miR-495-3p在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:检测miR-495-3p在结直肠癌(CRC)组织和细胞中的表达,探讨miR-495-3p对CRC细胞增殖、迁移、凋亡的影响。方法:采用RT-qPCR检测22对CRC及其癌旁组织和CRC细胞以及正常结肠上皮细胞中miR-495-3p的表达,选取其中差异表达最明显的两组细胞株转染miR-495-3p mimic、miR-495-3p inhibitor以及各自对照组。CCK-8和EdU实验检测细胞增殖能力、Transwell检测细胞迁移能力、流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:CRC组织和细胞中miR-495-3p表达降低(P<0.01)。与对照组相比,转染miR-495-3p mimic后细胞增殖和迁移能力下降(P<0.05),凋亡细胞增多(P<0.05);转染miR-495-3p inhibitor后细胞增殖和迁移能力增加(P<0.05),凋亡细胞减少(P<0.05)。结论:miR-495-3p在CRC组织和细胞中低表达,上调miR-495-3p表达后能降低细胞增殖、迁移能力,增加细胞凋亡率,在CRC中扮演着抑癌基因的作用。     

FHIT基因在结直肠癌组织中的异常表达

目的:探讨FHIT基因与结直肠癌发生之间的关系.方法:采用逆转录巢式酶链免疫反应,对41例结直肠癌组织及其配对的癌旁正常组织和25例良性腺瘤的FHIT基因进行检测.结果:在15例(38.9%)结直肠癌组织中检测到异常FHIT转录本,配对正常组织和良性腺瘤均未检测到异常转录本;测序证实异常转录本缺失3～5个FHIT外显子.异常FHIT转录本与结直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤部位、大小、血清癌胚抗原(CEA)的水平、组织学类型均无相关性(P＞0.05);与分化程度、病理分期、淋巴转移、远处转移相关(P＜0.05).结论:异常FHIT转录本的表达是结直肠癌发生中的常见事件,FHIT基因异常与结直肠癌的发生发展有关.     

miR-142-3p在陕北地区结直肠癌患者中的表达及临床意义

目的 观察微小microRNA 142-3p在陕北地区结直肠癌患者中的表达及临床意义。方法 通过组织原位杂交,检测结直肠癌患者组织中miR-142-3p的表达。结果 miR-142-3p主要定位于细胞的胞浆,在癌组织和癌旁组织中miR-142-3p的表达存在差异。结论 miR-142-3p在陕北地区结直肠癌组织与癌旁组织中呈差异表达,有望成为结直肠癌诊断和治疗的潜在靶点。     

miR-30c-1-3p在人结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨miR-30c-1-3p在人结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法采集行手术治疗的52例结直肠癌患者的癌组织及癌旁正常黏膜组织,实时定量PCR法检测两种组织中miR-30c-1-3p的表达水平并作比较;进一步分析结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平与患者临床特征的关系。结果结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平明显低于癌旁正常黏膜组织（P＜0.05）。结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平与患者有无淋巴结转移及临床分期有关,有淋巴结转移、临床分期Ⅲ~Ⅳ期的患者结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平均较低（均P＜0.05）;而与患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤位置、分化程度、浸润深度等均无关（均P＞0.05）。结论miR-30c-1-3p在人结直肠癌组织中表达下调,与有无淋巴结转移、临床分期有关,提示miR-30c-1-3p可能与结直肠癌的转移侵袭相关。     

p53在结直肠癌中的表达及临床意义

目的研究p53在结直肠癌中的表达,探讨p53在结直肠癌中的表达与结直肠癌发生、发展及预后的关系。方法选用结直肠癌组织标本80例及相应的癌旁组织标本40例,通过免疫组化法检测p53在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达,分析p53在结直肠癌中的表达与结直肠癌临床病理参数之间的关系。结果p53在结直肠癌组的阳性表达率为66.3%,在癌旁组的阳性表达率为20.8%。两者之间有显著性差异(P<0.01);结直肠癌组织中p53的阳性表达与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移有相关性(P<0.05),而与结直肠癌的发病年龄、性别无关(P>0.05)。结论p53的突变在结直肠癌的形成和发展中起了促进作用,同时说明p53有可能作为结直肠癌发生、发展及预后的肿瘤标志。     

