利拉鲁肽对高脂饮食喂养大鼠的血脂谱的调节作用

目的研究利拉鲁肽对高脂饮食喂养SD大鼠脂肪代谢的影响。方法将48只雄性SD大鼠随机分为四组,分别予以普通饮食（ND）、高脂饮食（HFD）、高脂饮食加小剂量利拉鲁肽腹腔注射（HFD＋SGLP-1）、高脂饮食加大剂量利拉鲁肽腹腔注射（HFD＋LGLP-1）。喂养8周后检测大鼠血脂、血糖、体重,并检测大鼠肝脏ApoE蛋白表达水平的变化。结果与ND组比较,HFD组大鼠体重、血脂及血糖水平显著升高,肝脏ApoE蛋白水平显著降低（P〈0．05）。而与HFD组比较,HFD＋SGLP-1组和HFD＋LGLP-1组大鼠体重、血脂及血糖水平明显降低,ApoE蛋白水平明显增高（P〈0．05）,但以HFD＋LGLP-1组效果最为显著。结论利拉鲁肽能够显著抑制高脂饮食喂养导致的体重增加,降低血糖及血脂水平,并调节血脂谱。利拉鲁肽改变血脂谱的作用可能与其增加肝脏ApoE蛋白的表达有关。     

GLP-1对非酒精性脂肪肝大鼠肝氧化应激及TNF-α、TGF-β1的影响

目的观察胰高血糖素样肽-1（GLP-1）对非酒精性脂肪肝大鼠肝氧化应激及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、转换生长因子β1
（TGF-β1）的影响。方法雄性SD大鼠30只,随机分为3组,分别予普通饮食10只（ND组）、高脂饮食10只（HFD组）、高脂饮食
加利拉鲁肽腹腔注射10只（GLP-1组）。高脂饮食12周建立大鼠NAFLD模型,建模成功后GLP-1组予利拉鲁肽腹腔注射治疗4
周。16周末处死各组大鼠,生物化学法检测血清ALT、血清和肝组织甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）,分光光度计测定肝匀浆超
氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MAD）及FFAs,酶联免疫吸附法测定血清TGF-β1、肝匀浆TNF-α。结果与ND组比较,HFD组
大鼠体质量、肝指数、血清ALT、TG、TC、TGF-β1及肝匀浆TG、TC、MAD、FFAs 、TNF-α均明显升高（P>0.05）,肝匀浆SOD活力
明显降低（P<0.05）,肝脏脂肪变性程度和炎症活动度显著增高（P<0.05）;而与HFD组比较,GLP-1组可促进上述指标恢复（P<
0.05）。结论利拉鲁肽可以减轻高脂饮食诱导肝脂肪变,改善氧应激及脂质过氧化,降低TNF-α及TGF-β1的含量,有可能作为
治疗非酒精性脂肪肝病的有效药物。
     

Roux-en-Y胃旁路术对肥胖大鼠脂肪肝的影响及机制研究

目的探讨Roux-en-Y胃旁路术(Roux-en-Y gastric bypass surgery, RYGB)对肥胖大鼠脂肪肝的影响及可能的机制。方法 将30只8周龄雄性Wistar大鼠随机分为正常饮食组(ND组)、高脂饮食组(HFD组)及高脂饮食且接受RYGB组(HFD+RYGB组),每组10只,分别给予正常饮食、高脂饮食。饲养16周后,对HFD+RYGB组大鼠行RYGB,对ND组及HFD组行假手术。术后,ND组大鼠继续给予正常饮食,HFD组与HFD+RYGB组大鼠接受高脂饮食。术后第4周,处死大鼠,收集血样,采用ELISA法测定大鼠血清TG、TC、游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)浓度。观察大鼠肝脏外形,取肝脏组织,行H-E染色及油红O染色,显微镜下观察肝脏组织的病理学变化。采用real-time PCR检测肝组织糖类应答元件结合蛋白(ChREBP)、固醇调节原件结合蛋白-1c(SREBP-1c)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)mRNA表达水平。结果 HFD组大鼠体质量、肝脏湿重及内脏脂肪总量高于ND组(P＜0.05),HFD+RYGB组大鼠体质量、肝脏湿重及内脏脂肪总量低于HFD组(P＜0.05);HFD大鼠血清TG、TC、FFA水平高于ND组(P＜0.05),HFD+RYGB组大鼠血清TG、TC、FFA水平低于HFD组(P＜0.05);HFD组肝脏TG、TC含量高于ND组(P＜0.05),HFD+RYGB组大鼠肝脏TG、TC低于HDF组(P＜0.05);H-E及油红O染色结果显示,HFD+RYGB组干细胞脂质沉积、脂滴空泡减少;术后第4周,HFD+RYGB组大鼠肝脏中的ChREBP和SREBP-1c的mRNA的表达量较HFD组均显著降低(P＜0.05)。结论 RYGB能显著缓解肝脏脂肪沉积及血脂,其机制可能与抑制脂肪酸合成途径的关键分子ChREBP和SREBP-1c有关。     

