芽孢杆菌BI1的鉴定及其抑菌性研究

目的 对本实验室分离得到芽孢杆菌B11进行鉴定.方法 将该菌株的16S rDNA基因序列与GeneBank中已鉴定的16S rDNA序列对比,并结合生理生化实验综合分析.结果 菌株B11与枯草芽孢杆菌亲缘关系最为接近,16S rDNA基因相似性达到99.6%,生理生化实验结果与标准枯草芽孢杆菌一致.结论 将芽孢杆菌B11鉴定为枯草芽孢杆菌.     

固体介质对凝结芽孢杆菌产芽孢的影响

目的 研究固体介质对凝结芽孢杆菌产芽孢的影响.方法 采用基础培养基(酵母粉0.07%、蛋白胨0.1%、葡萄糖0.1%、(NH4)2SO40.02%、MgSO40.02%、K2HPO40.1%),45℃静置培养凝结芽孢杆菌.12h加入纱布或木屑,48h观察芽孢产量.在基础培养基的基础上单因素增加酵母粉,葡萄糖,蛋白胨的含量,分别观察芽孢的产量.结果 基础培养基中凝结芽孢杆菌生长良好,但不产生芽孢,加入木屑或纱布则可产较多芽孢.以木屑为固体介质,多加入酵母粉的培养基产芽孢量较基础培养基略高,其他培养基对芽孢的生成均有刺激作用,但效果不明显,对照组均不产生芽孢.以纱布屑为固体介质,实验组除高葡萄糖含量的培养基外,均有明显的刺激作用,对照组均不产生芽孢结论 固体介质对凝结芽孢杆菌产芽孢具有促进作用,其促进作用与培养基的成分及固体介质的种类有关.     

核黄素对双歧杆菌和蜡样芽孢杆菌增殖的影响

目的　探讨不同浓度核黄素对双歧杆菌、蜡样芽孢杆菌生长的影响。方法　应用常规细菌定量培养及革兰染色镜检技术 ,观察 1、0 5、0 2 5 g·L-1的核黄素对双歧杆菌和蜡样芽孢杆菌增殖生长的影响。结果　① 1g·L-1核黄素组 ,在 4 8h后双歧杆菌活菌数增加约 10～ 10 0倍 ;0 5和 0 2 5g·L-1核黄素组 ,在 72h内活菌数增加约 10～ 390倍 ,镜检示双歧杆菌链的长度亦增加。② 0 5g·L-1核黄素组 ,36h后蜡样芽孢杆菌活菌数增加 ;0 2 5 g·L-1核黄素组 ,在 72h内活菌数均增加 ,约 0 5～ 315倍 ,链长度增加 ,芽胞形成时间延迟。 (3) 4℃存放 ,悬液加核黄素 (0 5g·L-1)可提高双歧杆菌和蜡样芽孢杆菌 6mon内的存活率。结论　核黄素可促进双歧杆菌、蜡样芽孢杆菌的增殖 ,在一定范围内存在剂量依赖关系 ,并可提高悬液中双歧杆菌和蜡样芽孢杆菌的长期存活率     

蜡样芽孢杆菌食物中毒调查报告

20 0 2年 7月 9日 17:4 5接到 4名患者举报 :进食某面皮摊上购买的担担面、面皮后出现腹痛、腹泻、恶心、呕吐、头晕等症状。经流行病学调查 ,实验室检查、临床症状分析为一起由蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒。现将调查结果报告如下。1　流行病学调查7月 9日 14 :30 ,4名患者同时食用位于敦化坊二机宿舍门口某流动摊贩出售的担担面、面皮。 30～ 6 0 min内分别出现腹痛、腹泻 ,每天平均 2次 ,为水样便 ,无里急后重感。恶心、呕吐每天 2～ 8次不等 ,并伴有头晕症状。现场调查发现有同一批担担面、面皮 ,但感观无变质现象。在调查4名患者 72 h各…     

蜡样芽孢杆菌食物中毒研究近况

蜡样芽孢杆菌(以下称蜡样菌)是一种需氧芽孢杆菌、能腐败食物的肠道致病菌。自然界中分布极广,常存于空气、土壤、灰尘、水、植物中,在食品、海产品、人的粪便中也可以查出。蜡样菌引起的食物中毒近年来有上升的趋势。     

