姜黄素Ⅲ抑制A549裸小鼠移植瘤生长及其血管生成的实验研究

目的初步探讨中药姜黄的主要活性单体成分双脱甲氧基姜黄素(姜黄素Ⅲ)对人肺腺癌细胞系A549裸小鼠移植瘤的生长及其血管生成的影响.方法选用人肺腺癌细胞株A549建立裸小鼠皮下移植瘤模型,腹腔注射姜黄素Ⅲ,测量移植瘤的重量、体积,同时应用CD34免疫组化染色,观测瘤组织内的微血管密度.结果姜黄素Ⅲ具有较好的抗人肺腺癌细胞系A549裸小鼠移植瘤生长作用,移植瘤重量及体积显著低于阴性对照组(P＜0.01);瘤组织内可见微血管形态不规则,并可见无明显管腔形成的新生血管,姜黄素Ⅲ组微血管密度明显低于阴性对照组(P＜0.01).结论姜黄素Ⅲ能明显抑制人肺腺癌细胞系A549裸小鼠移植瘤的生长,其机制之一可能与其抑制瘤组织内血管生成有关.     

姜黄素Ⅲ和顺铂联用抑制A549裸小鼠移植瘤生长作用研究

目的观察中药姜黄的主要活性单体成分双脱甲氧基姜黄素(姜黄素Ⅲ)和顺铂联用对抑制人肺腺癌细胞系A549裸小鼠移植瘤生长有无增效作用.方法将20只荷人A549肺腺癌的裸小鼠随机分成4组:①阴性对照组;②姜黄素Ⅲ组(100 mg/kg, 隔日1次×8次);③顺铂组(5 mg/kg, 每周2次×4次);④联合用药组(姜黄素Ⅲ100 mg/kg, 隔日1次×8次 顺铂5 mg/kg, 每周2次×4次)分别测量瘤质量、瘤体积和微血管密度,并观察各组移植瘤组织的病理形态结构.结果 4个组瘤质量分别为(1.15±0.18)、(0.57±0.10)、(0.49±0.08)、(0.24±0.05)g;瘤体积分别为(1 413.4±266.33)、(699.40±118.03)、(590.88±114.05)、(354.72±123.72)mm3.统计学分析表明:在瘤质量及瘤体积方面,姜黄素Ⅲ组、顺铂组和阴性对照组比较差异具有显著性(P<0.01),联合用药组和其他3组比较均有显著性差异(P<0.01).结论姜黄素Ⅲ、顺铂对A549裸小鼠移植瘤生长都有明显的抑制作用;姜黄素Ⅲ和顺铂联用能起增效作用.     

Beta-防御素抗裸鼠宫颈癌移植瘤生长作用及其机制研究

目的采用稳定转染pcDNA3.1(+)/mBD2的细胞株复制裸鼠移植瘤模型,通过对荷瘤小鼠肿瘤生长、瘤组织凋亡等指标的观察,揭示mBD2在动物体内抗肿瘤作用机制。方法将稳定转染PcDNA3.1(+)/mBD2、PcDNA3.1(+)的细胞株SiHa/M、SiHa/K及正常SiHa细胞于裸鼠左前腋下皮下接种,复制裸鼠移植瘤模型。观察肿瘤生长状况、荷瘤小鼠存活时间及肿瘤组织病理改变,采用免疫组织化学方法测定肿瘤组织中目的蛋白的表达,并用TUNEL法检测肿瘤组织的细胞凋亡。结果成功复制了裸鼠宫颈癌移植瘤模型。肿瘤生长曲线显示,SiHa/M组裸鼠肿瘤生长慢于SiHa/K组和SiHa组(P<0.05);SiHa/M肿瘤直径小于SiHa组和SiHa/K组,差异均有统计学意义(P<0.05)。肿瘤组织HE染色结果显示,SiHa/M细胞生长不活跃,局部有出血坏死,病理性核分裂相少;SiHa/K组与SiHa组肿瘤细胞生长活跃,病理性核分裂相多见,瘤细胞侵犯周围脂肪及肌肉组织。免疫组织化学染色结果显示SiHa/M组有mBD2表达;由TUNEL染色结果可以看出,SiHa/M组细胞凋亡较多,而SiHa/K及SiHa组细胞凋亡少,两者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 mBD2能够抑制移植瘤的生长,其机制可能与mBD2诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

