束缚应激对D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的 探讨束缚应激对D-氨基半乳糖联合脂多糖(D–galactosamine and lipopolysaccharide combination,D+L)诱导的小鼠肝损伤的保护作用.方法 正常BALB/c小鼠随机分为正常对照组(con)、应激对照组(str)、模型组(D+L)、束缚应激组(D+L+str).con组小鼠常规饲养;str组小鼠给予定时定量的束缚应激;D+L组小鼠腹腔注射D-氨基半乳糖和脂多糖的混合溶液, 1次/2天;D+L+str 组小鼠腹腔注射等量D+L混合液后,给予与str组相同的束缚应激. 第8周,各组小鼠取血检测血清AST、ALT,肝脏固定后HE及Masson染色观察小鼠肝脏结构、细胞形态及纤维化程度. 结果 第8周D+L+str组与D+L组小鼠相比,血清ALT和AST显著降低(P<0.01),AST/ALT显著增高(P<0.01);HE及Masson染色显示,D+L组小鼠肝小叶结构紊乱,出现结节性增生及大量上皮细胞核浓缩、溶解、坏死,枯否氏细胞浸润,而D+L+str组未见明显病理变化;纤维化程度评分显示, D+L+str组与D+L组小鼠相比,病理评分与纤维显色吸光度值均显著降低(P<0.05). 结论 束缚应激对D+L诱导的小鼠肝损伤具有一定保护作用.     

灵芝酸A对D-氨基半乳糖/脂多糖诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的?研究灵芝酸A对D-氨基半乳糖(D-GaIN)/脂多糖(LPS)诱导小鼠肝损伤的保护作用及其相关机制。方法?60只C57BL/6小鼠随机分为4组:正常组、模型组、灵芝酸A低剂量组（20?mg/kg）、灵芝酸A高剂量组（40?mg/kg）。除正常组和模型组给予等体积蒸馏水外,其余各组每天灌胃给予相应剂量药物,共7?d。末次给药4?h后,腹腔注射D-GalN(700?mg/kg)与LPS(1?mg/kg),正常组腹腔注射等体积溶媒。24?h后取血、肝脏。ELISA法检测血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活性以及白介素（IL-6、IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,各组小鼠肝脏做HE染色,并采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏组织中NLRP3/NF-κB蛋白表达。结果?灵芝酸A（20、40?mg/kg）能显著降低D-GaIN/LPS诱导的肝损伤小鼠血清ALT、AST活性及IL-6、IL-1β和TNF-α含量;能显著改善小鼠肝组织的病理学改变;显著降低肝脏NLRP3/NF-κB蛋白表达。结论?灵芝酸A对D-GaIN/LPS诱导的小鼠肝损伤具有保护作用,这种效应可能与调控NLRP3/NF-κB信号通路有关。      

D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠慢性肝损伤模型的建立

目的研究D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠慢性肝损伤模型建立的方法。方法 30 mg/mLD-氨基半乳糖和2μg/mL脂多糖混合溶液,腹腔注射,每2天1次,连续8周。监测小鼠饮食和体重变化;取血测定小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平;取肝组织,HE和Masson染色,观察小鼠肝组织结构、细胞形态及纤维化程度。结果模型组ALT水平升高,肝细胞变性、坏死等病变,组织纤维化明显增生。结论 D-氨基半乳糖联合脂多糖可诱导小鼠的慢性肝损伤模型。     

和厚朴酚对D-氨基半乳糖/脂多糖诱导的急性肝损伤大鼠NLRP3炎症通路及肝细胞自噬的影响

目的 探究和厚朴酚对D-氨基半乳糖(D-Gal N)/脂多糖(LPS)诱导的急性肝损伤大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症通路及肝细胞自噬的影响.方法 48只SPF级大鼠随机分为阴性对照组、模型组(500 mg/kg D-Gal N+10 μg/kg LPS)、和厚朴酚低剂量组(500 mg/kg ...     

