大黄素抑制胰腺癌新生血管形成的机制研究

目的探讨大黄素对裸鼠SW1990细胞原位移植瘤新生血管形成的影响及其机制。方法40只雌性BALB/c裸鼠建立SW1990细胞原位移植瘤的动物模型,分为对照组和大黄素低、中、高剂量组(20、40、80mg/kg)。大黄素各组均采取腹腔注射给药,3次/周,共2周。末次用药1周后处死裸鼠取肿瘤组织。采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中的内皮细胞标记物CD31和CD34,从而确定其微血管密度(MVD)。采用蛋白质印迹(Western blot)法检测新生血管相关基因血管内皮生长因子(VEGF)表达。荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测新生血管相关microRNA miR-20b、miR-21、miR-155、miR-210表达。结果免疫组织化学染色显示,按CD31、CD34计算的MVD,低剂量组、中剂量组、高剂量组较对照组均降低[(11.7±1.6)、(7.9±2.3)、(7.2±1.8)比(19.3±1.9),(12.3±1.8)、(5.4±1.6)、(4.8±1.6)比(16.5±1.1),P均0.05]。与低剂量组比较,中、高剂量组MVD明显降低(P均0.05);而中剂量组与高剂量组MVD比较,差异无统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示,对照组及低、中、高剂量组VEGF表达分别为(1.000±0.054)、(0.533±0.039)、(0.381±0.032)、(0.278±0.031),各组组间两两比较,差异均有统计学意义(P均0.05)。q RT-PCR结果显示,与对照组比较,低、中、高剂量组miR-20b表达水平增加[(1.398±0.128)、(1.588±0.140)、(2.336±0.354)比(1.000±0.083),P0.05],miR-21、miR-155及miR-210表达水平均降低[(0.449±0.126)、(0.240±0.051)、(0.147±0.029)比(1.000±0.212),(0.581±0.128)、(0.523±0.071)、(0.402±0.058)比(1.000±0.076),(0.378±0.055)、(0.239±0.034)、(0.185±0.043)比(1.000±0.104),P均0.05];与低剂量组比较,中、高剂量组miR-20b表达水平增加(P0.05),中、高剂量组miR-21、miR-210及高剂量组miR-155表达水平降低(P0.05),且高剂量组表达较中剂量组更明显(P0.05)。结论大黄素能抑制裸鼠SW1990细胞原位移植瘤的新生血管形成,其机制可能与下调VEGF表达以及调节与新生血管相关microRNA miR-20b、miR-21、miR-155、miR-210表达有关。     

大黄素通过调控miRNA抑制胰腺癌新生血管形成及其机制

摘 要 目的 探讨大黄素通过调控微小RNA（microRNA）抑制裸鼠SW1990细胞原位移植瘤新生血管的形成及其机制。方法 建立裸鼠SW1990细胞原位移植瘤的动物模型,分为对照组（N组）和3个大黄素组(20mg/kg,40 mg/kg,80 mg/kg,即E20组、E40组、E80组)。各组均采取腹腔注射给药,3次/周,共2周。末次用药后1周处死裸鼠取肿瘤组织。采用免疫组织化学染色法检测肿瘤组织的CD31和CD34（两种不同的内皮细胞标记物）,从而确定其微血管密度(MVD)。采用蛋白质印迹法（WesternBlot）法检测新生血管相关基因血管内皮生长因子(VEGF)的表达。荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测新生血管相关microRNA miR-20b,miR-21,miR-155,miR-210的表达。结果 免疫组织化学染色显示,按CD31计算的MVD,N组为19.3±1.9,E20组为11.7±1.6,E40组为7.9±2.3,E80组为7.2±1.8,N组、E20组、E40组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);E80组与N组、E20组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与E40比较,差异无统计学意义（P>0.05）。按CD34计算的MVD,N组为16.5±1.1,E20组为12.3±1.8,E40组为5.4±1.6,E80组为4.8±1.6,N组、E20组、E40组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);E80组与N组、E20组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与E40比较,差异无统计学意义（P>0.05）。WesternBlot法结果显示各组VEGF表达分别为1.000±0.054,0.533±0.039,0.381±0.032,0.278±0.031,各组组间两两比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。RT-qPCR法显示各组miR-20b 表达为1.000±0.083,1.398±0.128,1.588±0.140,2.336±0.354,miR-21表达为1.000±0.212,0.449±0.126,0.240±0.051,0.147±0.029, miR-210表达为1.000±0.104,0.378±0.055,0.239±0.034,0.185±0.043, (P<0.05)。各组组间两两比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。miR-155表达为1.000±0.076,0.581±0.128,0.523±0.071,0.402±0.058,N组、E20组、E80组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);E40组与N组、E80组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与E20比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 大黄素对裸鼠体内人胰腺癌SW1990细胞原位移植瘤的新生血管抑制作用效果显著,其机制可能是大黄素改变新生血管相关基因VEGF的表达以及改变新生血管相关microRNA miR-20b,miR-21,miR-155,miR-210的表达有关。关键词 大黄素;胰腺癌;新生血管;血管内皮生长因子;微小RNA     

