链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达

[目的]探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠肾脏COX-2/PGE2/EPs的表达情况.[方法]多次小剂量腹腔注射STZ诱导1型糖尿病小鼠模型,实验分为两组:正常对照组(NC)和糖尿病组(DM).ELISA法检测血清和尿液中前列腺素E2(PGE2)的表达水平;RT-qPCR法检测肾组织环氧合酶-2(COX-2)、膜结合型前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)、各型EP受体(EP1、EP2、EP3、EP4)的mRNA表达水平;Westemblot法检测相应蛋白表达水平.[结果]随着周龄增加,DM组小鼠逐渐出现明显多饮、多尿、体质量下降等糖尿病消耗症状;与NC组小鼠相比,DM组小鼠空腹血糖(FBG)和24 h尿蛋白排泄量均显著增加(P＜0.05);肾脏COX-2和EP4表达水平明显上调(P＜0.05)、而mPGES-1、EP1、EP2、EP3 mRNA表达无显著变化(P＞0.05);同时,DM组小鼠24 h尿PGE2定量显著高于NC组(P＜0.05).[结论]1型糖尿病小鼠肾脏组织中,早期即可检测到COX-2和EP4表达上调,伴24 h尿PGE2定量增加,提示COX-2/PGE2/EP4信号轴激活可能参与了糖尿病肾病的发生发展.     

子宫内膜异位症在位、异位内膜COX-2表达及腹腔液PGE2含量的研究

目的 通过测定子宫内膜异位症患者腹腔液中的前列腺素E2（PGE2）水平,在位、异位内膜组织环氧合酶-2（COX-2）的表达情况,以及它们二者之间的相关性,探讨COX-2、PGE2与子宫内膜异位症发病的相关性。。方法 采用放射免疫法,测定28例子宫内膜异位症患者（研究组）及22例浆膜下子宫肌瘤或单纯卵巢囊肿患者（对照组）腹腔液PGE2水平;采用免疫组化SP法测定研究组在位、异位内膜,以及对照组子宫内膜COX-2表达。结果 （1）研究组Ⅰ-Ⅱ期、Ⅲ-Ⅳ期腹腔液中PGE2水平均高于对照组（P〈0.05）,而Ⅰ-Ⅱ期、Ⅲ-Ⅳ期相比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）两组腹腔液PGE2水平均表现为在月经周期的增生期、分泌期,差异无统计学意义（P〉0.05）;研究组PGE2水平无论增生期、分泌期均高于同期的对照组（P〈0.05）。（3）两组在位内膜COX-2表达均为分泌期高于增生期（P〈0.05）;异位内膜COX-2表达增生期、分泌期差异均无统计学意义（P〉0.05）;研究组在位、异位内膜COX-2表达无论增生期、分泌期均高于同期的对照组内膜（P〈0.05）。（4）研究组在位、异位内膜的COX-2表达均与AFS-r分期无相关性（P〉0.05）。（5）腹腔液中PGE2浓度与异位内膜组织中COX-2表达无统计学相关性（r=0.30,P〉0.05）。结论 COX-2在在位、异位子宫内膜的过表达以及腹腔液中PGE2水平的异常升高可能是子宫内膜异位症发生、发展的原因之一。     

