从布渣叶中制备异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷的研究

目的 从布渣叶中分离制备高纯度异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷.方法 采用大孔吸附树脂富集布渣叶总黄酮,用Sephadex LH-20凝胶柱从布渣叶总黄酮中分离化合物单体,并采用IR、MS和1H-NMR、13C-NMR对其进行结构鉴定,利用TLC和HPLC对其纯度进行测定.结果 从布渣叶中分离出异鼠李素-3-O-β-...     

HPLC同时测定柿叶提取物中槲皮素-7-O-β-D-鼠李糖苷和染料木素含量的方法研究

目的:建立柿叶提取物中槲皮素-7-O-β-D-鼠李糖苷和染料木素的HPLC同时测定方法.方法:采用HPLC法,Phenomenex-C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-0.02％磷酸水为流动相梯度洗脱,检测波长:368 nm,流速:1 mL/min;柱温30℃.结果:槲皮素-7-O-β-D-鼠李糖苷和染料木素分别在7.44～297.4 μg/mL范围和1.10～109.8 μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.20％和98.77％.结论:该方法准确、可靠,重复性好,可用于柿叶提取物的质量评价与控制标准,为柿叶功能性产品的研究开发奠定基础.     

HPLC 法测定维药恰麻古中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量

目的：建立 HPLC 法测定维药恰麻古中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量。方法采用 HPLC 法测定新疆阿克苏、吐鲁番、伊犁地区维药恰麻古槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量,色谱条件：KromasilC18柱（200 mm＆#215;4．6 mm,5μm）;流动相：乙腈-0．5％冰醋酸水溶液（25∶75,v/v）;检测波长：257 nm;流速：1．0 mL/min;柱温：30℃。结果恰麻古中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷在0．0105～0．2100 mg/mL 浓度范围内呈良好的线性关系（r ＝0．9997）,平均加样回收率为99．1％,RSD 为2．4％（n ＝9）,新疆阿克苏、吐鲁番、伊犁产地恰麻古中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量分别为0．702、0．334、0．524 mg/g。结论 HPLC 法简单可行,重复性好,可作为恰麻古质量评价的方法之一。     

白首乌中抗肿瘤活性成分告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷在大鼠体内的代谢产物分析

目的 研究白首乌中甾苷成分告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷在大鼠体内的代谢情况.方法 大鼠单剂量灌胃给予20 mg/kg的告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷,分别收集24 h内的血浆、尿液、粪便和胆汁,样品经处理后,采用UPLC-Q-TOF分析,结合MetabolynxTM软件初步鉴定告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷在大...     

金铁锁中3-O-6′-O-甲基-β-D-葡萄糖醛酸丝石竹苷的含量测定

目的:研究金铁锁提取物中3-O-6′-O-甲基-β-D-葡萄糖醛酸丝石竹苷的含量测定方法。方法:金铁锁根粉乙醇提取,经大孔吸附树脂、硅胶及RP-C8、RP-C18反相硅胶反复柱层析,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构;HPLC法对其含量及纯度进行测定:色谱柱为Lichrospher 100 RP-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度:0~5 min,乙腈15%~20%;5~55 min,乙腈20%~55%;55~65 min,乙腈55%~85%;65~90 min,乙腈85%。检测波长210 nm,流速0.5 mL/min,柱温30℃。结果:所制备的3-O-6-′O-甲基-β-D-葡萄糖醛酸丝石竹苷的纯度为98.38%。对金铁锁原药材进行含量测定,含量为3.75%,线性范围0.615~3.712μg(r=0.999 7),平均加样回收率100.4%,RSD为0.69%(n=6)。结论:该法灵敏、准确可靠,制得的化合物可作为衡量金铁锁提取物质量的依据。     

金铁锁中3-O-6′-O-甲基-β-D-葡萄糖醛酸丝石竹苷的含量测定

目的:研究金铁锁提取物中3-O-6′-O-甲基-β-D-葡萄糖醛酸丝石竹苷的含量测定方法。方法:金铁锁根粉乙醇提取,经大孔吸附树脂、硅胶及RP-C8、RP-C18反相硅胶反复柱层析,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构;HPLC法对其含量及纯度进行测定:色谱柱为Lichrospher 100 RP-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度:0~5 min,乙腈15%~20%;5~55 min,乙腈20%~55%;55~65 min,乙腈55%~85%;65~90 min,乙腈85%。检测波长210 nm,流速0.5 mL/min,柱温30℃。结果:所制备的3-O-6-′O-甲基-β-D-葡萄糖醛酸丝石竹苷的纯度为98.38%。对金铁锁原药材进行含量测定,含量为3.75%,线性范围0.615~3.712μg(r=0.999 7),平均加样回收率100.4%,RSD为0.69%(n=6)。结论:该法灵敏、准确可靠,制得的化合物可作为衡量金铁锁提取物质量的依据。     