蜡样芽孢杆菌与类似菌鉴别方法研究

目的:验证和完善蜡样芽孢杆菌与类似菌鉴别方法,降低蜡样芽孢杆菌检验结果假阳性率。方法:按照国标GB/T4789.14-2003对蜡样芽孢杆菌标准菌株与类似菌(苏云金芽孢杆菌,蕈状芽孢杆菌)参考菌株以及我们从食品中分离出的蜡样芽孢杆菌可疑菌株从菌体和菌落形态、生化性状、根状试验、蛋白质毒素晶体试验等几个方面进行鉴别。结果:10株可疑菌中只有1号株菌为蜡样芽孢杆菌。结论:补充和完善后的"蜡样芽孢杆菌与类似菌鉴别方法"能有效地鉴别蜡样芽孢杆菌与类似菌,根状试验和蛋白质毒素晶体试验是最关键的鉴别手段,能明显地降低蜡样芽孢杆菌检验结果假阳性率。     

三七药材中芽孢杆菌的热激活研究

目的 ：探讨三七药材在常规灭菌工艺中可能会出现芽孢杆菌的热激活现象,为下一步三七药材灭菌工艺的研究奠定理论基础。方法 ：参照2020年版《中国药典》四部通则1105的方法,结合传统生化法和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法（MALDI-TOF-MS）对三七药材中的污染菌进行分型和鉴定;参照2020年版《中国药典》四部通则9208的相关热激活参数对三七药材进行处理,并对需氧菌总数进行计数,考察是否存在热激活现象。结果 ：三七药材中污染菌多为芽孢杆菌属,如枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等。与阴性对照组相比,三七药材经90℃、30min热激活处理后的需氧菌总数增幅达147倍之多。结论 ：芽孢杆菌在三七药材污染菌中占比较大,且存在芽孢热激活现象。制药企业在制定灭菌工艺时,应综合考虑,制定行之有效的灭菌方案。     

枯草芽孢杆菌guaB基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

克隆枯草芽孢杆菌guaB基因,构建穿梭表达载体,使其在大肠杆菌中获得表达,为构建鸟苷高产工程菌奠定基础。从枯草芽孢杆菌JSIM-G-518基因组扩增出guaB基因,将其连接到pMD19-T上,得到重组质粒pMD-guaB,进行测序和Blast比对分析。该重组质粒经PstI、BamHI双酶切,获得guaB片段连接至pHP13载体上,构建穿梭表达载体pHP13-guaB,并采用双酶切电泳进行鉴定。将该载体转化入大肠杆菌BL21中,通过SDS-PAGE电泳检测guaB基因的表达效果。克隆的guaB基因长度为1 510 bp,与GenBank登录的枯草芽孢杆菌同源性为99%,编码500个氨基酸,确认为控制IMP脱氢酶的基因。穿梭载体pHP13-guaB经双酶切后产生1 510 bp和4.9 kb两个期望的目的条带。SDS-PAGE结果显示表达产物相对分子质量的大小为52.9 k,与预期的IMP脱氢酶分子量一致,且该目的蛋白的表达效果比对照组更明显。论文成功实现了枯草芽孢杆菌guaB基因在大肠杆菌中的表达。     

巨大芽孢杆菌原生质的产生和紫外线诱变

本文报道了巨大芽孢杆菌原生质体的制备和再生。并用紫外线对原生质体进行了诱变处理,从中筛选出几株产酸率高于亲代的菌株。本文还研究了芽孢形成和古龙酸产量的关系;所有的高产菌株或能形成耐热的芽孢,或不耐热的内孢子,而所有低产菌株均不能形成芽孢或内孢子。可能巨大芽孢杆菌在形成芽孢的过程中,产生出某些物质,促进了2-酮基古龙酸的生成。     

显微定量法测定中成药中人参的含量

目的:制定人参在参苓白术散中的显微定量标准.方法:用显微定量法,以人参的草酸钙簇晶为显微特征物,对参苓白术散中的人参进行测定.结果:人参含量与每毫克特征数呈显著的线性正相关,回归方程为y=17.48x+1.31×10-3(γ=1.00,α=0.05).结论:显微定量法测定参苓白术散中人参的含量是可行的,结果可靠.     

中药秦艽中总生物碱的含量测定

A method for determining the total alkaloids of the Chinese drug Tsingjiu (秦艽) (Gentiana macrophylla) based on titration with silicotungstic acid was found. Weigh out accurately 2 g of pulverized (80 mesh) sample. Macerate it in a glass-stoppered flask with 50 ml of a mixture of chloroform-methanol-concentrated ammonia water (75: 25: 5) for 48 hours with occasional shaking. Take exactly 25 ml of the filtrate, evaporate and dissolve the residue in 0.6 N acetic acid, Impurities in the acetic acid solution are removed with lead acetate and the excess of Pb⁺² is removed by sodium sulphate. The clear filtrate is adjusted to about 50 ml with an acidity at about 0.5 N. The solution is titrated with 0.01 M silicotungstic acid, using malachite green as an outside indicator. Results are calculated on gentianine (C₁0H₉O₂N).     