他莫昔芬对D-氨基半乳糖/脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭的治疗研究

目的 观察他莫昔芬对D-氨基半乳糖/脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭的影响.方法 80只小鼠随机分为正常对照组、模型组、他莫昔芬(TAM)组、他莫昔芬+雌激素受体拮抗剂(TAM+ ICI)干预组.除正常对照组外其它3组分别经腹腔注射向日葵油、他莫昔芬、他莫昔芬+拮抗剂进行造模前预处理,连续3d,每天1次;第3次注射后12 h,腹腔注射D-氨基半乳糖及脂多糖造模.分别于造模后2h和5h采集外周血;5 h采集肝脏;造模后24h观察各组实验小鼠生存率.酶法测定血清ALT、AST;ELISA法检测血清TNFα、IL-1β;肝组织病理学分析采用HE及TUNEL法;Western blot测定肝脏Caspase-3.结果 生存率4组间两两比较,差异均有显著性意义(P=0.000).TAM组和TAM+ ICI组小鼠血清ALT、AST、TNFα和IL-1β低于模型组,差异均有显著性意义(P＜0.05),TAM组和TAM+ ICI组比较差异无显著性意义(P＞0.05).与正常对照组相比,TAM组小鼠肝脏大体无明显变化,TAM+ ICI组肝脏外观略呈肿胀,而模型组小鼠肝脏则呈现明显肿胀、出血坏死表现;镜下TAM组及TAM+ ICI组表现轻微的单个核细胞浸润、肝小叶结构毁坏,而模型组小鼠表现明显.TUNEL结果显示,与正常对照组相比,TAM组及TAM+ ICI组见少量凋亡小体,而模型组肝细胞皱缩明显,多见凋亡小体.Western blot结果显示,正常对照组、TAM组及TAM+ ICI组均未见Caspase-3的p17片段,而模型组显著增多.结论 他莫昔芬可能通过抗凋亡机制拮抗D-氨基半乳糖/脂多糖-诱导的小鼠急性肝衰竭.     

黄芩素对D-氨基半乳糖联合脂多糖所诱导的小鼠肝损伤的保护作用

[目的]建立D-氨基半乳糖联合脂多糖(D-GalN/LPS)所诱导的小鼠肝损伤模型,探讨黄芩素对肝损伤的保护作用.[方法]腹腔注射给予小鼠D-GalN/LPS,分别于给药1,2,4,6h后采血并剖取肝脏,测定血清ALT,AST,TNF-α值及肝组织GSH水平.另取小鼠适量制作肝损伤模型,分别灌胃给予黄芩素50,100,150mg/kg,1h后测定血清ALT,AST,TNF-α值.[结果]给予D-GalN/LPS6h时小鼠血清ALT,AST水平上升最显著,2h时血清TNF-α水平上升最显著,4h时开始下降,6h时趋于正常,小鼠肝匀浆中GSH水平在6h时损耗最显著.各剂量黄芩素均可降低D-GalN/LPS诱导的肝损伤小鼠的血清ALT,AST,TNF-α水平.[结论]黄芩素对D-GalN/LPS所诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用.     

D—氨基半乳糖诱导大鼠急性肝损伤的细菌易位

观察急性肝损伤大鼠的细菌易位情况。方法用Ｄ－氨基半乳糖诱发大鼠急性肝损伤模型及７０％肝叶切除模型在２４ｈ和４８ｈ分别取血，肝脏作用菌培养，并测血中胆红素和丙氨酸转氨酶水平。     

草苁蓉乙醇提取物对D-氨基半乳糖中毒大鼠急性肝损伤的保护作用

[目的 ]探讨草苁蓉乙醇提取物对D 氨基半乳糖中毒大鼠急性肝损伤的保护作用 .[方法 ]将大鼠随机分为正常组、损伤组、草苁蓉低剂量组、中剂量组、高剂量组和联苯双酯组 ,分别灌胃给药 6d .第 5d除正常组腹腔注射等量的生理盐水之外 ,其它各组均 1次性腹腔注射D 氨基半乳糖 5 0 0mg/kg ,造成急性肝损伤模型 ,3 6h后取血及肝组织 ,分别测定血清丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转氨酶、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量及肝组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量 ,并作肝组织病理形态学检查 .[结果 ]草苁蓉中剂量组、高剂量组、联苯双酯组大鼠血清丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转氨酶活性、血清及肝组织丙二醛含量明显低于损伤组 ,而超氧化物歧化酶活性明显高于损伤组 .病理分级结果 ,草苁蓉高剂量组变性及坏死较损伤组明显减轻 [结论 ]草苁蓉乙醇提取物对D 氨基半乳糖中毒大鼠急性肝损伤有剂量相关的保护作用 .     

