晚期糖基化终末产物受体在鳞状细胞癌中的研究进展

晚期糖基化终末产物受体（RAGE）是一种具有多配体的跨膜信号转导受体。研究表明，RAGE在许多鳞状细胞癌中异常表达，与鳞状细胞癌细胞的增殖、侵袭、迁移和预后等密切相关。本文就目前RAGE在鳞状细胞癌中的研究进展作一综述。     

晚期糖基化终末产物对巨噬细胞Nampt表达的影响

目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对巨噬细胞尼克酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)表达的影响。方法以人单核细胞株THP-1为体外细胞干预模型,经佛波酯诱导分化为巨噬细胞后,以0(阴性对照组)、50、100、250、500、1 000μg/mL的AGEs干预12 h,采用Western blotting方法检测细胞Nampt蛋白表达。以Western blotting检测结果选择合适浓度的AGEs处理巨噬细胞,分别于干预后0(阴性对照组)、3、6、12、24 h时点收集细胞,采用实时定量聚合酶链式反应(Real-Time PCR)技术和Westernblotting方法检测巨噬细胞Nampt mRNA和蛋白表达。结果在50～500μg/mL的浓度范围内,AGEs处理组巨噬细胞Nampt蛋白表达量均显著高于阴性对照组(P<0.01),且随干预浓度的升高呈现逐渐上升趋势,250μg/mL和500μg/mL AGEs处理组的干预效应最显著,设定后续实验中以250μg/mL AGEs对巨噬细胞进行干预。250μg/mL AGEs处理组巨噬细胞干预后各时点的Nampt mRNA和蛋白表达量均显著高于阴性对照组(P<0....     

晚期糖基化终末产物对巨噬细胞Nampt表达的影响

目的 探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对巨噬细胞尼克酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)表达的影响.方法 以人单核细胞株THP-1为体外细胞干预模型,经佛波酯诱导分化为巨噬细胞后,以0(阴性对照组)、50、100、250、500、1 000μg/mL的AGEs干预12 h,采用Western blotting方法检测细胞Nampt蛋白表达.以Western blotting检测结果选择合适浓度的AGEs处理巨噬细胞,分别于干预后0(阴性对照组)、3、6、12、24 h时点收集细胞,采用实时定量聚合酶链式反应(Real-Time PCR)技术和Western blotting方法检测巨噬细胞Nampt mRNA和蛋白表达.结果 在50～500μg/mL的浓度范围内,AGEs处理组巨噬细胞Nampt蛋白表达量均显著高于阴性对照组(P＜0.01),且随干预浓度的升高呈现逐渐上升趋势,250μg/mL和500μg/mL AGEs处理组的干预效应最显著,设定后续实验中以250μg/mL AGEs对巨噬细胞进行干预.250μg/mL AGEs处理组巨噬细胞干预后各时点的Nampt mRNA和蛋白表达量均显著高于阴性对照组(P＜0.01),且随干预时间的延长呈现逐渐上升趋势.结论 AGEs干预能促进巨噬细胞Nampt表达上调;提示AGEs 可能部分通过Nampt途径激活巨噬细胞而参与糖尿病动脉粥样硬化的发生过程.     

关于晚期糖基化终末产物的研究进展

1984年Vlassara等人首次提出晚期糖基化终末产物(AGE)这一概念,近年来对于AGE的研究备受关注.研究发现AGE参与了氧化应激、炎症反应等病理变化,同时,AGE还参与了慢性肾脏病、糖尿病肾病、动脉粥样硬化等疾病的发生及进展过程.本文就AGE的结构、与疾病的关系、药物干预等方面作一综述.     