利拉鲁肽对高脂喂养大鼠胰腺β细胞ATF4/CHOP通路的影响

目的 观察利拉鲁肽对高脂喂养大鼠胰腺GRP78、转录活化因子4(ATF4)、CCAAT区/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、TRB3蛋白和mRNA表达情况,探讨利拉鲁肽对高脂喂养大鼠胰腺ATF4/CHOP通路的影响.方法 将雄性Wistar大鼠44只分为对照组、高脂组、干预组1、干预组2,每组11只,对照组给予普通饮食,其余3组给予高脂饮食喂养8周后,干预组1给予利拉鲁肽100 μg·kg-1·d-1皮下注射;干预组2给予利拉鲁肽200 μg·kg-1·d-1皮下注射.药物干预2周后处死,每组取5只大鼠行清醒状态下高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验计算葡萄糖输注率(GIR),测定其余大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、血清游离脂肪酸(FFA)、总胆田醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),计算胰岛β细胞功能指数(HOMA-β),Western blot和Realtime-PCR技术检测胰腺GRP78、ATF4、CHOP和TRB3蛋白及mRNA的表达.结果 与对照组相比,高脂组FBG、FFA、TC、FINS、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C、GIR和HOMA-β明显下降(P＜0.05或P＜0.01),与高脂组相比,干预组2 HDL-C、GIR和HOMA-β升高(P＜0.05或P＜0.01),其余指标明显下降;与干预组1相比,干预组2的血FGB、FFA、TC下降,GIR和HOMA-β升高(P＜0.05).与对照组相比,高脂组GRP78、ATF4、CHOP和TRB3蛋白及mRNA的表达明显升高;与高脂组相比,干预组1与干预组2随利拉鲁肽浓度升高,GRP78、ATF4、CHOP和TRB3蛋白及mRNA表达逐渐下降.结论 利拉鲁肽可呈浓度依赖性改善高脂喂养大鼠胰岛素抵抗及保护胰岛β细胞,其作用机制可能涉及胰腺内质网ATF4/CHOP通路.     

利拉鲁肽1对非酒精性脂肪肝大鼠及细胞因子的影响

目的探讨利拉鲁肽（Lira）对非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠及细胞因子的影响。方法将雄性SD大鼠32 只随机分为3 组：正常对照组（NC）10 只、高脂组（HF）12 只、HF+Lira 组10 只。HF组、HF+Lira 组给予高脂饲料喂养16 周,HF+Lira 组高脂喂养12 周后,给予Lira 600μg/（kg·d）4 周。在16 周末处死大鼠。光学显微镜下观察肝脏病理变化;全自动生化仪检测血清三酰甘油（TG）,酶联免疫法测定空腹胰岛素（FINS）,并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;GPO-PAP法测定肝脏TG 含量;酶联免疫吸附法检测血清IL-18、IL-10 水平。多组间数据比较采用单因素方差分析,组间比较采用SNK- 检验。结果与NC 组相比,HF组的肝指数、肝脏TG、血清IL-18、TG、空腹血糖（FBG）、FINS 及HOMA-IR 均升高（p <0.05）;HF+Lira 组与HF 组相比,差异有统计学意义（p <0.05）,大鼠肝指数、肝脏TG、血清IL-18、TG、FBG、FINS 及HOMA-IR 均下降。HF 组血清IL-10下降（p <0.05）,HF+Lira 组较HF组血清IL-10 升高（p <0.05）。相关分析显示,血清IL-18 水平与肝脂肪变、肝小叶炎症及HOMA-IR 呈正相关（p <0.05）;IL-10 水平与肝脂肪变、肝小叶炎症及HOMA-IR呈负相关（p <0.05）。结论Lira 可能通过调节NAFLD 大鼠的炎症因子平衡,减轻胰岛素抵抗和炎症反应,减少肝脏脂质沉积,从而对NAFLD起到治疗作用。     

