子宫平滑肌和胎膜内皮素受体-1表达与分娩发动的关系

目的：探讨子宫平滑肌和胎膜内皮素受体-1（ETa—R）表达水平与分娩发动的关系。方法：分别于术中取正常晚孕临产组和未临产组（各30例）孕妇子宫平滑肌及胎膜,采用免疫组化SABC法测定子宫平滑肌和胎膜ETa—R的表达,并通过计算机图像分析系统进行定量分析。结果：正常妊娠临产前后子宫平滑肌细胞胞膜、胞质均有ETa—R表达,且临产后其表达范围及强度均较临产前增强,差异均有统计学意义（P〈0．01）;胎膜组织中ETa—R主要定位于合体滋养细胞和中间滋养细胞,ETa-R表达强度在临产前后没有明显变化（P〉0．05）,但临产后其阳性细胞率较临产前增强（P〈0．01）。结论：分娩发动前、后子宫平滑肌及胎膜组织中ETa—R表达水平升高,并与分娩发动有密切关系,是诱发子宫收缩的重要因素。     

不同临产状态的子宫平滑肌组织中与#br# NF-κB相互作用差异蛋白质的分析

目的：分析不同临产状态子宫下段平滑肌组织中与NF-κB相互作用的差异蛋白质,为分娩机制的研究提供新的实验及理论依据。方法：分别采集足月未临产、自然临产和前列腺素E2栓诱导临产(药物临产组)的孕妇子宫下段平滑肌组织。Western印迹验证NF-κB P65表达;联合免疫共沉淀、SDS-PAGE、电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)和蛋白质生物信息分析等技术,分析不同临产状态子宫平滑肌组织中与NF-κB相互作用的差异蛋白质,并利用Western印迹进行验证。结果：人类临产前后子宫下段平滑肌组织中NF-κB表达均为阳性,与NF-κB P65相互作用的差异蛋白,自然临产前后鉴定出9个,药物临产前后鉴定出5个,其中不同临产状态共同差异表达的蛋白3个,分别为热休克蛋白70(heat shock 70 kD protein,HSP70)、膜联蛋白A6和结蛋白,经Western印迹验证与蛋白表达相符。这些差异蛋白分别属于分子伴侣、信号转导、细胞骨架和能量代谢相关的蛋白质。结论：子宫平滑肌细胞中NF-κB通过与分子伴侣、信号传导、细胞骨架和能量代谢等相关的多种蛋白质相互作用,参与分娩的启动或调节。     

临产前后妊娠组织MMP-9、TGF-β1表达变化意义的研究

目的 研究临产前后妊娠组织MMP-9、TGF-β1表达的变化，探讨它们在分娩发动中的作用。方法 应用免疫组化法检测子宫平滑肌、胎盘、蜕膜组织MMP-9和TGF-β1的表达。结果 临产组妊娠组织MMP-9的表达明显强于未临产组，而TGF-β1的表达明显弱于未临产组。TGF-β1与MMP-9的表达负相关。结论 （1）MMP-9、TGF-β1表达的变化在宫颈成熟中发挥重要作用。临产前后TGF-β1表达下降，解除对MMP-9的抑制，从而宫颈细胞外基质降解，宫颈成熟而临产。     

Calponin-1和Transgelin蛋白在临产前后 妊娠子宫平滑肌中的表达

目的：探讨调宁蛋白1（Calponin-1）和转凝蛋白（Transgelin）在临产前后子宫平滑肌组织中的表达及其在分娩发动中的作用机制。方法：选取14例初产妇的子宫体部及子宫下段平滑肌组织,分为未临产组及临产组。分别用免疫组织化学及Western印迹检测Calponin-1和Transgelin的表达水平。结果：临产组子宫体部和下段平滑肌组织Calponin-1的表达较未临产组明显升高（P<0.05）。临产组子宫体部平滑肌组织中Transgelin的表达较未临产组升高（P<0.05）,而子宫下段平滑肌组织中Transgelin的表达2组差异无统计学意义（P>0.05）。结论：子宫体部和下段平滑肌组织中的Calponin-1和子宫体部平滑肌组织中的Transgelin可能参与了子宫平滑肌收缩的调节,与分娩发动关系密切。     