香叶木素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及周期阻滞的机制研究

目的 研究香叶木素对人肝癌HepG2细胞的增殖、凋亡及周期阻滞的影响并揭示其分子机制.方法 MTT方法检测不同浓度香叶木素对肝癌HepG2的细胞活力的影响;流式细胞术检测不同浓度香叶木素处理对HepG2细胞周期阻滞及细胞凋亡的作用;Western blot检测香叶木素处理对细胞p53、Bcl-2、Bax、Cleaved-cas-pase3、Cleaved-caspase8、Cleaved-PARP、Bak、cdc2、cyclinB1、p21等细胞周期调节或细胞凋亡相关蛋白表达的调节.结果 香叶木素能显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并且诱导细胞凋亡(P<0.05);流式细胞术对细胞周期检测示:香叶木素处理HepG2细胞,使G0/G1期细胞比例显著降低,而G2/M期细胞比例显著升高(P<0.05).香叶木素可下调HepG2细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、cdc2、cyclinB1的蛋白表达,上调p53、p21、Bax、Bak,Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase8、Cleaved-PARP等促凋亡蛋白.结论 香叶木素在体外实验能通过激活p53/Bcl-2细胞凋亡通路抑制人肝癌HepG2细胞的增殖及促进细胞凋亡,同时通过上调p53、p21下调cdc2、cyclinB1诱导细胞G2/M周期阻滞.     

UPLC法测定木鳖子药材中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的含量

目的:建立UPLC法测定木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯含量的方法,并对不同产地样品进行测定。方法:Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,线性梯度洗脱;流速0.25 m L/min,柱温30℃,检测波长203 nm。结果:丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯浓度与峰面积在0.35~5.60μg之间线性关系良好(r=0.999 6),加样回收率为97.98%,RSD为1.60%。结论:该方法简便、快捷、重复性好,可用于木鳖子药材的质量控制。     

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶新型底物的合成及在肾小管疾病诊断中的应用

目的 优化N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的新型底物6-甲基-2-吡啶基-1-硫-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)的合成方法,探讨其在肾小管疾病诊断中的应用价值.方法 采用活泼中间物(1-氯-1-脱氧乙酰糖)与6-甲基-2-巯基吡啶成苷合成底物;以MPT-NAG为底物,采用全自动生化仪测定糖尿病肾病、肾病综合征、肾移植患者和正常对照者尿液样本中NAG的活性.结果 底物MPT-NAG的结构经元素分析和1HNMR谱鉴定,高效液相色谱(HPLC)检测纯度达99.8％.NAG活性测定结果表明,糖尿病肾病、肾病综合征和肾移植患者的尿NAG活性增高,与正常对照者比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 经优化制备工艺合成获得NAG新型底物MPT-NAG,所用原料成本低、操作简便且产物得率较高,在肾小管疾病的诊断中具有临床应用价值.     

20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-20(S)-原人参二醇对抗肝癌药物的增敏作用研究

目的:探讨 20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-20(S)-原人参二醇(人参皂苷 IH901) 与医学上常用抗肝癌药物环磷酰胺 (CTX)、5-氟尿嘧啶 (5-FU)、顺铂 (cDDP) 单独用药及联合用药 体外抗肝癌细胞 Bel-7402、SMMC-7721 的活性。方法 应用 MTT 法检测人参皂苷 IH901、CTX、5-FU、cDDP 分别在不同质量浓度下单独及联合用药对肝癌细胞的增殖抑制率,并根据金氏公式计算其协同指数(Q值),进而评价两药联用的增敏效果。结果 IH901 与 CTX 联合用药后对 Bel-7402、SMMC-7721 抑制作用明显增强,且二者合用具有协同作用;而 IH901 与 5-FU 联合用药后对2种细胞仅相加效果;IH901 与 cDDP 联合用药,对 Bel-7402 仍然是相加的效果,对 SMMC-7721 则是具有轻微的协同效果。结论 人参皂苷 IH901 可增强 CTX 对肝癌细胞增殖的抑制作用,具有化疗协同效果,且具有一定的广谱性,可能成为一种潜在的抗肝癌药物。     

