D-半乳糖诱导小鼠免疫衰老的体外研究

目的建立和评价小鼠体外细胞及器官水平D-半乳糖致免疫衰老体系,探讨D-半乳糖对于免疫衰老的作用机制。方法建立细胞水平的D-Gal作用体系：设置不同浓度的D-Gal处理体外培养的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞,3H-TdR掺入实验检测增殖活性;建立器官水平的D-Gal作用体系：设置D-Gal注射处理组和对照组进行小鼠胸腺器官培养,检测方法为HE染色法观察组织切片和PI染色流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果D-Gal对于小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的增殖都有明显抑制作用,并且呈剂量相关效应;胸腺器官培养15 d后,HE染色结果显示：对照组的胸腺皮髓质分界清晰,细胞形态清晰,状态良好。而D-Gal组胸腺皮髓质分界混乱,细胞形态异常;D-Gal处理后,进行器官培养的胸腺3、7、11、15 d的亚二倍体峰的百分率分别为9.19±0.41、21.65±2.68、28.59±0.93、46.36±2.20,较对照组差异显著。结论D-Gal显著抑制了T淋巴细胞的增殖活性,可以诱导细胞免疫功能的衰退,诱导细胞水平的免疫衰老;切片结果表明,胸腺器官培养15 d后,D-Gal组胸腺发生组织退化。另外,胸腺器官培养中,对照组和D-Gal组的细胞凋亡率差异显著,D-Gal组的凋亡率随时间的增加而显著上升,证实D-Gal可在胸腺内诱导细胞的凋亡,破坏胸腺微环境,在体外器官水平诱导免疫衰老。     

基于RNA-Seq探讨玉竹多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠的保护作用

目的 探讨玉竹多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠认知功能保护作用的分子机制.方法 采用水提醇沉法提取玉竹总多糖组分并进行含量测定;将30只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、玉竹多糖组(2 g/kg).模型组及玉竹多糖组小鼠每日皮下注射D-半乳糖(150 mg/kg),正常组及模型组每日灌胃等体积生理盐水,同时玉竹多糖组小鼠灌胃...     

麋鹿角对D-半乳糖诱导小鼠衰老模型抗衰老作用

目的研究麋鹿角抗衰老作用。方法采用D-半乳糖诱导的小鼠亚急性衰老模型,以麋鹿角粉、水提取物和水提药渣灌胃给药,检测血浆中白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子?α(TNF?α)水平,肝、肾和脑中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,脑中单胺氧化酶(MAO)活性,小鼠背部皮肤羟脯氨酸(Hyp)含量,以及胸腺和脾脏指数。结果麋鹿角粉和水提取物均能显著提高衰老小鼠肝脏、肾脏以及脑组织内过低的SOD活性,提高肾脏和脑组织内过低的GSH-PX活性;同时降低肝脏和脑组织内过高的MDA水平,抑制脑组织中过高的MAO活性,显著升高过低的脾脏和胸腺指数;显著升高小鼠背部皮肤中过低的Hyp含量。水提取药渣也能显著提高肾脏中SOD和GSH-PX活性,抑制脑组织内MDA和MAO水平,升高背部皮肤中Hyp含量和胸腺指数。结论麋鹿角可通过提高机体抗氧化酶系活性,抑制脑组织MAO活性,提高免疫功能,延缓皮肤衰老而发挥抗衰老作用。本研究可为麋鹿角药用资源的合理利用及其产业化提供科学依据。     