应用cDNA微阵列筛选子宫平滑肌细胞收缩相关药物靶点

目的: 筛选临产活跃期子宫体部平滑肌差异基因表达谱,为子宫收缩相关药物靶点的选择提供候选基因.方法:应用8064条人类全长基因的cDNA表达谱芯片,分别筛选自然临产前后、缩宫素诱导临产前后和自然临产子宫体部与下段平滑肌的差异基因表达谱;用RT-PCR技术验证电压依赖性钙离子通道-L(voltage dependent calcium channel-L subtype,CACNA)的表达.通过生物信息学技术筛选具有药物靶点结构和功能的差异表达基因,作为子宫收缩相关药物候选的靶点.结果: 在自然临产前后、缩宫素诱导临产前后及自然临产后体部与下段的子宫平滑肌中,筛选出29条显著上调的基因.CACNA基因表达在RT-PCR与芯片实验中结果一致.在显著上调的29条基因中,神经调节素B受体(neuromedin B receptor,NMBR)基因和神经肽Y(neupeptide Y ,NPY)基因是具有宫缩相关药物靶点结构和功能的2种基因.在上述3种对比状态的子宫平滑肌细胞中,NMBR和NPY差异表达的比值分别为6.9,11.3,9.0和 6.0,29.8,2.9 .结论:不同临产状态的子宫平滑肌细胞共同表达上调的NMBR,可能是理想的、子宫收缩相关药物的候选靶点.     

ATP敏感性钾通道在人类妊娠不同状态的子宫平滑肌的表达

目的:探讨ATP敏感性钾通道(KATP )亚基在人类2种不同功能状态下(临产和未临产)子宫平滑肌中的表达情况。方法:实验分为足月临产组(TL组)和足月未临产组(TNL组),均12例。采用RT-PCR和实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测了人类2种妊娠状态下子宫平滑肌KATP 3种亚基mRNA的表达,并用免疫组织化学法检测KATP 3种亚基蛋白表达情况。结果:Kir6.1、Kir6.2、SUR2B mRNA在临产和未临产子宫平滑肌上均有表达,TNL组SUR2B mRNA的含量高于TL组(P<0.05);3种亚基的受体蛋白在人未临产和临产的子宫平滑肌细胞胞质中都有表达。结论:KATP在子宫平滑肌上有表达;在人类的妊娠子宫平滑肌上可能是通过SUR2B水平的改变起到调节平滑肌收缩的作用。     

中药治疗溴隐亭致大鼠流产模型中HB-EGF对滋养细胞增殖的影响

目的探讨中药治疗自然流产中滋养细胞肝素表皮生长因子(HB-EGF)、核增殖抗原(PCNA)的表达及相关性分析对滋养细胞增殖的影响。方法中药治疗溴隐亭致SD大鼠流产模型组,另设黄体酮、外源性泌乳素(PRL)治疗模型;单纯模型、正常孕鼠、非孕鼠为对照组,各12只;于孕12d处死观察妊娠结局。通过RT-PCR及免疫组化观察各组胎盘、子宫内膜HB-EGFmRNA及PCNA的表达,电镜观察微绒毛变化。结果中药与黄体酮、外源性PRL治疗组及正常孕鼠组胎盘HB-EGF和PCNA无显著差异,微绒毛结构正常;上述4组胎盘PCNA显著高于模型组,模型组微绒毛结构消失;模型组HB-EGF不表达,动情期子宫内膜HB-EGF显著高于上述4组;PCNA与HB-EGF正相关。结论(1)HB-EGF和早孕期滋养细胞的增殖明显相关。(2)中药可能通过自分泌或旁分泌增加滋养细胞HB-EGF表达,增强滋养细胞的增殖及侵入和对缺氧的耐受。     

足月妊娠临产前后羊水、母血和胎盘中TNF-的表达

目的探讨TNF-α在足月妊娠临产前后的变化和意义。方法将足月妊娠60例,分为临产组30例和未临产组30例,应用放射免疫法测定母血、羊水中TNF-α,免疫组化SABC法对胎盘中TNF-α进行定位和定量检测。结果临产组羊水中TNF-α水平较未临产组升高(P=0.000),胎盘中TNF-α定位于胎盘滋养细胞,且临产组较未临产组升高(P=0.000)。两组母血中TNF-α水平无变化(P=0.109)。结论临产后羊水、胎盘中TNF-α发生了变化,而母血中的TNF-α无变化,足月妊娠局部组织的TNF-α升高可能导致了分娩发动。     

妊高征患者胎盘滋养细胞Fas及FasL表达的研究

目的探讨妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘滋养细胞Fas及FasL的表达及意义.方法采用免疫组织化学法观察25例妊高征患者(妊高征组)胎盘Fas及FasL的表达及其与妊高征病情及新生儿出生体重的关系,并与25例正常妊娠妇女(正常妊娠组)比较.结果Fas及FasL主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞的胞膜及胞浆内.与正常妊娠组比较,妊高征组胎盘FasL表达显著降低(P＜0.05),轻度,中度,重度妊高征患者胎盘FasL表达,差异有显著性,而妊高征组滋养细胞表达Fas的水平却显著增加(P＜0.05)且轻度与中度及重度比较,差异有显著性.妊高征组胎盘Fas及FasL的表达与新生儿出生体重均无明显相关性.结论妊高征患者胎盘滋养细胞Fas及FasL表达失衡,通过免疫途径诱导滋养细胞发生级联凋亡反应,可能与妊高征的病因及病理过程有关.     

