新疆特高发肿瘤资源库的建立与管理

目的建立规范、标准的新疆特高发肿瘤资源库,为医学研究提供珍贵的资源。方法 2010年12月建立新疆特高发肿瘤资源库,在进行质量控制和规范化管理的同时收集手术切除后的组织样本,包括癌组织、癌旁组织(距离癌组织2 cm)和远端正常组织(距离肿瘤组织>5 cm),以及肿瘤患者的血细胞和血清/血浆标本,置于-80℃低温冰箱中冷冻保存;同时建立一套肿瘤资源库管理系统,储存患者一般资料和对应标本信息。结果共收集各类肿瘤组织标本4 008例,血液标本4 506例,与标本相对应的临床信息完整度达100%。结论新疆特高发肿瘤资源库具有一定规模,并已形成一整套肿瘤资源的建设经验和管理方法。     

泌尿系统肿瘤组织标本库的创建与分析

目的 依托哈尔滨医科大学附属第四医院泌尿外科的肿瘤标本资源,建立一个规范化、信息化的肿瘤组织标本库,为泌尿系肿瘤的基础研究提供高质量的生物样本资源。方法 收集笔者医院泌尿外科2013年10月~2016年1月行手术切除泌尿系统肿瘤患者的肿瘤组织、血液样本及尿液样本。所获得的手术标本立即放置在加有RNA保存液的冻存管中,然后储存在-80℃冰箱冻存。随机抽取6例-80℃冻存的肿瘤组织进行HE染色以及RNA和蛋白质的DNA提取及分析。结果 2013年10月~2016年1月,泌尿系肿瘤标本库共存储189例不同组织学类型的前列腺、膀胱、肾脏、阴茎和睾丸肿瘤的标本,200例尿液和240例血浆样本。抽样检查结果显示样本分子生物学指标稳定。结论 肿瘤组织样本库可提供高质量的生物样本资源及患者完整的临床信息,在一定程度上,有助于转化医学的发展,改进肿瘤诊断及治疗方法。     

肿瘤组织库的建立与管理

目的探讨各种肿瘤组织标本的采集和保存以及肿瘤组织库的建立和信息化管理方法。方法收集手术切除的肿瘤组织、癌旁组织、远端正常组织及患者的血清、血浆以及从肿瘤组织中提取的核酸,分别保存组织块、核酸、血清、血浆、淋巴细胞、干细胞等,液氮或-80％冷冻保存;同时建立一套信息系统用于肿瘤组织库的管理,包括标本存放位置、标本使用、实验结果、综合查询、标本废除管理等。结果收集标本55例,其中良性肿瘤2例,恶性肿瘤53例,共400份标本,一年来肿瘤组织库运转良好。结论建立肿瘤组织库可以对标本进行质量控制及信息化管理,保存少见、罕见标本,达到资源保存和共享的目的。     

肿瘤生物样本库的标准化建立与管理

肿瘤是中国乃至全球最常见、病死率最高的疾病之一。肿瘤组织是人类对肿瘤发生、发展和转移机制进行探索的最直接、最具体的研究对象,为了能够系统的收集、管理、并且有效利用这些肿瘤组织,建立肿瘤组织样本库（tumor tissue bank , T TB）［1-2］。肿瘤组织样本库的建立能够系统、规范、科学收集、保存手术切除的肿瘤组织、采集肿瘤患者相关体液及汇总相关病理类型、临床分期和治疗效果等方面信息的平台［3-4］。本院肿瘤组织样本库自2012年成立以来,在临床科室、麻醉科、手术室的大力配合下已经初具规模,初步形成组织样本的标准化收集、储存和管理的体系,已经收集各类手术中产生的组织样本包括肿瘤组织、癌旁组织、远端正常组织、正常组织和各类体液样本。随着肿瘤组织样本库的发展,也出现了许多问题,作者就现在组织样本库目前的问题进行探讨,以期有助于样本库标准化、规范化的发展。     

