Expression and clinical signifcance of tight junction proteins(occludin and ZO-1) in human esophageal squamous cell carcinoma

目的 探讨紧密连接蛋白occludin及ZO-1在食管鳞状细胞癌及手术切缘正常食管黏膜组织中的表达及其临床意义.方法 采用组织芯片和免疫组化法检测49例食管鳞状细胞癌患者的癌组织及手术切缘正常食管黏膜组织(距肿瘤组织＞5 cm)中occludin和ZO-1的表达,分析食管鳞状细胞癌癌组织中occludin、ZO-1表达与肿瘤的增殖、侵袭和转移之间的关系.结果 食管鳞状细胞癌组织中occludin及ZO-1的阳性表达明显低于手术切缘正常食管粘膜组织 (P＜0.01),且癌组织中occludin、ZO-1的表达与其分化程度及淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 食管鳞状细胞癌的occludin和ZO-1的表达下调或缺失与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移有关,在食管癌的进展中起重要作用.     

COL1A1、KPNA2在三阴性乳腺癌组织中的表达及与远期预后的关系

目的 探讨Ⅰ型胶原蛋白α1链（COL1A1）、核转运蛋白α2（KPNA2）在三阴性乳腺癌（TNBC）组织中的表达及与远期预后的关系。方法 收集2016年6月—2017年6月本院收治的87例TNBC患者为研究对象,患者均经手术留取癌组织及癌旁组织标本,采用免疫组织化学法检测COL1A1、KPNA2在各组织标本中的表达情况,分析两者表达情况与患者病理特征的关系,绘制生存曲线分析二者表达情况与患者5年预后的关系,采用COX回归模型分析影响患者预后生存的因素。结果 COL1A1、KPNA2在TNBC患者癌组织中高表达率显著高于癌旁组织（P<0.05）。在TNBC癌组织中,COL1A1、KPNA2高表达与组织学分级、脉管侵犯、淋巴结转移情况有关（P<0.05）,COL1A1高表达还与临床分期有关（P<0.05）。随访5年,87例患者总生存率78.16%（68/87）,COL1A1高表达者生存期较低表达者更短（P<0.05）,KPNA2高表达者较低表达者生存期更短（P<0.05）。COX回归分析显示,临床分期Ⅲ期、有淋巴结转移、COL1A1高表达、KPNA2高表达是三阴性乳腺癌患者预后生存的影响因素（P<0.05）。结论 COL1A1、KPNA2在TNBC患者癌组织中表达均增加,两者高表达与患者组织学分级、脉管侵犯、淋巴结转移情况均有关,且影响患者远期预后     

WDR5在肺腺癌中的表达和预后提示作用研究

目的分析WD重复域蛋白5（WDR5）表达与肺腺癌发生、发展的关系,探讨WDR5在评估远期生存中的价值。方法选取2010年1月1日至2014年2月8日于杭州市第三人民医院胸外科就诊且术后病理检查结果证实为肺腺癌的患者93例,采用免疫组织化学染色法分别检测WDR5在癌和癌旁正常组织中的表达水平。采用Cox比例风险回归模型对患者的生存情况作单因素、多因素分析,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用log-rank检验比较WDR5高表达与低表达患者1、3及5年生存率。结果53例（57.0%）患者肺腺癌组织中WDR5相对高表达,40例（43.0%）WDR5相对低表达;在其对应的癌旁正常组织中,30例（32.3%）WDR5相对高表达,63例（67.7%）WDR5相对低表达,与癌组织比较差异有统计学意义（P＜0.01）。WDR5的表达与患者的性别、年龄、肿瘤直径、T分期、病理分级均无关（均P＞0.05）;但与N分期和肿瘤分期均相关（均P＜0.01）。单因素分析显示,WDR5表达、N分期和肿瘤分期均是肺腺癌患者预后的影响因素（均P＜0.01）;进一步多因素分析显示,WDR5表达和N分期是肺腺癌患者预后的独立影响因素（均P＜0.01）。WDR5高表达患者的1、3及5年生存率分别为86.8%、41.5%和9.4%;WDR5低表达患者的1、3及5年生存率分别为95.0%、80.0%和55.0%,两者比较差异有统计学意义（P＜0.01）。结论WDR5在肺腺癌组织中的表达水平高于癌旁正常肺组织。WDR5高表达与N分期和肿瘤分期相关,且WDR5高表达患者总生存期更短,是肺腺癌预后的独立影响因素。     