2型糖尿病大鼠骨骼肌氧化应激与胰岛素抵抗的关系

日的探讨骨骼肌组织氧化应激在2型糖尿病（T2DM）胰岛素抵抗发生发展过程中的作用,方法SD（Sprague-Dawley）雄性大鼠以高脂、高胆固醇灌胃加糖水喂养（HFD）,诱发胰岛素抵抗（Insulin Resistance,IR）,记录饮食、饮水、体重变化,3月后两次腹腔内注射链脲佐菌素（STZ,20mg／kg）诱发高血糖症,继续高脂、高胆固醇、高糖喂养2月,造成实验性2型糖尿病大鼠模型,检测空腹血清的血糖（FGLU）、糖化血清蛋白（FMN）、胰岛素（INS）、C肽（C-P）、超敏C反应蛋白（CRP）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TCHOL）水平和胰岛素抵抗指数（IR）及骨骼肌组织内的活性氧和抗氧化物酶活性．结果STZ＋HFD组大鼠的FGLU、FMN、INS、C-P、CRP、TG、TCHOL和IR明显高于HFD组（P〈0．05）,HFD组高于正常对照组（P〈0．05）,成模率可达到90％;骨骼肌组织中一氧化氮（NO）水平较正常对照组显著增加（P〈0.05）;还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）较正常对照组显著降低（P〈0.05）．总一氧化氮合成酶（TNOS）、诱导型一氧化氮合成酶（INOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽还原酶（GR）与对照组之间差异无统计学意义（P〈0．05）．结论高糖、高脂、高胆固醇饮食可能通过骨骼肌组织氧化损伤、干扰骨骼肌组织胰岛素信号转导通路而诱导了IR。     

用1H-MRS评价利拉鲁肽对肥胖小鼠脂质代谢影响的研究

目的 运用氢质子磁共振波谱(proton magnetic resonance spectroscopy,¹H-MRS)评价利拉鲁肽(liraglutide)对肥胖小鼠模型体内不同部位、不同性质脂肪代谢的影响。 方法 将32只6周龄清洁级C57BL6雄性小鼠随机分为4组,每组8只,其中一组给予正常饮食,另外3组给予高脂饮食以建立肥胖小鼠模型。8周后,与正常饮食组比较,高脂饮食组体质量平均增长超过30%,表明肥胖小鼠造模成功。将成功造模后的高脂饮食组随机分为利拉鲁肽(glucagon-like peptide -1,GLP-1)组、隔日禁食(altenative day fasting,ADF)组和高脂对照(high-fat diet,HFD)组, GLP-1组和HFD组分别继续给予高脂饮食,ADF组与正常对照(control)组给予普通饲料喂养。GLP-1组每日皮下注射利拉鲁肽 0.4mg/(kg·d),ADF组为每隔24h给予正常饲料,期间自由饮水。干预 16 周末,取活体小鼠,在9.4T MicroMR成像设备上通过氢质子磁共振波谱(proton magnetic resonance spectroscopy, ¹H-MRS)技术检测各组小鼠肩胛间区棕色脂肪、肝脏及腹股沟区白色脂肪的甘油三酯(triglyceride,TG)含量。结果干预前各组小鼠体质量比较差异无统计学意义,随喂养时间的延长,各组小鼠平均体质量均呈明显升高的趋势(P＜0.05)。干预16周末,GLP-1组小鼠平均体质量明显低于HFD(P=0.009),而高于正常对照组(P=0.011),差异均有统计学意义(P＜0.05)。4组小鼠肩胛部棕色脂肪TG平均含量比较未发现各组之间差异有统计学意义。肝脏TG平均含量比较发现,仅GLP-1和HFD之间差异有统计学意义(P=0.045)。腹股沟白脂肪TG平均含量比较发现,与GLP-1小鼠比较,正常对照组小鼠腹股沟白脂肪TG平均含量明显降低(P=0.002),HFD组小鼠腹股沟白脂肪TG平均含量明显升高(P=0.015)。结论 利拉鲁肽可显著降低肥胖小鼠体质量,改善肥胖小鼠脂质代谢,尤其在改善肝脏脂质代谢方面表现出格外优势,表明利拉鲁肽在通过减轻体质量所致整体代谢参数的改善的同时,还有不依赖于体改善影响脂质代谢的其他途径。     

