10 mmol?L-1乙酸铵水溶液,进行梯度洗脱,流速0.25 mL?min-1,柱温25 °C。采用电喷雾离子源,以多重反应监测模式进行正离子检测。用于定量检测分析的离子对分别为：CTX：m/z 261.10→140.10;DCCTX：m/z 199.20→78.00;4-KetoCTX：m/z 275.10→142.00;CEPM：m/z 293.10→221.10;替硝唑（tinidazole,TNZ）：m/z 248.10→121.10。结果 CTX及其代谢产物尿中浓度在40~2000 ng?mL-1范围内线性关系良好（CTX、DCCTX、4-KetoCTX、CEPM的r2分别为：0.9915,0.9910,0.9956,0.9918）,最低定量限均为40 ng?mL-1;日内、日间RSD分别为0.67%~12.76%、1.30%~11.92%;由内标归一化的基质因子计算RSD,结果在0.52%~7.60%之间;该方法的提取回收率为74.00%~102.70% （n=6）,方法回收率为85.89%-110.69% （n=5）;测定成分和内标的稳定性均良好。结论 该方法快捷、准确可靠、重复性好,适用于大鼠高剂量CTX给药后CTX及其代谢产物尿药浓度的测定及排泄研究。     

LC-MS/MS测定人血浆中的盐酸伪麻黄碱

目的 采用LC-MS/MS法测定人血浆中盐酸伪麻黄碱的血药浓度.方法 血浆样品经液-液萃取,结合液-液反相萃取的方法处理,采用Diamonsil~(TM) C_(18)柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),以甲醇-10 mmol·L~(-1)醋酸铵(冰醋酸调pH4)(20:80)为流动相,LC-MS/MS用正离子电喷雾离子源(ESI~+)、离子选择通道为盐酸伪麻黄碱(m/z 166→148)、磷酸可待因内标(m/z300→191).结果 盐酸伪麻黄碱血药浓度5.065～1.013×10~3ng·ml~(-1)与检测信号具有良好的线性关系(r=0.9986),最低定量浓度为1 ng·ml~(-1).低、次低、中、高浓度的盐酸伪麻黄碱的萃取回收率分别为86.86%±5.8%、95.24%±4.31%、96.91%±1.75%、92.60%±7.79%;内标的萃取回收率为86.24%±3.86%.盐酸伪麻黄碱的日内、日间RSD均小于11.7%.结论 所建方法适用于盐酸伪麻黄碱的生物等效性及药物动力学的研究.     

大鼠血浆中奥昔布宁及其N-去乙基代谢物的UPLC-MS/MS法测定

建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定大鼠血浆中的奥昔布宁及其主要代谢物N-去乙基奥昔布宁.用液-液萃取法处理血样,以盐酸奥昔布宁-D11为内标,采用ESI源正离子模式、多反应监测进行测定.检测离子对分别为m/z 358.2→124.1(奥昔布宁)、m/z 330.2→96.1 (N-去乙基奥昔布宁)和m/z 369.3→142.1(奥昔布宁-D11).奥昔布宁及N-去乙基奥昔布宁在0.5～100 ng/ml和0.2～40 ng/ml浓度范围内线性关系良好,日内、日间RSD均小于8％.     

UPLC-MS/MS检测大鼠体内达卢生坦的血药浓度及其药动学研究

目的 建立一种快速、高灵敏度和高选择性的UPLC-MS/MS用于大鼠血浆中达卢生坦的测定。方法 通过蛋白沉淀法完成血浆样品处理。通过Acquity UPLC BEH C₁₈柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）色谱柱,流动相为0.1%甲酸水-乙腈,流速为0.4 mL·min^-1。采用ESI⁺方式检测,扫描方式为多反应离子监测方式检测。结果 达卢生坦血药浓度在0.01~2.5 μg·mL^-1内线性关系良好（R²>0.999 6）,定量下限（LLOQ）为0.01 μg·mL^-1。血浆中的达卢生坦平均回收率为87.613%~97.115%,日内及日间精密度RSD<7.71%,基质效应RSD<9.34%。结论 该方法灵敏高,快速高效,能成功应用于大鼠口服10.0 mg·kg^-1达卢生坦后的药动学研究。     

UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯浓度

目的 建立超高效液相串联质谱法快速测定大鼠体内8-O-乙酰山栀苷甲酯的浓度。方法 用乙腈沉淀蛋白方法处理血浆,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1;用正离子多离子反应监测(MRM)扫描,内标为槲皮素。结果 血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯的线性范围为2.5~500 ng·mL^-1(r=0.997 9),最低定量限为0.5 ng·mL^-1。低、中、高3个浓度(3, 45和450 ng·mL^-1)的质控样品的日内、日间精密度RSD均<10%,3个浓度的相对回收率分别为(103.59±4.75)%, (98.68±4.62)%和(97.06±5.64)%。结论 该方法操作简便、快捷,灵敏度高,适于大鼠血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯浓度的测定及其药代动力学研究。     

大鼠血浆中人参皂苷化合物K的UPLC-MS/MS法测定

建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中的人参皂苷化合物K.采用BEH C18色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,以乙酸泼尼松龙为内标,负离子电喷雾离子化,多反应监测,药物和内标的监测离子对为m/z 667→161和m/z 447→329.人参皂苷化合物K在2～2 000 ng/ml浓度范围内线性关系良好,日内及日间RSD均小于10%.     

