大肠癌组织中Girdin蛋白的表达及与细胞增殖和凋亡的关系

目的 检测大肠癌组织中Girdin蛋白表达及与细胞增殖、凋亡的关系。方法 应用免疫组织化学En Vision二步法检测84例大肠癌及其正常大肠黏膜组织中Girdin蛋白表达及Ki-67细胞增殖指数,TUNEL法检测大肠癌组织中的凋亡指数,并进行统计学分析。结果 大肠癌组织中Girdin蛋白阳性表达率为42.9%,高于大肠正常黏膜组织的表达率1.19%,且Ki-67增殖指数高于正常黏膜组织,凋亡指数低于正常黏膜组织,差异均有统计学意义(均P<0.01);通过Pearson相关分析,Girdin蛋白在大肠癌中表达与增殖指数呈正相关(r=0.742,P<0.05),与凋亡指数呈负相关(r=-0.667,P<0.05)。结论 大肠癌组织中Girdin蛋白呈过表达,提示Girdin与大肠肿瘤细胞的增殖、凋亡有关。     

Girdin蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨Girdin蛋白在乳腺癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化Envision二步法检测128例浸润性乳腺癌、38例导管内癌、30例单纯性导管上皮增生及30例正常乳腺组织中Girdin蛋白的表达情况,并分析其临床病理意义。结果 Girdin蛋白在正常乳腺组织、单纯性导管上皮增生、导管内癌及浸润性乳腺癌中的阳性表达率分别为10.0%、23.3%、42.1%、51.6%,呈逐级上升趋势,差异有统计学意义（P＜0.05）。浸润性乳腺癌组织中Girdin蛋白的表达与TNM分期、淋巴结转移及人表皮生长因子受体2（HER-2）表达明显相关,并与患者的生存时间也明显相关（均P＜0.05）。结论 Girdin蛋白在乳腺癌的发生、演变过程中起重要作用。其表达与患者的生存期密切相关,可作为预测乳腺癌预后的参考指标。     

Girdin蛋白在肿瘤中的作用

Girdin是新近发现的一种细胞内相对分子质量较大的蛋白质,在调节细胞增殖、细胞移行和细胞自噬方面具有重要作用。Girdin及其异常剪切体在一些类型的肿瘤组织中呈不同程度的高表达。其表达不但影响肿瘤的生长,而且也对肿瘤的转移、血管生成以及细胞自噬发挥着重要的调控作用。进一步深入探索Girdin在肿瘤中变化的规律及作用无疑对肿瘤的诊断及治疗有非常重要的意义。     

Girdin 与VEGF在胶质瘤中的表达及其与血管生成的关系

目的：研究胶质瘤中Girdin与血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达及二者与胶质瘤血管生成的关系,探讨Girdin与VEGF在胶质瘤血管生成中的作用。方法：应用免疫组化Envision法分别检测Girdin和VEGF在正常脑组织和不同级别胶质瘤组织中的表达;同时应用CD34抗体标记胶质瘤血管内皮细胞,计数肿瘤微血管密度（MVD）,并分析Girdin、VEGF及MVD三者之间的关系。结果：Girdin和VEGF在正常脑组织中均不表达,在胶质瘤中的表达均高于正常脑组织;随着胶质瘤WHO分级的升高,两者表达均呈升高趋势(P＜0.05）。随着胶质瘤分级的升高,MVD计数呈上升趋势。高、低级别胶质瘤之间的MVD计数比较,差异有统计学意义(P＜0.05）。胶质瘤中Girdin表达与MVD呈正相关（P＜0.01）,VEGF表达与MVD呈正相关（P＜0.01）,Girdin表达与VEGF表达亦呈正相关（P＜0.01）。Girdin表达与胶质瘤KPS评分、切除范围和胶质瘤分级相关（P＜0.05）,与年龄、性别无相关性。结论：胶质瘤中Girdin和VEGF高表达,两者表达与胶质瘤血管生成之间均有相关性,且Girdin与VEGF表达正相关,提示Girdin与VEGF在胶质瘤的血管生成过程中,促进胶质瘤新生血管的形成,引起胶质瘤细胞增殖、浸润、侵袭及转移,促进胶质瘤的发生发展。Girdin表达与胶质瘤的生物学行为相关,可成为胶质瘤预后的预测因子。     

信号转导蛋白AKT在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 分析非小细胞肺癌（NSCLC）中信号转导蛋白AKT的活化状态磷酸化AKT（P—AKT）的表达及意义。方法 应用免疫组织化学的方法，检测80例NSCLC组织及35例良性肺病变组织标本中P—AKT的表达，并与临床病理因素进行相关性分析。结果 P—AKT在NSCLC中高表达，阳性率为78．8％，而在良性肺病变组织中不表达（P〈0．05），P—AKT在不同年龄、性别、TNM分期、组织分化以及淋巴结转移与无淋巴结转移组均高表达，组间对比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 在NSCLC中存在AKT的活化，P—AKT参与肺癌的发生和发展。AKT的活化在NSCLC中不仅是一个频发事件，而且是一个普遍事件。针对AKT的靶位点治疗有可能对各期、各型NSCLC产生治疗作用。     

