中药调节PMOP成骨与成脂分化平衡的研究进展

绝经后骨质疏松症发病风险逐年上升,其发病与骨平衡的破坏有关,成骨细胞功能衰减、骨形成不足,最终导致净骨量丢失。而骨形成又与骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的成骨分化和成脂分化关系密切,其分化受多条信号通路调控。本文主要对中药调控骨髓间充质干细胞的分化及其机制进行总结与分析。     

体外长期培养的家猪骨髓间充质干细胞生物学特性变化

目的 观察体外长期培养的家猪骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)生物学特性的变化.方法 将第1代MSCs(早期)和第35代MSCs(晚期)分别进行细胞形态学观察和染色体核型分析;钙沉积和细胞增殖测定,以及采用实时定量PCR定量分析成骨分化及成脂分化相关基因表达.结果 早期培养的MSCs细胞形态为较大的纺锤形,晚期为小的梭形.第35代MSCs细胞Ki-67染色强阳性,染色体数目增加.成骨诱导条件下早期MSCs茜素红S染色呈强阳性,晚期MSCs未见明显染色且OC基因表达明显下调(P＜0.01);成脂诱导条件下早期MSCs油红O染色阳性,晚期MSCs未见明显染色且PPARγ2基因表达明显下调(P＜0.01).结论 体外长期培养的家猪晚期MSCs不适合作为组织工程种子细胞.     

人绒毛膜来源的间充质干细胞成骨成脂分化潜能

目的:探讨人绒毛膜来源的间充质干细胞(hCDMSC)体外生长特性和成骨成脂分化潜能,证实人绒毛膜来源的间充质干细胞作为组织工程种子细胞的可行性.方法:取胎盘组织基蜕膜面用胶原酶和胰蛋白酶法分离培养,通过传代扩增观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖曲线,体外向成骨、成脂诱导分化,茜素红和油红O染色鉴定细胞分化能力,RT-P...     

lncRNA调控间充质干细胞向成骨细胞分化的研究进展 #br#

间充质干细胞（MSCs）是一种多能性基质细胞,已被证实具有向骨、软骨、脂肪、肌肉、神经、心肌和内皮等多种组织细胞分化的能力,且其在骨再生修复中发挥重要作用。长链非编码RNA（lncRNA）通过多种途径影响MSCs向成骨细胞分化的过程,同时在骨代谢平衡的过程中有着重要的调控作用。本文综述了lncRNA调控MSCs成骨分化的最新研究进展,为进一步研究lncRNA调节MSCs成骨分化及骨形成的机制提供新思路。     

SD大鼠骨髓基质细胞体外培养及分化研究

目的 研究SD大鼠骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)的生物学特性及其成骨和成脂分化能力.方法 处死16只6月龄SD大鼠动物,非连续密度梯度离心分离大鼠MSCs,传代后分别在成骨及成脂培养基中诱导培养14天,观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,通过组织特染对MSCs的成骨,成脂表型进行鉴定,计数阳性染色细胞百分比.结果 SD大鼠MSCs在体外具有成骨细胞分化潜力,油红0染色显示成脂诱导培养基可定向诱导其分化.结论 本实验成功分离SD大鼠MSCs且保持分化能力.     

骨形态发生蛋白介导的Smad依赖途径和Smad非依赖途径对骨质疏松症的潜在调节作用研究进展

糖皮质激素长期使用、雌激素减少、继发性甲状旁腺功能亢进、骨组织微环境改变等多种因素均可诱发骨质疏松症。骨代谢失衡(成骨-成脂失衡)是骨质疏松症发病的关键机制,而骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞增加和成骨细胞减少是导致骨质疏松症成骨-成脂失衡的核心。骨形态发生蛋白(bone morphogenesis protein,BMP)则是调控骨质疏松症成骨-成脂平衡的关键蛋白,而这一调控作用又是通过Smad依赖途径和Smad非依赖途径来实现的。本文重点介绍了BMP介导的Smad依赖途径和Smad非依赖途径,并详细介绍了BMP-2、BMP-4、BMP-6、BMP-7、BMP-9通过上述途径参与骨质疏松症成骨、成脂代谢调控的可能机制,以期为临床抗骨质疏松症药物有效靶点的筛选提供新思路。     

