间期荧光原位杂交技术检测恶性血液病的11q23/MLL基因重排

目的分析伴有11q23／MLL基因重排的恶性血液病的细胞遗传学特点,探讨荧光原位杂交技术（FISH）在诊断及鉴定恶性血液病11q23／MLL基因重排中的价值。方法用间期FISH分析11q23／MLL基因易位细胞的30例恶性血液病患者的核型特征,用MLL双色分离探针绿色标记在（5′MLL,光谱绿）和（3′MLL,光谱桔红）。结果应用常规细胞遗传学及间期FISH分析白血病患者30例,结果显示11q23＋／MLL＋患者9例（30．0％）,12q23-／MLL＋患者4例（13．3％）,11q23＋／MLL-患者2例（6．7％）,11q23-／MLL-患者15例,检测到部分病例染色体核型分析与间期FISH方法检测11q23异常与MLL基因重排不一致。结论FISH在检测11q23／MLL基因重排方面与传统的常规细胞遗传学相比具有检出率高的优势,能更有效、直观地分析恶性血液病的染色体异常,对于恶性血液病的诊断以及异常染色体的检出具有广泛的应用前景。     

常规细胞遗传学分析和荧光原位杂交方法检测白血病11q23/MLL基因重排

本研究比较常规细胞遗传学（conventional cytogenetics,CC）分析,间期荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）技术及连续R显带后FISH（sequential R-banding and FISH）检测混合系列白血病（mixed lineage leukemia,MLL）基因重排的应用价值.应用常规细胞遗传学及间期FISH分析我院白血病患者37例,结果显示11q23＋/MLL＋患者10例,11q23^-/MLL＋患者2例（5.4%）,11q23^＋/MLL-患者3例（8.1%）,11q23^-/MLL-患者22例.部分病例CC与间期FISH方法检测11q23/MLL基因重排得到了不一致的结果.对6例患者进行连续R显带后FISH分析后,对照核型和FISH图都能清楚地看到MLL基因易位涉及的染色体.结论：为了给出准确的诊断,在检测11q23/MLL重排时需要进行常规细胞遗传学和间期FISH测定并结合两者结果来评定,必要时需做R显带后FISH或进一步的分子生物学分析.     

MLL基因重排急性白血病患儿的临床和生物学特点研究

目的对儿童急性白血病进行混合谱系白血病(mixed lineage leukemia，MLL)基因重排的临床和实验研究：方法应用MLL双色荧光原位杂交(FISH)基因探针进行双色FISH，以13对引物行多重RT—PCR检测融合基冈，并联合染色体R带核型分析及流式细胞仪免疫表型检测，对298例儿童急性白血病中16例含有MLL基因重排患儿进行分析：结果MLL基因重排的白血病在儿童急性白血病中占5.4％，而在婴幼儿白血病中占56．3％；对106例患进行多重RT—PCR，检测到涉及MLL基因重排11例，其中MLL／AF42例，MLL／AF61例，MLL／AF6、MLI／ELL合并MLL／AFX或HOX11各1例，MLL／AF92例，MLL／AF101例，MLI／ELL2例。串联重复dup11q231例，HOX活化1例；27例进行了FISH检测，发现9例有MLL重排，其阳性率为36．0％；16例MLL基因重排患儿中14例(87．5％)有克隆性染色体异常，其中11例累及11号染色体[t(4；11)2例，t(6；11)、t(8；11)、t(7；8；11)、t(9；11)各1例， 112例，11q-3例]；16例MLL基因重排患儿中11例为B系ALL，以B祖细胞或前B细胞白血病为主，5例为急性单核细胞白血病，其中3例有CD7和CD2淋系抗原表达；16例MLL基因重排患儿中8例接受治疗，7例获得完全缓解。结论多重RT—PCR和FISH联合是检测MLL重排最精确和灵敏的方法，MLL基冈重排中包括易位、缺失和重复。MLL基因重排的检测对儿童急性白血病预后判断和治疗方案的选择具有重要意义，并且对WHO分型将其单独列为11q23／MLL白血病提供了有力的依据。     

MLL基因重排阳性儿童急性白血病的临床和实验研究进展

11q23染色体异常是造血系统恶性肿瘤中的常见改变,此异常导致位于11q23的混合谱系白血病(Mixed lineage leukemia,MLL)基因发生重排.此类白血病具有独特的临床和生物学特征,对常规化疗不敏感,完全缓解率低,生存期短[1].目前WHO在对白血病的重新分类中将其单独列为11q23/MLL白血病.我们从MLL基因结构功能及其异常形式、携带该易位儿童急性白血病(AL)的临床和实验室特征以及治疗方面做一综述.     