DL0410改善D-半乳糖致衰老小鼠认知功能的线粒体保护机制研究

目的：本研究选择D-半乳糖致小鼠衰老模型为研究对象,探讨DL0410对衰老小鼠认知功能的保护作用,并从线粒体保护角度出发研究其分子作用机制。方法：建立D-半乳糖致衰老小鼠模型,通过行为学实验,评价DL0410对模型小鼠学习记忆的影响。实验设置阳性药对照对奈哌齐和美金刚,行为学实验包括Morris水迷宫、避暗实验、筑巢实验、新物体识别实验,并从线粒体结构和功能角度研究DL0410对其及下游多个层次的保护机制。结果：行为学实验结果表明,DL0410可以明显改善模型小鼠认知功能障碍的作用。在Morris水迷宫定位航行实验中,DL0410可以缩短其搜索时间和搜索距离,缩短其在空间探索实验中首次穿越平台的时间,并增加其穿越平台的次数;在避暗实验中,可以减少错误次数;此外,还可以提高筑巢实验的打分和新物体识别实验中的分辨指数。对脑内胆碱能系统功能进行考察,发现模型小鼠脑内乙酰胆碱酯酶的活性和乙酰胆碱水平未受显著影响,DL0410可以剂量依赖性的抑制脑内乙酰胆碱酯酶活性,提高乙酰胆碱水平,但差异未有统计学意义。对脑内线粒体功能和线粒体超微结构进行考察,发现DL0410可以显著提高线粒体的呼吸控制率（RCR）和氧化磷酸化效率（OPR）,保护线粒体超微结构。对脑内氧化水平进行考察,DL0410可以显著提高谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶和过氧化物歧化酶的活性,降低模型小鼠脑内脂质过氧化产物MDA和晚期糖基终末化产物AGE。从神经炎症角度,DL0410可以通过RAGE/ NF-κB信号通路抑制星形胶质细胞和小胶质细胞的活化和增生,抑制炎症介质的分泌。通过抑制JNK的激活,抑制脑内凋亡的发生,进而保护突触超微结构,减少突触的丢失。结论：DL0410 可以有效改善D-半乳糖致衰老小鼠的学习记忆功能,其可能的机制是,通过保护线粒体的结构和功能,进而抑制脑内氧化应激水平,抑制神经炎症的发生,减少神经元的丢失和突触的破坏,从而改善模型小鼠的认知功能。     

枸杞子对D-半乳糖致免疫衰老小鼠胸腺功能的作用

目的：建立D-半乳糖致衰老动物模型,并设置不同处理,研究枸杞子对于小鼠胸腺功能的作用,确定其对于免疫衰老的影响。方法：小鼠分组进行造模并给药;实时定量PCR方法对处理后小鼠胸腺初始T细胞标记物（sjTRECs）进行绝对定量以评价免疫中枢器官胸腺的生成和输出功能。结果：小鼠胸腺和脾脏的T淋巴细胞中的sjTRECs的含量：D-Gal模型组〈枸杞组〈对照组（P〈0.05）。结论：D-Gal模型组与对照组相比,小鼠胸腺的初始T细胞生成和输出功能显著减弱,成功建立了D-Gal致小鼠免疫衰老的模型。枸杞组的小鼠胸腺初始T细胞生成和输出功能较D-Gal组显著增强,具有延缓衰老和免疫保护的作用。     

黄精对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老作用研究

目的：探讨黄精对实验性衰老小鼠的抗衰老作用及机制。方法：以D-半乳糖致亚急性衰老小鼠为模型,同时给予黄精煎剂治疗,6周后,以超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、Na^＋ -K^＋ -ATP酶、Ca^2＋ -ATP酶、脂质过氧化的终产物丙二醛（MDA）为指标,观察黄精延缓衰老作用。结果：黄精能有效提高衰老小鼠脑组织中的SOD、GSH-Px、Na^＋ -K^＋ -ATP酶、Ca^2＋ -ATP酶的活性,降低MDA含量。结论：黄精有明显抗衰老作用,其作用机理可能与其清除自由基的作用有关。     

茶多酚对D-半乳糖诱导衰老小鼠红细胞氧化损伤影响

目的观察茶多酚对衰老小鼠红细胞氧化损伤的影响。方法对以D-半乳糖诱导衰老小鼠模型分别以低、中、高剂量的茶多酚灌胃30 d,测定小鼠红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,红细胞膜Na -K -ATPase活性和唾液酸含量。结果模型组红细胞SOD活性、Na -K -ATPase活性和唾液酸含量与正常对照组比较显著下降,茶多酚给药组小鼠红细胞SOD活性、细胞膜Na -K -ATPase活性和唾液酸含量较正常对照组明显增高,MDA含量降低,在各给药组中以茶多酚大剂量组的作用最强。结论茶多酚能增强机体抗氧化能力,减少自由基对生物膜的损伤,维持细胞膜的稳定性,具有抗衰老作用。     

脑欣方对D-半乳糖诱导的脑功能衰退小鼠的保护作用

目的探讨脑欣方对D-半乳糖诱导的脑功能衰退小鼠的保护作用.方法小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖(46 d,120 mg/kg),采用水迷宫测试仪测定模型小鼠的学习记忆能力,同时检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)含量.结果灌服脑欣方 100、200、400 mg/kg 46 d可以不同程度地改善模型小鼠的学习记忆能力;明显增强模型小鼠脑组织SOD活力,增加GSH含量,降低MDA含量(P<0.05,P<0.01).结论抑制脑组织脂质过氧化反应,提高脑组织的抗脂质过氧化能力,可能是脑欣方改善行为学异常,防治老年期痴呆的作用机制之一.     