丹栀逍遥散对D-氨基半乳糖所致大鼠急性肝损伤保护作用的研究

目的探讨丹栀逍遥散对D-氨基半乳糖(D-GaIN)所致大鼠急性肝损伤的保护作用机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为空白组,模型组,联苯双酯组,丹栀逍遥散高、中、低剂量组,每组10只。连续灌胃给药7 d后,除空白组腹腔注射等体积生理盐水外,其余大鼠均腹腔注射D-GaIN。24 h后,检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)的含量。结果丹栀逍遥散能明显抑制由D-GaIN所致的血清中ALT、AST以及肝匀浆中MDA含量的升高,并提高肝匀浆中SOD和GSH-PX的含量,其中大部分差异有统计学意义(P<0.05)。结论丹栀逍遥散对D-GaIN所致的大鼠急性肝损伤具有保护作用。     

香蜂草苷对脂多糖联合D-氨基半乳糖诱导C57BL/6J小鼠急性肝损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨香蜂草苷对脂多糖(LPS)联合D-氨基半乳糖(D-Gal)致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制.方法:将90只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、香蜂草苷(0.8 mg/kg)对照组、模型组、阳性对照(175 mg/kg联苯双酯)组及香蜂草苷低、高剂量(0.4 mg/kg、0.8 mg/kg)组.连续给药1...     

九味肝泰片对D-氨基半乳糖所致大鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨九味肝泰片对D-氨基半乳糖(D-GalN)所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法采用腹腔注射D-GalN的方法复制急性肝损伤大鼠模型,并随机分为6组:模型组,联苯双酯片组(13.5 mg/kg),九味肝泰胶囊组(0.4 g/kg),九味肝泰片高、中、低剂量组(0.8、0.4、0.2 g/kg),另设正常组。连续灌胃给药7 d后,采用生化分析法检测各组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性和肝糖原含量,同时检测肝匀浆液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。结果与正常组比较,模型组大鼠血清AST和ALT显著升高(P0.01);与模型组比较,九味肝泰片能明显降低肝损伤大鼠血清ALT、AST活性及肝组织MDA水平,提高肝糖原含量(P0.05或P0.01);同时与九味肝泰胶囊比较,九味肝泰片还能明显降低GSH-Px活性(P0.05)。结论九味肝泰片对D-GalN所致急性肝损伤大鼠具有明显的保护作用,其作用机制可能与抗氧化有关,且部分指标效果优于九味肝泰胶囊。     

丹芪活肝胶囊对D-氨基半乳糖致大鼠肝损伤的保护作用

目的观察丹芪活肝胶囊对D-氨基半乳糖（D—GalN）所致大鼠肝损伤的保护作用。方法sD大鼠60只,随机分6组,分别为正常对照组,模型组,联苯双酯组,丹芪活肝胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组。大鼠分别灌胃给药,1次／d,连续7d,末次给药24h后,除正常对照组外,其余各组大鼠均腹腔注射D．GalN600mg,／kg,24h后采血,检测血清ALT、AST活性及TP、ALB、TBIL含量并观察肝组织病理学变化。结果丹芪活肝胶囊能降低D—GalN所致大鼠肝损伤血清ALT、AST活性,提高TP、ALB含量,降低TBIL含量。其中大部分差异有显著性（P〈0．05）。丹芪活肝胶囊高、中剂量组能明显改善肝组织损伤的程度。结论丹芪活肝胶囊对D—GalN诱导的大鼠肝损伤有保护作用,其作用机制可能与保护肝细胞膜、改善蛋白代谢有关,具体机制还需进一步实验研究。     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖诱导大鼠肝细胞内质网应激的抑制作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠肝细胞内质网应激的影响.方法:培养大鼠肝细胞系BRL细胞,用NAC或LPS分别或共同处理BRL细胞,其中共同处理时把NAC加入培养液中预处理1h再给予LPS处理肝细胞.用锥虫蓝拒染法检测细胞存活率;Hoechst33258染色荧光显微技术检测肝细胞凋亡的形态学变化;免疫印迹法检测内质网应激标志蛋白GRP78及凋亡相关蛋白CHOP、Caspase-12和Caspase-3的表达.结果:与溶剂对照组比较,LPS能时间依赖性地引起肝细胞细胞活力显著降低和细胞凋亡增多,诱导内质网应激标志蛋白GRP78表达明显上调;NAC预处理抑制LPS引起细胞存活率降低和细胞凋亡增多,并且能显著抑制LPS诱导的GRP78及凋亡相关蛋白CHOP、Caspase-12和Caspase-3表达上调.结论:NAC通过阻断LPS诱导的肝细胞内质网应激而减轻肝细胞损伤.     

