1,25—（OH）2D3对人垂体GH瘤细胞GH分泌的影响

在15例体外培养的人垂体生长激素(GH)分泌瘤细胞上研究1,25-(OH)_2D_3对GH分泌的调节作用,发现14例瘤细胞的GH分泌对血清生理范围(40～80pg/ml)的1,25-(OH)_2D_3有兴奋和抑制两种反应,其中9例出现GH分泌明显的抑制反应,2例呈明显兴奋反应,3例在培养不同天分别出现兴奋和抑制不同形式的反应。1,25-(OH)_2D_3使垂体GH瘤GH分泌的抑制平均为对照的63.1±3.3％,GH分泌的增加达对照值的164.0±6.2％.本研究结果表明,血清生理范围的1,25-(OH)_2D_3对大多数体外培养的人垂体GH瘤的GH分泌有直接调节作用,这种作用包括抑制与兴奋两种,其中抑制作用更为常见。     

1,25（OH）2维生素D3和塞莱昔布协同对5-FU化疗的增敏作用

目的 研究塞来昔布(特异性环氧合酶-2抑制剂)联合1,25(OH)2维生素D3增强5-FU对结肠癌化疗增敏作用及其机制.方法 3种药物用单药、两药和3药联合干预结肠癌细胞株HT29 48h,用ELSA法观察干预后结肠癌细胞抑制率和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)表达变化及联用5-FU后溶解型Fas受体(s-FasL)表达的变化.结果 单药、两药和3药联合干预结肠癌细胞株HT29后抑制率增加,MMP-7表达减少及s-Fas表达减少(P<0.05或P<0.01).结论 塞莱昔布和1,25(OH)2维生素D3协同对5-FU的增敏作用,其机制可能通过抑制MMP-7表达,降低其对细胞表面Fas的酶解作用,促进结肠癌细胞凋亡.     

1,25-（OH）2维生素D3对稽留流产患者蜕膜产生的细胞因子的影响

目的研究1,25-（OH）2维生素D3对稽留流产患者蜕膜产生的细胞因子的免疫调节影响。方法采用ELISA法检测1,25-（OH）2维生素D3干预前后稽留流产患者及对照组蜕膜基质细胞产生白细胞介素-6（IL-6）、IL-8、TGF-β的差异。结果 1,25-（OH）2维生素D3能够下调稽留流产患者和对照组蜕膜细胞产生IL-6、IL-8及对照组产生TGF-β,且促进稽留流产患者TGF-β的产生。结论 1,25-（OH）2维生素D3能够对稽留流产患者蜕膜产生的细胞因子进行免疫调节,考虑母胎界面免疫调节网络系统的复杂性,维生素D3对稽留流产的治疗作用有待进一步临床验证。     

1,25（OH）2D3对4种细胞碱性磷酸酶活性的影响

观察１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对体外培养的人牙乳头细胞，牙髓细胞，牙龈细胞，成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法；用组织块培养法和ＡＬＰ测定法。结果：在１，２５（ＯＨ）２Ｄ３ｄ和５ｄ下人牙乳头细胞，人牙髓细胞及人成骨细胞ＡＬＰ活性增加，第７日变化不明显，而人牙龈细胞未见明显变化。     

1,25（OH）2D3和ATRA对HO8910生长的协同抑制作用

目的：通过单独或联合使用1,25-二羟维生素D3[1,25-dihydroxy vitaminD3,1,25（OH）2D3]和全反式维甲酸（all trans rinoic acid,ATRA）,研究其对人卵巢癌细胞HO8910生长、细胞周期和细胞凋亡的影响,以及维生素D受体（vitamin D recept VDR）及维甲酸α受体受体（retinoic acid receptorα,RARα）mRNA的表达变化,探讨其作用的分子机制。方法：选用人卵巢癌细株HO8910在体外进行培养,培养时分别添加1,25（OH）2D3、ATRA或二者联合,采用MTT比色法测定细胞生长抑制率,流式细胞术（flow cytometry,FCM）进行细胞周期和细胞凋亡分析,用RT-PCR检测VDR及RARαmRNA的表达。结果：结果是单独或联合使用1,25-二羟维生素D3和全反式维甲酸诱导后,HO8910细胞生长均受到不同程度的抑制（P〈0.05）,并呈时间依赖关系;能够引起细胞周期时相的改变,G1细胞增多（P〈0.05）;能够诱导细胞产生细胞凋亡（P〈0.05）;能够上调VDR及RARαmRNA的表达（P〈0.05）,进而抑卵巢癌细胞增殖,其中以联合用药组最为显著。结论：说明1,25-二羟维生素D3和全反式维甲酸能抑制人卵巢癌细胞株HO8910生长;诱导细胞周期发生G1期阻滞,同时产生细胞凋亡作用;通过上调VDR及RARαmRNA的表达,从而抑制癌细胞增当1,25-二羟维生素D3与全反式维甲酸联合用药时,能够对HO8910细胞生长产生协同抑制作用。     

