NF-κB靶向性哑铃形"圈套"寡核苷酸体外抑制细胞因子表达效应的研究

目的设计合成靶向NF—κB的哑铃彤“圈套”ODNs，并检测其对NF—κB转录活性和肾小球系膜细胞细胞因子（TNF—d和IL-6)表达的抑制效应。方法采用电泳迁移率改变实验(EMSA)体外检测哑铃形圈套ODNs对NF-κB转录活性的抑制效应。提取大鼠肾小球系膜细胞，随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组。采用阳离子脂质体将2、4和8mg／L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞，6h后用LPS刺激，收集转染后8、12和18上清和细胞。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清细胞因子蛋白表达，逆转录PCR(RT—PCR)法检测细胞因子mRNA转录。结果哑铃形圈套ODNs在体外能有效地抑制NF—κB与其顺式元件的结合；4、8mg/L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TNF—d和IL-6转录与表达。结论靶向NF—κB的哑铃形圈套ODNs在体外可抑制NF—κB的转录活性，从而对体外培养的肾小球系膜细胞细胞因子的表达具有抑制效应。     

NF-κB靶向性哑铃形圈套寡核苷酸抑制肾小球系膜细胞TGF-β1的表达

目的:设计合成靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs,并检测其对NF-κB转录活性和肾小球系膜细胞TGF-β1表达的抑制效应.方法:采用电泳迁移率改变实验(EMSA)体外检测哑铃形圈套ODNs对NF-κB转录活性的抑制效应.提取大鼠肾小球系膜细胞,随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组.采用阳离子脂质体将2,4,8 mg/L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞,6 h后用LPS刺激,收集转染后8,12,18 h上清和细胞.用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清TGF-β1蛋白表达,逆转录PCR(RT-PCR)法检测TGF-β1mRNA转录.结果:哑铃形圈套ODNs在体外能有效地抑制NF-κB与其顺式元件的结合;4,8 mg/L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1转录和表达.结论:靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs在体外可抑制NF-κB的转录活性,从而对体外培养的肾小球系膜细胞炎性因子TGF-β1的表达具有抑制效应.     

NF-κB靶向性哑铃形"圈套"寡核苷酸对肾小球系膜细胞细胞因子表达的影响

目的　设计合成靶向 NF-κB的哑铃形圈套 ODNs,并检测其对 NF-κB转录活性和肾小球系膜细胞细胞因子 (IL - 6和 TGF-β1)表达的抑制效应。方法　采用电泳迁移率改变实验 (EMSA)体外检测哑铃形圈套 ODNs对 NF-κB转录活性的抑制效应。提取大鼠肾小球系膜细胞 ,随机分为正常对照组、L PS刺激组、哑铃形圈套 ODNs处理组、无关圈套 ODNs处理组和脂质体处理组。采用阳离子脂质体将 2、4、8mg/ L 不同剂量哑铃形圈套 ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞 ,6 h后用 L PS刺激 ,收集转染后 8、12、18上清和细胞。用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)法检测上清细胞因子蛋白表达 ,逆转录 PCR(RT- PCR)法检测细胞因子 m RNA转录。结果　哑铃形圈套 ODNs在体外能有效地抑制 NF-κB与其顺式元件的结合 ;4、8mg/ L剂量哑铃形圈套 ODNs可明显抑制 L PS诱导的大鼠肾小球系膜细胞 IL - 6和 TGF-β1 转录与表达。结论　靶向 NF- κB的哑铃形圈套 ODNs在体外可抑制 NF- κB的转录活性 ,从而对体外培养的肾小球系膜细胞细胞因子的表达具有抑制效应     