维生素D对骨髓基质干细胞成骨分化的分子调控研究进展

骨髓基质干细胞(MSCs)是骨髓基质的组成成分,在骨骼的发育和代谢平衡中起重要作用。该文总结并综述了维生素D及其活性形式1,25二羟基维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]通过Wnt信号通路、Wnt5a/ROR2轴、BMP/TGF-β/Samd信号通路、ROS/ERK信号通路对MSCs成骨分化的分子调控,阐明了维生素D对MSCs代谢调控的分子信号通路。     

阿伦磷酸钠对小鼠骨髓基质细胞成骨和成脂分化的影响

目的在离体条件下研究阿伦磷酸钠对小鼠骨髓基质细胞(BMSCs)成骨和成脂分化的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测阿伦磷酸钠对骨髓基质细胞增殖的影响,碱性磷酸酶(ALP)活性测定法检测阿伦磷酸钠对骨髓基质细胞(MSCs)成骨分化的影响,油红O染色形态学及定量测定法检测阿伦磷酸钠对骨髓基质细胞成脂分化的影响。结果1×10-10,1×10-9,1×10-8,1×10-7,1×10-6和1×10-5mol.L-1的阿伦磷酸钠可以促进小鼠原代骨髓基质细胞增殖,抑制骨髓基质细胞的成骨分化及成脂分化。结论阿伦磷酸钠对骨质疏松症的预防和治疗作用可能通过抑制骨髓基质细胞的成脂分化,进而减少脂肪细胞细胞因子的分泌而抑制破骨细胞的形成、激活以及骨吸收功能。     

Wnt10b与骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的关系

目的研究Wnt10b与骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导间充质干细胞(MSCs)骨向分化的关系,以及相关的分子机制。方法利用PCR、Western blot、组织化学染色等方法,检测BMP9对Wnt10b表达的影响,以及Wnt10b对BMP9诱导的成骨分化的影响。同时,通过定量PCR、Western blot、油红O染色、流式细胞术等,分析Wnt10b影响BMP9成骨分化诱导作用的可能机制。结果 Wnt10b在C3H10T1/2、C2C12、MEFs和MC3T3-E1细胞中均有表达,BMP9在C3H10T1/2细胞中上调Wnt10b的表达水平。Wnt10b增强BMP9在C3H10T1/2细胞中增加OCN蛋白水平和促进钙盐沉积的能力,沉默Wnt10b减弱BMP9的作用。Wnt10b并不改变BMP9对细胞周期的影响,但能增强BMP9诱导的Smad1/5/8磷酸化,沉默Wnt10b减弱BMP9对Smad1/5/8磷酸化的促进作用。此外,Wnt10b抑制BMP9在C3H10T1/2细胞中诱导的成脂分化,沉默Wnt10b则促进BMP9的成脂分化诱导作用。结论 Wnt10b可以促进BMP9诱导的MSCs骨向分化,这种作用可能与增强BMP/Smad信号转导有关。     

体外诱导人牙龈成纤维细胞多向分化潜能的实验研究

目的 探索人牙龈成纤维细胞（hGFs）是否具有多向分化潜能, 为组织工程学提供新的细胞来源。方法 经志愿者知情同意后收集健康牙龈组织, 组织块法培养 hGFs。取第 3 代 hGFs 进行成骨、 成软骨和成脂诱导, 未分化诱导的细胞为对照组。分别用碱性磷酸酶 （ALP） 染色和茜素红染色、 阿利新蓝染色、 油红 O 染色检测细胞成骨、 成软骨和成脂能力。实时定量聚合酶链反应 （PCR） 检测细胞中成骨分化标志基因 ALP、 runt 相关转录因子 2 （Runx2）、成软骨分化标志基因聚集蛋白聚糖（AGR）和成脂分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPARγ2）的表达。结果 成骨诱导组培养至 7 d 时 ALP 染色可见大量的蓝紫色沉淀, 28 d 时细胞周围有大量红染的钙结节沉积,而对照组无钙结节, 培养至 14 d 细胞中 ALP 和 Runx2 表达明显高于对照组（P < 0.01）。14 d 时成软骨诱导组阿利新蓝阳性, 成脂诱导组可见红色的脂肪滴, 而对照组 2 种染色为阴性, AGR、 PPARγ2 表达均明显高于对照组（P <0.01）。结论 hGFs 具有成骨、 成软骨和成脂分化的多向分化潜能。     