Girdin、Bim蛋白在儿童肾母细胞瘤中的表达及其与临床病理的相关性

目的：探讨Girdin、Bim蛋白在儿童肾母细胞瘤和正常组织中的表达及其与临床病理因素的关系,并进一步分析两者之间的相关性。方法收集2000年1月至2009年12月60例住院患者的肾母细胞瘤及肾母细胞瘤旁正常组织,应用免疫组织化学(EnVisionTM)法分别检测Girdin、Bim蛋白在肾母细胞瘤和正常组织中的表达情况,数据经统计软件SPSS17.0分析检验。结果 Girdin蛋白在肾母细胞瘤、正常组织中的阳性表达率分别为68.33%(41/60)、46.67%(28/60),两组之间表达差异有显著统计学意义(χ2=5.76,P<0.01);Bim蛋白在肾母细胞瘤、正常组织中的阳性表达率分别为21.67%(13/60)、78.33%(47/60),两组之间表达差异有显著统计学意义(χ2=38.53,P<0.01);肾母细胞瘤组织中Girdin蛋白的表达与肿瘤直径、组织学形态、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),但与性别、年龄、肿瘤位置无关(P>0.05);肾母细胞瘤组织中Bim蛋白的表达与肿瘤直径有关(P<0.05),但与性别、年龄、肿瘤位置、组织学形态、临床分期、淋巴结转移无关(P>0.05);肾母细胞瘤组织中Girdin蛋白的表达与Bim蛋白表达呈负相关(r=-0.59,P<0.01)。结论肾母细胞瘤组织中Girdin、Bim蛋白的异常表达均与肿瘤直径有关,这表明检测两者有利于判断肿瘤细胞的增殖能力。     

FLIP、FADD在人乳腺癌细胞中的表达及与细胞凋亡、增殖相关性的研究

乳腺癌(breast cancer)是女性常见病之一.在我国城市发病率约为23/100 000.乳房虽位于体表,其病变易于发现并便于及早诊断,但手术治疗病例中,Ⅰ期患者仍低于30%.30年来随诊断技术的进步,手术、药物、放射及内分泌多学科综合治疗的采用,Ⅱ～Ⅲ期乳腺癌的5年生存率只提高了10%.     

VAPB在肝癌中的表达与促增殖作用研究

目的:研究囊泡相关膜蛋白相关蛋白B(VAPB)在肝癌中的表达及其在肝癌细胞增殖与凋亡中的调控作用。方法:(1)分别用生物信息学分析与免疫组化实验,分析VAPB在肝癌癌组织与癌旁组织中的表达。(2)用实时荧光定量PCR(RT-PCR)与蛋白质印迹实验,检测肝癌细胞株与正常肝细胞株中VAPB的表达。(3)分别用MTS细胞活力实验与EdU细胞增殖实验,检测通过转染siRNA下调VAPB表达对肝癌细胞生长的影响。(4)用流式细胞仪检测通过转染siRNA下调VAPB对肝癌细胞凋亡的影响。结果:(1)与癌旁组织相比,VAPB在肝癌组织中的表达显著升高。(2)与正常肝细胞株相比,VAPB在4株肝癌细胞株中的表达均显著上调。(3)下调VAPB表达后,肝癌细胞的活力与增殖能力均被显著抑制。(4)下调VAPB表达诱导了肝癌细胞的凋亡。结论:肝癌组织与细胞中VAPB表达异常升高,VAPB可促进体外肝癌细胞的活力与增殖能力,同时抑制肝癌细胞的凋亡。     

促凋亡基因bax在胆管癌组织中的表达及临床意义

（１）目的 探讨促凋亡基因ｂａｘ在胆管癌组织中的表达。（２）方法 应用抗ｂａｘ多克隆抗体分别对２０例胆管癌和７例先天性胆总管囊肿组织的石蜡切片进行免疫组化染色。（３）结果 ２０例胆管癌组织有１１例ｂａｘ蛋白表达阳性（５５．００％），而７例先天性胆总管囊肿仅１例表达阳性（１４．２９％），两组间差异有显著性（Ｘ＾２＝６．７３，Ｐ〈０．０１），随肿瘤分化程度的增高，阳性表达增强，但差异无显著性（Ｘ＾２＝     

人脑星形细胞瘤环氧化酶-2的表达及与细胞增殖凋亡的关系

目的:检测人脑星形细胞瘤环氧化酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)表达,探讨COX-2与肿瘤恶性程度、细胞增殖活性及凋亡程度的关系.方法:采用免疫组化方法检测星形细胞瘤组织中COX-2及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、Mcl-1癌基因的表达情况.结果: 68例星形细胞瘤组织COX-2的表达阳性率为61.8%,COX-2的表达强度和病理分级呈正相关(χ2=14.24, P＜0.01).COX-2与Mcl-1、PCNA蛋白表达均呈正相关性.结论:COX-2蛋白在星形细胞瘤过度表达与病理分级及细胞增殖、凋亡关密切相关.     