百里醌抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长的实验观察

目的 观察百里醌对胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的影响及其作用机制.方法 建立外科胰腺癌原位移植模型,随机分为4组:对照( Control)组、低剂量百里醌(L-TQ)组、高剂量百里醌(H-TQ)组和吉西他滨(GEM)组,第3周开始分别给予溶媒(1％乙醇)0.2 ml/只、百里醌5 mg/kg、百里醌20 mg/kg和吉西他滨100 mg/kg治疗.术后第8周处死裸鼠,测量胰腺肿瘤瘤重并计算抑瘤率;观察裸鼠肿瘤转移情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织中细胞增殖因子(Ki-67)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达.结果 L-TQ组、H-TQ组和GEM组的抑瘤率分别为42.57％、64.11％和54.77％;与对照组相比,GEM组肿瘤转移未被明显抑制,而L-TQ组和H-TQ组肿瘤转移明显被抑制;与对照组相比较,L-TQ组和H-TQ组中Ki-67、XIAP和MMP-9的表达强度明显减弱,而GEM组中仅Ki-67表达下调.结论 百里醌具有抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用,此作用机制可能与抑制XIAP和MMP-9的表达有关.     

白藜芦醇抑制胰腺癌裸鼠移植瘤生长的实验研究

目的:观察白藜芦醇(Res)对人胰腺癌Miapaca-2(PC-2)细胞构建的胰腺癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型并随机分组,分别给予3种不同浓度的白藜芦醇干预后处死胰腺癌裸鼠,取出移植瘤,观察其体积、重量的变化情况;HE染色法观察移植瘤组织病理学变化;采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和Western bolt法测定移植瘤组织Bcl-2、Bax、p53蛋白和mRNA表达水平。结果:Res组移植瘤的体积、重量明显低于阴性对照组,随着浓度增加变化越明显(P<0.01);3个浓度组白藜芦醇作用于胰腺癌裸鼠后,移植瘤组织中Bcl-2、Bax、p53蛋白和mRNA表达水平较阴性对照组差异具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增加表达水平的差异越明显。结论:白藜芦醇可能通过调节Bcl-2、Bax、p53的表达来抑制胰腺癌移植瘤的生长。     

辣椒素抑制胰腺癌裸鼠皮下移植瘤生长的实验研究

目的探讨辣椒素对胰腺癌BXPC-3细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其机制。方法建立耐药胰腺癌BXPC-3细胞的裸鼠皮下移植瘤动物模型,将荷瘤鼠随机分为:对照组(control,N组)、吉西他滨组(GEM)、低剂量辣椒素组(L-CAP)和高剂量辣椒素组(H-CAP)。第3周开始分别给予溶媒(生理盐水)0.2毫升/只、吉西他滨100mg/kg、辣椒素10mg/kg和辣椒素20mg/kg治疗。3天1次,共8次。实验过程中称测量肿瘤体积,末次用药1周后处死裸鼠。免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67(细胞增殖因子)、XIAP(X连锁凋亡抑制蛋白)和NF-κB(核转录因子)的表达。采用RT-PCR检测核转录因子NF-κB和XIAP mRNA的表达。结果末次用药1周后H-CAP组肿瘤体积和质量明显小于其他各组。免疫组织化学染色结果显示L-CAP组和H-CAP组的NF-κB和XIAP蛋白的表达量明显低于N组和GEM组。H-CAP组Ki-67的表达量明显低于其他各组。RT-PCR结果显示L-CAP组和H-CAP组的NF-κB和XIAP mRNA的表达量明显低于N组和GEM组。结论辣椒素可以通过下调NF-κB和XIAP基因和蛋白表达,从而产生对胰腺癌BXPC-3细胞移植瘤的抑制作用。     