胰岛素样生长因子-Ⅱ在妊振高血压综合征胎盘滋养细胞浅浸润中的影响

目的检测胎盘滋养细胞中胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growthfactor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)及其mRNA的表达,研究IGF-Ⅱ对细胞滋养细胞浸润能力的影响,评估IGF-Ⅱ在妊娠高血压综合征(妊高征)中的作用.方法①用免疫组化法检测正常及妊高征孕妇的胎盘组织中IGF-Ⅱ的表达,并用计算机图像分析系统进行定量分析比较.②用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常妊娠及妊高征胎盘滋养细胞中IGF-ⅡmRNA表达水平,并通过紫外凝胶图像分析进行定量分析比较.③用滋养细胞体外侵袭试验研究IGF-Ⅱ对正常及妊高征胎盘细胞滋养细胞浸润能力的影响.结果①IGF-Ⅱ主要位于绒毛小叶的合体滋养细胞及细胞滋养细胞.此外,也存在于羊膜绒毛层,但染色较以上两种细胞明显减弱.经图像分析检测证实妊高征组胎盘IGF-Ⅱ的平均光密度显著低于正常妊娠组(P＜0.05).②妊高征胎盘滋养细胞IGF-ⅡmRNA的表达亦显著低于正常妊娠者(P＜0.05).③妊高征滋养细胞较正常滋养细胞的浸润能力显著降低.④IGF-Ⅱ能明显促进正常妊娠滋养细胞的侵袭能力;但对妊高征滋养细胞侵袭能力的影响不显著.结论IGF-Ⅱ可能在妊高征胎盘滋养细胞浅浸润过程中起重要作用.     

基于PI3K/Akt通路沉默miR-26b对妊娠期高血压胎盘滋养细胞增殖、凋亡的影响

目的 分析沉默微小RNA-26b（Micro RNA-26b,miR-26b）对妊娠期高血压胎盘滋养细胞增殖、凋亡及磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B（phosphoinositide-3 kinase/protein kinase B,PI3K/Akt）通路的影响。 方法 购买人胎盘滋养细胞,使用100 μmol/L N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导胎盘滋养细胞模拟妊娠期高血压微环境,分为细胞空白组（N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导胎盘滋养细胞）、过表达组（N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导胎盘滋养细胞后做miR-26b过表达质粒转染）、沉默组（N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导胎盘滋养细胞后做miR-26b沉默质粒转染）。检测3组细胞增殖、细胞凋亡、细胞PI3K/Akt通路蛋白表达情况。 结果 与空白组相比,过表达组miR-26b表达量升高,沉默组miR-26b表达量降低（P＜0.05）,说明miR-26b转染成功。过表达组24 h、48 h、72 h细胞增殖率逐渐降低,沉默组逐渐升高,3组在组间、时点间、组间·时点间差异均有统计学意义（P＜0.05）。与空白组相比,过表达组PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bcl-2蛋白表达量降低,Bax蛋白表达量升高（P＜0.05）;与空白组相比,沉默组PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bcl-2蛋白表达量升高,Bax蛋白表达量降低（P＜0.05）;与过表达组相比,沉默组PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bcl-2蛋白表达量升高,Bax蛋白表达量降低（P＜0.05）。 结论 沉默miR-26b可抑制妊娠期高血压胎盘滋养细胞凋亡、促进增殖,其作用机制可能与PI3K/Akt通路被激活相关。     

PPARα和IL-1βmRNA在妊娠期子宫肌层的表达及相关性

目的 探讨人类妊娠的不同阶段过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)和白细胞介素-1β( IL-1β)mRNA在子宫肌层的表达,以及在维持妊娠、发动分娩中的作用.方法 收集10例未孕(NP组)、10例未足月未临产(PL组)、20例足月未临产(TNL组)及20例足月临产(TL组)育龄期妇女的子宫平滑肌组织,采用荧光定量(real time) PCR技术检测PPARα及IL-1βmRNA的表达.以NP组作为对照,采用2△△CT法分析目的基因组间差异性表达.结果 PPARα在PL组的表达较其他各组均明显升高(P＜0.05),在TL组的表达降低(P＜0.05).IL-1β.在PL组的表达明显降低(P＜0.05),在TL组的表达与其他各组比较则明显升高(P＜0.05).TNL组PPARα及IL-1β的表达与NP组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).PPARα与IL-1β呈负相关(r=-0.767,P＜0.05).结论 PPARα及IL-1β在妊娠的不同时期均有明显变化.抗炎因子PPARα可能在维持妊娠中起重要作用,促炎因子IL-1ββ可能参与分娩发动.     