NF-κB靶向性哑铃形"圈套"寡核苷酸对肾小球系膜细胞TNF-α的表达抑制作用的研究

目的:本实验设计合成靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs,并检测其对肾小球系膜细胞TNF-α表达的抑制效应。方法:以NF-κB顺式作用元件κB序列为模板,设计包含两个拷贝的κB序列,长度为58个碱基的环状IDNs,合成后部分序列做FAM标记,行转染效率鉴定实验。提取大鼠肾小球系膜细胞,随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组。采用阳离子脂质体将2、4、8 mg／L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞,6h后用LPS刺激,收集转染后8、12、18上清和细胞。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清TNF-α蛋白表达,逆转录PCR(RT-PCR)法检测TNF-αmRNA转录。结果:阳离子脂质体可将哑铃形圈套ODNs高效转染入肾小球系膜细胞;4、8mg／L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TNF-α转录和表达。结论:靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs对体外培养的肾小球系膜细胞炎性因子TNF-α的表达具有抑制效应。     

NF-κB靶向性哑铃形“圈套”寡核苷酸对肾小球系膜细胞TNF—α的表达抑制作用的研究

目的：本实验设计合成靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs，并检测其对肾小球系膜细胞TNF-α表达的抑制效应。方法：以NF-κB顺式作用元件出序列为模板，设计包含两个拷贝的出序列，长度为58个碱基的环状dNs，合成后部分序列做FAM标记，行转染效率鉴定实验。提取大鼠肾小球系膜细胞，随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组。采用阳离子脂质体将2、4、8mg／L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞，6h后用LPS刺激，收集转染后8、12、18上清和细胞。用酶联免疫吸附试验(ELSSA)法检测上清TNF-α蛋白表达，逆转录PCR(RT-PCR)法检测TNF-αmRNA转录。结果：阳离子脂质体可将哑铃形圈套ODNs高效转染入肾小球系膜细胞；4、8mg／L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TNF-α转录和表达。结论：靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs对体外培养的肾小球系膜细胞炎性因子TNF-α的表达具有抑制效应。     

NF-kB靶向性哑铃形"圈套"寡核苷酸对肾小球系膜细胞TNF-α的表达抑制作用的研究

目的:本实验设计合成靶向NF-kB的哑铃形圈套ODNs,并检测其对肾小球系膜细胞TNF-α表达的抑制效应.方法:以NF-kB顺式作用元件kB序列为模板,设计包含两个拷贝的kB序列,长度为58个碱基的环状ODNs,合成后部分序列做FAM标记,行转染效率鉴定实验.提取大鼠肾小球系膜细胞,随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组.采用阳离子脂质体将2、4、8 mg/L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞,6h后用LPS刺激,收集转染后8、12、18上清和细胞.用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清TNF-α蛋白表达,逆转录PCR(RT-PCR)法检测TNF-amRNA转录.结果:阳离子脂质体可将哑铃形圈套ODNs高效转染入肾小球系膜细胞;4、8mg/L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TNF-α转录和表达.结论:靶向NF-kB的哑铃形圈套ODNs对体外培养的肾小球系膜细胞炎性因子TNF-α的表达具有抑制效应.     

NF-κB靶向性哑铃形"圈套"ODNs抑制大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧后TNF-α的表达

目的 设计合成靶向哑铃形寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)圈套,检测其对大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后TNF-α表达的抑制效应.方法 原代大脑皮质神经元体外培养,建立氧糖剥夺/复氧模型,以正常组、OGD4 h/R6 h组、NF-κB decoy ODNs组、无关decoy ODNs组、脂质体组为实验组,采用Western blot检测NF-κB p65蛋白表达,分别采用免疫细胞化学和逆转录-聚合酶链反廊法(RT-PCR)检测FNF-α蛋白和mRNA表达.结果 Westernblot检测显示NF-κB decoy ODNs组NF-κB P65蛋白表达明显低于OGD4 h/R6 h组、脂质体组、无关decoy ODNs组(P<0.05),与OGD4 h/R6 h组、脂质体组、无关decoy组相比NF-κB decoy ODNs组TNF-α蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05);而脂质体组、无火decoy ODNs组对NF-κB P65蛋白、TNF-α蛋白和mRNA表达未见抑制(P>0.05).结论 靶向性NF-κB的哑铃形圈套ODNs可有效抑制大脑皮质神经元OGD/R后炎症因子TNF-α mRNA及蛋白的表达.     