姜黄素对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用

目的观察姜黄素对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用。方法 Wistar大鼠随机分为6组：空白组、模型组、地塞米松组和姜黄素三个不同剂量组（50、100、200mg.kg-1）。LPS气管滴注复制ALI模型,6h后收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,检测TNF-α、IL-1β浓度及蛋白含量;称重法检测肺组织湿/干重比和肺含水量。结果姜黄素剂量依赖性降低LPS所致ALI模型BALF中TNF-α、IL-1β及蛋白量增加,降低肺湿/干重比、肺含水量。结论姜黄素对LPS所致ALI有保护作用,其可能的机制为调节炎症介质的产生有关。     

间充质干细胞外泌体调控氧化应激减轻D 氨基半乳糖/脂多糖诱导的急性肝损伤

目的: 探讨小鼠间充质干细胞来源的外泌体(exosome, Exo)对D-氨基半乳糖(D-galactosamine hydrochloride, D-GalN)/脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导的急性肝损伤治疗作用及可能机制。方法: 提取小鼠间充质干细胞,通过流式细胞术和细胞分化实验进行验证。超速离心法提取间充质干细胞外泌体,透射电镜和蛋白质免疫印迹对其鉴定,纳米颗粒追踪分析测定外泌体粒径电位。通过活性氧荧光探针考察外泌体减轻活性氧损伤的功能。CCK-8检测外泌体对肝细胞的保护作用。腹腔注射D-GalN/LPS制备急性肝损伤小鼠模型,考察外泌体对D-GalN/LPS诱导的急性肝损伤小鼠的治疗作用。结果： 原代间充质干细胞表达CD29和CD44两个标志蛋白,而不表达CD31和CD117,具有成骨分化能力。间充质干细胞外泌体为具有典型杯状结构的纳米囊泡,表达CD9和CD63两个标志性蛋白。与PBS组相比,干细胞外泌体能够减轻L02细胞内的活性氧水平,提高L02细胞活性,且外泌体本身对L02细胞活性没有影响。与PBS组相比,Exo治疗组能够改善肝脏组织损伤,降低转氨酶水平,调节丙二醛、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的水平。结论： 在细胞实验中,间充质干细胞外泌体能够减少活性氧,保护肝细胞的活性;在动物实验中,间充质干细胞外泌体能够下调氧化应激相关蛋白的表达,促进肝脏组织修复。     

愈肝片对D-氨基半乳糖小鼠急性肝损伤的保护作用

目的 观察愈肝片（由生晒参，枸杞子，丹参，土茯苓，柴胡，郁金，石见穿等中药制成）对D－氨基半乳糖胺（D－GlaN)小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 将60只小鼠随机分为空白对照组，模型组，肝脾康阳性对照组和愈肝片高，中，低剂量组，每组10只。测定血清白蛋白（ALB）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和凝血时间（CT），观察了愈肝片和阳性对照组对D－GlaN肝损伤模型的影响。结果 与空白对照组比较，模型组小鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）含量升高（P＜0．01），血清白蛋白（ALB）含量降低（P＜0．01），凝血时间延长（P＜0．01），表明模型组动物肝细胞受到损伤，而愈肝片高剂量组动物的AST含量降低（与模型组比较P＜0．05）。同时，愈肝片各剂量组动物血清白蛋白含量比模型组升高（P＜0．05或P＜0．01）；愈肝片的中，高剂量组对动物凝血时间延长有改善作用（与模型组比，P＜0．05）。结论 愈肝片对D－GlaN所致的肝损伤有一定的保护作用。     