结直肠癌组织FAT10 mRNA表达的临床意义

目的研究FAT10 mRNA在结直肠癌组织中的表达及其与结直肠癌临床病理学间的关系。方法应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测FAT10 mRNA在51例结直肠癌组织、结直肠癌旁组织和正常结直肠黏膜组织的表达水平,并观察其与临床病理特征的关系。结果(1)RT-PCR法检测FAT10在结直肠癌组织病例中表达阳性率为68.6%,在结直肠癌旁组织及正常结直肠黏膜中表达阳性率分别为17.6%和13.7%;(2)结直肠癌组织FAT10表达水平与结直肠癌旁组织及正常结直肠黏膜组织比较,差异均有显著性(P<0.05);结直肠癌淋巴结转移组患者FAT10表达水平与未转移组相比较,差异有显著性(P<0.05);伴肝转移组的结直肠癌与无肝转移组结直肠癌FAT10表达水平差异有显著性(P<0.05);组织FAT10表达水平还与临床分期密切相关,FAT10水平随分期升高而升高。与患者年龄、性别、肿瘤所在部位、肿瘤大小及病理分化程度等,临床病理特性之间无相关性(P>0.05)。结论FAT10在结直肠癌组织中的表达明显上调,对应的癌旁组织及正常结直肠黏膜组织无表达或弱表达;测定FAT10的表达可能预测结直肠癌的发生潜能;结直肠癌组织中FAT10的阳性表达与肿瘤临床分期、有无淋巴结转移及肝转移有关,提示FAT10基因与肿瘤的侵袭、转移密切相关。     

miR-155-5p和TRIP13在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系

目的 探讨miR-155-5p及甲状腺激素受体因子13(TRIP13)在结直肠癌(CRC)中的表达水平及与预后的关系。方法 选取2015年1月—2017年5月本院经病理确诊的78例CRC患者为研究对象。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测CRC组织及癌旁组织中的miR-155-5p、TRIP13 mRNA表达情况,免疫组化染色法测定CRC组织及癌旁组织中TRIP13蛋白表达情况;分析miR-155-5p、TRIP13蛋白表达对CRC患者预后的影响;采用Kaplan-meier分析组织中miR-155-5p、TRIP13蛋白对CRC患者预后的影响;采用Pearson检验分析CRC组织中miR-155-5p与TRIP13 mRNA表达水平的相关性;多因素Cox回归分析CRC患者预后的影响因素。结果 CRC组织miR-155-5p、TRIP13 mRNA表达水平及TRIP13蛋白的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05);CRC组织中miR-155-5p、TRIP13蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、浸润深度无关(P>0.05),与患者TNM分期、肿瘤分化...     

miR-150在结直肠癌中的差异表达及临床意义

在消化系统恶性肿瘤中,结直肠癌(CRC)较常见且近年来发病率明显上升,由于早期症状隐匿,临床诊治有待突破。miR-150在CRC患者组织中呈低表达,与CRC临床病理特征相关,在CRC病程中呈动态变化。miR-150在CRC发生、发展过程中起抑癌作用,其机制为miR-150通过靶向调控c-Myb、p21、p53凋亡促进蛋白家族的抑制性成员等特定靶基因的表达,在CRC的形成、发展及转移过程中发挥重要调节作用。但miR-150能否用作CRC肿瘤生物标志物、作为有效的治疗靶点和癌症预后判断指标的临床研究刚刚起步。     

MiR-96和miR-424-5p在结直肠癌患者血清中的表达水平及临床意义

  目的  分析血清miR-96和miR-424-5p表达与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系,探究两者联合检测对结直肠癌的诊断价值。  方法  收集2015年1—12月河南省人民医院收治的120例结直肠癌患者、40例结直肠腺瘤患者及40例健康受试者血清,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测血清miR-96和miR-424-5p的表达水平,分析其与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系,构建受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-96和miR-424-5p的诊断效能。  结果  MiR-96和miR-424-5p在结直肠癌患者血清中的表达水平显著高于结直肠腺瘤患者和健康受试者,差异有统计学意义(均P < 0.05);TNM分期Ⅲ/Ⅳ期、低分化和有远处转移患者血清miR-96表达水平显著高于TNM分期Ⅰ/Ⅱ期、高中分化和无远处转移患者(均P < 0.01);TNM分期Ⅲ/Ⅳ期患者血清miR-424-5p表达水平显著高于TNM分期Ⅰ/Ⅱ期患者(均P < 0.01)。血清miR-96和miR-424-5p高表达患者的5年生存率及平均生存时间均低于血清miR-96和miR-424-5p低表达患者(均P < 0.01)。MiR-96和miR-424-5p诊断结直肠癌的曲线下面积(AUC)分别为0.727和0.720,特异性分别为71.2%和86.2%,两者联合检测的AUC和特异性分别为0.780和93.7%,均大于两者单独诊断(均P < 0.05)。  结论  血清miR-96和miR-424-5p表达水平升高与结直肠癌的发生、发展及预后不良相关,联合检测血清miR-96和miR-424-5p对于结直肠癌的诊断具有一定的参考价值。      