松蘑提取液对D-半乳糖致衰老小鼠功能的影响

目的 观察松蘑提取液对D-半乳糖致衰老小鼠功能的影响.方法 50只小鼠随机分成对照组、模型组和松蘑提取液低、中、高剂量组(100 mg/mL、150 mg/mL、200 mg/mL).采用D-半乳糖复制衰老模型,检测小鼠脏器指数,学习记忆功能,测定大脑皮层和海马组织SOD、GSH-Px活性及MDA含量.结果 模型组小鼠空间学习记忆功能下降,逃避潜伏期延长;皮层和海马组织SOD、GSH-PX活性降低,MDA含量增高.松蘑提取液治疗组能明显改善衰老小鼠的空间学习记忆能力,显著提高皮层和海马中SOD、GSH-PX活性,降低MDA水平,呈剂量依赖性.结论 松蘑提取液减轻了衰老小鼠的学习记忆障碍,其机制可能与其抗氧化作用有关.     

海参肽对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老作用研究

目的研究海参肽对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化和免疫功能的影响。方法将60只BALB/c小鼠,分为正常组(给予生理盐水)、模型组(给予生理盐水)、海参肽低、中、高三个剂量组(125、250、500 mg/kg)和VE组(100mg/kg),采用颈背部皮下注射1 000 mg/kg剂量的D-半乳糖来建立小鼠衰老模型,记录小鼠的体重变化,计算胸腺和脾脏指数,测定血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH?Px)活力、脂褐素(Lipo)含量、免疫球蛋白G(IgG)、白细胞介素-2(IL?2)含量、心肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力和Lipo含量。结果与模型组相比,海参肽中、高剂量组活力、心肝组织的SOD活力,降低血清Lipo含量,差异均有统计学意义(P0.05);海参肽高剂量组(500 mg/kg)能升高血清免疫因子IgG、IL?2含量,降低心脏组织的Lipo含量,差异有统计学意义(P0.05)。结论海参肽对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠具有提高免疫和增强抗氧化能力的作用,能够延缓衰老。     

旱莲草对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的抗衰老作用研究

目的探讨旱莲草的抗衰老作用。方法以D-半乳糖致亚急性衰老小鼠为模型,测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及丙二醛(MAD)含量,脑、心肌细胞膜Na -K -ATP酶、Ca2 -ATP酶活性,并采用跳台法检测各组小鼠学习记忆行为。结果与模型组比较,旱莲草组可明显提高脑组织SOD和GSH-PX的活性;提高脑、心肌细胞膜Na -K -ATP酶、Ca2 -ATP酶活性,降低MDA含量;改善衰老小鼠的学习记忆能力。结论旱莲草具有明显的抗衰老作用,其作用机制可能与其清除自由基的作用有关。     

脑栓康对D-半乳糖诱导的脑功能衰退小鼠的保护作用

目的　探讨脑栓康对D -半乳糖诱导的脑功能衰退小鼠的保护作用。方法　小鼠颈背部皮下注射D -半乳糖 ,通过测定模型小鼠的学习记忆能力和脑组织超氧化物歧化酶 (SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)活力、丙二醛 (MDA)和脂褐素含量 ,观察脑栓康对模型小鼠的保护作用。结果　脑栓康 10 0、5 0、2 5mg/kg可不同程度地改善模型小鼠的学习记忆能力 ;3个剂量均可以明显增强模型小鼠脑组织SOD、GSH Px活力 ,降低MDA和脂褐素含量 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论　抑制脑组织脂质过氧化反应 ,提高脑组织的抗氧化能力 ,可能是脑栓康改善行为学异常、防治老年期痴呆的作用机制之一     

松花粉对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型肾脏mtDNA的保护作用

目的探讨松花粉对衰老模型小鼠肾脏线粒体DNA（mtDNA）的保护作用及其延缓衰老的机理。方法将30只雄性昆明小白鼠随机分为青年对照组、衰老模型组、松花粉治疗组;衰老模型组、松花粉治疗组采用每天5%D-半乳糖溶液100mg/kg颈背部皮下注射,复制亚急性衰老小鼠模型;青年对照组给予0.9%氯化钠注射液;松花粉治疗组在造模的同时每天给予750mg/kg的松花粉灌胃;青年对照组与衰老模型组以等体积的0.9%氯化钠注射液灌胃。连续50d后观察各组肾脏病理改变,并检测肾脏组织mtDNA的相对含量、肾脏组织SOD活性及其MDA的含量。结果松花粉能够改善衰老小鼠肾脏的病理改变,并能降低衰老小鼠肾脏组织mtDNA的相对含量,提高肾脏组织SOD活性及降低其MDA含量（P〈0.05）。结论松花粉可能通过减轻肾脏的氧化损伤,从而保护肾脏mtDNA延缓肾脏的衰老。     