胎盘间充质干细胞向神经细胞诱导的实验研究

目的间充质干细胞(MSCs)具有自我更新和多向分化能力的特点，尽管其主要来源骨髓间充质干细胞(BMSCs)已被认为是治疗多种疾病的良好细胞来源。但在严重感染或随着年龄的增长骨髓细胞数及增殖、分化能力均明显下降等情况下，就无法顺利获得足量可用于治疗的BMSC，有必要寻找MSC的新来源。方法消化胎盘组织、贴壁培养获得基质细胞；用流式细胞仪检测其细胞表面标志；比较叔丁对甲氧酚(butylated hydroxyanisole，BHA)、复方丹参注射液、β-巯基乙醇(BME)等对培养的基质细胞向神经细胞分化的作用；采用免疫细胞化学的方法对分化的细胞进行鉴定。结果胎盘组织中分离出的基质细胞与骨髓间充质干细胞有相似形态和细胞表面标志，并可诱导表达神经元和星型胶质细胞标志神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolasen，NSE)、神经微丝(neurofilament，NF)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrilament acidic protein，GFAP)。结论胎盘组织中存在能分化为神经元样细胞的间充质干细胞。胎盘间充质干细胞可能是一种可为临床治疗提供丰富新来源的间充质干细胞。     

基因修饰间充质干细胞治疗肿瘤研究进展

间充质干细胞（MSCs）是来源于中胚层的成体干细胞,体内分布广泛,可从骨髓、脂肪、牙髓、脐带/胎盘等组织中分离获取,具有高度的可增殖和分化潜能,较低的免疫原性,同时具有向炎症损伤部位微环境的趋向性,在疾病治疗方面可作为基因药物的载体实现精准治疗。癌症被认为是永远无法愈合的伤口,其组织微环境在损伤与修复中呈无休止的动态变化,MSCs在其中扮演了重要角色。利用MSCs具有的向肿瘤组织中归巢及定位的特点,对其进行抗肿瘤药物的基因工程改造可能在癌症的治疗上是一种新的策略。概述MSCs在癌症发生发展中的作用以及基因修饰MSCs治疗癌症的研究进展,旨在为临床使用基因修饰MSCs治疗癌症提供策略和见解。     

间充质干细胞的体内生物分布及其成药性研究进展

间充质干细胞（MSCs）是一类来源于中胚层的多能干细胞,具有多向分化潜能、促进干细胞植入、造血支持、免疫调控及自我复制的生物学特性,是干细胞家族重要成员。由于其免疫调节、血管再生、组织修复等作用,MSCs已逐渐成为多项治疗领域的研究热点之一,并在自身免疫性疾病、组织损伤以及各种替代治疗领域成为一种非常有潜力、有前景的治疗药物。当机体组织损伤或发生炎性细胞浸润时,外源性给予的MSCs进入机体后可归巢至病变部位,并与体内的多种细胞发生相互作用,恢复机体正常生理功能、维持机体微环境稳态,修复病变组织器官。通过综述MSCs进入体内后的分布、归巢特性及相关影响因素、体内外检测方法及其作为药物开发的成药性研究进展,为干细胞从医疗技术转化为药物提供指导。     

间充质干细胞治疗特发性肺纤维化药理机制研究进展

间充质干细胞（MSCs）具有多种分化能力,可以直接迁移到损伤组织中并分化为肺泡上皮细胞,还可以分泌并释放多种细胞因子和外泌体,调节炎症和免疫反应。特发性肺纤维化（IPF）是与年龄相关、发病机制尚不明确的慢性进行性肺部疾病,临床上使用的吡非尼酮和尼达尼布仅能缓解症状。MSCs在治疗IPF方面具有广阔的应用前景,就目前关于MSCs治疗特发性肺纤维化的药理机制以及该疗法所存在的局限性进行综述和探讨。     

Effect of lead on proliferation and neural differentiation of mouse bone marrow-mesenchymal stem cells