北京大学临床肿瘤学院标本库的建设

研究恶性肿瘤的重要材料就是肿瘤标本,但长期以来国内始终没有建立起切实可行、规范的科研型标本库,未形成规范的标本保存方法.北京大学临床肿瘤学院标本库始建于1996年,其职责是采集、保存和利用人类常见肿瘤的组织和血液标本,并对其进行科学的管理和质量控制.目的是充分利用医院现有的肿瘤标本资源,为人类疾病的基础和临床研究提供材料.标本库于2000年底改建,在外科、手术室、病理科的配合下,现已初步形成标准化、规范化的样本采集、储存和管理体系.目前库存常见肿瘤标本3 000多份,近5年增加了血清标本的保存项目,现已库存常见肿瘤血清标本2 000份.     

波形蛋白在原发性肝癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨原发性肝癌(HCC)组织与癌旁组织中波形蛋白的表达及其临床意义.方法 收集该院2015年1月至2016年3月30例手术切除的肝癌组织,离癌2~5 cm(简称癌旁近临)和离癌5 cm以外(简称癌旁近远)组织及患者临床资料.运用实时荧光定量PCR和免疫组织化学检测组织中波形蛋白表达,并用Image J软件及病理评分等对其表达量进行分析.结果癌组织、癌旁组织、正常肝组织标本里波形蛋白的mRNA分别为8.97±4.19、2.14±1.12和1.00±0.00,差异有统计学意义(P<0.05).癌组织、癌旁近临和癌旁近远组织标本里波形蛋白表达量分别为75.22±16.87、41.72±6.19和36.26±4.71,差异有统计学意义(P<0.05).波形蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和肿瘤范围无关(P>0.05),与TNM分期、病理分级、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05).结论 检测HCC患者的波形蛋白表达有助于 HCC诊断与预后.     

MMP12mRNA在人肺腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的检测MMP12mRNA在人肺腺癌组织中的表达,探讨其与临床病理特征的关系。方法收集肺腺癌患者肿瘤组织样本39例,每例患者另取癌旁组织作为对照,应用real-timePCR技术,分别以GAPDH、RPLP0、PUM1、HPRT1和TBP为内参基因分析肺腺癌肿瘤组织及癌旁组织MMP12mRNA表达水平。扩大样本至103例,以PUM1为内参基因分析肺腺癌肿瘤组织及癌旁组织MMP12mRNA表达水平及MMP12mRNA表达水平与患者临床病理特征的关系。结果肺腺癌肿瘤组织相对于癌旁组织MMP12mRNA表达水平上调者所占比例较表达水平无改变或表达水平下调者增高,且以PUM1为内参基因检测肺腺癌肿瘤组织MMP12mRNA表达水平高于癌旁组织（P＜0.05）,且MMP12mRNA在男性患者（男性vs女性,2.07±3.25vs0.53±2.90,P＜0.05）、病理亚型为实性/微乳头状生长为主浸润性腺癌（实性/微乳头状生长为主vs附壁样/乳头状/腺泡状生长为主,3.30±2.95vs0.75±3.20,P＜0.05）中表达水平上调。结论MMP12mRNA在肺腺癌肿瘤组织中表达水平上调,可能参与肺腺癌发生、发展,且性别可能作为肺腺癌肿瘤组织MMP12mRNA表达水平上调的危险因素。     

新疆肿瘤资源库样本质量控制体系建立

目的：建立新疆肿瘤样本资源库质量控制体系。方法肿瘤标本收集、处理、保存按照《生物样本库最佳实践2012》第3版执行。标本每年进行1次质量检测,从标本库中按照1％比例随机抽取35例标本进行病理质检,确认取材部位与病理诊断符合情况;按照2％比例随机取样,2 a 检测标本120例,进行 RNA、DNA 和蛋白质分析。结果受检样本肿瘤部分均＞86％,坏死组织面积均＜10％,与术后病理检查结果复合率达97．1％。样本蛋白质和 DNA 无明显降解;RNA 电泳结果显示28 s 条带亮度为18 s 的1．5～2．0倍,标本 RNA 质控合格率为88．4％。结论新疆肿瘤标本资源库中的标本质量良好,可满足研究要求。     