1α,25（OH）2维生素D3受体的分离和部分纯化

采用小牛胸腺提取１α，２５（ＯＨ）２维生素Ｄ３受体，基于未标记的和氚标记的１α，２５（ＯＨ）２维生素Ｄ３对其高特异性和高亲和力的受体发生竞争结合作用，可用以建立血清中１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３含量的放射受体测定法。本室用一种简便易行的方法自胸腺制备了１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３受体［１］，经放射受体测定法分析，该法制备的刚刚出生小公牛胸腺受体，其用量与标记物量匹配时，Ｂｏ可达４８．８％。试用于放射受体分析，血清１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３的测定范围在３．９～６４．５ｐｇ／管，灵敏度为３．９ｐｇ／管，且样品前处理无需高效液相色谱［２］。     

1,25-（OH）2D3免疫调节作用的研究进展

1,25(OH)2D3是维生素D3的生物活性代谢产物,不仅可以调节骨钙代谢,还发挥其他广泛的生物活性。临床上主要应用于绝经后骨质疏松症和肾性营养不良症等的治疗。近年来发现,免疫细胞可以表达维生素D受体,且能够自身代谢维生素D,因而其免疫调节作用以及对免疫相关疾病的治疗作用也越来越受到重视。现就1,25(OH)2D3相关的免疫调节作用方面的研究进展予以综述。     

1,25-（OH）2D3对1型糖尿病小鼠主要脏器的保护作用

目的研究1,25-（OH）2D3对1型糖尿病（T1DM）小鼠的作用及可能机制。方法 40 mg/kg STZ腹腔注射C57BL/6小鼠连续5 d建立T1DM模型,5μg/kg 1,25-（OH）2D3隔日腹腔注射,监测血糖、体质量、饮水及饲料消耗,分析各脏器的病理及超微结构。结果 1,25-（OH）2D3治疗14 d后,T1DM小鼠的血糖、饮食、饮水量显著下降（均P〈0.05）;1,25-（OH）2D3可减轻胰岛炎症状及各脏器的超微结构病变,诱导淋巴细胞的凋亡,并在胰腺中可见典型自噬现象。结论 1,25-（OH）2D3可诱导胰腺细胞的自噬,同时诱导淋巴细胞凋亡,从而减轻T1DM症状。     

维持性血透患者1,25（OH）2D3和铝负荷变化的意义

观察了25例尿毒症维持性血透患者骨铝、血铝和血1.25(OH)_2D_3的变化。结果:血透患者血l.25(OH)_2D3显著低于正常(P<0.01),骨铝、血铝均显著高于正常(均P<0.01),骨铝与血l.25(OH)_2D_3呈显著负相关(P<0.01),与血透时间呈显著正相关(P<0.01),与血铝浓度无显著相关性(P>0.05)。提示尿毒症血透患者有铝中毒的危险;体内1.25(OH)_2D_3缺乏使尿毒症患者易患铝中毒性骨病。     

1,25(OH)2D3对骨代谢的影响

维生素D代谢物1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]是体内生物活性最强的维生素D活性形式,通过对成骨细胞和破骨细胞的作用,参与骨形成和骨吸收的代谢调节.维生素D受体(VDR)是一种核受体超家族的成员,其主要介导维生素D对靶细胞的生物效用.VDR不仅分布于与骨、钙代谢有关的小肠、肾和骨等组织,还存在于脑、肝、皮肤、牙齿等器官;同时促进其对钙、磷的吸收.1,25(OH)2D3与受体结合激活基因组时先由维生素D结合蛋白(DBP)将其转运到各靶器官组织,与靶器官及组织中的VDR结合,再与视黄醛X受体(RXR)形成杂二聚体,后与维生素D反应元件(VDRE)结合,对靶基因的转录和翻译进行调控,且只调节含有VDRE的基因,进而实现其生物学功能.1,25(OH)2D3亦介导快速反应,其反应时间仅几秒钟.如肠细胞、破骨细胞、甲状旁腺组织及胰岛β细胞均有这种快速反应.它通过与膜表面受体相互作用,刺激蛋白激酶C,进而使细胞内钙浓度升高,然后刺激丝裂原活化的蛋白激酶(MAP)引起基因效应.VDR功能本质上反映了1,25(OH)2D3的功能,其不仅存在于成骨细胞,而且也存在于破骨细胞[1].位于骨组织上的VDR作用是双向的,成骨细胞上的VDR可调节而位于破骨细胞上的VDR,可抑制其增殖亦可促进其分化.从而对骨的合成和分解代谢起着双向调节作用,而该双向作用的取向则取决于维生素D的含量.正常的骨再建过程依赖于骨吸收和骨形成过程的动态平衡,而这一过程又分别与破骨细胞和成骨细胞的功能密切相关.     