HPLC法测定养血补肾口服液中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的：为养血补肾口服液建立专属性含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法对2，3，5，4‘‘-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷进行了含量测定，采用Kromasil C18柱，流动相为ψ(乙腈：水)：25：75。结果：线性范围0.03392～2-7136μg，平均回收率为98．37％，RSD：1．00％(n：5)。结论：本法操作简便，易行，具有实用性。     

骆驼刺中异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品的制备研究

目的建立骆驼刺中异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品的制备分离方法。方法取骆驼刺药材醇提浸膏的正丁醇萃取部分,用硅胶柱色谱分离,依次用氯仿-甲醇（90：10～70：30）、氯仿-甲醇-水（70：30：10～60：40：10）梯度洗脱,收集异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷富集流份,继续采用凝胶柱色谱及制备HPLC进行分离纯化,通过NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,经TLC、HPLC等技术进行质量分数检测。结果从骆驼刺中制备分离的异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品,质量分数〉99％。结论本法得到的异鼠李素-3-O-β-D芸香糖苷对照品符合中药化学对照品的相关技术要求,为骆驼刺药材和的骆驼刺成方制剂的质量控制及药效物质基础研究提供化学对照品。     

HPLC法测定首乌胶囊中2,3,5,4 -四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的：测定首乌胶囊中2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为DiamonsilC18（4.6mm×200mm）,流动相为乙腈-水（25：75）,柱温为30℃,流速为1.0mL/min,检测波长为320nm。结果：2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.02104-0.526μg范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为98.45%,RSD（%）=1.23%（n=5）。结论：含量测定方法快速、准确,适用于首乌胶囊质量分析控制方法。     

HPLC法测定养血补肾口服液中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的 :为养血补肾口服液建立专属性含量测定方法。方法 :采用高效液相色谱法对 2 ,3 ,5 ,4′ 四羟基二苯乙烯 2 O β D 葡萄糖苷进行了含量测定 ,采用KromasilC1 8柱 ,流动相为 ψ(乙腈 ∶水 ) =2 5∶75。结果 :线性范围 0 .0 3 3 92～ 2 .713 6μg ,平均回收率为 98 3 7%,RSD =1.0 0 %(n =5 )。结论 :本法操作简便 ,易行 ,具有实用性。     

24-亚甲基-胆甾-3β,5α,6β-三醇的合成

目的 高效合成海洋天然产物24-亚甲基-胆甾烷-3β,5α,6β-三醇.方法 以猪去氧胆酸为原料,△5-3β-四氢吡喃氧基胆甾-24-酮为关键中间体,格氏试剂异丙基化为关键步骤,经7步反应合成目标分子.结果 以53%的总收率合成目标分子,其结构为MS、1HNMR、13CNMR、IR所证实.结论 以本法合成24-亚甲基-胆甾烷-3β,5α,6β-三醇,原料廉价易得、路线简短、收率高、符合原子经济性.     

PR-HPLC法测定甘肃蚤缀中苜蓿素、苜蓿素-4′-O-β-愈创木基甘油基酯、异牡荆素、异金雀花素和苜蓿素-7-O-β-D-葡萄糖苷

目的 建立HPLC法对甘肃蚤缀中苜蓿素、苜蓿素-4′-O-β-愈创木甘油基酯、异牡荆素、异金雀花素和苜蓿素-7-O-β-D-葡萄糖苷同时定量的方法。方法 采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil TM C18(250 mm×4。6 mm,5 μm),流动相为乙腈0.5%磷酸梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;柱温为30 ℃;检测波长为350 nm;进样量为10μL。结果 苜蓿素、苜蓿素-4′-O-β-愈创木甘油基酯、异牡荆素、异金雀花素和苜蓿素-7-O-β-D-葡萄糖苷5个化合物达到基线分离且线性关系良好,线性范围分别为5.44～97.92 μg/mL(r=0.999 2)、4.76～85.68 μg/mL(r=0.999 2)、6.52～117.36 μg/mL(r=0.999 6)、4.92～88.56 μg/mL(r=0.999 8)、1.60～29.34 μg/mL(r=0.999 1),平均加样回收率分别为100.21%(RSD=1.94%)、97.50%(RSD=2.50%)、100.38%(RSD=2.46%)、98.54%(RSD=2.40%)、97.45%(RSD=3.14%)。结论 测定了4种来源的甘肃蚤缀样品中5个化合物的量,该方法分离度好、快速、简便,重现性佳。     