Roux-en-Y胃旁路手术对肥胖大鼠脑组织炎症和脂质蓄积的影响

目的:探讨Roux-en-Y胃旁路(RYGB)手术对高脂饮食诱导的肥胖大鼠脑组织炎症和脂质蓄积的影响.方法:将30只4周龄雄性Wistar大鼠随机分为正常饮食组(ND组)、高脂饮食组(HFD组)及高脂饮食且接受RYGB手术组(HFD+RYGB组),各10只.ND组大鼠给予正常饮食,HFD组和HFD+RYGB组给予高脂饮食.饲养16周后,HFD + RYGB组大鼠行RYGB术,ND组和HFD组行假手术.术后ND组继续正常饮食,HFD组和HFD+RYGB组继续高脂饮食,术后第4周处死大鼠,收集血样,ELISA法测定大鼠血清三酰甘油 (TG)、胆固醇 (TC)和游离脂肪酸(FFA)水平;并取大鼠脑组织,ELISA法检测大鼠脑组织匀浆二酰基甘油(DAG)和FFA及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、IL-6水平,免疫组织化学法检测大鼠下丘脑离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达,电镜观察大鼠下丘脑神经元形态学变化.结果:HFD组大鼠血清TG、TC、FFA水平均高于ND组和HFD+RYGB组(P<0.05~P<0.01);HFD+RYGB组FFA水平明显高于ND组(P<0.01),2组TG、TC水平差异均无统计学意义(P>0.05).HFD组大鼠脑组织DAG、FFA水平均显著高于HFD+RYGB组和ND组(P<0.01);HFD+RYGB组脑组织DAG、FFA水平亦均显著高于ND组(P<0.01).ND组和HFD+RYGB组大鼠脑组织中TNF-α、IL-1和IL-6水平均显著低于HFD组(P<0.01);HFD+RYGB组TNF-α水平亦明显高于ND组(P<0.01),但2组IL-1和IL-6水平差异均无统计学意义(P>0.05).免疫组织化学检测显示,HFD组和HFD+RYGB组大鼠下丘脑Iba-1和GFAP阳性星形胶质细胞数量增多,胞体增大,突起增粗变长;与HFD组比较,HFD+RYGB组Iba-1和GFAP阳性表达减少.电镜下可见HFD组大鼠下丘脑神经元线粒体水肿、空泡形成及大量自噬体形成,HFD+RYGB组大鼠下丘脑神经元病变减轻.结论:RYGB可以下调高脂饮食的诱导肥胖大鼠下丘脑脑组织中TNF-α、IL-1、IL-6的表达,减轻下丘脑神经元病变,改善脑组织的炎症状态,降低脑组织中脂质含量.     

天麻粉对高脂饲料喂养大鼠降脂减肥作用的实验研究

目的观察天麻粉对高脂饲料投喂大鼠的降血脂和减肥作用。方法采用雄性SD大鼠,以高脂饲料喂养建立高血脂和肥胖模型。实验设正常对照组、高脂饲料（HFD）组、HFD＋天麻粉500 mg/kg和1000 mg/kg组共4组,治疗30 d。试验前后测量动物体重,试验后检测动物空腹血清总胆固醇（CHO）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和血糖（Glu）水平,处死动物后测定体脂（睾丸及肾周围脂肪垫）重量并计算脂肪系数（体脂重量/终体重）。结果高脂饲料投喂30 d后,HFD组大鼠出现显著高血脂和高血糖,体重、体脂重量和脂肪系数较正常对照组分别增加（13.5±2.7）%、（86.8±9.1）%、（66.5±0.5）%,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。HFD＋天麻粉500 mg/kg组体脂重量下降（16.2±9.9）%,与HFD组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;HFD＋天麻粉1000 mg/kg组体重、体脂重量和脂肪系数均得到明显控制,较HFD组分别下降（10.3±5.6）%、（22.0±5.9）%、（15.4±1.9）%,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。HFD＋天麻粉500 mg/kg和1000 mg/kg组使大鼠血清CHO分别下降（12.6±5.4）%、（14.3±3.6）%,TG分别下降（8.4±4.2）%、（15.8±8.4）%,Glu分别下降（18.7±3.5）%、（23.0±7.5）%,与HFD组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论在高脂饲料诱导的大鼠高血脂和肥胖模型中,天麻粉500 mg/kg和1000 mg/kg具有降血脂和降血糖作用;天麻粉1000 mg/kg还具有减肥作用。     

高脂饮食喂养大鼠脂肪组织GRP78mRNA的表达及意义

目的 通过观察高脂喂养的胰岛素抵抗大鼠内脏脂肪组织中GRP78mRNA的表达,探讨其在胰岛素抵抗发病机制中的意义.方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为正常饮食组（NC组）和高脂饮食组（HF组）,每组15只.喂养10周后,应用高胰岛素-正常血糖钳夹实验技术评估胰岛素抵抗模型的建立.采用实时荧光定量PCR（Real time PCR）法检测脂肪组织GRP78mRNA的表达.同时检测血清胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、测定血糖（BG）、胰岛素（INS）,测定各组大鼠内脏脂肪的重量与体重的比值.结果 （1）喂养10周后HF组的葡萄搪输注率（GIR）明显低于NC组（P〈0.01）,HF组胰岛素明显高于NC组（P〈0.05）;（2）HF组大鼠内脏脂肪组织中GRP78mRNA的表达明显增高,与NC组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;（3）10周末,HF组大鼠甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、及内脏脂肪相对含量均明显升高（P〈0.01）.结论 高脂喂养10周大鼠胰岛素抵抗模型建立成功,高脂饮食可诱导内脏脂肪组织GRP78mRNA表达增强.