Apaf-1基因甲基化及表达在结直肠癌发生中的作用

目的探讨Apaf—1基因甲基化及表达在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）发生中的作用。方法应用半定量RT—PCR和甲基化特异性PCR方法,分析40例CRC及癌旁正常组织中Apaf—1（apoptotic protease activating factor—1）基因的表达及启动子区甲基化情况。结果65％（26／40）的CRC组织Apaf-1表达明显下调,与癌旁正常组织相比差异有统计学意义（P〈0．05）。Apaf-1基因与患者的性别及浸润深度差异无统计学意义（P〉0．05）,与患者的病理组织分化程度、淋巴结转移与否、临床TNM分期差异有统计学意义（P〈0．05）。在Apaf-1基因表达明显下调的26例CRC中20例出现甲基化,表达水平无明显变化的14例CRC中5例出现甲基化,二者对比差异有统计学意义（P〈0．05）。40例癌旁正常对照组织未检测到Apaf-1基因甲基化,提示甲基化是Apaf-1基因表达下调的主要原因。结论Apaf-1基因与CRC的发生发展相关,启动子区甲基化是该基因失活的重要发生机制。     

miR-340在膀胱尿路上皮癌中的表达及其靶基因预测的生物信息学分析

目的探讨miR-340在膀胱尿路上皮癌中的表达,并对其预测的靶基因进行生物信息学分析,为miR-340在膀胱尿路上皮癌发生中的作用机制研究提供理论基础。方法采用miRNA芯片技术检测膀胱尿路上皮癌及正常膀胱黏膜组织中miRNA表达谱,用实时定量PCR法进行验证,挑选具有显著表达差异的miR-340为进一步研究对象,利用生物信息学方法,对miR-340的靶基因进行预测,并对其靶基因进行基因本体（GO）功能富集分析及KEGG信号转导通路富集分析。结果miRNA表达谱芯片、实时定量PCR法均提示miR-340在膀胱尿路上皮癌中较癌旁正常膀胱组织中表达明显降低。miR-340预测靶基因集合功能富集于细胞黏附（celladhesion）、生物黏附（biologicaladhesion）和细胞间黏附（cell-celladhesion）等,KEGG通路分析涉及癌通路（pathwaysincancer）和细胞周期通路（pathwaysincellcycle）等。结论miR-340在膀胱尿路上皮癌中呈低表达,miR-340预测靶基因集合显著富集在与肿瘤发生相关的信号通路中。     

miR-149-5p在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的分析miR-149-5p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法应用qRT-PCR方法检测40对HCC癌组织和癌旁肝组织中miR-149-5p的表达,并分析miR-149-5p的表达与肝癌患者临床病理之间的关系,进一步将以红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)为报告基因的miR-149-5p慢病毒(LV-miR-149-5p)感染MHCC97-H肝癌细胞,以过表达miR-149-5p,采用MTT检测感染后细胞增殖的变化,采用流式细胞仪测定感染后细胞周期的变化,并采用Transwell侵袭实验检测感染后细胞的体外侵袭能力的变化。结果 qRT-PCR结果提示miR-149-5p在HCC癌组织中的相对含量(5.522±1.104)低于癌旁肝组织(9.279±1.594)(P<0.05),统计分析表明miR-149-5p在癌和癌旁肝组织中相对含量的比值与AFP含量负相关(P<0.05)。体外实验证实,miR-149-5p过表达不能影响细胞周期但能抑制细胞增殖(P<0.05),而在Transwell侵袭实验中,LV-miR-149-5p感染MHCC97-H细胞后,对照细胞组透膜细胞数为(86.3±11.8)/视野,对照慢病毒组透膜细胞数为(83.7±4.0)/视野,LV-miR-149-5p组透膜细胞数为(50.6±3.4)/视野,实验组细胞侵袭能力较对照组细胞显著降低(P<0.05)。结论 miR-149-5p的过表达可抑制MHCC97-H细胞的增殖和侵袭,因此,miR-149-5p可作为一种抑癌基因在HCC的诊断及治疗中发挥作用。     