人参糖肽的结构及其对Aβ25-35处理PC12细胞的抗凋亡作用

目的：研究人参糖肽的结构,探讨其对β淀粉样蛋白_25-35（Aβ_25-35）处理PC12细胞凋亡的保护作用,为开发人参抗阿尔茨海默病（AD）药物奠定理论基础。方法：采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）与Q ExactiveOrbitrap质谱联用分析人参糖肽结构。将鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞分为6组,加入含不同浓度（0、6.25、12.50、25.00、50.00和100.00 μmol·L^-1） Aβ_25-35的培养基,采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法测定PC12细胞的存活率。将PC12细胞分为空白对照组、模型组和给药组,模型组加入含有50.00 μmol·L^-1Aβ_25-35的培养基,给药组加入不同浓度（0.03、0.10、0.30和1.00 g·L^-1）人参糖肽和含有50.00 μmol·L^-1Aβ_25-35的培养基。采用CCK-8法测定PC12细胞的存活率,采用Annexin Ⅴ-FITC/PI法测定人参糖肽和Aβ_25-35处理后PC12细胞的凋亡率。将PC12细胞分为空白对照组、模型组和人参糖肽给药组,模型组加入含有50.00 μmol·L^-1Aβ_25-35的培养基,给药组加入不同浓度（0.10和0.30 g·L^-1）人参糖肽和含有50.00 μmol·L^-1Aβ_25-35的培养基,采用流式细胞术测定不同细胞周期PC12细胞的百分比。结果：人参糖肽结构分析得到肽链为NLSHYHSGSS、糖基为N1-HexNAc,肽链为SGSSSSSSSEDDGMGR、糖基为S6-HexNAc等20多个人参糖肽结构。当Aβ_25-35浓度为50 μmol·L^-1时,PC12细胞存活率为（55.45±2.34）%;与空白对照组比较,不同浓度Aβ_25-35处理组PC12细胞存活率明显降低（P<0.01）。与空白对照组比较,模型组PC12细胞存活率明显降低（P<0.01）;与模型组比较,给药组细胞存活率明显升高（P<0.05）。与空白对照组比较,模型组PC12细胞凋亡率升高（P<0.01）;与模型组比较,给药组细胞凋亡率降低（P<0.05）。与空白对照组比较,模型组S期PC12细胞百分比升高（P<0.05）;与模型组比较,给药组S期PC12细胞百分比降低（P<0.05）。结论：利用质谱法分析得到人参糖肽结构。人参糖肽可有效抑制Aβ_25-35处理PC12细胞的凋亡,具有神经细胞保护作用,其抗凋亡活性作用可能与抑制细胞S期阻滞有关。     

HPLC测定阿胶益寿口服液中2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的：建立阿胶益寿口服液中2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量测定的HPLC方法。方法：用AE.Kromasil-C18柱（150mm×4.6mm,5μm）,乙腈-水（15.8∶84.2）为流动相,检测波长：320nm,柱温28℃,流速1.0ml·min-1。结果：在0.0956～0.382μg,进样量与峰面积线性关系良好,r=0.9996（n=5）。平均回收率98.8%,RSD为1.5%。结论：本法准确度高,专属性好,简便快捷,可作为该成分含量测定的方法。     

海金子中柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁的分离及含量测定

目的 研究海金子70％乙醇提取物的化学成分;建立HPLC测定海金子中柽柳素-3-O-芸香糖苷、芦丁的含量.方法 采用硅胶柱色谱进行分离纯化,利用波谱技术、色谱技术进行结构鉴定.采用Agela Technologies Promosil C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4％磷酸水溶液(34∶66),流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为40℃对不同采集时间、不同部位的海金子中的柽柳素-3-O-芸香糖苷、芦丁进行含量测定.结果 分离鉴定了2个黄酮苷类化合物,分别为柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁.柽柳素-3-O-芸香糖苷在0.254～1.145 μg范围、芦丁在0.341～1.533 μg范围与其峰面积呈良好的线性关系;平均回收率:柽柳素-3-O-芸香糖苷为100.08％,RSD为1.09％(n=6),芦丁为99.89％,RSD为1.41％(n=6).结论 两种化合物首次从该植物中分离得到.所建立的HPLC简便、准确、重现性好,结果准确可靠,可用于海金沙中柽柳素-3-O-芸香糖苷和芦丁的测定.     

HPLC测定舒神灵胶囊中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的:采用高效液相色谱法测定舒神灵胶囊中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。方法:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-水(20∶80)为流动相;流速为1.0 ml/min;检测波长为320 nm。结果:2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷线性范围为5.95~95.20μg/ml(r=0.999 3,n=5),平均回收率为99.57%,RSD=0.67%。结论:该方法简便、快捷、准确,可用于舒神灵胶囊的质量控制。