食管鳞状细胞癌中紧密连接蛋白occludin、ZO-1的表达及其临床意义

目的探讨紧密连接蛋白occludin及ZO-1在食管鳞状细胞癌及手术切缘正常食管黏膜组织中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片和免疫组化法检测49例食管鳞状细胞癌患者的癌组织及手术切缘正常食管黏膜组织(距肿瘤组织>5 cm)中occludin和ZO-1的表达,分析食管鳞状细胞癌癌组织中occludin、ZO-1表达与肿瘤的增殖、侵袭和转移之间的关系。结果食管鳞状细胞癌组织中occludin及ZO-1的阳性表达明显低于手术切缘正常食管粘膜组织(P<0.01),且癌组织中occludin、ZO-1的表达与其分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05)。结论食管鳞状细胞癌的occludin和ZO-1的表达下调或缺失与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移有关,在食管癌的进展中起重要作用。     

PTP1B在结肠癌组织中的表达及临床意义的相关研究

目的 研究蛋白酪氨酸磷酸酶1B（protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B）蛋白在结肠癌组织中的表达及临床意义.方法 通过免疫组织化学染色法检测50例结肠腺癌组织、30例癌旁正常结肠腺组织中PTP1B蛋白的表达变化,分析其表达与结肠癌临床病理特征和预后之间的关系.结果 结肠癌组织中PTP1B蛋白的表达明显高于远癌结肠腺组织（P＜0.05）;同时,PTP1B蛋白在结肠癌组织中的表达与组织类型,Dukes分期,癌转移和肿瘤直径大小有明显相关性（P＜0.05）,与年龄、性别无相关性（P＞0.05）;Kaplan-Meier生存分析显示PTP1B蛋白高表达患者的预后明显差于低表达患者,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 PTP1B蛋白的高表达可以反映结肠癌的恶性生物学行为,在结肠癌的发生过程中起着重要作用,其可能为结肠癌的诊疗及预后评估提供一个有效的方法.     

Bcl-2和Bag-1在结肠癌组织中的表达及其意义

目的 探讨Bcl-2、Bag-1在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌临床病理学特征及预后的关系.方法 利用免疫组织化学染色方法检测55例结肠癌组织、33例癌旁结肠组织及15例正常结肠组织中Bcl-2、Bag-1蛋白的表达情况,结合临床病理特征及预后对其进行分析.结果 Bcl-2、Bag-1在结肠癌组织中的表达阳性率(80.2%和72.7%)均显著高于癌旁结肠组织(60.6%和48.5%)及正常结肠组织(均为0),差异有统计学意义(P＜0.05).Bcl-2及Bag-1的表达与肿瘤有无淋巴结转移、肿瘤分化程度及临床分期有关(P＜0.05);而与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤浸润深度、癌胚抗原(CEA)等无关.Bcl-2、Bag-1的表达呈高度一致性(P＜0.01).Bcl-2阳性结肠癌患者及Bag-1阳性结肠癌患者的5年、10年累积生存率均显著低于阴性者(P＜0.05).结论 Bcl-2、Bag-1与结肠癌的生物学行为密切相关,并可作为结肠癌患者预后的预测因素.     

结肠癌PIG11表达与临床病理的关系

目的：探讨PIG11蛋白在结肠癌组织中表达的临床病理学意义。方法：采用免疫组化Envision法，对100例结肠癌标本组织芯片中PIG11蛋白的表达情况进行检测，并分析其与临床病理参数及患者生存期的相关性。结果：结肠癌组织中PIG11蛋白表达阳性率为25%，癌旁组织阳性率为65%，两者差异有统计学意义（P＜0.05）。PIG11蛋白表达与肿瘤组织分化程度、浸润深度及TNM临床分期相关（P＜0.05）。Kaplan-Meier生存曲线分析提示PIG11蛋白低表达患者的5年生存率低于高表达患者（P＜0.001）。结论：PIG11蛋白的表达与结肠癌的发生、发展可能有关，并可提示结肠癌患者的预后。     