大黄素通过非Caspase依赖通路抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤生长机制研究

目的探讨大黄素对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用,并探讨其作用机制。方法建立人膀胱癌细胞株BIU87裸鼠移植瘤模型,并随机分为4组[对照组、大黄素组、Caspase抑制剂（Z-VAD-FMK）组及大黄素＋Z-VAD-FMK组]。观察各组裸鼠移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线,4周后处死全部裸鼠,取出肿瘤组织,称瘤质量;HE染色观察肿瘤细胞形态,RT-PCR检测各组肿瘤组织中线粒体蛋白凋亡诱导因子（AIF）和核酸内切酶G（Endo G）的mRNA的表达,Western blot检测各组肿瘤组织中AIF和Endo G蛋白的表达。结果大黄素组肿瘤生长速度明显慢于其他3组,大黄素组和大黄素＋Z-VAD-FMK组肿瘤较其他2组轻,差异均有统计学意义（均〈0.01）,大黄素组与大黄素＋Z-VAD-FMK组差异也有统计学意义（〈0.01）。大黄素＋Z-VAD-FMK组中AIF和Endo G的表达水平显著上调,与其他各组比较,差异均有统计学意义（均〈0.01）。结论大黄素能够明显抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能部分与大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和Endo G的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡有关。     

大黄素对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤抑癌基因去甲基化作用

目的 通过建立胰腺癌Panc1细胞株皮下移植瘤模型,探讨大黄素对胰腺癌皮下移植瘤抑癌基因p16、RASSF1A、ppENK启动子区CpG岛的去甲基化作用的影响。方法 首先建立人胰腺癌细胞裸鼠模型,后给予不同药物浓度的大黄素（0、30、50、70mg/kg）处理裸鼠,观察大黄素对裸鼠移植瘤生长的影响,采用MSP、RT-PCR以及Western blot法分别检测不同组别移植瘤的3个抑癌基因甲基化状态以及mRNA、蛋白的改变。结果 大黄素能够抑制胰腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长,随着大黄素浓度的升高,其对胰腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制率逐渐升高,特别50、70mg/kg浓度组与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。MSP结果显示大黄素可使裸鼠移植瘤组织的甲基化条带减弱,非甲基化条带增强,同时可以使经RT-PCR和Western blot法结果证实的低表达或无表达的mRNA和蛋白表达增强或者重新表达,与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 通过体内实验笔者证实大黄素可以对胰腺癌裸鼠移植瘤抑癌基因p16、RASSF1A、ppENK发挥不同程度的去甲基化作用,使因启动子区甲基化而失表达的抑癌基因重新表达,大黄素抑制胰腺癌裸鼠移植瘤生长可能和其具有对抑癌基因去甲基化作用有关。     

人参皂甙Rg3抑制肝癌移植瘤新生血管形成的研究

目的探讨人参皂甙Rg3（简称Rg3）应用对裸鼠肝癌移植瘤模型中肿瘤的生长及微血管密度的影响。方法采用人肝癌Bel-7402细胞株,种植于24只雄性裸鼠皮下,随机均分成4组：联合用药组,Rg3组,三氧化二砷组及对照组。实验自肿瘤接种第3天开始,人参皂甙Rg3,隔日灌胃,共20次,三氧化二砷,每日腹腔内注射,连续28d,停药1周后,脱颈处死,分别观察裸鼠的生存质量,检测肿瘤的重量,并计数肿瘤内微血管密度（MVD）。结果Rg3组,三氧化二砷组,联合用药组对肝癌裸鼠种植肿瘤的生长有明显的抑制作用,联合治疗组抑制肿瘤生长的作用明显优于单组,Rg3组MVD明显低于三氧化二砷组及对照组。结论Rg3通过抑制肿瘤新生血管形成,明显降低肿瘤内的MVD,Rg3与三氧化二砷联合应用能明显抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长。     