应用皂甙指数测定中成药中总皂甙的含量

本文采用皂甙指数法,对中成药牛黄解毒片中的总皂甙进行了含量测定方法的探讨,该方法快速简便,测定结果可靠。     

川白芷中香豆素类成分的反相高效液相色谱分析

本文用反相高效液相色谱法分离测定了川白芷的根、茎、叶、尾根及种子中的欧前胡素、异欧前胡素和氧化前胡素等三种有效成分。在键合相0DS柱上,以甲醇一水(70:30)为流动相,紫外检测,样品中各组分分离良好,用微处理机按外标法定量,变异系数≤3.33%,回收率97.91—101.36%。     

十二种治疗心血管病的中成药中二十种微量元素的含量分析

本文用原子吸收分光光度法、电感偶合等离子发射光谱法和极谱法分析了十二种治疗心血管病的中成药中二十种微量元素(铜、锌、铁、锰、镁、铝、钙、钛、锶、钡、镉、铅、钴、镍、磷、钾、钼、铬、硒、汞)的含量,并对结果进行了讨论。     

4种中成药中微量麝香酮的毛细管气相色谱测定

建立了麝香保心丸,心宝丸,心丹和克癀胶囊等４种成药中中微量麝香酮的毛细管气相色谱测定法。样品采用Ｓｅｐ－Ｐａｋ硅胶微柱净化处理。麝香酮的进样量在０．００４２２－０．４２２μｇ范围内峰面积与进样量的相关系ｒ为０．９９９７。４种中成药的回收率分别为９８．８％、９７．７％、９８．６％和１０１．８％。     

黄柏及中成药中小檗碱和巴马亭的高效液相色谱法测定

本文以正相高效液相色谱法,用窗口图解技术对色谱条件进行了优化。对黄柏及其中成药中的有效成分——小檗碱、巴马亭的提取、测定条件、标准曲线进行了研究。并对两种含黄柏的中成药样品进行了分析。其中小檗碱的回收率均在97%以上,巴马亭的回收率均在96%以上。     

反相高效液相色谱法测定牛黄类中成药中胆汁酸的含量

反相高效液相色谱法测定牛黄类中成药中胆汁酸的含量倪坤仪，王建，陈健，郁建，屠树滋（中国药科大学２１０００９）含牛黄的中成药种类很多，在医疗中具有广泛的用途。中药牛黄中主要成分为胆汁酸和胆红素。本文主要研究用ＨＰＬＣ法测定牛黄以及含牛黄中成药中胆汁酸的...     

HPLC和HPCE法测定罂粟壳中3种生物活性生物碱

目的：建立中药罂粟壳中3种生物活性生物碱吗啡、可待因和罂粟碱的含量测定法,根据样品测定结果提出其质量评价的建议。方法：HPLC法和HPCE。结果：用HPLC及HPCE法测定了罂粟壳12个样品中3种生物碱含量,并根据两种方法含量测定的结果建议罂粟壳所含3种生物碱以吗啡含量不低于0.04％,可待因含量不低于0.02％以及罂粟碱含量不低于0.01％为宜。结论：本文建立的HPLC及HPCE含量测定法均具有快速,简便,灵敏,分离度好等特点,适用于罂粟壳中3种生物碱的分离测定。     

秦艽生物碱的薄层色谱扫描测定

用CS-930型双波长薄层扫描仪探讨适合秦艽生物碱定量测定条件。以乙醚—丙酮为展开剂,在硅胶GF₂₅₄板上分离了秦艽甲素和丙素,分别用荧光熄灭和荧光法检出斑点后扫描测定。扫描参数:秦艽甲素λ_s255nm,λ_R280nm;秦艽丙素λ_s300nm,λ_R330nm;反射法锯齿扫描;SX=7;外标一点法;△y=0.2。得到两条通过原点直线。秦艽甲素及丙素的回收率分别为102.75%及100.42%,变异系数分別为2.48%及0.22%。用此法测定了中药秦艽中甲素和丙素的含量;对比了不同产地、同一产地野生和种植、地上和地下部分药材的生物碱含量,为开发秦艽资源提供信息。