圈套ODNs影响IL-10表达的实验研究

目的本实验设计合成靶向核因子KB（NF-KB）的哑铃形圈套寡核苷酸（ODNs），并验证其对白介素10（IL-10）的作用。方法以阳离子脂质体为载体，将圈套ODNs转染大鼠pMФ细胞6h后用LPS（μg／ml）刺激，用ELISA法及RT-PCR法测圈套ODNs对IL-10在蛋白及mRNA水平的影响。结果哑铃形圈套ODNs可降低在IL-10mRNA及蛋白水平的表达。结论靶向NF-KB的哑铃形圈套ODNs具有抗IL-10的作用。     

大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧后NF-κB P50/c-Rel对Bcl-xL表达的影响

目的探讨脂质体(TransfastFastTM Transfection Reagent)介导转录因子NF-κB圈套物(decoy)寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODNs)对Wistar大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后受NF-κB P50、c-Rel调控的抗凋亡因子Bcl-xL表达的影响。方法原代大脑皮质神经元体外培养,建立OGD/R模型,分为OGD 4 h/R 6 h组、NF-κB decoy ODNs组、无关decoy ODNs组、脂质体组;同时设立正常对照组。采用蛋白质印迹分析检测NF-κB P50、c-Rel蛋白表达;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠皮质神经元内Bcl-xL mRNA表达。结果蛋白质印迹分析显示OGD 4 h/R6 h组P50、c-Rel蛋白表达较正常组升高(P<0.01);转染NF-κB decoy ODNs后P50、c-Rel蛋白表达低于OGD 4 h/R 6 h组、脂质体组、无关decoy ODNs组(P<0.05);RT-PCR显示OGD 4 h/R 6 h组Bcl-xL mRNA表达较正常组升高(P<0.05);NF-κB decoy ODNs组Bcl-xL mRNA表达低于OGD 4 h/R 6 h组、脂质体组、无关decoy组(P<0.05)。结论 NF-κB decoy ODNs可有效抑制大脑皮质神经元OGD/R后受NF-κB亚基P50、c-Rel调控的抗凋亡因子Bcl-xL mRNA表达,这可能是NF-κB神经保护作用的部分机制。     

低浓度二甲亚砜和第二信使调节剂混合物低温保存血小板的初步研究

目的:研究NF-κB"诱骗(decoy)"寡核苷酸(ODNs)对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞株J774.1细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法:体外培养巨噬细胞,LPS刺激后脂质体转染NF-κB"decoy"ODNs,用硝酸还原酶法测定培养液中NO水平以及iNOS含量,RT-PCR观察细胞iNOS的mRNA表达变化.结果:NF-κB"decoy"ODNs可降低巨噬细胞培养体系LPS诱导的NO合成,阻断iNOS mRNA的表达;对照序列的ODNs和转染剂对NO、iNOS无明显影响.结论:NF-κB"decoy"ODNs可以抑制iNOS的活性,减少NO生成,可能与其特异性竞争抑制活化NF-κB结合位点有关.     

核转录因子-κB圈套策略对肝癌细胞HepG2凋亡的影响

目的:观察NF-κB圈套寡核苷酸(Decoy ODNs)对NF-κB活性的影响,进一步探讨其对人肝癌细胞HepG2凋亡的作用机制。方法:设计NF-κB圈套寡核苷酸,将FITC标记的NF-κB Decoy ODNs转染HepG2,共聚焦显微镜观察其核内定位,描记生长曲线;凝胶阻滞法(EMSA)检测转染前后NF-κB活性;再分别用流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡情况。Western blot检测HepG2细胞中Bcl-2和Fas的含量。结果:NF-κB Decoy ODNs转染HepG2细胞后定位于胞核,NF-κB活性明显下降,其显著抑制细胞生长,促进HepG2细胞凋亡;低活性NF-κB可以下调Bcl-2、增加Fas的表达水平。结论:NF-κB圈套寡核苷酸促进肝癌细胞HepG2凋亡的机制可能与其下调NF-κB的活性,使促凋亡蛋白Fas表达增加和降低抑凋蛋白Bcl-2表达有关。     