普罗布考对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏的保护作用研究

目的:本实验主要研究抗氧化剂普罗布考对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏的保护作用及可能机制.方法:将36只大鼠随机分为3组,正常对照组12只;衰老模型组12只;普罗布考治疗组12只.大鼠每日腹腔注射D-半乳糖,按每只小鼠100mg/kg的剂量给药,连续42 d,形成亚急性衰老模型.做组织学检查,观察肾组织病理改变,测定肾组织超...     

D-半乳糖诱导间充质干细胞衰老的研究

目的 利用D-半乳糖诱导建立间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）体外衰老模型,并探讨其潜在机制。方法 以正常培养的MSCs做对照组,以分别用1、10、100g/L D-半乳糖诱导的MSCs作为处理组,培养48h后,采用免疫蛋白印迹法（Western blot）检测细胞内AKT与mTOR蛋白磷酸化水平以及衰老相关蛋白p16^Ink4a的变化。同时使用β-半乳糖苷酶试剂盒检测MSCs中β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）表达量的变化。最后用AKT抑制剂预处理D-半乳糖诱导组以明确AKT/mTOR信号通路在MSCs衰老中的作用。结果 与对照组相比,10g/L D-半乳糖作用48h后MSCs中β-半乳糖苷酶表达和衰老相关蛋白p16^Ink4a含量明显增加,同时p-AKT与p-mTOR含量也较对照组增加,加入AKT抑制剂后,衰老组β-半乳糖苷酶表达和衰老相关蛋白p16^Ink4a含量皆有所下降。结论 D-半乳糖能成功诱导构建MSCs体外衰老模型,AKT/mTOR信号通路参与了这一过程。     

新疆紫草提取物对小鼠D-半乳糖亚急性衰老模型的作用研究

目的:研究新疆紫草[Arnebia. euchroma (Royle) Johnst, AE]提取物对D-半乳糖致衰老小鼠模型的作用.方法:用D-半乳糖(D-Gal) 建立亚急性衰老小鼠模型,观察新疆紫草脂溶性提取物(AE-Ⅰ)对小鼠胸腺系数,脾脏系数,血清尿素氮(BUN)的含量和总抗氧化能力(T-AOC),肝组织总超氧化物歧化酶(T-SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,丙二醛(MDA)的含量,脑组织一氧化氮合成酶(NOS)和单胺氧化酶(MAO)活性的影响.结果:AE-Ⅰ能降低血清BUN 含量,提高T-AOC活性(P<0.01),升高肝组织T-SOD和GSH-Px的活性,降低MDA含量(P<0.01).但对胸腺系数、脾脏系数及脑组织中MAO、NOS活性无显著影响(P>0.05).结论:新疆紫草脂溶性提取物对D-半乳糖衰老小鼠具有延缓衰老作用.     

核桃、黑芝麻对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老作用研究

目的研究核桃制剂、黑芝麻制剂、核桃和黑芝麻复方制剂的抗衰老作用。方法颈背皮下注射5%D-半乳糖(0.3ml/d)建立小鼠衰老模型,用自制的核桃制剂、黑芝麻制剂、复方制剂8g/(kg.d)连续给小鼠灌胃30天,并用生理盐水组作正常对照。结果核桃、黑芝麻可显著提高小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性(P<0.01),明显降低丙二醛(MDA)的活性(P<0.05),但对谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、甘油三酯的影响不大(P>0.05)。结论核桃、黑芝麻能显著提高SOD活性、明显降低MDA活性,具有抗衰老作用。     

火棘对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的实验研究

目的 研究火棘对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化的作用.方法 将小鼠随机分为生理盐水对照组(简称生理盐水组),AD模型组(简称模型组),药物(低、高剂量)组,每组10只,共40只.连续胃饲小鼠8周后取血液、肝脏,并将小鼠断头处死,制作海马10％组织匀浆,分别取血液、肝脏、脑,测定超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力、丙二...