2型糖尿病大鼠膀胱逼尿肌中膜结合型前列腺素E2合酶1的表达及意义

目的探讨2型糖尿病大鼠膀胱逼尿肌中膜结合型前列腺素E2合酶1（mPGES-1）的表达及意义。方法将36只雌性SD大鼠随机分成糖尿病组与对照组,每组18只。使用链脲佐菌素（STZ）建立2型糖尿病大鼠动物模型。造模成功后12周,观察并比较两组大鼠一般生理体征;在光镜下观察膀胱逼尿肌组织HE染色结果,在透射电镜下观察组织超微结构变化,采用免疫组化法检测组织中mPGES-1表达水平,并使用前列腺素E2（PGE2）酶联免疫试剂盒检测24h尿液中PGE2含量,所得结果进行组间比较。结果与对照组比较,糖尿病组大鼠终末体重明显降低（P＜0.05）,终末血糖、膀胱湿重和24h尿量均明显增加（均P＜0.05）。与对照组比较,糖尿病组大鼠在光镜下可见逼尿肌肌束结构排列紊乱,肌束间隙变宽;在透射电镜下可见逼尿肌细胞间距变宽,胞质内线粒体肿胀破裂呈空泡状。糖尿病组大鼠24h尿液PGE2含量、膀胱逼尿肌组织中mPGES-1表达水平较对照组均明显下降（P＜0.05）。结论2型糖尿病大鼠膀胱逼尿肌组织中mPGES-1表达水平及尿液PGE2含量均明显降低,可能与糖尿病性膀胱病的进展有关。     

帕立骨化醇对糖尿病肾病大鼠肾保护机制的研究

目的探讨帕立骨化醇对糖尿病肾病（DN）大鼠的肾保护作用及其可能机制。方法采用腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）构建DN大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为帕立骨化醇组（P组）、DN组（D组）,并设置健康对照组（N组）。P组大鼠每周腹腔注射帕立骨化醇3次,剂量为0.4μg/kg,给药12周后检测24h尿蛋白定量及血生化指标,以实时PCR检测肾组织肾素及环氧化酶-2（COX-2）mRNA表达,免疫组化检测肾组织COX-2蛋白的表达,并以ELISA法检测尿前列腺素E2（PGE2）水平。结果与N组相比,D组与P组24h尿蛋白定量、血肌酐（SCr）、空腹血糖及甲状旁腺激素（PTH）均显著升高（均P＜0.05）,肾组织肾素和COX-2 mRNA及蛋白表达,以及尿PGE2水平均显著升高（均P＜0.05）,且D组显著高于P组（P＜0.05）。肾素水平与尿PGE2水平及COX-2 mRNA表达均呈正相关（r=0.798、0.722,均P＜0.01）。结论帕立骨化醇可显著减少DN大鼠早期蛋白尿,其机制可能与通过抑制肾组织COX-2表达,下调尿PGE2水平,从而抑制肾组织肾素表达有关。     

补肾活血方对抗心磷脂抗体阳性复发性流产患者血清和蜕膜中环氧化酶2及前列腺素E2的影响研究

背景　复发性流产（RSA）是妊娠常见疾病之一,目前的病因学研究表明,抗心磷脂抗体（ACA）（+）与其发病机制密切相关。环氧化酶2（COX-2）具有调节血小板聚集、外周血管收缩等功能,可以催化产生前列腺素E2（PGE2）,COX-2及其催化产生的PGE2可能与血液高凝倾向的ACA（+）RSA存在联系,并影响其妊娠结局。目的　明确ACA（+）RSA的COX-2、PGE2异常表达与该疾病的关系,并探索补肾活血方对ACA（+）RSA疾病的治疗作用与分子机制。方法　选取2015年3月-2016年3月在黑龙江中医药大学附属第一医院门诊及住院部治疗的符合纳入标准的ACA（+）RSA流产蜕膜16例,正常流产蜕膜15例,共收集蜕膜样本31例：ACA（+）RSA者蜕膜为试验组1（n=16）、正常人工流产者蜕膜为对照组1（n=15）,其中试验组1中1例因流产组织发现染色体异常而排除。选取2015年3月-2016年3月在黑龙江中医药大学附属第一医院门诊及住院部治疗的符合研究标准的要求行保胎治疗ACA（+）RSA患者11例（试验组2）,及在黑龙江中医药大学附属第一医院门诊行正常孕检者13例（对照组2）,共收集血清样本24例,其中试验组2中1例自然流产、对照组2中3例自动退出,未计入统计数据。采用RT-PCR法检测蜕膜组织中COX-2、PGE2的mRNA;试验组2给予补肾活血方治疗,对照组2不给予干预,于治疗前和治疗后分别留取静脉血。采用ELISA法检测血清COX-2、PGE2水平。结果　对照组1蜕膜组织中COX-2 mRNA、PGE2 mRNA水平均高于试验组1（P<0.05）。治疗前对照组2和试验组2血清P、β-HCG、COX-2、PGE2水平比较,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗后对照组2和试验组2血清P、β-HCG、COX-2水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）;治疗后对照组2血清PGE2水平低于试验组2（P<0.05）。试验组2治疗后血清P、β-HCG、COX-2、PGE2 水平均高于治疗前（P<0.05）。结论　ACA（+）RSA患者血清、蜕膜组织中COX-2、PGE2呈低表达,提示COX-2、PGE2可能参与该病的发生。补肾活血方可以通过调节COX-2、PGE2水平而有利于ACA（+）RSA者维持妊娠。     