hVEGF siRNA抑制A549细胞在裸鼠移植瘤的早期生长及血管新生

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(human vascular endothelial growth factor,hVEGF)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对A549细胞裸鼠移植肿瘤生长以及对鸡胚尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)上诱导新生血管的影响.方法:分别构建3个表达不同特异性hVEGF siRNA序列的质粒载体,与表达无关序列siRNA质粒载体分别转染A549细胞,用ELISA与realtime RT-PCR选出抑制hVEGF效果最佳的hVEGF siRNA质粒.G418筛选出稳定表达抑制效果最佳的hVEGF siRNA和表达无关序列siRNA的A549细胞,与未转染的A549细胞分别注射于裸鼠皮下,观察3组细胞在裸鼠皮下成瘤及肿瘤生长的速度.鸡胚尿囊实验:孵育至第9天的白皮受精种蛋随机分为4组,分别在鸡胚尿囊膜表面加未培养过A549细胞的DMEM培养液(阴性对照组),未转染的A549细胞培养上清液(阳性对照组),转染hVEGF siRNA的A549细胞培养上清液(hVEGF siRNA组),转染无关序列siRNA的A549细胞培养上清液(无关序列siRNA组),继续孵育48 h,取固定后的鸡胚绒毛尿囊膜于显微镜下计数血管分支点和血管分支长度.结果:hVEGF siRNA使A549细胞表达mRNA水平最大下降70%,分泌hVEGF水平最大下降48%.在裸鼠移植瘤模型中,hVEGF siRNA组比无关序列siRNA组肿瘤平均体积减少58%,肿瘤生长到50 mm3的平均时间延迟5.4 d,移植肿瘤组织匀浆hVEGF含量降低54%;而肿瘤的倍增时间与肿瘤生长速率差异不显著.在鸡胚尿囊膜实验中,阴性对照组加样液的hVEGF含量为0,hVEGF siRNA组加样液的hVEGF含量约占无关序列siRNA组和阳性对照组的40%～44%;血管分支点计数,hVEGF siRNA组,无关序列siRNA组与阳性对照组比阴性对照组增加45%～55%;血管分支总长度hVEGF siRNA组比阴性对照组增加约53%,无关序列siRNA组和阳性对照组比阴性对照组分别增加约97%及99%.CAM血管图上与阴性对照组比较VEGF siRNA组可见增多的血管分支,阳性对照组和无关序列siRNA组上还可以见血管分支增粗、增长.结论:构建并证实质粒介导的hVEGF siRNA能抑制A549细胞分泌VEGF,从而抑制A549细胞诱导鸡胚尿囊膜的血管新生.在裸鼠移植瘤模型中,hVEGF siRNA能抑制肿瘤早期生长,对肿瘤后期的生长速率无显著抑制.     

丙戊酸对卵巢癌裸鼠移植瘤血管形成的影响

目的探讨丙戊酸(VPA）对卵巢癌裸鼠移植瘤血管形成的影响。方法建立人卵巢癌裸鼠皮下转移瘤模型,将24只裸小鼠随机分为对照组、VPA组、顺铂（DDP）组、VPA+DDP 4组,每组6只。观察并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线、计算肿瘤体积、肿瘤生长抑制率。采用免疫组化SP法检测各组裸鼠皮下移植瘤中CD105 和sFlk-1的表达水平。结果① 治疗组裸鼠移植瘤的体积较对照组明显变小;② 各治疗组肿瘤组织的CD105表达较对照组均明显下降(P＜0.05),sFlk-1表达较对照组均明显增高(P＜0.05)。结论VPA对卵巢癌裸鼠移植瘤有明显抑制作用,其作用机理可能与抑制肿瘤血管形成有关,与DDP联合应用其抑瘤作用增强。     

氧化苦参碱抑制人胃癌裸鼠移植瘤生长的机制

目的:探讨氧化苦参碱抑制人胃癌裸鼠移植瘤生长的机制,为临床运用氧化苦参碱治疗胃癌提供一定的理论依据.方法:将裸鼠随机分为阴性对照组(NS)、阳性对照组（5-FU）、氧化苦参碱小、中、大剂量组(oxymatrine,OXY),观察OXY对人胃癌裸鼠移植瘤的抑制作用；剥取裸鼠移植瘤,分别进行病理学切片HE染色、DNA染色、...     

恶性肿瘤裸鼠原位移植瘤株库建立

据悉 ,沈阳军区 2 0 2医院在国际上首次建立的人类恶性肿瘤裸鼠原位移植瘤株库 ,于日前通过科技部、卫生部联合组织的专家验收 ,填补了人类肿瘤基础研究领域的空白。标志着我国在人类肿瘤研究领域已处于国际领先水平。科学家在研究过程中 ,缺乏人体肿瘤标本来研究患者体内的肿瘤细胞生长、侵袭和转移的临床过程 ,这些阻碍了人类对肿瘤的深入研究。为此 ,建立人类肿瘤动物模型是国内外医学界面临的重要课题。沈阳军区 2 0 2医院早在 1989年便将人类肿瘤组织直接原位移植于裸鼠 ,完成了世界上首例人类肝癌裸鼠原位移植模型。据研究课题负责人…     