BTG1在肾透明细胞癌组织中的表达及对786-O细胞株增殖和凋亡的影响

目的:探讨B细胞易位基因1(BTG1)在肾透明细胞癌组织中的表达及对肾透明细胞癌细胞株786-O增殖和凋亡的影响.方法:采用免疫组化法检测20例肾透明细胞癌及其癌旁组织中BTG1蛋白的表达.构建BTG1表达质粒及合成BTG1的干扰RNA分别转染786-O细胞,通过MTT法实验观察BTG1对786-O细胞体外增殖的影响,...     

Akt抑制剂MK2206对舌鳞癌TCA-8113细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制

目的：探讨Akt抑制剂MK2206对舌鳞状细胞癌(舌鳞癌)TCA-8113细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其可能的作用机制。方法：取处于对数生长期舌鳞癌TCA-8113细胞株随机分为对照组和1、5、25、125及250 nmol/L MK2206实验组。在不同剂量及时间处理因素下,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,蛋白质印迹分析检测细胞中caspase-9、Bad 、GSK-3β、p-Akt和T-Akt蛋白表达水平。 结果：舌鳞癌TCA-8113细胞在MK2206
作用12、24和36 h的半数抑制浓度（ＩＣ５０）分别为（112.54±1.67）、（79.67±2.01）和(33.33±1.98） nmol/L。FCM法检测,1、5、25、125和250 nmol?L-1 MK2206作用舌鳞癌TCA-8113细胞12 h后,细胞凋亡率分别为（14.2±0.74）%、（19.3±0.45）%、（35.1±0.45）%、（39.6±0.48）%和（52.1±0.19）%,与对照组比较差异均有统计学意义（P<0.01）。蛋白质印迹分析,随着MK2206药物剂量和作用时间的增加,p-Akt、Bad 和GSK-3β蛋白表达水平下降,与对照组β-actin比较其条带的颜色变暗;caspase-9蛋白表达水平升高,与对照组β-actin比较其条带的颜色变深。T-Akt蛋白表达变化不明显,与对照组β-actin比较条带的颜色无明显不同。结论：Akt抑制剂MK2206可抑制舌鳞癌TCA-8113细胞增殖并诱导凋亡。     

甲状腺肿瘤中增殖细胞核抗原和垂体肿瘤转化基因-1的表达

目的研究增殖细胞核抗原(PCNA)及垂体肿瘤转化基因-1(PTTG-1)在甲状腺肿瘤中的表达及其与病变的关系。方法对87例甲状腺肿瘤(乳头状腺癌38例,滤泡性腺癌21例,未分化癌5例,腺瘤23例)分别应用免疫组织化学方法检测PCNA及PTTG-1表达情况,并对各组瘤组织进行PCNA及PTTG-1表达比较,观察PCNA与PTTG-1的相关性。结果PCNA及PTTG-1蛋白在各甲状腺肿瘤组织均存在表达,PCNA在乳头状癌、滤泡性癌及未分化癌组中表达高于腺瘤组(P<0.05,P<0.01),PTTG-1在乳头状癌、滤泡性癌组表达高于腺瘤组(P<0.01);PCNA及PTTG-1在甲状腺肿瘤表达具有正相关性(r=0.36,P<0.05)。结论PCNA及PTTG-1的表达与甲状腺肿瘤相关,PCNA及PTTG-1水平升高可能参与甲状腺恶性肿瘤病程。     

MicroRNA-20b在卵巢癌细胞中的表达及对增殖和凋亡的影响

探讨microRNA-20b（miR-20b）在卵巢癌细胞系中的表达及对增殖和凋亡的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定miR-20b 在卵巢癌细胞系A431、SKOV3 及正常卵巢上皮细胞系Hose 中的相对表达量,将SKOV3 细胞系分成未转染对照、阴性对照及miR-20b 模拟物组,用Lipofectamine2000 分别不转染、转染miR-20b scramble 和miR-20b mimics,CCK8 实验测定3 组细胞增殖能力,流式细胞术测定3 组细胞凋亡,Western blot测定张力蛋白同源在10 号染色体有缺失的磷酸酶（PTEN）、裂解型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）的相对表达量。结果qRT-PCR示A431、SKOV3细胞系miR-20b 相对表达量较Hose 细胞系低;miR-20b 模拟物组在0、24、48、72 及96 h的OD45 nm 值低于未转染对照组和阴性对照组;miR-20b 模拟物组凋亡率高于阴性对照组和未转染对照组;miR-20b 模拟物组PTEN 相对表达量低于阴性对照组,裂解型PARP蛋白相对表达量高于阴性对照组。结论miR-20b 抑制卵巢癌细胞增殖并促进凋亡,其机制可能与下调PTEN 和上调PARP 蛋白表达有关。     

