脑胶质瘤组织时钟基因启动子区甲基化状态及意义

目的探讨脑胶质瘤组织中PER1、PER2、CRY1、CRY2、CLOCK、BMAL1和NPAS2时钟基因启动子区甲基化状态与脑胶质瘤发生、发展的关系。方法采用甲基化特异性PCR检测脑胶质瘤组织及其癌旁正常组织（对照）PER1、CRY1、CRY2、CLOCK、BMAL1、NPAS2等时钟基因启动子区甲基化状态。结果脑胶质瘤组织与癌旁正常组织中PER1、CLOCK时钟基因启动子区均未有甲基化；脑胶质瘤组织中NPAS2、PER2时钟基因启动子区甲基化频率明显高于癌旁正常组织（均P＜0.05）；两种组织中CRY1、CRY2和BMAL1时钟基因启动子区甲基化频率比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。不同级别脑胶质瘤组织中PER1、CLOCK时钟基因启动子区均未有甲基化；高级别脑胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ级）组织中NPAS2时钟基因启动子区甲基化频率高于低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ级）组织（P＜0.05）；不同级别脑胶质瘤组织中CRY1、CRY2、BMAL1和PER2时钟基因启动子区甲基化频率比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论NPAS2、PER2时钟基因启动子区甲基化频率明显增高；NPAS2时钟基因启动子区甲基化频率越高，脑胶质瘤的恶性程度越高。NPAS2、PER2时钟基因启动子区DNA甲基化修饰可能是脑胶质瘤发生、发展的重要机制。     

胶质瘤组织和细胞系中 Nanog 基因启动子区甲基化检测

目的：检测胶质瘤组织和细胞系中 Nanog 基因启动子区甲基化状态与 Nanog 基因的表达,并探讨其在胶质瘤发展中的作用。方法采用甲基化特异性 PCR(MSP)法分别检测正常脑组织、胶质瘤组织、胶质瘤癌旁组织、胶质瘤细胞系 U87和 U251中 Nanog 基因启动子区甲基化状态,实时定量 PCR(RT-PCR)法检测相应组织和细胞系中 Nanog 表达情况。结果 MSP 法检测胶质瘤组织 Nanog 基因启动子区呈非甲基化状态,且非甲基化检出率(58．82%)高于癌旁组织(13．63%),差异有统计学意义(χ2=14．852,P <0．01)。对MSP 法检测结果行灰度值分析,高级别胶质瘤中 Nanog 基因启动子区非甲基化程度高于低级别组。 U87和 U251细胞系中 Nanog 基因启动子区呈非甲基化状态。 RT-PCR 结果显示高级别胶质瘤中 Nanog mRNA 相对表达量高于低级别组, U87和 U251细胞系中 Nanog mRNA 的转录明显增多。结论胶质瘤中 Nanog 基因启动子区呈非甲基化状态,且可能促进 Nanog 基因的转录,影响胶质瘤的发生与发展。     

脑胶质瘤MGMT基因启动子甲基化与蛋白表达的研究

目的 探讨脑胶质瘤中MGMT基因启动子甲基化与MGMT蛋白表达的相关性及MGMT基因变异与脑胶质瘤临床病理学特征的关系.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)的方法检测49例脑胶质瘤组织中MGMT基因启动子甲基化情况,免疫组织化学法检测脑胶质瘤MGMT蛋白表达情况. 结果 49例脑胶质瘤组织中,MGMT基因启动子甲基化阳性率为53.06%(26/49);脑胶质瘤组织中MGMT基因启动子区甲基化阳性率在脑胶质瘤WHOⅡ、Ⅲ、Ⅳ级中分别为45.45%、50.0%和72.72%,三者间比较差异无统计学意义(P=0.32);在不同性别、年龄之间MGMT基因启动子甲基化阳性率差异也无统计学意义(P>0.05).MGMT蛋白表达阳性率为55.10%(27/49),其中29.62%(8/27)MGMT基因启动子甲基化为阳性;而22例MGMT蛋白表达阴性的组织中,81.81%MGMT基因启动子甲基化阳性(18/22).MGMT蛋白表达与其基因启动子甲基化呈负相关(r=-0.520,P<0.05 ),不同性别、年龄及病理学分级之间MGMT蛋白表达率差异均无统计学意义(P>0.05).结论 MGMT基因启动子区甲基化可能是MGMT蛋白失活的重要原因之一,检测组织中MGMT 基因启动子的异常甲基化可以作为肿瘤早期诊断的一项指标;MSP是检测MGMT基因启动子区甲基化灵敏和可靠的方法.     

O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因启动子甲基化对脑胶质瘤患者化学治疗敏感性及生存的影响

目的 探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化对脑胶质瘤患者化学治疗敏感性及生存的影响。方法 选择2014年1月至2017年8月延安大学咸阳医院收治的90例脑胶质瘤患者为研究对象,所有患者进行手术切除胶质瘤,术后给予同步放射治疗、化学治疗联合替莫唑胺辅助化学治疗。采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测患者胶质瘤组织和瘤旁组织中MGMT基因启动子甲基化水平,比较肿瘤组织与瘤旁组织中的MGMT基因启动子甲基化阳性率。所有患者术后随访36个月,比较复发与未复发患者的MGMT基因启动子甲基化阳性率,比较MGMT基因启动子甲基化阳性与阴性患者的无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,单因素和多因素Cox回归模型分析脑胶质瘤患者生存的影响因素。结果 90例脑胶质瘤患者中,胶质瘤组织和瘤旁组织中MGMT基因启动子甲基化阳性率分别为43.33%(39/90)、4.44%(4/90),胶质瘤组织中MGMT基因启动子甲基化阳性率显著高于瘤旁组织(χ²=37.430,P<0.05)。75例复发患者胶质瘤组...     