Bone marrow-mesenchymal stem cells (MSCs) are considered to be an ideal source of stem cells for assessing the effects of environmental toxins on the proliferation, multipotency and differentiation of adult stem cells. The aim of this study was to investigate the effect of lead on the proliferation and neuronal differentiation of murine MSCs. MTT assay used in this study revealed that while the proliferation of MSCs is sensitive to higher than 10 μM lead, a 50% reduction in the rate of their proliferation can be achieved in the presence of 60 μM lead. The results of immunocytochemistry and RT–PCR showed that β-mercaptoethanol induced-neuronal differentiation is also reduced after the treatment of MSCs by 60 μM lead. Furthermore, the comet assay analysis of MSCs showed a substantial increase in DNA damage in the lead treated cells compared to the control. In conclusion our results revealed for the first time that lead is not only cytotoxic to the survival and proliferation of MSCs but also inhibits their differentiation to neurons in a dose-dependant manner. Therefore, MSCs appear to be an alternative method for assessing the cytotoxic effects of such environmental hazards.     

Mesenchymal stem cells for bone gene therapy and tissue engineering

Mesenchymal Stem Cells (MSCs) are adult stem cells that constitute a variety of adult tissues. MSCs maintain self-renewal ability with the ability to give rise to different mesenchymal cells, and are therefore responsible in part, for the regenerative capacity of mesenchymal tissues. MSCs throughout a variety of species were found to be able to differentiate to several mesenchymal tissues including: bone, cartilage, stroma, adipose, connective tissue, muscle and tendon. MSCs are relatively easily isolated from the bone marrow and expanded in vitro. It was found that MSCs play an important role in bone physiology and hematopoiesis, and in part participate in the pathophysiology related to bone diseases, mainly osteoporosis. MSCs were widely used in experimental studies in vivo, and were shown to form mesenchymal tissues. These discovered features have made MSCs good candidates for the development of various therapeutic modalities aimed to regenerate mesenchymal tissues, mainly bone. The more important approaches currently utilizing MSCs are gene therapy and tissue engineering. Both exploit the current knowledge in molecular biology and biomaterial science in order to direct MSCs to differentiate in vivo to desired lineages and tissues. Better understanding of the molecular mechanism directing the differentiation of MSCs, will eventually allow us to properly manipulate MSCs both in vivo and ex vivo to allow the regeneration of complex tissues and organs.     

诱导间充质干细胞向心肌细胞分化方法及分化机制进展

干细胞在体外特定条件下,可特异的向某种组织类型细胞进行分化,其中包括向心肌细胞分化。目前,胚胎干细胞(em-bryonic stem cells,ESCs)虽然具有这方面的功能,且其分化效率较一般成体细胞高,但是由于伦理问题限制了其在临床的应用。而间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)不仅取材方便,且没有伦理争议,是最具希望的再生医学种子细胞,引起了人们的极大关注。目前对于体外诱导不同来源的间充质干细胞向心肌细胞分化方法的实验研究很多,主要包括化学试剂诱导和模拟体内微环境诱导两大类。该文就MSCs向心肌分化的体外诱导方法和分化机制的研究进展作一综述。     

Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells and hepatic differentiation: old concepts and future perspectives

Mesenchymal stem cells (MSCs) are multipotent cells, able to differentiate into elements of the mesodermal lineage. Bone marrow and adipose tissue represent the main sources for MSC isolation. In the last decade, several studies have reported the plasticity of MSCs toward a hepatocyte-like phenotype. The use of MSCs to generate hepatocyte-like cells holds great promises to overcome the scarcity of available organs for transplantation. However, little is known about the molecular pathways involved in lineage cross-differentiation and several issues remain to be answered before MSC application in clinical settings. Aim of this review is to critically analyze the possible sources of MSCs suitable for liver repopulation and the molecular mechanisms underlying MSC hepatic differentiation.     

间质干细胞与肿瘤的关系研究进展

间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是来源于中胚层的一类具有高度自我更新能力和多向分化潜能的非造血干细胞,具有很好的组织迁移能力和肿瘤靶向性。MSCs用于抗肿瘤治疗已经开展了广泛的研究,MSCs可以作为细胞载体发挥抗肿瘤作用,同时通过促肿瘤血管生成、免疫抑制、分化为肿瘤相关成纤维细胞等方式促进肿瘤的恶性行为。该文对近年来该领域的研究进展进行简要综述。