中药小分子抑制新生血管形成机制的研究进展

一系列中药复方在临床实践和基础实验中被证明能够抑制病理性新生血管形成,中药小分子是中药复方中实际发挥药效的活性成分,既往文献报导了特定中药小分子能够通过不同途径抑制血管内皮细胞生长因子表达,从而抑制新生血管形成,为治疗相关血管新生疾病提供了新思路。新生血管形成在糖尿病性视网膜病变等视网膜新生血管疾病中扮演了重要的角色,也对恶性肿瘤的发生发展具有重要意义。本文简述了新生血管形成的过程和机制,并以部分黄酮类、皂苷类、生物碱等中药小分子为主,整理并详细介绍了中药小分子抑制新生血管形成的机制与研究进展。     

甲状腺激素可抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长

目的探讨甲状腺激素对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法建立BALB/c人胰腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,将成
瘤裸鼠随机分为对照组（灭菌蒸馏水）、甲状腺激素（T3）高浓度组、T3低浓度组、丙基硫氧嘧啶（PTU）高浓度组、PTU低浓度组,
干预21 d。测量各组裸鼠体质量变化;测量各组移植瘤体积与瘤体质量变化;应用ELISA法检测裸鼠血清中甲状腺激素T3浓
度;应用免疫组化染色法检测瘤体组织中细胞增殖核抗原（PCNA）的表达和肿瘤微血管密度（MVD）的变化。结果与对照组相
比,甲状腺激素组裸鼠体质量较干预前均明显减轻（P<0.05）,而PTU组变化不明显。甲状腺激素组移植瘤体积增长明显滞后于
PTU组和对照组（P<0.05）。甲状腺激素组瘤体质量显著低于PTU组和对照组（P<0.05）。与PTU组和对照组相比,甲状腺激素
组的PCNA增殖指数与MVD亦明显降低（P<0.05）,但不同浓度组间无显著统计学差异（P>0.05）。结论甲状腺激素可抑制人
胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,通过抑制肿瘤细胞的增殖和新生血管的形成来发挥抗肿瘤效应,具有潜在的临床应用价值。
     

人参皂甙Rg3对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤血管生成拟态的研究

目的 本实验通过建立胰腺癌SW-1990细胞株皮下移植瘤模型,探讨人参皂甙Rg3对胰腺癌皮下移植瘤血管生成拟态的影响。 方法 首先建立人胰腺癌细胞裸鼠模型,后给予不同药物浓度的人参皂甙Rg3(0、5、10、20mg/kg)处理裸鼠,观察人参皂甙Rg3对裸鼠移植瘤生长的影响,免疫组化-PAS双染观察人参皂甙Rg3对裸鼠胰腺癌皮下移植瘤血管生成拟态和血管内皮因子CD31的影响,并用荧光定量PCR和Western blot法分别检测MMP-2、MMP-9在mRNA和蛋白水平的表达。 结果 人参皂甙Rg3能够抑制胰腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长,其中20mg/kg人参皂甙Rg3组最明显;Western blot法和荧光定量PCR示用药组与空白组比较,MMP-2、MMP-9在蛋白和mRNA水平的表达下降,且差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化-PAS双染后发现血管拟生(+)和CD31(+)数量均较空白组减少。 结论 通过体内实验笔者证实人参皂甙Rg3能够通过降低MMP-2、MMP-9的表达来抑制胰腺癌血管生成拟态的形成。     

三氧化二砷抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长及机制的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对人卵巢癌细胞株 3AO细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及作用机制。方法 :4× 10 6个 3AO细胞接种于裸鼠皮下 ,采用不同浓度As2 O3 腹腔注射治疗 ,与顺铂 (cDDP)进行对比 ,计算移植瘤的体积、瘤重、抑瘤率及Fas、FasL基因表达水平的变化。结果 :As2 O3 对移植瘤生长的抑制作用明显优于cDDP ,且具有剂量低赖性 ;As2 O3 作用后Fas基因的表达呈升调节 ,而FasL基因的表达无明显变化。结论 :As2 O3 对人卵巢癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用 ,其机制与Fas基因的过度表达有关。     