D-氨基半乳糖致小鼠、大鼠肝损伤模型的实验性研究

目的筛选D-氨基半乳糖（D—Gal）造模的最佳剂量，比较D—Gal造成的大、小鼠急性肝损伤模型的稳定性，为保肝新药的筛选提供合适的实验动物模型和理论依据。方法采用60只昆明种小鼠、70只SD大鼠，以D—Gal作为肝损伤试剂，建成急性肝损伤动物模型，以血液生化、肝功能、肝组织学的改变为观察指标，筛选大、小鼠最佳用药剂量，并观察D—Gal所致大鼠肝损伤的动态变化。结果本实验条件下，D—Gal500mg／kg为大鼠的最适剂量，此剂量建立的肝损伤模型肝组织形态变化显著且死亡率低。结论与小鼠动物模型相比较，D—Gal500mg／kg大鼠急性肝损伤模型更适用于保肝新药的筛选与评价。     

维药芹菜根醇提物对D-氨基半乳糖所致大鼠急性肝损伤的保护作用

目的 观察维药芹菜根醇提物对D-氨基半乳糖(D-GalN)所致大鼠急性肝损伤的保护作用.方法 Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,联苯双酯组,芹菜根醇提物高、低剂量组.用药组连续灌胃给药7 d,于末次药1 h后,除正常组,其余各组大鼠均腹腔注射D-GalN制备急性肝损伤模型.24 h后取血和肝组织,用生化法测定血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.肝组织石蜡切片,HE染色,光镜下观察病理变化.结果 芹菜根醇提物能显著降低血清AST、ALT及肝脏MDA水平(P＜0.05或P＜0.01),升高肝组织SOD活性(P＜0.01).芹菜根醇提物高剂量组肝细胞病变程度减轻,肝索结构完整,肝窦扩张、充血不明显;芹菜根醇提物低剂量组肝细胞部分坏死,脂肪变性明显,有少量炎细胞浸润,疏松样化改变,轻度胞浆水肿.结论 芹菜根醇提物可抑制脂质过氧化反应,减轻肝细胞病理损害,对D-GalN所致大鼠急性肝损伤具有保护作用.     

D-氨基半乳糖急性肝功能衰竭大鼠的内分泌腺改变

为了考核人工肝脏辅助装置的疗效,建立较为理想的急性肝功能衰竭动物模型非常重要。自1968年 Keppler 首先采用 D-氨基半乳糖(GalN)腹腔内注射引起重度急性肝坏死及肝性昏迷后,由于其病理变化酷似     

西红花酸促进脂多糖和D-氨基半乳糖胺诱导的大鼠肝细胞损伤的自噬

目的研究西红花酸对肝细胞损伤中细胞自噬的影响及其机制。方法体外分离和培养大鼠肝细胞,调整细胞密度为1× 108/L,接种于24孔板中,分为对照组、损伤组、西红花酸组、3甲基腺嘌呤（3MA）组和西红花酸+3MA组,肝细胞培养24 h后,加 入脂多糖1 mg/L+D-氨基半乳糖胺60mg/L进行细胞损伤处理,西红花酸组和3MA组分别加入西红花酸和3MA进行干预,西红 花酸+3MA组则加入西红花酸与3MA进行干预,继续培养12 h。采用ELISA检测各组上清液中的ALT、AST和LDH;细胞经免 疫荧光染色后,荧光显微镜观察染色细胞LC3荧光;细胞经染色切片后,透射电子显微镜观察自噬体;Western blot检测肝细胞 中LC3、p62、SIRT1的表达。结果ALT、AST和LDH水平在肝细胞损伤后升高,3MA处理后达最高,而西红花酸处理后明显降 低。肝细胞损伤后LC3荧光增多,西红花酸处理后LC3荧光最多,3MA处理后LC3荧光明显减少。肝细胞损伤后自噬体形成 增加,西红花酸处理后自噬体增加明显,3MA处理后自噬体形成明显抑制。肝细胞损伤后LC3和SIRT1表达上调、p62表达下 调,西红花酸处理后LC3和SIRT1表达最高、p62表达最低,3MA处理后LC3和SIRT1表达最低、p62表达最高。结论肝细胞损 伤后细胞自噬增加,西红花酸可促进肝细胞损伤的自噬、减少肝细胞进一步损伤。