结肠癌组织AKIP1、PKA及P65的表达及意义

目的 探讨结肠癌组织AKIP1、PKA及P65的蛋白表达情况及其临床意义.方法 选择手术切除的结肠癌组织标本及同源癌旁组织标本各37例,采用免疫组化SP法对组织进行染色,观察结肠癌组织及癌旁组织中AKIP1、PKA及P65的表达差异及其相关性,同时观察结肠癌组织AKIP1、PKA及P65表达与结肠癌组织恶性程度及病例分期的相关性.结果 结肠癌组织AKIP1、PKA表达强度低于癌旁组织,差异有统计学意义（u=77.42,P＜ 0.05;u=38.09,P＜0.05）,结肠癌组织AKIP1、PKA阳性表达率（67.6％、75.7％）低于癌旁组织（94.3％、91.9％）,差异有统计学意义（x2=15.51,P＜0.05;x2=10.16,P＜0.05）;结肠癌组织P65表达强度高于癌旁组织（u=22.07,P＜0.05）,结肠癌组织P65阳性表达率（91.9％）高于癌旁组织（62.2％）（x2=27.07,P＜0.05）,结肠癌组织中AKIP1与PKA表达呈正相关（r=3.106,P＜0.05）,与P65表达呈负相关（r=-0.40226,P=0.05）.不同TNM分期的结肠癌组织中AKIP1、PKA及P65的表达,两两相比,差异有统计学意义（u=11.92,P＜0.05;u=8.17,P＜0.05;u=18.02,P＜0.05）;不同分化程度的结肠癌组织中KIP1、PKA及P65的表达,两两相比,差异有统计学意义（u=22.09,P＜ 0.05;u=12.09,P＜0.05;u=27.94,P＜0.05）.结论 结肠癌组织中存在AKIP1、PKA及P65过度表达现象,并且同结肠癌的生物学行为相关,其可能通过相互调控参与结肠癌的发生发展.     

肺腺癌Ubiquilin1蛋白的表达与临床病理关系的研究

目的探讨肺腺癌组织中Ubiquilin1蛋白的表达与临床病理特征的关系。方法选取90例肺腺癌患者,应用免疫组化组织芯片,评估癌组织中Ubiquilin1蛋白高表达与临床病理关系,评估癌及癌旁组织中的表达及与远期生存的关系。结果肺腺癌组织中Ubiquilin1蛋白的表达高于配对的癌旁组织,差异有统计学意义（Z=-5.831,P＜0.01）。肺腺癌高表达与配对癌旁高表达相关（字2=17.222,P＜0.01）,与5年生存率相关（字2=25.989,P＜0.01）。TNM分期、性别、肺癌中高表达、癌旁中高表达是回归模型筛选出来的有统计学意义的预后因子（P＜0.05）,Kaplan-Meier生存率曲线提示高表达与不良预后有关（P＜0.01）。结论Ubiquilin1蛋白可以作为预测肺腺癌临床及预后的指标,对筛选肺腺癌手术后高危患者有重要的临床意义。     

SIRT1、Phospho-SIRT1在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨沉默信息调节因子同源类似物1(SIRT1)和磷酸化沉默信息调节因子同源类似物1(Phospho-SIRT1)在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法:选取行手术切除的结肠癌存档蜡块和癌旁正常组织(距病变部位>5cm处,且证实为无癌浸润)石蜡标本各60例。采用Western blot法检测结肠癌组织中SIRT1、Phospho-SIRT1水平,并分析结肠癌患者3年生存率影响因素。结果:SIRT1、Phospho-SIRT1在结肠癌组织中的阳性表达率均高于癌旁正常组织(P<0.05)。TNM分期Ⅰ～Ⅱ期的患者SIRT1、Phospho-SIRT1阳性表达率均低于Ⅲ～Ⅳ期患者(P<0.05);P53阳性患者SIRT1阳性表达率低于P53阴性患者,Ki67阳性患者Phospho-SIRT1阳性表达率高于Ki67阴性患者(P<0.05)。单因素分析显示,TNM分期I～II期的患者3年生存率高于Ⅲ～Ⅳ期患者(P<0.05),淋巴结有转移的患者3年生存率低于淋巴结无转移患者(P<0.05);SIRT1、Phospho-SIRT1阳性患者3年生存率均低于阴性患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示,TNMⅢ～Ⅳ分期、淋巴结有转移、SIRT1和Phospho-SIRT1阳性表达是影响结肠癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:SIRT1、Phospho-SIRT1在结肠癌组织中的表达均高于癌旁正常组织;SIRT1、Phospho-SIRT1水平与患者的TNM分期和淋巴结转移有关;其中SIRT1水平与患者P53蛋白表达相关,Phospho-SIRT1水平与患者的Ki67蛋白表达相关;TNM分期、淋巴结转移、SIRT1、Phospho-SIRT1四个因素是影响结肠癌患者预后生存的关键。     