1,25-（OH）2D3及LPS对2型糖尿病肾病尿毒症患者单核细胞维生素D受体表达的影响

目的探讨1,25-(OH)2D3及TLR4配体(脂多糖,LPS)对2型糖尿病(T2DM)和糖尿病肾病(diabetic ne-phropathy,DN)尿毒症患者血清干预的单核细胞维生素D受体(VDR)表达的影响,进一步探索1,25-(OH)2D3在T2DM和DN炎症性免疫反应中的作用。方法分离研究对象(健康对照组、T2DM组和DN尿毒症组)外周血血清,孵育THP-1单核细胞,然后于含或不含10-7mol/L的1,25-(OH)2D3培养液中培养48 h后,再用终浓度为1μg/ml的LPS干预24 h,收集单核细胞和培养上清。采用RT-PCR检测VDR mRNA表达,Western blot、免疫荧光检测THP-1单核细胞内VDR蛋白表达。ELISA法检测细胞培养上清IL-6和IL-10浓度。结果与正常对照组比较,在LPS的刺激下T2DM组和DN尿毒症组THP-1单核细胞内VDR mRNA水平下调[对照组(0.99±0.25);T2DM组(0.65±0.24);DN尿毒症组(0.62±0.27),P<0.05];DN尿毒症组THP-1单核细胞内VDR蛋白表达比正常对照组和T2DM组显著下调[对照组(0.48±0.05);T2DM组(0.50±0.06);DN尿毒症组(0.20±0.01),P<0.01],且LPS增强以上患者血清孵育的THP-1单核细胞炎症细胞因子IL-6的分泌[对照组(15.13±1.61);T2DM组(24.06±2.92);DN尿毒症组(70.77±5.48),P<0.05];而1,25-(OH)2D3可部分阻断上述作用。结论 LPS能下调T2DM和DN尿毒症患者单核细胞VDR mRNA和蛋白的表达,引起促炎和抗炎细胞因子失调。1,25-(OH)2D3可部分逆转LPS的作用,对T2DM和DN尿毒症可能具有一定的保护作用。     

1,25-二羟维生素D3处理的树突细胞在变应性气道炎症中的免疫调节作用

目的 探讨1,25-二羟维生素D,[1,25(OH)2D3]处理的树突细胞(DC)在变应性气道炎症中的免疫调节作用及其机制.方法 小鼠骨髓来源DC分2组,分别用1,25(OH):D,和磷酸盐缓冲液(PBS)处理,RT-PCR和蛋白质印迹法检测2组Dc Notch配体Mrna和蛋白表达.将2组DC和Notch配体中和抗体封闭的1,25(OH)2D3处理DC分别与小鼠脾脏来源CIM+T细胞共培养,流式细胞仪检测CD4+T细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分比.将卵清蛋白(OVA)致敏小鼠分2组,每组5只,分别过继转移1,25(OH)2D3组DC[1,25(OH)2D3-DC组]和PBS组DC(PBS-DC组),以OVA激发气道炎症后行肺脏病理、支气管肺泡灌洗液(BALF)中自细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13和干扰素γ(IFN-γ)水平以及脾脏CD4+T细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分比检查.结果 1,25(OH)2D3组DC Notch配体Jaggedl和Jagged2 Mrna表达(0.376±0.029、0.564±0.018)和蛋白表达(0.786±0.034、0.632±0.026)均明显高于PBS组(分别为0.146±0.032、0.267±0.012和0.124±0.025、0.098±0.012,均P＜0.01).与CIM+T细胞共培养后,1,25(OH)2D3组CD4+T细胞中CD4+C1)25+Foxp3+T细胞百分比(22.49%±0.56%)明显高于PBS组(6.67%±0.60%,P＜0.01);经Jagged2中和抗体封闭组CIM4CD25+Foxp3+T细胞百分比(6.56%±1.89%)明显低于未封闭组(20.37%±1.64%,P＜0.01),1,25(OH)2D3-DC组小鼠气道炎症明显轻于PBS-DC组;BALF中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ水平(pg/ml)分别为33±5、134±23、91±11和未检测到(＜12.5),均明显低于PBS-DC组(分别为55±7、332±49、152±19、23±6,均P＜0.01);脾脏CD4+T细胞中CIM+CD25+Foxp3+T细胞百分比(14.69%±1.14%)明显高于PBS-DC组(2.38%±0.14%,P＜0.01).结论 1,25(OH)2D3处理DC对变应性气道炎症有抑制作用,这种作用可能与1,25(OH)2D3处理DC通过Jaggect2介导的Notch信号途径诱导CD4+CD25+Foxp3+T细胞生成有关.     

慢性肾功能衰竭时甲状旁腺激素—1,25（OH）2D3轴的变化

维持体内正常钙平衡和适应异常钙代谢的能力取决于二种激素和三个主要器官,甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)、1,25(OH)_2D_3与肾脏、骨或小肠之间的相互关系。1,25(OH)_2D_3增加肠钙吸收,协同PTH增加近曲肾小管钙吸收和动员骨钙进