小鼠Lewis肺癌不同部位皮下移植瘤模型的比较

目的 探究不同部位肺癌皮下移植瘤存在的差异,为肺癌研究者提供提供基础依据。方法 将稳定表达虫萤光素酶的小鼠Lewis肺腺癌细胞（ll2-luc-m38）分别注射于C57 BL/6小鼠的右腋皮下、右腹股沟皮下、脚垫皮下,定期利用小动物活体成像系统观察小鼠皮下移植瘤成瘤情况及转移情况,观察不同部位荷瘤小鼠的生存时间和死亡率,肿瘤组织取材,采用石蜡包埋、切片、HE染色做出病理学诊断。并将小鼠处死后立即进行肺部组织固定、观察转移灶。对皮下移植瘤行切除术观察小鼠术后生存情况和转移情况。结果 腋下组和腹股沟组成瘤时间较早,成瘤率为100%,脚垫组成瘤时间较晚,成瘤率为33%;腹股沟组和腋下组瘤体积增长迅速,其中腹股沟组瘤体积增长最快;接种后第21天腋下组70%的小鼠出现了肺转移,转移灶数目较多;腹股沟组50%小鼠出现肺转移,且转移灶数目较少;脚垫组小鼠未观察到肺转移灶。脚垫组小鼠死亡率最高。腹股沟组和腋下组小鼠可行皮下移植瘤切除术,术后存活率为100%。结论 小鼠lewis肺癌皮下移植瘤模型中,腹股沟组和腋下组成瘤率高,可耐受移植瘤切除术,手术死亡风险低,便于监测,操作简单且可重复性高,其中腋下组转移性更好。     

熊果酸抑制胶质瘤裸鼠移植瘤生长及其机制的初步探讨

目的 观察熊果酸对恶性胶质瘤裸鼠移植瘤细胞外信号调节激酶ERK1及核内因子C-Jun、C-Myc、Cyclin D1表达的影响,探讨熊果酸抗胶质瘤生长的机制.方法 皮下注射技术复制恶性胶质瘤细胞株C6裸鼠皮下移植瘤模型,然后将其分为3组:①空白对照组,②熊果酸组(50 mg·kg-1·d-1,共20 d),③PD98059组(2 mg·kg-1·d-1,共7 d),观察处理后动物生存、移植瘤生长状况及移植瘤组织病理学形态变化;用免疫组化技术检测移植瘤组织ERK1、C-Jun、C-Myc、Cyclin D1蛋白表达变化;用原位杂交技术观察ERK1 mRNA变化.结果 熊果酸组和PD98059组移植瘤生长缓慢,其肿瘤体积及质量明显低于对照组(P＜0.05).熊果酸组和PD98059组ERK1、C-Jun、C-Myc、Cyclin D1蛋白及ERK1 mRNA表达明显低于对照组(P＜0.05).结论 熊果酸具有抑制恶性胶质瘤裸鼠移植瘤生长的作用,其机制可能与下调ERK1、C-Jun、C-Myc、Cyclin D1表达有关.     

组织块移植法建立人肺癌裸鼠移植瘤模型

肺癌对人类的健康构成了严重的威胁,人肺癌裸鼠移植瘤模型的建立对于肺癌的研究是一项重要的工具.建立肺癌移植瘤模型的方法主要有细胞培养移植法、组织块移植法和匀浆液移植法.组织块移植法建立的模型能最大限度地模拟人体内环境,是一种理想的模型.就组织块移植法建模的操作方法及当前研究进展作一综述。     

miR-614过表达抑制肺腺癌A549细胞增殖、侵袭及裸鼠移植瘤生长

目的:探讨miR-614过表达对肺腺癌A549细胞增殖、侵袭及裸鼠移植瘤生长的影响.方法:将培养至对数生长期的人A549细胞分为对照组、miR-NC组(脂质体转染miR-NC mimic)和miR-614组(脂质体转染miR-614 mimic).RT-qPCR检测每组A549细胞中miR-614的表达,CCK-8法检测每组A549细胞增殖活性;Transwell法检测检测每组A549细胞侵袭细胞数,Western Blot法检测每组A549细胞血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)和Ki-67蛋白的相对表达量.皮下种植0.2 mL各组A549细胞悬液(5 ×106/mL),构建裸鼠移植瘤的模型,每周测量1次移植瘤组织的体积,造模5周后进行移植瘤组织称重.结果:miR-614组A549细胞增殖活性和侵袭细胞数低于miR-NC组(P＜0.05),细胞VEGF、MMP-2和Ki-67蛋白表达低于miR-NC组(P＜0.05),TIMP-2蛋白表达高于miR-NC组(P＜0.05);miR-614组裸鼠移植瘤质量低于miR-NC组,且造模3周、4周和5周后,移植瘤体积低于miR-NC组(P＜0.05).结论:miR-614过表达可抑制A549细胞的增殖和侵袭,进而抑制肿瘤生长.     

TRIM28siRNA抑制非小细胞肺癌A549裸鼠移植瘤生长以及促进凋亡的研究

目的 建立非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞裸鼠移植瘤模型,探讨TRIM28小干扰RNA(siRNA)对NSCLC裸鼠移植瘤生长和细胞凋亡的影响.方法 将NSCLC细胞A549皮下注射Balb/c裸鼠建立移植瘤模型.比较皮下注射A549/TRIM28siRNA细...     