肺癌患者CYP1A1和GSTM1基因多态性检测

目的:探讨CYP1A1与GSTM1基因多态与支气管肺癌癌变的关系.方法:采用回顾性"病例-对照"方法和PCR-RFLP技术,对98例肺癌患者和136名体检健康者(对照组)进行CYP1A1与GSTM1基因多态性检测.结果:对照组和肺癌组CYP1A1 m1、GSTM1缺陷型等位基因频率分别为28%和43%、44%和61%,2组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).CYP1A1(w1/m1、CYP1A1(m1/m1、GSTM1(缺陷型)基因型患肺癌的危险度分别升高3.18倍、2.72倍和2.16倍(P均＜0.05).GSTM1(缺陷型)和CYP1A1(w1/m1或CYP1A1(m1/m1基因型携带者患肺癌的危险度为5.62倍(P＜0.01.吸烟使GSTM1缺陷型携带者和CYP1A1 m1携带者肺癌的患病危险度较单一基因作用危险度显著增加(P＜0.05).结论:CYP1A1 m1和GSTM1缺陷型基因均是肺癌的危险因素,2者存在交互作用,且均与吸烟有协同作用.     

Ksp-Gpx1-k1k1载体的构建及鉴定

目的 构建含有肾组织特异性启动子(Ksp-cadherin)的Gpx1与k1k1载体质粒,为下一步构建转基因动物、研究在动物模型体内表达和基因治疗提供基础.方法 以KLK1 cDNA、GPX1 cDNA、Ksp-cadherin BAC为模板,PCR扩增获得人源Gpx1、KLK1、Ksp-cadherin cDNA.PCR产物大小与预期结果一致,序列分析完全正确.选择多个相应酶切位点,分步将Ksp-cadherin、Gpx1、KLK1插入至pIRES-EGFP质粒中.构建pKSP-GPX1-IRES-KLK1重组质粒.应用酶切鉴定和序列分析方法验证所构建载体的正确性.结果 成功构建了含有Ksp-cadherin的GpX1与k1k1载体质粒.结论 该重组载体的构建为下一步构建转基因动物,研究其在哺乳动物肾组织内过表达及在移植肾缺血冉灌注损伤的基因治疗中的作用奠定了基础.     

谷胱苷肽转硫酶GSTM1、GSTT1和GSTP1基因多态性与江苏人群直肠癌易感性的关系

目的:探讨谷胱苷肽转硫酶M1、T1、P1(GSTM1、GSTT1和GSTP1)基因多态性和吸烟饮酒习惯与直肠癌易感性的关系.方法:以直肠癌患者210例,人群对照439例为研究对象,调查研究对象的生活习惯,以多重PCR技术检测GSTM1和GSTT1基因缺失,PCR-RFLP技术检测GSTP1基因单核苷酸多态(第105密码子A→G).结果:GSTM1和GSTT1基因缺失频率在病例组和对照组差异无显著性;GSTP1 A/A、A/G和G/G基因型频率分布在病例组和对照组差异无显著性;与GSTP1 A/A基因型携带者相比,G/G基因型者发生直肠癌的危险性无显著升高,调整OR值为1.11(95%CI:0.77～1.60).结论:GSTM1、GSTT1和GSTP1基因多态性与直肠癌易感性无关.     

结直肠癌组织中Tiam1、Fascin-1及HSPB1的表达及意义

目的探讨结直肠癌组织中Tiam1,Fascin-1及HSPB1的表达及意义。方法制作含100例结直肠癌组织的组织芯片,应用免疫组化SP法检测结直肠癌组织中Tiam1,Fascin-1及HSPB1的表达。结果组织芯片免疫组化染色后,形态可观测率为96%,并且背景清晰,对比鲜明。Tiam1表达阳性率为74%,Fascin-1表达阳性率为51%,HSPB1表达阳性率为68%,显著高于非肿瘤组织。Tiam1,Fascin-1及HSPB1表达与结直肠癌转移显著相关,伴发转移的结直肠癌组织Tiam1,Fascin-1及HSPB1阳性表达明显高于无转移者。通过相关性统计学分析,发现Tiam1与Fascin-1表达呈正相关(r=0.678,P<0.01),Tiam1与HSPB1表达呈正相关(r=0.650,P<0.01)。结论Tiam1,Fascin-1及HSPB1均与结直肠癌转移有关,Fascin-1和HSPB1的高表达可能与Tiam1的调控有关。     