晚期糖基化终末产物对糖尿病结膜松弛症的影响

目的 测定晚期糖基化终末产物（AGEs）在糖尿病结膜松弛患者结膜组织及血清中的含量,探讨其在糖尿病结膜松弛症发生过程中的作用机制.方法 共收集结膜标本36份（糖尿病结膜松弛症6例9眼、单纯结膜松弛症5例9眼、糖尿病不伴结膜松弛症者9例9眼和正常人9例9眼）,血清标本29份（每人静脉采血）,采用竞争性酶联免疫吸附试验法（ELISA）定量测定其AGEs含量.结果 在糖尿病结膜松弛组、糖尿病组两组血清AGEs含量（ng/nl）分别为17.5525±4.1593和15.7092±3.1896,明显高于结膜松弛组和正常结膜组的12.0809±3.2551和9.0161±2.4255,差异有统计学意义（P＜0.05）;在糖尿病结膜松弛组与糖尿病组、结膜松弛组与正常结膜组病组,血清AGEs含量差异无统计学意义（P=0.089）.结膜组织中AGEs含量在糖尿病结膜松弛组（0.4240±0.0903）、糖尿病组（0.3436±0.0780）、结膜松弛组（0.2682±0.0410）、正常结膜组（0.1895±0.0176）依次降低,各个组间差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 血清及结膜中AGEs水平升高与糖尿病结膜松弛症密切相关,高糖环境和AGEs蓄积可能在糖尿病结膜松弛的发生和发展中起到重要作用.     

急性心肌梗死时晚期糖基化终末产物受体表达水平的改变

目的 研究大鼠急性心肌梗死时心脏晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达水平的改变.方法 将体重(230±20)g的SD大鼠随机分为实验组和假手术组,两组均在麻醉下打开胸腔挤出心脏,实验组用6号手术线在左心耳下1.5~2 mm处结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型,假手术组不结扎,之后将心脏放回胸腔,关闭切口;3周后处死大鼠,取心脏不同部位心肌组织,应用定量PCR技术检测RAGE基因mRNA表达水平;应用免疫组织化学和Western blot方法检测RAGE蛋白表达水平;应用Western blot方法检测ERK1/2蛋白表达水平.结果 实验组梗死区心肌组织RAGE的mRNA水平较非梗死区明显升高(P<0.05);免疫组织化学及Western blot分析显示梗死区RAGE蛋白表达水平明显较非梗死区高(P<0.05);梗死区pERK1/2蛋白表达水平明显高于非梗死区(P<0.05).假手术组心肌组织RAGE的mRNA和蛋白表达水平、pERK1/2蛋白表达水平与实验组非梗死区心肌组织比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 大鼠心肌梗死后,梗死区心肌组织RAGE被激活,并通过MAPK/ERK1/2途径进一步激活核因子-κB等下游信号转导因子,最终引起一系列促炎反应并导致心肌重构.     

钱桐荪教授经验方对糖尿病肾病大鼠晚期糖基化终末产物受体蛋白的影响

目的:观察钱桐荪教授中药经验方(下称钱氏经验方)对糖尿病肾病模型的早期防治效果及对晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)表达的影响.方法:采用腹腔注射链脲佐菌素(streptozotoc in,STZ)诱导糖尿病模型,造模成功随机将成模动物分为糖尿病模型组、钱氏经验方大剂量组、钱氏经验方小剂量组,各组灌胃8周,于8周末检测24h尿蛋白,免疫组化及Western Blot检测肾小球RAGE表达情况.结果:糖尿病观察组的24 h尿蛋白定量、RAGE表达明显高于正常组,钱氏经验方大剂量组和钱氏经验方小剂量组24h尿蛋白定量、RAGE表达明显低于糖尿病观察组.结论:钱氏经验方可能通过降低RAGE的表达对糖尿病肾病起防治作用.     

可溶性晚期糖基化终末产物受体在脓毒症早期诊断中的价值

目的探讨血浆可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)的水平在脓毒症早期诊断中的价值。方法选取脓毒症患者30例作为脓毒血症组,其中存活患者18例,死亡患者12例,应用ELISA法检测患者血浆sRAGE水平;选取正常者30例作为正常组,比较两组之间血浆sRAGE水平。结果与正常组比较,脓毒血症组患者血浆sRAGE水平显著增高(505.0±71.2 pg/m L vs 172.7±34.0 pg/m L),差异有统计学意义(P<0.05)。存活组与死亡组比较,两组患者血浆sRAGE水平分别为(476.4±79.4 pg/m L)和(524.1±60.0 pg/m L),两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 sRAGE可以作为脓毒症早期诊断的辅助手段。     