核仁组织区嗜银染色在甲状腺癌中的应用研究

目的:探讨核仁组织区嗜银染色(AgNOR)技术在甲状腺癌病理诊断及预后中的应用。方法:采用银染技术对50例石蜡包埋甲状腺组织块,其中甲状腺癌40例,结节性甲状腺肿10例,结甲周围正常组织作为对照,观察Ag-NOR颗粒的数量、形态及分布。结果:在甲状腺癌中,在甲状腺正常组织中AgNOR均数为(1.14±0.41),结节性甲状腺肿(2.27±0.32),乳头状癌(3.15±1.03),滤泡状癌(4.09±1.17),髓样癌(4.51±1.31),未分化癌(4.83±1.29),甲状腺癌与结节性甲状腺肿,不同病理类型的甲状腺癌之间AgNOR计数均有统计学差异。结论:AgNOR定量分析可作为判定甲状腺肿瘤良、恶性及分化程度的指标,估计预后,指导临床治疗。     

肿瘤组织标本库的创建及意义

目的:探讨肿瘤组织标本库的创建和管理方法。方法:通过文献综述及实地调查深入了解国内知名大型标本库的创建过程及其管理经验。结果:肿瘤组织标本库通过有效地收集和科学地保存人类肿瘤组织,避免研究资源浪费的同时,也为肿瘤研究提供了便利和丰富的资源。结论:标本库的建立在促进肿瘤研究进程中发挥着举足轻重的作用。     

肝细胞癌上皮型钙粘素基因甲基化及其临床特征研究

目的：探讨肝细胞癌上皮型钙粘素基因甲基化与肝细胞癌之间的关系。方法收集肝细胞癌患者53例,取手术切除肿瘤标本53分以及癌旁组织标本53份,并取30份正常人的肝组织标本作为对照,应用甲基化特异性PCR技术检测其肿瘤组织、癌旁非肿瘤组织或者正常组织中的上皮型钙粘素基因甲基化情况。结果肿瘤组织甲基化率的甲基化率为45.3%,显著高于癌旁组织的11.3%（P〈0.05）;正常肝组织的甲基化率为6.7%,与肿瘤组织甲基化率比较差异显著（P〈0.05）,而与癌旁组织比较无显著差异;肿瘤Ⅲ-Ⅳ期、肿瘤组织包膜不完整、HBV阳性均与甲基化密切相关（P〈0.05）。结论上皮型钙粘素基因甲基化可能参与了肝细胞癌性转变过程。     

建立鼻咽癌资源库的经验与挑战

目的 针对鼻咽癌单病种组织和血标本的收集、保存与信息化管理,探讨建立肿瘤标本库的经验与挑战.方法 系统性地收集鼻咽癌的组织标本,用于病理组织学研究、提取DNA和RNA等各种不同的用途.同时收集鼻咽癌患者放化疗前后全血标本,进行血清、血浆以及白细胞的分离与保存,同时建立信息系统对标本的临床信息与随访资料进行管理.结果 在1年半时间内,收集了鼻咽癌组织标本1 070多份,匹配血标本近100多份,都有完善的临床信息与随访资料.面临的挑战包括肿瘤资源库持续性发展所需的持续性投入以及如何充分应用平均体积很小的鼻咽癌活检组织.结论 虽然鼻咽癌的活检组织体积很小,但是建立鼻咽癌单病种组织与血标本库是可行的.通过对标本进行质量控制与信息化管理,将有利于开展针对鼻咽癌的各种科学研究.     