姜黄素抑制人宫颈癌CaSki细胞裸鼠移植瘤生长的实验研究

目的:探讨姜黄素对人宫颈癌CaSki细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。 方法：建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,35只荷瘤裸鼠随机分为5组,姜黄素高剂量(200mg/kg)、中剂量(100mg/kg)、低剂量(50mg/kg)组、溶剂对照组和顺铂组（3mg/kg）,每组7只,姜黄素连续灌胃给药15d,顺铂组每3天腹腔注射给药,共5次。停药24 h后处死裸鼠,测量裸鼠体重、移植瘤体积、瘤重,计算抑瘤率;光镜下观察移植瘤组织形态学变化;结果:处理组的移植瘤体积均明显小于空白对照组(P相似文献   

高效液相色谱法测定头痛宁合剂中阿魏酸的含量

目的 建立测定头痛宁合剂中阿魏酸含量的方法.方法 采用HPLC法,以C18为固定相,乙腈:0.085%磷酸(17:83)为流动相,检测波长为316 nm,流速为1 mL/min.结果 阿魏酸在9.8-98 μg/mL范围内线性良好,平均回收率为101.0%,RSD%=1.42% (n =6).结论 本方法可用于头痛宁中...     

高效液相色谱法测定妇月康软胶囊中阿魏酸的含量

目的建立妇月康软胶囊中阿魏酸的含量测定方法。方法采用HPLC法测定阿魏酸的含量,使用HypersilC18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,甲醇-1%醋酸（32∶68）为流动相,检测波长为320 nm。结果阿魏酸在0.015~0.600μg范围内线性关系良好,r=1.000 0（n=6）。平均回收率为98.3%,RSD为2.07%。结论该方法简便、准确,可用于妇月康软胶囊的质量控制。     

熊果酸体内抗肺癌作用机制探讨

目的：探讨熊果酸对人肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制。方法:采用人肺腺癌A549细胞株进行裸鼠移植瘤实验。通过移植瘤生长曲线、终末瘤重计算抑制率观察熊果酸对人肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用,采用免疫组化法检测VEGF蛋白表达、微血管密度,TUNEL检测凋亡指数,探讨其作用机制。结果:实验组用药后移植瘤生长缓慢,实验结束时,实验组瘤重及瘤体积明显低于对照组（P＜0.05）,抑瘤率为51.35％。实验组移植瘤组织微血管密度及VEGF蛋白表达明显低于对照组（P均＜0.01）,实验组癌细胞凋亡指数高于对照组(P＜0.01)。结论:熊果酸对裸鼠肺腺癌移植瘤生长有抑制作用,其机制可能与降低移植瘤促血管生成因子VEGF的表达、抑制新生血管的形成和促进肿瘤细胞凋亡有关。     

细梗香草总皂苷诱导肺癌细胞H460凋亡及其机制的研究

目的：观察细梗香草总皂苷（LC）对非小细胞肺癌H460细胞增殖和凋亡的影响。方法在H460肺癌细胞培养时加入不同浓度的LC,采用MTT法和克隆形成实验检测细胞的增殖活性,AnnexinⅤ/PI（FCM）法观察LC对肺癌细胞凋亡的诱导作用和周期分布的影响。DCFH- DA荧光探针FCM检测细胞内活性氧生成,Western blot法检测NF-κB、I-κB、Bax、Bcl-2、Capase-3的蛋白表达。结果 LC可抑制H460细胞生长,具有剂量、时间依赖性;LC作用H460细胞后克隆形成率明显下降。LC可引起H460细胞凋亡,并可将H460生长阻滞在S期。LC以浓度依赖方式增高H460细胞内活性氧水平,还可使H460细胞I-κB、Bax和Capase-3表达增加,而使NF-κB和Bcl-2表达降低。结论 LC可以抑制H460细胞增殖,可能是通过增加细胞内活性氧表达,激活了肺癌细胞线粒体凋亡途径。     

高效液相色谱法测定甘草黄酮阿魏酸乳膏中阿魏酸含量

目的建立甘草黄酮阿魏酸乳膏中阿魏酸含量的测定方法。方法采用KromasilC18（4．6mm×250mm,5μm）色谱柱;流动相为乙腈-0．3％冰醋酸（25：75）;流速为1．0ml／min;柱温25℃;检测波长320nm;进样量20μl。结果阿魏酸浓度为2．26-36．16μg／ml时与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9998）,平均加样回收率为97．50％,RSD为1．73％（n=6）。结论本方法准确、简便、重现性好,可作为该品种中阿魏酸的定量检测方法。     