多重荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病急变期复杂核型异常

目的 探讨多重荧光原位杂交（M—FISH）技术检测慢性粒细胞白血病急变期（CML—BC）复杂核型异常（CCA）的价值。方法 应用M—FISH技术对26例常规细胞遗传学（CC）分析显示CCA的CML—BC患者进行检测分析。结果 除标准t（9；22）（q34；q11）外，通过M—FISH技术共检出69种结构异常，其中10种为平衡易位，59种为不平衡易位，不平衡易位包括1种插入、6种缺失及52种易位及衍生染色体；另外还检出23种数目异常。26例CML—BC患者中所有染色体均涉及异常，除标准t（9；22）外异常最多涉及的染色体是17号、2号、8号及16号。1例标本M—FISH未检出CCA，6例标本检出了CC分析未发现的异常核型。M—FISH明确了16种CC分析未确定的异常，纠正了5种CC分析识别错误的异常，还发现了CC分析未检出的35种染色体易位，其中der（9）t（16；6；9；22）和der（18）t（16；18；19）在既往文献中未见报道。结论 对伴有CCA的CML—BC以M—FISH技术可以发现和纠正CC分析漏检及误检的染色体异常。伴有CCA的CML—BC与CML常见的附加异常不同。     

急性混合细胞白血病伴t(12;22)一例报告--附文献复习

目的报道1例伴有t（12;22）（p13;q12）的急性混合细胞白血病.方法骨髓细胞经24h短期培养后按常规方法制备染色体,采用R显带技术进行细胞遗传学分析.应用抗生物素蛋白生物素复合物（ABC）法和单克隆抗体检测白血病细胞的表面抗原;12号和22号全染色体涂染探针分别以绿色和红色2种荧光素标记后进行双色荧光原位杂交（FISH）涂染检测.结果患者的临床表现和实验室检查均符合急性混合细胞白血病.免疫表型分析髓系和淋系标记均呈阳性;染色体核型为46,XX,t（12;22）（p13;q12）[6]/46,XX,idem,der（2）[2]/46,XX[12].骨髓中期细胞经双色FISH证实12号染色体短臂和22号染色体长臂之间发生了易位.结论t（12;22）（p13;q11-13）是恶性血液病中少见的染色体异常.t（12;22）患者具有独特的临床、细胞遗传学和分子生物学特点.该染色体异常对急性白血病的预后判断价值仍需进一步观察.     

多重荧光原位杂交检测慢性淋巴细胞白血病复杂核型异常

目的探讨多重荧光原位杂交（M-FISH）技术检测慢性淋巴细胞白血病（CLL）复杂核型异常（CCA）的价值。方法应用M—FISH技术对6例常规细胞遗传学（CE）显示CCA的CLL进行研究。结果M-FISH检测仅有1例检出了CFA克隆；1例检出非复杂核型的异常克隆及1个CCA细胞；1例检出3个不同的染色体变异细胞。其余3例M—FISH未检出异常核型分裂象。6例CLL的核型分析中共发现平衡易位10种；非平衡易位9种，其中der（14）t（16；14；9）是既往文献未报道的易位。结论对伴有（CCA的CLL以M—FISH技术可以发现和纠正CC漏检及误检的染色体异常。单个细胞核型异常在CLL中多见，     