健脾理气方对功能性消化不良大鼠十二指肠MLCK和PGE2-cAMP通路的影响

目的 观察健脾理气方对功能性消化不良（functional dyspepsia,FD）模型大鼠十二指肠肌球蛋白轻链激酶（myosin light chain kinase,MLCK）和前列腺素E2（prostaglandin E2,PGE2）-环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）通路的影响。方法 18只SD雄性大鼠采用数字表法随机分为正常组、模型组及中药治疗组（每组6只）,以夹尾应激法建立功能性消化不良动物模型,正常组及模型组大鼠均给予0.9%（质量分数）氯化钠注射液灌胃,中药治疗组给予健脾理气方水煎剂灌胃。取大鼠十二指肠组织进行HE染色,观察组织形态,同时应用定量聚合酶链式反应（quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测MLCK和PGE2受体EP1、EP4 mRNA含量,酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法测定PGE2和cAMP的表达。结果 模型组大鼠十二指肠MLCK表达升高,PGE2、EP4、cAMP表达下降,EP1未见明显异常,健脾理气方治疗后可明显抑制MLCK表达,升高PGE2、EP4和cAMP表达。结论 健脾理气方可以抑制MLCK mRNA表达,同时上调PGE2-EP4-cAMP信号通路表达,这可能是健脾理气方治疗FD的机制之一。     

肺癌患者肺组织中COX-2和PGE2表达的变化及其意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者肺组织中环氧合酶-2（COX-2）和前列腺素E2（PGE2）表达的变化及其与临床病理参数之间的关系。方法采用逆转录聚合酶联反应（RT-PCR）和放射免疫法,分别检测38例NSCLC患者正常肺组织和肺癌组织中COX-2 mRNA和PGE2表达的变化。结果38例肺癌患者正常肺组织和肺癌组织中分别有34例和3例检测到COX-2 mRNA表达,阳性表达率分别为89.47%和7.89%;半定量分析肺癌组织中的COX-2 mRNA平均吸光度显著高于正常肺组织（P〈0.01）。肺癌组织和正常肺组织匀浆中PGE2浓度分别为（42.33±6.13）μg/L和（5.87±1.40）μg/L,两者比较差异亦具有显著性（P〈0.01）。直线相关分析发现肺癌组织中COX-2 mRNA的表达和PGE2浓度的变化呈正相关（r=0.552,P〈0.05）。COX-2mRNA表达在不同性别、年龄、组织分型、TNM分期和分化程度之间差异均无显著性（P均〉0.05）。结论NSCLC患者肺癌组织中COX-2 mRNA和PGE2表达增强,可能在NSCLC的发生和发展中具有重要作用。     