分娩过程中胎盘E2／P比值的变化及其与IL—1β刺激胎膜生成 …

为探讨分娩过程中胎盘组织雌、孕激素比值（Ｅ２／Ｐ）的变化，及其对白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）刺激治膜生成前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的影响，作者采用放射免疫法分别对胎盘组织液Ｅ２和Ｐ进行了测定，又采用酶联免疫法对胎膜增减液中的ＰＧＥ２含量进行了测定。结果显示：①分娩发动后的胎盘组织Ｅ２和Ｐ水平与临产前相比变化不明显，但ＥＦ２／Ｐ比值明显升高（ｐ〈０．０５）。分娩发动后胎膜组织ＰＧＥ２分泌量高于分娩     

脐血浆中硫化氢与分娩宫缩发动关系的探讨

目的:研究脐血浆中硫化氢(H2S)在分娩宫缩发动中的意义?方法:在新生儿娩出后采集脐带静脉血浆60例,根据分娩时有否发动宫缩分为两组,用敏感硫电极检测脐血浆中硫离子的浓度,并换算出H2S的含量;免疫组织化学方法检测胎盘中胱硫醚- γ -裂解酶(CSE)和胱硫醚-β-合成酶(CBS)的表达程度?结果:未发动宫缩组脐血浆中H2S含量高于发动宫缩组,差异有统计学意义(P = 0.017)?免疫组化见CSE表达于胎盘绒毛的细胞滋养层胞浆中,未发动宫缩组的表达明显高于发动宫缩组,CBS在两组中均未见表达? 结论:胎盘绒毛的细胞滋养层胞浆中含有CSE,不含CBS;脐血浆中H2S由细胞滋养层细胞参与调控生成;孕产妇脐血浆中H2S与宫缩发动有密切关系?     

粒单核细胞和粒细胞集落刺激因子在人胎盘滋养层细胞的定位

目的：确定脐血中高水平的造血因子的来源。方法：应用抗粒单核细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）和抗粒细胞集落刺激因子（ＧＣＳＦ）的单克隆抗体对１９例健康产妇足月分娩的胎盘组织的冰冻切片进行免疫组织化学染色。以耳鼻咽喉科摘取的鼻息肉组织做对照。结果：胎盘郎汉斯细胞及合体细胞呈现阳性反应，而阴性对照无反应。结论：胎盘滋养层细胞可能是产生脐血中ＧＭＣＳＦ和ＧＣＳＦ的主要细胞     

妊娠滋养细胞疾病研究进展

妊娠性滋养细胞疾病是来源于胎盘滋养细胞的一组疾病,包括葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、胎盘部位滋养细胞肿瘤和绒毛膜癌,是严重威胁女性健康的妇科疾病之一。随着化疗药物的应用,滋养细胞肿瘤治愈率达80%～90%,成为最早可经化疗治愈的恶性肿瘤之一。妊娠滋养细胞疾病的发生、发展是多因素参与、极其复杂的病理过程。现代医学研究对该疾病的发生机制有进一步的认识。     

地塞米松及黄体酮对未足月胎膜早破孕妇CRH及分娩发动的影响

目的探讨地塞米松及黄体酮对未足月胎膜早破的孕妇外周血CRH水平及分娩时间的影响。方法选择未足月胎膜早破的孕妇60例,随机分为地塞米松组（A组）、地塞米松＋黄体酮组（B组）、黄体酬组（C组）、对照组（D组）各15例。A组人院后给予地塞米松肌注治疗、B组给予地塞米松＋黄体酮治疗,C组给予黄体酮治疗,D组未用两药。对比4组孕妇人院时、人院后1d及2dCRH的变化及破膜到胎儿娩出的时间。结果治疗后CRH水平A组显著高于另外3组（P〈0．01）;组内比较,A组与D组治疗前后差异有统计学意义（P〈0．01）。A组的分娩发动显著早于另外3组（P〈0．01）。结论地塞米松能够升高未足月胎膜早破孕妇外周血CRH的水平,对分娩发动有促进作用。而黄体酮有抑制作用。     

胎盘绒毛组织孕激素受体表达与分娩发动的关系

目的:探讨胎盘绒毛组织孕激素受体(progesterone receptor,PR)表达变化与分娩发动的关系.方法:采用免疫组化和Western blot印迹杂交法检测正常足月剖宫产产妇胎盘绒毛组织(临产组15例,未临产组15例)孕激素受体表达变化情况.结果:免疫组化结果显示15例未临产组均存在核PR染色阳性,15例临产组出现弱阳性结果.Western blot结果显示,临产组PRA表达量较未临产组下调,同时临产组PR-B表达量较未临产组也下调,两者均存在显著性差异,具有统计学意义(P＜0.01);临产组PR-A/PR-B较未临产组高,存在统计学意义(P＜0.05).结论:PR-A/PR-B比值升高可能是参与分娩发动的机制之一.