护肾固精方对系膜细胞核因子-κB活性及炎性细胞因子表达的影响

目的 研究护肾固精方(Hu shen gu jing fang，HSGJF)对脂多糖(LPS)刺激大鼠肾小球系膜细胞(MeasangialCells，MsC)表达炎性细胞因子的影响及其作用机制。方法：分别以酶联免疫吸附法(ELISA)检测MsCIL-1β、TNF-α蛋白水平：电泳迁移率变动分析(EMSA)检测MCs核因子-κB(nuclearfactor-κB，NF-κB)的活性；反转录多聚酶链反应技术(RT-PCR)检测MsC TNF-amRNA表达。结果 HSGJF能抑制LSP刺激肾小球MsC分泌IL-1β、TNF-α蛋白质增加的同时、亦能抑制LSP刺激肾小球MsC中NF-κB活化，在HSGJF作用下炎性细胞因子表达均呈不同程度减弱。结论 HSGJF通过抑制MsCNF-κB的活性，下调炎性细胞因子的表达。为进一步认识和评价中医药在肾脏疾病防治中的作用提供了理论及实验依据。     

芪蓟多糖通过抑制NF-κB信号通路影响大鼠肾小球系膜细胞增殖变化

目的探讨芪蓟多糖通过NF-κB信号通路对大鼠肾小球系膜细胞的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激系膜细胞增生,分别给予氯沙坦和芪蓟多糖,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾小球系膜细胞上清液转化生长因子β活化激酶1(TAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、核因子(NF-κB)和纤维粘连蛋白(FN)表达;实时定量PCR法检测TAK1、NF-κB的表达。结果 ELISA法对OD值的测定,与正常组比较,模型组、芪蓟肾康方多糖高剂量组和低剂量组、氯沙坦组大鼠肾小球系膜细胞中TAK1、TRAF6、NF-κB和FN表达均升高且有明显差异(P0.05,P0.01);与模型组比较,芪蓟肾康方多糖高剂量组和低剂量组、氯沙坦组可降低NF-κB信号转导中各靶点TAK1、TRAF6、NF-κB及FN的表达,且有明显差异(P0.01)。实时定量PCR法检测,与正常组比较,模型组及芪蓟肾康方多糖高剂量组和低剂量组大鼠肾小球系膜细胞中TAK1、NF-κB表达升高,且有明显差异(P0.05);与模型组比较,芪蓟肾康方多糖高剂量组和低剂量组大鼠肾小球系膜细胞中TAK1、NF-κB明显降低(P0.05)。在NF-κB表达中,芪蓟肾康方多糖高剂量组和低剂量组组间比较无明显差异(P0.05)。结论芪蓟多糖可能通过下调肾小球系膜细胞NF-κB mRNA及TAK1、TRAF6、NF-κB和FN蛋白表达的水平,抑制核因子信号转导通路的兴奋性,缓解NF-κB的释放,减少FN的过度表达,从而减轻细胞外基质(ECM)的分泌,降低肾小球的损伤,减缓肾小球的硬化。     

氧化/还原修饰肝素对高糖诱导肾小球系膜细胞凋亡及其信号转导途径的影响

目的：考察化学修饰的非抗凝肝素（高碘酸氧化／硼氢化钠还原修饰肝素，OR-Heparin）对高糖诱导的人肾小球系膜细胞凋亡的保护作用及其可能的机制。方法：肾小球系膜细胞经高糖或高糖＋OR-heparin作用24h，Hoechest33258染色、AnnexinV-PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡，Westernblotting检测凋亡相关蛋白（p53，Bcl-2，Bax，cytosolic cytochromec）的表达，Cy3-标记抗体荧光显微镜观察NF-κB的转录激活，比色法测定Caspase-3酶活。结果：氧化／还原修饰的肝素显著降低高糖诱导的肾小球系膜细胞的凋亡，同时抑制凋亡相关蛋白的表达以及NF-κB的转录激活。结论：氧化／还原修饰肝素可以通过抑制凋亡相关蛋白的表达来抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡，这可能与抑制NF-κB转录激活相关。     