前列腺素E2活化EP2受体促进肝癌细胞增殖

目的研究前列腺素E2(PGE2)对肝癌细胞增殖活性的影响,并探讨其作用主要通过何种前列腺素EP受体介导。方法采用RT-PCR检测肝细胞癌Hep3B细胞COX-2和EP1~EP4受体mRNA的表达水平,cell counting kit-8(CCK-8)细胞计数法检测PGE2和EP2受体激动药butaprost及EP3/EP4受体激动药PGE1 alcohol对细胞增殖的影响。结果人肝癌细胞Hep3B高表达COX-2 mRNA,正常肝细胞QSG7701 COX-2 mRNA表达水平远远弱于前者。四种亚型的PGE2受体EP1~EP4的mRNA在人肝细胞癌细胞株Hep3B均有表达,EP2和EP4受体表达水平明显高于EP1和EP3受体。PGE2呈时间和浓度依赖性地促进Hep3B细胞增殖。孵育细胞48h后,10μmol/L的PGE2表现出明显的促细胞增殖的作用,与未加PGE2的阴性对照组相比,细胞的增殖活性上升22.57%(P<0.001)。0.1、1和10μmol/L的PGE2作用Hep3B细胞72 h后,细胞增殖活性分别较对照组上升12.13%(P<0.01)、17.58%(P<0.01)和33.07%(P<0.001)。20μmol/L的butaprost孵育细胞72 h使细胞增殖活性提高了21.96%(P<0.001),而EP3/EP4受体激动剂PGE1alcohol在浓度为2~20μmol/L的范围内对Hep3B细胞增殖活性无显著影响,当浓度达到200μmol/L时则对细胞的增殖产生抑制作用。结论 Hep3B细胞上的EP2受体被选择性激动后可刺激细胞增殖,提示EP2受体介导了PGE2对Hep3B细胞的促增殖作用。     

塞来昔布对糖尿病胃轻瘫大鼠胃排空的影响

目的：探讨塞来昔布（celecoxib）对糖尿病胃轻瘫（diabetic gastroparesis,DGP）大鼠胃排空的影响。方法：雄性SD 大鼠随机分为实验组和正常对照组。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素（streptozocin,STZ）并喂食高糖高脂饲料建立糖尿病胃轻瘫模型;正常对照组（normal control,NC,n=7）腹腔注射等量磷酸盐缓冲液并标准饲料喂养。8周后将实验组大鼠随机分为糖尿病胃轻瘫组（DGP组,n=7）、塞来昔布处理组（CE组,n=7）;CE组灌胃塞来昔布 40 mg/（kg·d）共3周。半固体糊残留率法检测大鼠胃排空;荧光定量PCR检测胃窦平滑肌中环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）mRNA表达;Western blot检测胃窦平滑肌中COX-2蛋白表达;ELISA法检测前列腺素E2（prostaglandin E2,PGE2）表达;电镜观察胃窦平滑肌细胞超微结构。结果：塞来昔布显著改善DGP大鼠胃排空率（F=64.123,P=0.000）;可使大鼠胃窦平滑肌细胞COX-2 mRNA表达（F=9.928,P=0.005）、COX-2蛋白表达（F=28.543,P=0.001）及PGE2表达（F=55.378,P=0.000）下调;DGP大鼠胃窦平滑肌细胞线粒体肿胀、空泡化,CE组仅见少量髓鞘样结构。结论：塞来昔布可能通过COX-2/PGE2通路改DGP大鼠胃排空。     

EP1在不明原因复发性自然流产中的作用研究

目的研究前列腺素E2受体亚型EP1在不明原因复发性自然流产(URSA)中表达水平变化,分离鉴定子宫平滑肌细胞,并用特异性siRNA抑制EP1的表达,观察其对子宫平滑肌收缩率的影响,为抗RSA药物研究提供新的理论依据。方法用荧光定量PCR检测两组子宫平滑肌细胞膜上EP1的表达分布情况;应用图像分析系统测量正常组和URSA组病人子宫平滑肌细胞收缩率;用特异性siRNA抑制URSA组子宫平滑肌细胞EP1的表达,分析其对在子宫平滑肌细胞收缩率的影响。结果 URSA组子宫平滑肌细胞中EP1的表达水平显著高于正常组(P<0.01),同时URSA组中子宫平滑肌细胞的收缩率显著高于正常组(P<0.01);EP1特异性siRNA和阴性对照siRNA处理URSA组子宫平滑肌细胞后,EP1特异性siRNA处理子宫平滑肌细胞收缩率较阴性对照siRNA处理组显著下降(P<0.05)。结论在RSA病人中,外在刺激或内在因素导致EP1表达上调可能是促使子宫的异常收缩而发生流产的一个重要原因。因而PGE2/EP1系统可作为治疗RSA的一个潜在靶点。     