荜茇明碱对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨荜茇明碱（PL）对人乳腺癌MDA‐MB‐231细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法体外培养人乳腺癌MDA‐MB‐231细胞;采用活细胞计数试剂盒（CCK‐8）法检测不同浓度的PL对MDA‐MB‐231细胞增殖的影响;流式细胞术检测PL对细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹（Westernblot）法检测PL对MDA‐MB‐231细胞Bcl‐2和Bax蛋白表达水平的影响。结果PL抑制MDA‐MB‐231细胞增殖,并呈现出浓度、时间依赖性。PL诱导MDA‐MB‐231细胞凋亡,而乙酰‐L‐半胱氨酸则抑制了PL诱导的细胞凋亡。Westernblot结果提示随着PL浓度的增加,Bax的表达逐渐增加,而Bcl‐2的表达逐渐减少。结论PL对人乳腺癌MDA‐MB‐231细胞有明显的生长抑制和诱导凋亡作用,其机制可能与Bcl‐2蛋白表达的减少和Bax蛋白表达增加有关。     

黄芪多糖对基底细胞样乳腺癌细胞增殖和Akt磷酸化的影响

目的：观察黄芪多糖对基底细胞样乳腺癌细胞株MDA-MB-468细胞增殖和Akt蛋白磷酸化的影响。方法：用不同浓度的黄芪多糖（Astragalus polysaccharide,APS）干预MDA-MB-468细胞,用甲基噻唑基四唑法检测不同浓度APS干预对MDA-MB-468细胞增殖的量效和时效关系。用细胞内蛋白质印迹法检测APS干预MDA-MB-468细胞株1、2、4和7d后对磷酸化Akt（phospho-Akt,p-Akt）（Thr308）和p-Akt（Ser473）蛋白表达水平的影响,以及p53/鼠双微体2（murine double minute 2,MDM2）信号转导通路中的关键靶点p53、MDM2和人第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN）蛋白表达水平的影响。用小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）技术沉默PTEN的表达,用细胞内蛋白质印迹法检测APS干预MDA-MB-468细胞2d对p-Akt（Thr308）和p-Akt（Ser473）蛋白表达水平的影响。结果：1和0.5mg/mL的APS对MDA-MB-468细胞的增殖有明显的抑制作用。1和0.5mg/mL的APS干预1、2、4和7d后能下调p-Akt（Thr308）的表达;干预1和2d后下调p-Akt（Ser473）的表达,上调MDM2蛋白的表达;干预7d后上调p53和PTEN蛋白的表达。PTEN沉默后,APS在干预2d后对p-Akt（Thr308）和p-Akt（Ser473）的表达没有影响,细胞增殖的抑制率低于PTEN未沉默时。结论：APS能抑制MDA-MB-468细胞的增殖,下调MDA-MB-468细胞Akt磷酸化的水平,其抑制MDA-MB-468细胞增殖的机制可能与通过对p53/MDM2正负反馈环的调节从而上调p53和PTEN蛋白的表达有关。     

双氢青蒿素对人胃癌细胞BGC-823细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

研究双氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）对人胃癌细胞BGC-823细胞增殖、凋亡的影响及机制。 方法采用噻唑蓝（methylthiazoletetrazolium,MTT）法检测DHA对人胃癌细胞BGC-823增殖的抑制作用;用流式细胞技术、荧光显微镜、透射电子显微镜检测经DHA处理后BGC-823细胞的凋亡率及形态特征的变化;Western印迹方法检测凋亡相关基因Bax、Caspase-3、Caspase-8表达的变化。 结果MTT分析表明,DHA作用可明显抑制BGC-823细胞的增殖,抑制率随药物浓度的增加而增大,且随着时间的延长而增大,具有显著的剂量和时间依赖性（P＜0.01）,半数抑制浓度(IC50值)为3.4 μmol/L。流式细胞术检测结果显示,随着DHA药物浓度的增加,凋亡峰愈加明显,并呈现出剂量依赖性（P＜0.01）。形态学的观察结果：BGC-823细胞在DHA作用下出现典型的凋亡形态。Western印迹显示：Bax、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达随着DHA给药浓度的增加而增高。 结论DHA对BGC-823细胞增殖有抑制作用;DHA通过上调Bax、Caspase-3、Caspase-8表达促进BGC-823细胞凋亡。