BRCA1基因启动子区甲基化状态抑癌作用研究

目的：研究BRCA1基因启动子区甲基化状态在乳腺癌组织中的抑癌作用。方法甲基化PCR法检测60例乳腺癌患者的癌组织、癌旁组织和20例乳腺良性组织中BRCA1-mRNA表达及启动子区甲基化状态,以及评价其作用。结果癌组织和癌旁组织中BRCA1-mRNA的表达水平分别为（0.6122＆#177;0.2344）、（0.6875＆#177;0.2576）,在癌组织、癌旁组织、良性肿瘤组织中BRCA1表达的甲基化率分别为70.0%、48.3%、35.0%。癌组织的甲基化率明显的高于癌旁组织和良性肿瘤组织;经统计学分析显示,淋巴结转移、肿瘤分级在BRCA1-mRNA表达及启动子区甲基化中的差异均具有统计学意义（P＜0.05）,绝经、组织分型在BRCA1-mRNA表达及启动子区甲基化中的差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 BRCA1-mRNA表达及启动子区甲基化状态在乳腺癌的发生发展中起着重要的作用,并且与组织分期和淋巴结的转移密切相关。     

喉鳞状细胞癌ESRRG基因启动子甲基化及临床意义研究

目的探讨雌激素相关受体γ（ESRRG）基因启动子在LSCC组织中的甲基化状态,分析其与临床病理特征及预后的关系,并评估其对LSCC的诊断价值。方法采用焦磷酸测序方法检测89例男性LSCC患者LSCC组织与癌旁正常组织的ESRRG基因启动子甲基化水平;分析ESRRG基因启动子甲基化水平与患者临床病理特征的关系;绘制ROC曲线评估ESRRG基因甲基化水平对LSCC的诊断价值;采用Kaplan-Meier法绘制患者生存曲线,并比较高甲基化组（甲基化水平＞26.41%）与低甲基化组（甲基化水平≤26.41%）5年生存率。结果LSCC组织ESRRG基因启动子甲基化水平高于癌旁正常组织（P＜0.05）。T3~4期患者LSCC组织ESRRG基因启动子甲基化水平高于T1~2期患者（P＜0.05）,临床分期Ⅲ、Ⅳ期患者LSCC组织ESRRG基因启动子甲基化水平高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P＜0.05）。AUC为0.81,当ESRRG基因启动子甲基化水平为26.41%时,诊断LSCC的灵敏度、特异度分别为0.7079、0.7865。ESRRG基因启动子低甲基化组患者5年生存率高于高甲基化组患者（69.03%vs45.12%,P＜0.05）。结论ESRRG基因启动子在LSCC组织中呈高甲基化水平,且在T3~4期及Ⅲ、Ⅳ期患者LSCC组织中明显增高,高甲基化水平患者预后较差。     

乳腺癌中NDRG-1基因甲基化状态研究

目的 研究NDRG1基因启动子区甲基化状态,探讨NDRG-1基因甲基化在乳腺癌发生中的作用.方法 采用双色荧光杂交微阵列基因芯片技术对33对乳腺癌标本和癌旁组织标本NDRG-1基因启动子区甲基化状态进行研究.结果 肿瘤标本和癌旁组织标本中NDRG-1基因启动子区CpG位点均有不同程度的甲基化,肿瘤组织中NDRG-1基因启动子区CpG位点甲基化率明显高于相应的癌旁组织(t=14.12,P＜0.05).结论 NDRG-1基因启动子区过甲基化可能在乳腺癌的发生过程中起重要作用.     

Runx3基因启动子甲基化及其蛋白表达与喉癌的关系

目的探讨Runx3基因启动子甲基化状态及其蛋白表达与喉癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测55例喉癌组织及癌旁正常黏膜组织中Runx3DNA的表达,并用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测Runx3基因启动子甲基化情况。结果55例喉癌组织标本中Runx3基因蛋白的表达较癌旁正常组织中表达明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;癌旁正常黏膜组织中无Runx3基因启动子的甲基化,喉癌组织中有32例（58.2%）检测到Runx3基因启动子的甲基化,2者比较差异有统计学意义（P〈0.05）;喉癌组织中Runx3基因启动子甲基化及Runx3蛋白的表达与性别、临床分型及分级、有无淋巴结转移均无关（均P〉0.05）;喉癌组织中Runx3基因启动子甲基化与Runx3蛋白表达呈负相关（r=-0.7092,P〈0.01）。结论Runx3基因启动子甲基化是其基因失活的可能机制之一,在喉癌的发生中起重要作用。     

肝细胞癌P14^ARF基因启动子甲基化及其临床特征探讨

目的：探讨P14^ARF基因启动子甲基化与肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）及其临床病理特征的关系。方法：通过甲基化特异性PCR（MSP）方法检测50例HCC组织和癌旁肝组织中P14^ARF基因启动子甲基化状况。结果：癌组织及癌旁组织中P14^ARF基因启动子甲基化阳性率分别为28．0％（12／50）和4.0％（2／50）（P=0．004）。P14^ARF基因启动子甲基化与HCC的临床分期、门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤大小、肿瘤个数及肿瘤分化无关（P〉0．05）,但在HBV阳性的HCC组织中甲基化阳性率显著高于HBV阴性的HCC组织（P=0．044）。结论：启动子区甲基化是P14^ARF基因失活的重要机制,P14^ARF启动子区异常甲基化可能参与了肝细胞的癌性转变。