1型糖尿病与HLA-DRB1?DQB1基因相关性研究

目的: 研究中国江苏地区汉族人群1型糖尿病(T1DM)与人类白细胞抗原(HLA)-DRB1?DQB1基因及单倍型频率的相关性?方法:选取江苏地区汉族人群T1DM患者(112例)与对照组(69例),运用聚合酶链反应-寡核苷酸探针序列特异性引物(PCR-SSO)技术,进行HLA-DRB1?DQB1基因分型,两组间等位基因频率比较采用χ2检验,通过Arlequin软件进行单倍型频率的分析?结果:112名T1DM患者中检测到DRB1位点等位基因17个(对照组19个),DQB1位点等位基因7个(对照组7个)?与对照组相比,T1DM组DRB1*0901?DRB1*0405和DRB1*0301频率明显增高,DQB1位点的DQB1*0201与DQB1*0303频率明显高于对照组;与对照组相比,T1DM患者明显升高的单倍型频率为:DRB1*0901-DQB1*0303?DRB1*0301-DQB1*0201?DRB1*0405-DQB1*0401和DRB1*0405-DQB1*0302?结论:中国江苏地区汉族T1DM患者HLA基因DR位点的DRB1*0901?DRB1*0405?DRB1*0301及DQ位点的DQB1*0201?DQB1*0303对T1DM易感?发现了4个新的具有易感作用的单倍型:DRB1*0901-DQB1*0303?DRB1*0301-DQB1*0201?DRB1*0405-DQB1*0401和DRB1*0405 -DQB1*0302?     

Sp1和Egr-1对LCRG1基因启动子转录活性的调节研究

目的:目前LCRG1基因转录调控机制不清,现拟研究Sp1和Egr-1对人LCRG1基因启动子的转录调节. 方法:利用MatInspector软件分析LCRG1基因启动子区域内潜在的转录因子结合位点,Sp1、wtEgr-1、mtEgr-1真核表达质粒与LCRG1启动子重组质粒的共转染实验,分析其对LCRG1启动子活性的影响. 结果:生物信息学提示LCRG1基因启动子区域存在Sp1和Egr-1等位点,外源性突变型转录因子Egr-1能上调LCRG1基因启动子的活性.结论:突变型转录因子Egr-1可能参与该基因的表达调控.     

CYP1A1与GSTM1基因的多态性与西安地区食管癌的关系

目的 探讨细胞色素p450代谢酶1A1（CYP1A1）、谷胱苷肽转硫酶μ（GSTM1）基因多态性与西安地区食管癌的关系。方法 应用分子流行病学研究方法，调查分析了西安地区108例食管癌病例和101例对照CYP1A1与GSTM1基因多态性。结果 CYP1A1 Ile/Ile,Ile/Val,Val/Val基因型在病例和对照中分别为22.6%，43.4%，34.0%和30.7%，47.5%，21.8%；其中Val/Val基因型在两间差异显（P＝0.049）；GSTM1存在型、缺失型在病例，对照中分别为40.7%，59.3%和56.4%，43.6%差异显（P＝0.023）。结论 CYP1A1 Val/Val基因基因型（突变纯合子）与GSTM1的缺失与西安地区食管癌的遗传易感性有关。     

HLA-DQ A1, -DQB1 and -DRB1 gene polymorphism--in Malay type 1 diabetes mellitus patients and their use for risk prediction

HLA-DQA1, -DQB1, and -DRB1 gene polymorphism were analyzed to study type 1 DM susceptibility in Malay patients from Southeast Asia (Malaysia and Singapore). Patients showed significant increases in the occurrence of DQA1*0501 (50.7% vs. 20.4%; RR = 3.97; Pc < 0.01), DQB1*0201 (48% vs. 19.1%; RR = 3.86; Pc < 0.05), and DRB1*0301 (38.7 vs. 6.8%; RR = 8.36; 95% Pc < 0.05). Conversely, significant decreases were noted in the occurrence of DQA1*0601 (14.7% vs. 35.2%; RR = 0.33; Pc = 0.008) and DQB1*0601 (4% vs. 23.5%; RR = 0.16; Pc < 0.05) in type 1 DM patients. Using a logistic regression model, we derived a risk prediction model for type 1 DM in our indigenous Malay population based on the identified HLA genotypes. The RR for type 1 DM increases by a factor of 5.68 for every unit increase in the number of DRB1*0301 allele (P < 0.001), and decreases by a factor of 0.18 per unit increase in the number of DQB1*0601 allele (P < 0.001). After adjusting for these two HLA genotypes, DQA1*0501, DQB1*0201 and DQA1*0601 were not statistically significant as risk predictors. The lower incidence of type 1 DM in the Malay population may be contributed by the genotypic combinations of DR and DQ genes as well as the linkage disequilibria between susceptible and protective alleles.