NF-κB圈套性寡核苷酸诱导骨髓DC疫苗的实验研究

目的 体外诱导、培养大鼠(Lewis大鼠)骨髓来源改良树突状细胞(DC),为进一步研究核苷酸圈套技术抗移植排斥反应作准备.方法 Lewis大鼠骨髓造血干细胞,体外经重组大鼠细胞因子GM-CSF、IL-4诱导成DC;核因子-κB(NF-κB)圈套寡核苷酸(NF-κB decoy ODN)用于阻止DC的成熟,降低细胞表面分子的表达,制备改良的DC;LPS用于刺激DC的成熟.流式细胞仪检测DC表面分子CD11c、CD80、CD86等的表达情况,分析DC的细胞特性.结果 体外GM-CSF和IL-4诱导的大鼠骨髓来源DC纯度高、数量丰富.NF-κB decoy ODN能明显降低DC表面分子(CD11c、CD80、CD86等)的表达,表现为非成熟状态;经LPS刺激仍能保持非成熟状态.结论 经NF-κB decoy ODN处理的大鼠骨髓来源DC,其状态稳定,低表达表面分子和共刺激分子,可作为进一步研究的DC疫苗.     

紫铆因抑制脂多糖诱导小胶质细胞炎性反应的作用机制研究

目的 探讨紫铆因抑制脂多糖(LPS)诱导BV2小胶质细胞炎性反应的作用机制.方法 以LPS诱导BV2小胶质细胞活化建立体外神经炎症细胞模型.MTT法检测紫铆因对BV2细胞存活率的影响;qPCR法检测各组细胞中炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达水平;Western blot法检测各组细胞内核因子-κB(NF-κB) p65和ERK信号通路相关蛋白的表达变化;免疫荧光染色观察各组细胞内NF-κcB p65的核转录活性变化.结果 紫铆因干预BV2细胞24 h后,对细胞活力无明显影响;紫铆因能显著下调LPS诱导BV2细胞活化后炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达水平;紫铆因能明显降低LPS诱导BV2细胞活化后,ERK信号通路相关蛋白的磷酸化水平,并且能有效抑制NF-κB p65的核转录活性,阻止其向核内转移.结论 紫铆因可以抑制LPS诱导的小胶质细胞活化,降低BV2小胶质细胞的炎性反应.     

NF-κB“诱骗”寡核苷酸对LPS诱导的SW480细胞IL-1β表达的影响

目的探讨核转录因子-κB（NF-κB）＂诱骗（decoy）＂寡核苷酸（ODNs）对脂多糖（LPS）诱导的结肠癌SW480细胞IL-1β表达的影响。方法体外培养SW480细胞并随机分为5组,对照组、LPS组（以10μg/L的LPS刺激3h）、NODN组（以10μg/L的LPS刺激3h后转染1μmol/L的NF-κB decoy ODNs）、SODN组（以10μg/L的LPS刺激3h后转染1μmol/L的错译ODNs）、lipofectin2000组（以10μg/L的LPS刺激3h后加入同剂量的lipofectin2000）,检测各组细胞培养液中LDH的水平,并应用RT-PCR技术检测各组细胞IL-113 RNA的表达。结果各组细胞培养液中LDH浓度差异无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,LPS组、NODN组、SODN组及lipofectin2000组IL-1 13 mRNA表达均升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;与LPS组比较,NODN组IL-1βmRNA表达显著降低（P〈0.01）,而SODN组及lipofectin2000组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 NF-κB decoy ODNs可有效下调SW480细胞IL-1βmRNA的表达,有望成为治疗炎性肠病的一种新型基因药品。     