肺积汤对Lewis肺癌裸鼠移植瘤新生血管的影响

目的观察肺积汤对Lewis肺癌移植瘤新生血管的影响,并探讨其机制。方法 BALB/c雄性裸鼠30只,复苏转染绿色荧光的裸鼠Lewis肺癌细胞株,接种于裸鼠左侧腋下,制备裸鼠Lewis肺癌模型,随机数字表法分为生理盐水组、肺积汤组和贝伐单抗组,每组10只。生理盐水组给予0.9%生理盐水0.4mL/只,灌胃,1天1次;肺积汤组给予肺积汤混悬液(生药含量1g/mL)22.2mg·kg~(-1),调整至0.4mL/只,灌胃,1天1次;贝伐单抗组给予贝伐单抗15mg·kg~(-1),调整至0.2mL/只,腹腔注射,1周2次,持续用药21天后处死裸鼠,收集血清、皮下瘤。HE染色观察皮下瘤血管情况,免疫组化法检测皮下瘤微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)表达量;ELISA法测定血清VEGF-A水平。结果与生理盐水组比较,肺积汤组及贝伐单抗组瘤重减轻[(6.15±1.49)g、(4.32±0.77)g比(7.92±1.09)g,P0.05,P0.01],瘤体积缩小[(3.73±1.06)cm~3、(2.36±1.99)cm~3比(4.97±1.68)cm~3,P0.05,P0.01];与生理盐水组、贝伐单抗组比较,肺积汤组裸鼠未出现明显恶病质表现。肺积汤组及贝伐单抗组裸鼠皮下瘤细胞变性坏死较少,散在红细胞少。免疫组化结果显示,与生理盐水组比较,肺积汤组及贝伐单抗组MVD减少[(18.39±1.21)、(17.40±0.86)比(27.40±10.12),P均0.05],瘤组织和血清VEGF-A表达量降低[皮下瘤组织VEGF-A:(3.35±1.15)、(3.22±1.10)比(6.98±1.74),P均0.01;血清VEGF-A:(115.38±9.15)pg/mL、(106.21±3.15)pg/mL比(130.63±4.51)pg/mL,P0.05,P0.01],肺积汤组与贝伐单抗组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论肺积汤能抑制皮下瘤生长及转移,延缓恶病质发生,其作用机制可能与下调VEGF-A表达,抑制肿瘤血管新生有关。     

花脸蘑多糖LSPb1在喉癌细胞裸鼠移植瘤模型中抑制血管形成

目的研究花脸蘑多糖(LSPb1)在体内对喉癌血管新生的作用,探究其抗肿瘤的作用机制。方法 ELISA检测体外培养的喉癌Hep-2细胞在低氧环境下分泌血管内皮生长因子(VEGF)的量;异种移植瘤模型研究LSPb1对移植瘤体积的影响;ELISA和RT-PCR检测移植瘤内VEGF蛋白和mRNA水平的表达;免疫组化定量分析移植瘤组织中新生血管的数量。结果在Hep-2细胞中,LSPb1显著抑制了VEGF的分泌(P<0.001)。在Hep-2异种移植瘤模型荷瘤裸鼠中发现LSPb1显著抑制了瘤体的生长(P<0.05);与对照组相比,LSPb1处理移植瘤中VEGF mRNA水平无表达,VEGF因子的表达下降(P<0.01),血管密度显著下降(P<0.01)。结论 LSPb1作为一个潜在的喉癌治疗药物有望在治疗人喉癌中发挥重要的作用。     

羟基红花黄色素A抑制新生血管形成的机制研究

目的从中药中寻找新的血管生成抑制剂,并探讨其抑制新生血管生成的作用机理.方法从红花中提取分离羟基红花黄色素A,利用鸡胚尿囊膜(CAM)实验观察羟基红花黄色素A对新生血管的抑制作用,并通过RT-PCR实验,观察羟基红花黄色素A对CAM组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体(VEGF-R)(flt-1) mRNA表达的影响.结果提取出的羟基红花黄色素A纯度达到了98.9%,浓度为0.59 g/L的羟基红花黄色素A能使CAM血管数明显变细减少(P<0.01)并能显著抑制CAM组织中bFGF、VEGF及VEGF-R(flt-1) 的mRNA表达(P<0.05).结论通过本实验我们首次得出羟基红花黄色素A能显著抑制CAM新生血管生成,其作用机制之一是通过抑制bFGF、VEGF及VEGF-R(flt-1)的mRNA表达来实现的,提示羟基红花黄色素A可能是一很有潜力的血管生成抑制剂.