新疆特高发肿瘤资源库平台建设

"新疆特高发肿瘤资源库"是在新疆维吾尔自治区建立针对具有地方特色的哈萨克族食管癌、维吾尔族宫颈癌等特高发肿瘤标本库,通过采集、保存和利用人类常见肿瘤的组织、血液和体液标本,并对其进行科学的管理和质量控制,充分利用新疆医科大学附属肿瘤医院现有的肿瘤标本资源,为基础和临床研究提供材料。新疆特高发肿瘤资源库于2010年12月启动建设,王喜艳院长任负责人,主持新疆特高发肿瘤资源库建设专项包括自治区平台建设项目2项、乌鲁木齐市科学技术计划项目     

膀胱移行细胞癌中LYVE-1标记的淋巴管密度及其临床意义

目的 应用特异的淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)检测膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中淋巴管密度（LVD）,探讨癌组织中LYVE-1标记的LVD及其临床意义。方法 收集45例BTCC组织和10例正常膀胱黏膜组织标本,应用免疫组化方法检测LYVE-1标记的淋巴管数量,计算其淋巴管密度值,分析LVD与临床病理参量之间的关系。结果 BTCC组织内LVD显著高于正常膀胱黏膜组织(4.81±0.93 vs 1.56±0.37, P < 0.0001);浸润超过肌层组的LVD显著高于浸润未超过肌层组(6.22 ±0.32 vs 4.45 ±0.64, P < 0.0001);淋巴结阳性组的LVD显著高于淋巴结阴性组(6.20 ±0.32 vs 4.46±0.66, P < 0.0001) ,三者均有统计学意义。结论 在膀胱移行细胞癌组织中,淋巴管的生成与肿瘤的发生发展和侵袭转移密切相关。随着我们深入研究膀胱移行细胞癌淋巴管生成机制及LYVE-1的功能、结构,必将进一步明确膀胱移行细胞癌的恶变转移机制。     

肿瘤资源库的建立和管理

[目的]建立肿瘤资源库为临床和科研部门收集、保存和管理肿瘤资源,为促进医疗和科研的发展提供服务.[方法]将来自肿瘤患者的血清、血浆和血细胞分离后冻存.收集离体后的组织标本,分别用于RNA、DNA和蛋白的保存及石蜡包埋切片存档.所有标本及其相关的临床信息均录入数据库,供研究者调用.[结果]已保存肿瘤病人的血标本18 000多例,组织标本3 400多例和健康人血标本7 400多例.标本已有115人次使用,使用者的反馈及标本库的质检结果表明所收集的标本质量符合分子生物学实验的要求.[结论]中山大学肿瘤防治中心建立了规范的、具一定规模的肿瘤资源库,为更好地利用肿瘤标本资源提供了服务平台.     

浅谈凝血试验影响因素

目的了解门诊与住院病人之间凝血试验结果的差距,探讨凝血试验的影响因素,为临床诊断治疗疾病提供可靠参考信息.方法对本室近一年多收到的凝血样本(剔除特别异常结果)7 250份,门诊凝血试验样本3 569份,住院病人样本3 681份;门诊和住院凝血四项结果进行对比统计分析.结果门诊病人PT12.9±3.8秒,APTT38±12.3秒,Fib3.2±1.5g/L,TT17.3±2.5秒;住院病人PT13.9±4.7秒,APTT42±15.7秒,Fib2.9±1.9g/L,TT18.2±3.1秒.经u检验四项试验均P＜0.001,门诊与住院之间结果具有显著性差异.结论住院病人凝血试验结果明显高于门诊病人,最明显的原因是住院病人抽血后样本放置时间过长,其次是采样不顺利与样品收集顺序等,临床医生对检验结果应区别对待.     