混合系白血病基因重排的检测方法及其临床意义

为了研究混合系白血病（MLL）基因重排在急性白血病（AL）中的发生率、融合基因类型及其临床意义，用荧光原位杂交技术检测60例急性白血病（AL）患者MLL基因重排，对于MLL基因重排阳性的患者，用巢式RT—PCR方法检测MLL基因重排形成的6种常见融合基因类型。结果表明：7例AL患者有MLL基因重排，发生率为11．67％，其中2例为急性髓细胞白血病M5（AML—M5），融合基因均为MLL／AF9；男5例为B细胞系急性淋巴细胞白血病（B—ALL），其中2例融合基因为MLL／ENL，1例MLL／AF4，2例未扩增出融合基因产物。结论：荧光原位杂交技术是检测ALMLL基因易位重排的快速、特异、灵敏的方法，巢式RT-PCR是检测MLL基因重排产生的融合基因类型的简便可行的方法；MLL基因重排的检测对急性白血病预后判断和治疗方案的选择具有重要意义。     

TET2突变检测在血液肿瘤中的临床价值

1 TET2基因的起源与结构 TET家族中包括TET1、TET2及TET3。TET1位于染色体10q22,在急性髓系白血病（AML）相关的染色体易位t（10;11）（q22;q23）中作为混合性白血病（MLL）的融合配体出现在少数AML中。     

伴复杂核型异常的髓系恶性血液病8号染色体异常分析

为研究伴复杂核型异常（complex chromosome abnormalities，CCA）的髓系恶性血液病的8号染色体异常，采用常规染色体分析和多重荧光原位杂交技术检测81例伴CCA的髓系恶性血液病患者的染色体异常，其中急性髓系白血病（AML）25例、慢性髓系白血病（CML）35例和骨髓增生异常综合征（MDS）21例。结果表明：81例标本中CCA涉及所有染色体，而8号染色体异常发生率为35．8％（29／81），其中AML为56％（14／25）、CML为28．6％（10／35）、MDS为23．8％（5／21），CML加速期、急变期发生率分别为20％（1／5）、33．3％（9／27）。29例伴8号染色体异常的髓系恶性血液病中有15例为非平衡易位，占51．7％。结论：8号染色体异常是伴CCA的髓系恶性血液病中常见的染色体异常，可能与疾病进展相关，多为不平衡性易位。     

Early G2/M checkpoint failure as a molecular mechanism underlying etoposide-induced chromosomal aberrations

Topoisomerase II (Topo II) inhibitors are cell cycle-specific DNA-damaging agents and often correlate with secondary leukemia with chromosomal translocations involving the mixed-lineage leukemia/myeloid lymphoid leukemia (MLL) gene on chromosome 11 band q23 (11q23). In spite of the clinical importance, the molecular mechanism for this chromosomal translocation has yet to be elucidated. In this study, we employed 2-color FISH and detected intracellular chromosomal translocations induced by etoposide treatment. Cells such as ataxia-telangiectasia mutated-deficient fibroblasts and U2OS cells, in which the early G2/M checkpoint after treatment with low concentrations of etoposide has been lost, executed mitosis with etoposide-induced DNA double-strand breaks, and 2-color FISH signals located on either side of the MLL gene were segregated in the postmitotic G1 phase. Long-term culture of cells that had executed mitosis under etoposide treatment showed frequent structural abnormalities of chromosome 11. These findings provide convincing evidence for Topo II inhibitor-induced 11q23 translocation. Our study also suggests an important role of the early G2/M checkpoint in preventing fixation of chromosomal abnormalities and reveals environmental and genetic risk factors for the development of chromosome 11 translocations, namely, low concentrations of Topo II inhibitors and dysfunctional early G2/M checkpoint control.     