两种方法对肺部恶性肿瘤诊断的对比性研究

目的 用脂质结合唾液酸（ＬＳＡ）与恶性肿瘤特异性生长因子（ＴＳＧＦ）对肺癌诊断的对比性研究。方法 用改良间苯二酚法和化学比色法,同时检测５６例肺癌、６５例肺良性疾病、５０例健康成人血清中ＬＳＡ和ＴＳＧＦ的含量。结果 在肺癌患者中,ＬＳＡ阳性率为８０．４％,诊断正确率为８７．３％;ＴＳＧＦ阳性率为８５．７％,诊断正确率为８９．６％,二者结果相似。３３例各型肺癌患者的ＬＳＡ和ＴＳＧＦ水平变化与手术切除     

艰制肺癌疗效的机制因素与红景天苷的抗肿瘤特性研究

肺癌是我国的肿瘤发病谱中的主要病种,化疗药物的临床疗效已达到平台期,现阶段5年生存率很低,需要取得突破性的进展。在针对肺癌肿瘤细胞的增殖分化失控、凋亡缺陷及肿瘤区血管生成等这些发生发展的重要机制因素的纠正上,涉及到对ras基因的突变、环氧化酶（cyclooxygenase,cox）、胰岛素样生长因子（insulin—likeg rowth factor,IGF）及Akt蛋白等的认识。红景天苷突出的促进体态回稳的免疫调节、抑制肺癌细胞增殖及抗肿瘤血管生成等作用切合了肺癌的病理发展机制,能增加化疗药的抗肿瘤及抗转移作用,并可降低化疗药物毒性,展现了广阔的应用前景。     

视黄酸对肿瘤坏死因子α诱导肺泡上皮细胞损伤的保护作用

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549增殖凋亡的影响与视黄酸(RA)对其调控作用。方法用不同浓度的TNF-α、1μmol/LRA和10μg/LTNF-α+1μmol/LRA处理肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549细胞24h和48h后MTT法测定细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡。用10μg/LTNF-α处理24h或48h后继续培养,用台盼蓝染色计算24、48和72h活细胞数。结果分别用0、0.1、1、5、10μg/L浓度的TNF-α培养A549细胞24h和48h测定细胞增殖数(%):24h分别为95.0%、90.0%、79.6%、72.4%和59.6%,方差分析结果F值为18.04,P<0.01;48h分别为93.2%、82.7%、61.5%、50.3%和44.7%,F值为40.61,P<0.01。用10μg/LTNF-α处理A549细胞24h,其对细胞的增殖抑制作用可逆转,但处理48h后的A549细胞增殖抑制作用不能逆转。用TNF-α和视黄酸培养A549细胞12、24与48h后,凋亡的细胞数(%)TNF-α组分别为14.3%±3.2%、18.6%±2.9%和43.4%±3.5%,与对照组(6.3%±1.2%,8.2%±1.3%和26.1%±2.5%)比较差异有统计学意义;视黄酸加TNF-α组为4.8%±1.1%,5.2%±1.3%和16.4%±2.3%,明显少于TNF-α组。结论视黄酸通过抑制TNF-α对肺泡Ⅱ型上皮细胞的破坏,可以达到减轻肺泡上皮细胞损伤,保护肺表面活性物质的作用。     

血管内皮细胞生长因子水平对肺癌预后的影响

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平对肺癌预后的作用.方法采用ELISA方法对肺癌组(112例)、对照组(48例)、健康组(31例)的血清、尿液及恶性胸腔积液(46例)和结核性胸腔积液(31例)中VEGF水平进行检测,并对其进行分析.结果肺癌组血清VEGF含量[(506.22±365.06)μg/ml]明显高于对照组[(237.16±168.09)μg/ml]和健康组[(131.32±99.76)μg/ml](P＜0.001);血清VEGF的水平与病变侵袭程度、淋巴结转移、远处转移、生存时间密切相关;而与性别、组织学类型无关;恶性胸腔积液中VEGF含量[(937.23±400.92)μg/ml]明显高于结核性胸腔积液组[(257.41±361.47)μg/ml](P＜0.001);肺癌组尿液VEGF水平也明显增高[(167.40±186.89)μg/ml].结论血清VEGF检测可作为临床预测肺癌患者预后的重要指标之一.     

肺癌肺叶切除支气管成形术

本文介绍了12例肺癌肺叶切除支气管成形术的经验,本组病例按PTNM分期,Ⅰ期4例;Ⅱ期1例;Ⅲ期7例。均治愈出院。讨论了手术适应症的选择,支气管吻合时的注意事项以及并发症的予防和处理方法。对吻合口肉芽的处理,采用纤维支气管镜观察下,应用激光治疗,较用器械咬出为好。