槲皮黄酮对AMPK/NF-κB信号通路介导IL-6表达的影响

目的 探讨槲皮黄酮介导AMPK/NF-κB信号通路对IL-6炎症因子表达的影响.方法 RAW264.7细胞体外培养,采用LPS不同浓度及时间点诱导炎症模型,ELISA法检测IL-6含量;CCK8试验检测槲皮黄酮和LPS(1 ng/mL)对RAW264.7细胞抑制率的影响;槲皮黄酮处理细胞1h后,加入LPS(1 ng/mL)培养48 h,ELISA法检测IL-6含量;将细胞分为5组后,ELISA法检测IL-6表达水平;Western blot检测细胞核中NF-κB蛋白的表达水平.结果 LPS处理细胞后,分泌IL-6的量明显高于对照组细胞;CCK8实验表明槲皮黄酮和LPS对细胞的抑制作用较弱;槲皮黄酮处理后的细胞分泌IL-6的能力减弱;LPS+AMPK激活剂组、LPS+槲皮黄酮组、LPS+槲皮黄酮+AMPK激活剂组相对于LPS细胞组中IL-6的分泌受到抑制,并且细胞核内NF-κB的表达水平降低.结论 槲皮黄酮通过刺激AMPK含量来抑制NF-κB向细胞核的转移,导致细胞核内NF-κB表达降低而起到抑制炎症因子IL-6的分泌.     

升降散对LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB信号的影响

目的?研究升降散对LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)TLR4表达及其下游NF-κB信号通路的影响。方法?用不同浓度LPS（0、2、10?μg/mL）诱导NR8383细胞,采用Real-time PCR和Western Blotting分别检测TLR4的mRNA和蛋白表达水平。用带有NF-κB的质粒转染NR8383细胞,双荧光素酶报告基因检测NF-κB活性,Western Blotting检测磷酸化p65表达水平,Real-time PCR检测细胞因子TNF-α、A20、IL-6和IL-1β的mRNA表达水平,ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β的含量。将升降散作用于LPS成功诱导NF-κB上调的NR8383细胞,Real-time PCR、Western Blotting、双荧光报告基因检测和ELISA实验检测升降散在NR8383细胞中对LPS诱导NF-κB信号通路的影响。结果?LPS成功诱导NR8383细胞中NF-κB上调,在蛋白表达和mRNA表达水平均证实,LPS能梯度诱导TLR4高表达,且与LPS浓度呈正相关;同时,LPS能够诱导TLR4下游NF-κB的激活,增加下游靶基因编码细胞因子的合成与分泌,且与LPS浓度呈正相关。10?μg/mL升降散作用NR8383细胞后,能抑制LPS诱导TLR4的高表达和下游NF-κB的激活。结论?LPS能梯度诱导NR8383细胞中TLR4的高表达及其下游NF-κB的激活,升降散能够显著抑制该诱导作用。      

小白菊内酯对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及核因子-κB、单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的探讨小白菊内酯（PTL）对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞（MC）增殖、核因子-κB（NF-κB）活性和单核细胞趋化蛋
白-1（MCP-1）表达的影响。方法采用正常葡萄糖组（糖浓度为5.6 mmol/L）和高糖组（糖浓度为30 mmol/L）、高糖+PTL组,分
别体外培养大鼠肾小球MC,MTT法检测MC的增殖,ELISA法检测培养液上清中MCP-1的浓度,Western Blot法检测IκBα反
映NF-κB的活性,EMSA法检测NF-κB的活性。结果高糖诱导后MC增殖、MCP-1表达和NF-κB活性明显增强,NF-κB结合蛋
白IκBα明显降解;应用PTL干预后,MC增殖、MCP-1表达和NF-κB活性均明显降低,IκBα降解被抑制。结论PTL能抑制高糖
诱导的肾小球MC NF-κB活化及MCP-1的表达,从而为PTL用于临床防治糖尿病肾病提供了一定的理论依据。