乳腺癌患者血清可溶性晚期糖基化终末产物受体水平及其临床意义

目的探讨乳腺癌患者血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)水平及其临床意义。方法选取80例乳腺癌患者和80例健康体检者为研究对象,应用酶联免疫吸附法测定两组血清sRAGE水平。分析乳腺癌患者血清sRAGE水平与临床病理特征的关系,并采用受试者工作特征曲线评价血清sRAGE对乳腺癌的诊断效能。结果乳腺癌患者血清sRAGE水平低于健康体检者(P<0.05)。TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴转移的乳腺癌患者血清sRAGE水平分别高于TNM分期Ⅲ期、淋巴转移的患者(P<0.05)。血清sRAGE诊断乳腺癌的受试者工作特征曲线下面积为0.849(P<0.05),敏感性为91.85%,特异性为77.41%。结论 sRAGE在乳腺癌患者血清中呈低表达,其或与乳腺癌的发生、发展有关,并有望成为临床诊断乳腺癌的生物学标志物。     

糖尿病大鼠肾小球晚期糖基化终末产物对肾脏改变的影响

目的：探讨晚期糖基化终末产物（AGE）在糖尿病肾病发生与发展中的作用。方法：采用ELISA方法检测STZ－糖尿病大鼠肾小球组织晚期糖基化终末产物（GTE－AGE）含量,同时检测尿蛋白／肌酐（Pr/Cr)比值及肾小球基底膜厚度（GBMT）。结果：糖尿病大鼠在病程12周时GTE－AGE已明显增加（P＜0．01）,20周时尿Pr/Cr比值开始升高（P＜0．05）,28周时GBMT明显增加（P＜0．01）;胰岛素治疗组,GTE－AGE含量、尿Pr/Cr比值和GBMT也明显增加（P＜0．05）,但增加速度减慢;胰岛素与所基胍治疗组到28周时仍与正常对照无显著差异。结论：AGE在肾小球内的大量形成和堆积与肾小球结核和功能的异常改变直接有关,是高血糖引起肾脏病变的一个重要环节。     

晚期糖基化终末产物对破骨细胞分化不同阶段的影响

目的 探究晚期糖基化终末产物（AGEs）对破骨细胞分化不同阶段的影响。方法 利用核因子κB受体活化因子配体（RANKL）于体外诱导小鼠巨噬细胞系Raw264.7细胞进行破骨细胞向分化,通过抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色确定破骨细胞分化的不同阶段,并将细胞随机分为对照组、分化早期阶段干预组、分化晚期阶段干预组;用CCK-8法检测AGEs作用下的细胞活性;破骨细胞向诱导完成后进行TRAP染色,以RT-PCR 检测RANK、NFATC-1、TRAF-6、TRAP、CTSK的mRNA表达,以Western blot检测CTSK及RANK的蛋白表达。结果 将Raw264.7细胞破骨细胞向分化的前3 d划分为细胞分化早期阶段,之后为细胞分化晚期阶段;100 mg/L的AGEs对Raw264.7细胞的生长无明显影响;早期阶段干预组及晚期阶段干预组的TRAP染色阳性细胞数量均多于对照组,早期阶段干预组与对照组的差异具有统计学意义（P<0.05）;早期阶段干预组及晚期阶段干预组的RANK、NFATC-1、TRAF-6、TRAP、CTSK的mRNA表达均多于对照组,早期阶段干预组与对照组的差异具有统计学意义（P< 0.05）;CTSK及RANK的蛋白表达趋势与相关mRNA表达变化趋势一致。结论 AGEs可能对破骨细胞分化的不同阶段产生不同影响,AGEs于破骨细胞分化早期阶段加入对其分化的促进作用比在晚期阶段加入更明显。     

晚期糖基化终末产物在骨关节炎中的研究进展

晚期糖基化终末产物(AGEs)是蛋白质、脂质等大分子与还原糖通过一系列非酶促反应而生成的一组稳定的共价化合物,它通过激活细胞表面的受体(receptor of AGEs,RAGE)引起广泛的病理生理反应,并在动脉粥样硬化、糖尿病、中枢神经系统退变等多种疾病的发病机制中起着重要作用。随着年龄的增长,AGEs在人体内多种组织中不断积聚,是机体衰老的一项重要指标,在骨性关节炎的病理生理过程中起重要作用。作者就AGEs对软骨生物力学性能的影响、软骨代谢失衡的机制以及基于AGEs的靶向治疗等方面作一综述。     