浅表性和浸润性膀胱癌微环境中树突状细胞的变化及意义

 【目的】研究树突状细胞（Dc）在不同类型膀胱移行细胞癌及癌旁组织中的变化以及与肿瘤病理分级的关系，探讨恶性肿瘤免疫逃避的可能机制。【方法】将133例膀胱移行细胞癌病理标本按WHO标准进行病理分级，按1987年国际抗癌协会（UICC）标准进行临床分型（浅表和浸润），应用免疫组化法检测病理标本中Dc。【结果】133例标本中肿瘤Dc数目明显少于瘤旁组织（G1 16．85±1．1，G2 9．45±2．17，G3 2．99±1．19 vs G1 21．8±4．78，G2 21．71±4．72，G320．00±5．49，P〈0．01）并随肿瘤病理分级的增加而减少，相同病理分级浅表性膀胱癌实质内Dc数目（G2 10．79±1．69；G3 4．79±0．67）明显多于浸润性膀胱癌实质内Dc数目（G27．52±1．0；G3 2．46±0．66），其差别具有统计学意义（P〈0．01）；肿瘤旁组织Dc数目在不同肿瘤病理分级、临床分型的标本中差别无统计学意义（P〉0．05）。【结论】Dc仅在机体有炎症或肿瘤时作为抗原递呈者出现；肿瘤内Dc数目的减少是恶性肿瘤逃避机体的免疫监视和排斥的一个可能机制；浸润性膀胱癌容易转移可能与瘤内Dc数目及活性过度下调和Dc过早凋亡有关。     

锌指蛋白703在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的 研究锌指蛋白703(ZNF703)在甲状腺乳头状癌中的表达(包括阳性率及相对表达量)及阳性率与临床特征的关系.方法 应用免疫组织化学法(pv9000法)检测组织芯片(包括36例甲状腺乳头状癌及14例癌旁正常组织)中ZNF703的阳性表达率,并分析癌组织中的阳性表达率与芯片包含的相关临床资料(年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期)之间的关系.另收集20例临床新鲜甲状腺乳头状癌及匹配癌旁组织样本,应用Western blot及RT-PCR技术检测ZNF703在20对组织样本的蛋白和mRNA相对表达量.结果 免疫组化提示ZNF703在甲状腺乳头状癌的阳性表达率为66.7%,较癌旁组织的21.4%明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);癌组织阳性表达率与年龄、性别无关,与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05).Western blot及RT-PCR提示ZNF703在20例甲状腺乳头状癌组织的蛋白相对表达量[(0.893±0.113)vs(0.510±0.072)]及mRNA相对表达量[(6.399±2.096)vs(1.285±0.354)]均高于匹配癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 ZNF703在甲状腺乳头状癌中的表达高于癌旁组织,并且在癌组织中ZNF703阳性率高低与患者临床分期、淋巴结转移及肿瘤大小有关,可见ZNF703在甲状腺乳头状癌的发生及进展中可能发挥促进作用.     

胃癌微血管密度变化及其表达的临床病理意义

目的 :探讨微血管密度 (MVD)在胃癌发展中的变化及血管第八因子相关抗原抗体 (F- )的表达水平的临床病理意义。方法 :用 F- 相关抗原抗体免疫组织化学染色 S- P法检测 5 6例胃癌手术切除标本 ,观察癌组织、癌旁及正常组织中微血管密度 ,分析其与胃癌的发展关系。结果 :微血管密度在癌组织为 40 .2 4± 13.6 ,癌旁为 2 5 .2 0± 10 .12 ,正常组织为 14.2 1± 4.2 5 (P<0 .0 5 ) ,有转移者与无转移者的微血管密度分别为 40 .17± 8.91和 19.2 1±10 .0 4(P<0 .0 1)。结论 :微血管的生长与胃癌的发展有关 ,除淋巴结转移、浸润深度 ,肿瘤分期具有预后意义外 ,胃癌组织中微血管密度也具有判断预后的价值。     

食管癌组织DNA聚合酶活性的定量研究

测定了61例食管癌患者和20例正常人的血清DNA聚合酶(DNA-P)活性,取其中58例有手术大体标本患者的食管癌组织,癌旁组织和20例正常食管粘膜活检组织同时测定该酶活性。结果为:血清DNA-P阳性48例、阳性率为78.7%,对照组均为阴性。正常、癌旁、癌组织DNA-P活性依次升高,差异有显著性意义。在癌旁组织中,正常、轻度、中度到重度不典型增生,酶活性也依次升高(P<0.01,P<0.05)。高、中、低分化鳞癌三组酶活性分别为5.092±1.532,7.607±2.331,10.890±0.920,(P<0.05,P<0.01)。提示DNA-P是一个良好的肿瘤标志物。