血浆miR-152-3p作为肺癌诊治指标的临床价值

目的 探讨血浆中miR-152-3p浓度相对水平在肺癌早期诊断中的应用价值.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测我院和广州医科大学呼吸疾病研究所收集的2014年5~10月55例Ⅰ、Ⅱ期肺癌患者和53例健康人群血浆中miR-152-3p浓度相对水平,并对检测结果进行统计学分析,比较两组结果之间是否存在差异性,同时运用ROC曲线分析评价miR-152-3p对肺癌早期诊断的价值.结果 肺癌患者血浆中miR-152-3p浓度相对水平为(4.71±2.18),健康组为(7.34±4.15),肺癌患者明显低于健康组,差异有统计学意义(t=4.223,P<0.05);血浆miR-152-3p浓度ROC曲线下面积(AUC)为0.689;当血浆中miR-152-3p浓度相对水平在最佳临界值5.6时,血浆miR-152-3p对肺癌诊断的特异性为67.3%,敏感性为62.3%;不同年龄、性别、吸烟和不吸烟、I期和II期肺癌患者血浆中miR-152-3p浓度相对水平比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 肺癌患者血浆中miR-152-3p浓度相对水平明显低于健康人群,但对肺癌早期诊断的准确性较低,需结合其他生物标记物联合检测.     

大肠癌组织中BORIS表达及其与临床病理因素的关系

目的:探讨大肠癌中BORIS蛋白的表达与肿瘤病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学方法研究(60)例大肠癌组织及其配对的(40)例切缘正常大肠组织BORIS的表达情况,比较BORIS在不同大肠组织中表达的差异及其与大肠癌病理因素之间的关系。结果:大肠癌组织中BORIS蛋白表达阳性率明显高于切缘正常大肠组织(P<0.05),BORIS蛋白表达阳性率与肿瘤大小、浸润深度、Dukes分期、淋巴结转移、分化程度有关(P<0.05);与患者年龄、性别、肿瘤发生部位无关(P>0.05)。结论:BORIS过量表达可能在大肠癌的发生、发展过程中起重要作用,可能用于大肠癌辅助诊断。     

Expression of miR-149-5p in hepatocellular carcinoma and its clinical significance

目的 分析miR-149-5p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义.方法 应用qRT-PCR方法检测40对HCC癌组织和癌旁肝组织中miR-149-5p的表达,并分析miR-149-5p的表达与肝癌患者临床病理之间的关系,进一步将以红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)为报告基因的miR-149-5p慢病毒(LV-miR-149-5p)感染MHCC97-H肝癌细胞,以过表达miR-149-5p,采用MTT检测感染后细胞增殖的变化,采用流式细胞仪测定感染后细胞周期的变化,并采用Transwell侵袭实验检测感染后细胞的体外侵袭能力的变化.结果 qRT-PCR结果提示miR-149-5p在HCC癌组织中的相对含量(5.522±1.104)低于癌旁肝组织(9.279±1.594)(P＜0.05),统计分析表明miR-149-5p在癌和癌旁肝组织中相对含量的比值与AFP含量负相关(P＜0.05).体外实验证实,miR-149-5p过表达不能影响细胞周期但能抑制细胞增殖(P＜0.05),而在Transwell侵袭实验中,LV-miR-149-5p感染MHCC97-H细胞后,对照细胞组透膜细胞数为(86.3±11.8)/视野,对照慢病毒组透膜细胞数为(83.7±4.0)/视野,LV-miR-149-5p组透膜细胞数为(50.6±3.4)/视野,实验组细胞侵袭能力较对照组细胞显著降低(P＜0.05).结论 miR-149-5p的过表达可抑制MHCC97-H细胞的增殖和侵袭,因此,miR-149-5p可作为一种抑癌基因在HCC的诊断及治疗中发挥作用.     