前列腺素E_2对免疫细胞的调控影响

目的:通过观察前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE)对外周血T细胞增值的影响,分析其对免疫细胞(Th1和Th2细胞)的调节作用及影响。方法:应用抗CD3和抗CD28单克隆抗体(mAb)与健康成人外周血单个核细胞(MNC),RPMI 1640,10%胎牛血清(FBS),加PGE2为观察组,不加PGE2为对照组,观察组加入不同浓度的PGE2,与对照组对比观察。结果:在加入不同浓度PGE2的情况下,T细胞增值的抑制率有时显增加,与PGE2浓度呈正相关。结论:前列腺素E2在免疫细胞的发育分化及免疫应答过程中起着重要作用。     

缓释性前列腺素E2栓与米索前列醇在引产应用中的比较

目的:比较延期妊娠孕妇阴道放置缓释性前列腺素E2栓（普贝生）与米索前列醇在引产中的应用情况。方法:选择我院86例单胎头位延期妊娠无引产禁忌症的孕妇,将其随意分成A、B两组,分别阴道放置缓释性前列腺素E₂栓（普贝生）与米索前列醇引产,并进行比较。结果:普贝生用于延期妊娠引产成功率高,不良反应少,易于放取,用药容易控制,时间短,安全性高;米索前列醇组引产有效且价格低廉、易保存,但剂量不易掌握,需多次阴道操作。两组在羊水污染率、剖宫产率、产后出血量、新生儿窒息等方面无统计学差异。结论:对于延期妊娠孕妇,特别是宫颈Bishop评分≤6分时,在排除胎儿、胎位、脐带、胎盘、羊水、产道异常的情况下,可以根据经济情况灵活应用缓释性前列腺素E₂栓（普贝生）与米索前列醇引产。但缓释性前列腺素E2栓引产成功率显著高于米索前列醇,宫颈Bishop评分提高快,引产成功时间也短于米索前列醇组。引产时应严格掌握适应证及禁忌证,遵循操作规程,注意监测胎心及宫缩情况。     

两种根充材料治疗慢性根尖周围炎近期临床疗效比较

目的：比较阿司匹林、碘仿糊剂与牙胶尖及根管充填剂一次性根充治疗慢性根尖周围炎的近期临床疗效。方法：常规根管预备慢性根尖周围炎患牙１００ 例，分别用阿司匹林、碘仿糊剂与牙胶尖及根管充填剂一次根充各５０ 例。结果： 用阿司匹林、碘仿糊剂充填组成功率为９２％ ，而用牙胶尖及根管充填剂充填组成功率为６０％ 。结论：用阿司匹林、碘仿糊剂一次性根充治疗慢性根尖周围炎患牙，能显著抑制炎症渗出，使成骨细胞数量增加及活力增强，诱导牙周硬骨板形成，缩短了病程和疗程，其疗效优于传统牙胶根充。     