UPLC-MS/MS检测大鼠血浆中阿帕替尼的浓度及其药动学研究

目的 采用UPLC-MS/MS建立快速检测大鼠血浆中阿帕替尼浓度的方法,并应用于药动学研究。方法 大鼠血浆样本用乙腈沉淀蛋白,液质联用技术检测浓度,流动相为乙腈-水（含0.1%甲酸）,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,柱温40℃,内标为氯唑沙宗;质谱条件：电喷雾离子化源（ESI）,负离子监测模式,检测离子对阿帕替尼为m/z 396.2→210.0和m/z 396.2→158.0,氯唑沙宗m/z 168.0→132.0。结果 阿帕替尼和内标氯唑沙宗的保留时间分别为1.07 min和1.40 min,线性范围为10~2 000 ng·mL^-1（r²=0.993）,检测限为1 ng·mL^-1,准确度为90.65%~111.50%,基质效应为89.14%~104.65%,平均回收率>86%,日内、日间精密度RSD均<10%。常温下放置24 h、冻融2次和-80℃冻存30 d的RSD均<10%。药动学研究结果显示,大鼠单次灌胃阿帕替尼76.5 mg·kg^-1,AUC_（0-t）为（6 114.41±645.99）ng·mL^-1·h,CL_z/F为（12.21±1.08）L·h^-1·kg^-1,V_z/F为（75.70±38）L·kg^-1,T_1/2为（4.23±1.94）h,T_max为（2±0.71）h,C_max为（1 377.7±284.54）μg·L^-1。结论 该法操作简便,重复性好,准确可靠,适用于大鼠血浆中阿帕替尼的浓度检测及其药动学研究。     

UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中胡蔓藤碱乙和胡蔓藤碱丁及其药动学与生物利用度研究

目的 建立一种检测大鼠血浆中蔓藤碱乙和胡蔓藤碱丁的UPLC-MS/MS法,并研究大鼠口服和舌下静脉给药方式下胡蔓藤碱乙和胡蔓藤碱丁的药动学差异。方法 大鼠分别灌胃和舌下静脉注射蔓藤碱乙和胡蔓藤碱丁,在一定时间内取血,离心获得血清;士的宁为内标,通过UPLC-MS/MS来测定血清中蔓藤碱乙和胡蔓藤碱丁的浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数。结果 经灌胃给药5 mg·kg^–1,胡蔓藤碱乙的t_1/2为(5.7±1.2) h,AUC_(0-t)为(59.6±20.1) ng·h·mL^–1,CL/F为(89.1±30.5) L·h^–1·kg^–1,C_max为(18.3±5.3) ng·mL^–1;经舌下静脉给药1 mg·kg^–1后,胡蔓藤碱乙的t_1/2为(1.5±0.3) h,AUC_(0-t)为(140.2±37.4) ng·h·mL^–1,CL为(7.6±2.3) L·h^–1·kg^–1,C_max为(114.9±36.0) ng·mL^–1。经灌胃给药5 mg·kg^–1,胡蔓藤碱丁的t_1/2为(4.7±4.1) h,AUC_(0-t)为(44.3±5.1) ng·h·mL^–1,CL/F为(100.3±11.7) L·h^–1·kg^–1,C_max为(13.0±4.0) ng·mL^–1;经舌下静脉给药0.1 mg·kg^–1后,胡蔓藤碱丁的t_1/2为(1.1±0.4) h,AUC_(0-t)为(72.9±19.1) ng·h·mL^–1,CL为(1.4±0.4) L·h^-1·kg^–1,C_max为(43.7±6.8) ng·mL^–1。胡蔓藤碱乙的生物利用度为8.5%;胡蔓藤碱丁的生物利用度为1.2%。结论 胡蔓藤碱乙、胡蔓藤碱丁吸收迅速,半衰期较短。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中5-FU及其代谢产物5-FUH2的浓度及应用

目的:建立同时测定人血浆中5-氟尿嘧啶(5-FU)及其代谢产物5-氟-5,6-二氢尿嘧啶(5-FUH2)浓度的方法,并应用于临床.方法:血浆样品经乙酸乙酯二次萃取处理后,以5-溴尿嘧啶(5-Bru)为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱技术(UPLC-MS/MS)测定.色谱柱为Acquity UPLC HSS T3,流动...     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中丙硫氧嘧啶的含量

目的 建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中丙硫氧嘧啶的含量,为临床治疗药物监测（TDM）和生物等效性试验（BE）提供方法学基础。方法 采用Agilent SB-C₁₈柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液（80∶20,V/V）,等度洗脱。质谱采用AJS-ESI源,多反应监测（MRM）正离子模式,检测离子对为：丙硫氧嘧啶m/z 171.1→112.1、内标（丙硫氧嘧啶-D5）m/z 176.1→117.0。结果 血浆中丙硫氧嘧啶在10~5 000 ng/ml范围内线性关系良好,r=0.999 3;批内和批间的精密度和准确度良好（RSD<10%,RE<±10%）;不同浓度的基质效应均<110%,变异系数<5%;不同浓度的平均回收率为101.60%~113.56%,符合方法学要求。结论 该方法快速简便、灵敏准确,适用于血浆中丙硫氧嘧啶的含量测定。