miR-139-5p在小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨miR-139-5p在小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义,阐明miR-139-5p在小细胞肺癌发生发展中的作用。方法：采用细胞生长、凋亡及周期实验检测miR-139-5p的生物学功能;实时荧光定量PCR法检测50例小细胞肺癌患者癌组织及癌旁正常组织中miR-139-5p的表达,结合临床资料分析其在临床中的作用。结果：miR-139-5p在小细胞肺癌组织中的表达水平低于正常肺组织（P<0.01）;转染miR-139-5p mimics后能够明显上调细胞中miR-139-5p的表达,差异有统计学意义（P<0.01）。与对照组比较,上调miR-139-5p的表达后细胞的增殖能力降低（P<0.01）,G₁期细胞明显增多（P<0.05）,细胞周期发生G₀/G₁期阻滞。单因素分析,miR-139-5p的表达与患者的性别和年龄无关（P>0.05）,miR-139-5p在局限期（LD）患者中的表达较广泛期（ED）患者低,两者的miR-139-5p表达率比较差异有统计学意义（χ²=10.546,P=0.001）;miR-139-5p在耐药患者中的表达较化疗敏感患者增高（χ²=7.025,P=0.008）。miR-139-5p在存活患者中的表达较死亡患者降低（χ²=7.697,P=0.006）;Cox回归分析,疾病分期和miR-139-5p的表达可作为小细胞肺癌独立的预后因子。结论：miR-139-5p通过抑制细胞增殖、促进细胞凋亡及诱导细胞周期阻滞参与调节小细胞肺癌发生发展,可作为评估小细胞肺癌患者临床预后的靶基因。     

结直肠癌中miR-21表达与临床病理因素及预后的关系

目的探讨结直肠癌组织中miR-21表达与临床病理因素及预后的关系。方法取59例结直肠癌组织标本及癌旁正常黏膜组织标本,采用茎环逆转录实时荧光定量PCR方法检测结直肠癌组织及癌旁正常黏膜组织中miR-21的相对表达量,并分析癌组织中miR-21表达与临床病理因素的关系。用Kaplan-meier法计算生存率,采用log-rank检验、Cox比例风险回归模型分析结直肠癌预后影响因素。结果结直肠癌组织中miR-21的相对表达量明显高于其癌旁正常黏膜组织（P＜0.05）。结直肠癌组织miR-21表达水平与肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期有关（均P＜0.05）;与性别、远处转移、分化程度、浸润深度和肿瘤位置无关（均P＞0.05）。远处转移、分化程度、miR-21表达水平是影响患者预后的独立危险因素（均P＜0.05）,其RR值及95%CI分别为5.053（1.395~5.787）、3.998（1.395~18.305）、3.837（1.266~11.631）。结论miR-21与结直肠癌患者预后和疾病进展密切相关。     

microRNA-150在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的 检测microRNA-150 (miR-150) 在结肠癌细胞株、结直肠癌(CRC)组织中的表达,分析其与临床特征间的关系。方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测8种结肠癌细胞株及45例CRC患者癌组织及对应正常组织中miR-150的表达情况,分析其表达与CRC临床病理资料之间的关系。结果 miR-150在8种结肠癌细胞株中表达明显降低,CRC组织中miR-150的表达较同一患者正常黏膜组织中的miR-150表达明显下调(P<0.05);miR-150在CRC组织中的表达与肿瘤的分化程度(P<0.05)及病理类型(P<0.01)密切相关。结论 miR-150在CRC中表达下调,其低表达与CRC的分化及病理类型相关,可作为结直肠癌诊断及治疗的指标之一。     

MiR-182在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞迁移能力的影响

目的 检测miR-182在结直肠癌中的表达情况及与临床病理参数的关系,探讨其对结直肠癌细胞迁移能力的影响。方法 实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测86例患者结直肠癌与对应癌旁组织中miR-182的表达情况,分析其与结直肠癌临床病理参数之间的关系。体外用miR-182 mimics和阴性对照转染结直肠癌HT-29细胞,将实验分为miR-182组、阴性对照组和空白组,transwell小室实验观察 miR-182对HT-29细胞迁移能力的影响。结果 MiR-182在结直肠癌的表达显著高于癌旁(P<0.001),其表达水平与患者的浸润程度(P=0.028)、淋巴结转移(P=0.003)、远处转移(P=0.006)和临床分期(P=0.005)密切相关, 而与年龄、性别、肿瘤类型、肿瘤大小和分化程度无相关性(P均>0.05)。体外实验进一步表明,miR-182过表达的HT-29细胞迁移数显著高于阴性对照组和空白组(P均<0.05)。结论 MiR-182在结直肠癌中高表达且与肿瘤的转移及进展有关,体外能增强结直肠癌细胞的迁移能力,提示miR-182可作为预防和治疗结直肠癌转移的潜在靶点。