儿童急性白血病MLL基因的检测及临床意义

目的对儿童急性白血病(acute leukem ia,AL)MLL基因重排进行临床和实验研究。方法采用荧光原位杂交(FISH)和多重RT-PCR技术,联合染色体R带核型分析及流式细胞仪免疫表型检测,对27例儿童AL进行分析。结果25例儿童AL中的9例(36.0%)有MLL重排,ALL中的发生率为4.0%,AML中的发生率为3.7%。多重RT-PCR检测到MLL易位产生的融合基因4例,分别为MLL/AF4 2例、MLL/AF9和MLL/AF10各1例;27例白血病患儿进行了染色体核型分析,22例(81.5%)有克隆性染色体异常。在MLL重排中ALL均为B系ALL,AML均为M5b。结论MLL基因重排可能与儿童急性单核细胞白血病和B细胞系ALL有关。     

MLL基因重排在成人急性白血病中的检测和临床特征研究

混合系白血病(MLL)发生基因重排在成人急性白血病中相关研究较少。本研究通过3种技术组合检测MLL基因重排,探究其在成人急性白血病中的发生率、伙伴基因类型、伴MLL基因重排的急性白血病临床特征和预后并评估该组合检测的临床应用价值。对183例成人急性白血病患者采用常规细胞遗传学、分离信号FISH和多重巢式PCR 3种技术组合检测MLL基因重排。结果显示,成人急性白血病中MLL基因重排发生率低(8.2%);重排类型在急性淋巴细胞白血病(ALL)中MLL-AF4最常见,急性髓系白血病(AML)中MLL-AF6和MLL-AF9最常见;MLL基因重排患者髓外浸润占40%,诱导治疗30 d内完全缓解率33.3%,3个月复发率和6个月生存率各为50.0%和50.0%。结论:本研究中常规细胞遗传学技术对MLL基因重排的漏检率高达60%,因此常规细胞遗传学,分离信号FISH和多重巢式PCR结合检测MLL基因重排具有重要的预后意义和指导临床治疗价值。     

23例伴9号染色体短臂异常的急性淋巴细胞白血病临床研究

目的研究伴9号染色体短臂（9p）异常的急性淋巴细胞白血病（ALL）的临床及分子细胞遗传学特征。方法对23例伴9p异常的ALL患者进行回顾性分析其临床特征及预后；应用荧光原位杂交（FISH）技术鉴定其累及的基因。结果9p异常ALL占同期ALL的5．26％。有免疫学资料的21例患者，4例为T系ALL；17例为B系ALL，其中早前B细胞型3例。11例以del（9p）为主要遗传学特征，其余12例9p异常包括t（9p）或del／add（9p）作为继发或伴发于其他染色体异常的复杂核型。经FISH检测发现14例患者有p16基因缺失。与核型正常组患者相比，del（9p）患者更易累及脾脏，且生存期短。结论9p异常是一个非随机的染色体改变且极易累及p16基因。伴有9p缺失的患者具有独特的临床特征与不良的预后。     

成人急性淋巴细胞白血病的分型探讨

目的 研究成人急性淋巴细胞白血病(ALL)生物学特征,分析WHO 2008年ALL分类的变化.方法 应用流式细胞术、R显带常规核型分析法、RT-PCR技术对初诊成人ALL患者进行免疫学、细胞遗传学、分子生物学检测.结果 ①共412例初诊成人ALL患者,男性239例,女性173例.免疫表型可分析病例410例,B系357例...     

多重RT-PCR技术联合染色体核型分析在儿童急性淋巴细胞白血病诊断分型中的应用

目的　研究多重逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术联合染色体核型分析在急性淋巴细胞白血病 (ALL)诊断分型中的价值。方法　采用多重RT PCR技术 ,染色体R或G显带技术对 5 0例儿童ALL进行分析。结果　 5 0例ALL患儿中 18例 (36 .0 % )分别具有 11种融合基因 ,包括E2A/PBX1、TEL/AML1、TLS/ERG、MLL/AF4、MLL/AF9、MLL/AF10、MLL/AFX、MLL/AF6、MLL/ELL、TAL1D、HOX11。在接受染色体检查的 4 8例ALL患儿中 ,染色体异常有 2 4例 (5 7.1% ) ,其中染色体数目和缺失异常为 18例 ,染色体易位 6例。多重RT PCR和核型分析联合使ALL的遗传学异常检出率增至 70 % (5 0例中 35例 )。结论　多重RT PCR和染色体核型分析两种方法相结合 ,可以相互补充 ,从而提高了ALL患儿遗传学异常的检出率 ,为儿童ALL的诊断、分型和预后判断提供可靠依据。