不同时期增生性瘢痕组织中前列腺素和基质金属蛋白酶-2的含量测定及分析

目的测定不同时期烧伤患者增生性瘢痕（HS）组织中前列腺素（PGs）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的含量并探讨其变化规律。方法选取2013年3-9月在无锡市第三人民医院收治的烧伤患者或需手术切除瘢痕的患者皮肤标本57例,分为正常组（10例）,烧伤早期组（9例）,瘢痕1个月组（9例）、3个月组（9例）、6个月组（8例）、12个月组（6例）、24个月组（6例）。采用ELISA法和Western bolt法测定不同时期各分组瘢痕组织中PGs（包括PGD2,PGE2和PGF2α）和MMP-2含量。观察PGs和MMP-2在不同时期瘢痕组织中的含量变化。结果正常组PGE2、PGD2和PGF2α的含量最低[（5.543±0.484）、（3.619±0.484）、（4.833±1.106）ng/m L],与正常组比较,烧伤早期组PGE2、PGD2和PGF2α含量显著增加[（30.960±0.735）、（25.952±1.309）、（17.451±1.056）ng/m L]（P〈0.01）;除正常组外,瘢痕24个月组PGE2、PGD2和PGF2α的含量最低[（11.445±0.972）、（8.012±0.972）、（5.888±1.059）ng/m L],但与正常组比较差异仍有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。MMP-2在正常组含量最低,与正常组比较,烧伤早期组MMP-2的增加（P〈0.05）,瘢痕3个月组含量最高（P〈0.01）,瘢痕12个月组降低（P〈0.05）,瘢痕24个月组MMP-2含量则降低至与正常组接近的水平（P〉0.05）。结论 PGs和MMP-2在不同时期瘢痕组织中的含量和正常皮肤比较有显著差异,提示两者可能在增生性瘢痕中有重要作用。     

普贝生用于足月引产的效果观察

目的观察普贝生促宫颈成熟的疗效与安全性。方法采用随机、双盲对照的方法将240例妊娠孕妇随机分为两组。试验组120例以阴道放置普贝生促宫颈成熟,对照组120例用小剂量缩宫素促宫颈成熟。比较两组孕妇的宫颈Bishop评分、分娩情况及对胎儿、新生儿的影响。结果两组治疗后宫颈Bishop评分均有所提高,但治疗组较对照组增高更为显著,两组比较差异有极显著性（P〈0.001）。实验组阴道分娩率为79.2%,明显高于对照组的阴道分娩率（43.3%）,差异具有非常显著性（P〈0.01）。两组胎儿窘迫、产后出血量及新生儿Apgar评分差异无显著性（P〉0.05）。结论普贝生用于足月促宫颈成熟安全、有效,值得临床借鉴。     

慢性牙周炎龈沟液中IL-6，PGE2水平的研究

目的研究龈沟液中白细胞介素石（IL-6）和前列腺素E2（PGE2）水平与慢性牙周炎的关系。方法 采用ELISA法对49例慢性牙周炎患者和40例健康牙龈组织的龈沟液中IL-6和PGE2进行测定,分析IL-6和PGE2的浓度在慢性牙周炎者和健康牙龈组织中的分布。结果慢性牙周炎患者的IL-6和PGE2水平明显高于健康人。结论IL-6和PGE：水平是推测慢性牙周炎破坏程度的重要指标。     

普贝生用于足月妊娠引产与降低剖宫产率的临床观察

目的评估普贝生对于足月妊娠引产和降低剖宫产率的影响。方法选取足月妊娠孕妇180例,随机分为观察组和对照组,对照组使用缩宫素引产,观察组使用普贝生引产。结果用药后,观察组的宫颈Bishop评分明显高于对照组（P〈0．05）;观察组的有效率92．22％,对照组仅45．56％,观察组的有效率明显高于对照组（χ^2=45．7258,P〈0．01）;观察组阴道分娩率56．67％,明显高于对照组（χ^2=17．9908,P〈0．01）;观察组出现不良反应11例,对照组8例,两组比较差异无统计学意义（χ^2=0．5296,P〉0．05）。结论普贝生是一种有效的引产药物,能够降低剖宫产率,不良反应少。     

普贝生用于足月引产的临床观察30例分析

目的:探讨普贝生用于单胎足月引产的有效性及安全性。方法:采用病例对照研究的方法,对30例孕周超过37周、单胎无妊娠合并症的初产妇,以阴道放置普贝生为观察组,30例不用普贝生的病例为对照组。比较使用后的宫颈成熟及分娩情况。结果:观察组产妇给药后Bishop评分,23例提高≥2分,而对照组仅5例提高2分,两组比较,差别有极显著性(P<0.01)。观察组从给药到分娩的时间为(24±2)小时,对照组为(72±6)小时,两组比较,差别有极显著性(P<0.01)。结论:普贝生可安全、有效地用于足月引产。