晚期糖基化终末产物受体真核表达载体的构建与表达

目的 构建带HA标签的晚期糖基化终末产物受体真核细胞表达载体.方法 采用PCR方法从人cDNA文库中扩增RAGE基因编码区,使用常规酶切、连接方法将其重组至pcDNA3真核表达载体中,对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定.以RAGE/pcDNA3重组质粒为模板,运用突变方法在RAGE氨基末端信号肽后插入HA序列.利用Western blotting在HEK 293细胞中对经过测序鉴定的HA-RAGE\pcDNA3重组质粒的表达进行了检测.结果 RAGE/pcDNA3重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,HA-RAGE\pcDNA3重组质粒可在HEK 293细胞中表达.结论 成功构建了带HA标签的RAGE真核细胞表达载体,该载体能在真核细胞中表达,为进一步研究RAGE在细胞信号转导途径中的作用提供了一个重要的工具.     

重组可溶性晚期糖基化终末产物受体对脂多糖致小鼠肺组织NF-kB活化的影响

目的 探讨可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)小鼠肺内核因子kappaB(NF-k B)活化的影响及潜在意义.方法 向小鼠左肺内滴注LPS建立ALI模型,于造模后1 h腹腔注射100 ug sRAGE,观察其对造模后4h左肺组织NF-k B P65 DNA结合活性的影响,并检测造模后24 h支气管肺泡灌洗液(BALD中白细胞(WBC)及中性粒细胞(neutrophil,NEU)数量、蛋白(TP)浓度和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,同时对肺组织进行病理学评估.结果 LPS滴注后4h,肺组织中NF-k BP65 DNA结合活性显著增强(P<0.01),应用重组小鼠sRAGE减轻了LPS肺损伤早期肺内NF-k B活化(P<0.05),显著降低了LPS滴注后24 h BALF中WBC及NEU数量、TP含量和TNF-k B水平(P均<0.05),减轻了LPS引起的肺组织病理改变.结论 应用sRAGE阻止RAGE信号通过抑制LPS肺损伤早期肺内NF-kB活化减轻肺内失控的炎症反应,从而对ALI发挥保护作用.     

晚期糖基化终末产物对骨髓内皮祖细胞功能的影响及意义

目的 观察体外培养的骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)在晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)作用后功能的改变,探讨AGEs影响EPCs功能的可能机制及在动脉粥样硬化发生、发展中的作用. 方法 使用密度梯度离心法从骨髓获取单个核细胞并进行体外培养.对贴壁细胞进行细胞化学分析,以激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝血素Ⅰ(FITC-UEA-Ⅰ)和DiI-标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-acLDL)双染色阳性细胞为正在分化的EPCs.培养细胞中加入不同浓度AGEs,测定AGEs作用后EPCs的迁移、黏附、增殖能力,同时分析细胞内活性氧浓度及细胞的凋亡情况.结果 AGEs作用后EPCs生物学功能明显减退,细胞内氧化应激增强,凋亡率增加;同时这种改变可以被AGEs蛋白交联阻断剂ALT711削弱. 结论 AGEs增加骨髓EPCs内活件氧生成,增强氧化应激,破坏细胞内环境稳定性,使细胞生物学功能受损,最终导致细胞凋亡.这种变化与AGEs浓度成剂量依赖性.     

晚期糖基化终末产物在纤维化中的作用机制

晚期糖基化终末产物AGEs是指体内的糖类通过非酶促糖化途径与蛋白质、核酸或脂质等大分子氨基之间形成的不可逆聚合物。目前的研究表明，晚期糖基化终末产物与肾脏、肝脏、肺脏、血管、腹膜等纤维化发生密切相关，其促纤维化作用机制涉及到纤维化发生的多个环节，包括细胞外基质、纤维性细胞以及纤维性细胞因子等。本文将从上述三个方面对近几年来的相关研究结果进行综述。