HtrA2/Omi与Livin在乳腺浸润性导管癌中表达及其临床意义

目的探讨HtrA2/Omi与Livin在乳腺浸润性导管癌(IDC)中的表达及临床意义。方法选取北部战区总医院和平分院普外科乳腺病区自2016年2月至2017年7月收治的63例行根治性手术治疗的IDC患者的病理组织与癌旁正常乳腺组织为研究对象。采用免疫组化法检测HtrA2/Omi与Livin在63例IDC组织及癌旁正常乳腺组织中的表达情况,分析二者的表达情况与临床病理特征间的关系。结果 HtrA2/Omi与Livin在IDC组织中的阳性表达率均明显高于癌旁正常乳腺组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。HtrA2/Omi的表达与肿瘤脉管侵犯有相关性(P<0.05),与患者年龄、是否绝经、肿瘤大小、淋巴结转移、原发肿瘤淋巴结转移分期(TNM)、组织学分级、神经侵犯、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(C-erbB-2)、细胞核增殖抗原(Ki-67)、分子分型均无相关性(P>0.05)。Livin蛋白的表达与肿瘤大小、TNM分期具有相关性(P<0.05),与患者年龄、是否绝经、淋巴结转移、组织学分级、神经侵犯、脉管侵犯、ER、PR、C-erbB-2、Ki-67、分子分型均无相关性(P>0.05)。Spearman等级相关分析显示,IDC组织中HtrA2/Omi与Livin表达水平无明显相关性(P>0.05)。结论在IDC患者中,HtrA2/Omi及Livin的高表达与肿瘤的发生、发展相关,Livin可能与IDC细胞增殖相关,高表达提示预后不良。     

针刺对运动性骨骼肌损伤大鼠细胞自噬及Omi/HtrA2通路的影响

目的：探究针刺对运动性骨骼肌损伤大鼠细胞自噬及Omi/HtrA2通路的影响,为探讨针刺改善运动性骨骼肌损伤的机理提供依据。方法：将128只8周龄SD雄性大鼠随机分为对照组（C组,n=8）、针刺组（A组,n=40）、运动组（E组,n=40）、运动针刺组（EA组,n=40）。E组进行一次持续性下坡跑,跑台坡度为-16°,速度为16 m/min,运动时间为90 min;A组斜刺大鼠比目鱼肌,进针角度约30°,留针2 min;EA组在运动后斜刺比目鱼肌留针干预。分别于运动、针刺或运动针刺干预后0 h、12 h、24 h、48 h和72 h取材。透射电镜观察比目鱼肌细胞内自噬体超微结构变化;Western Blot法检测比目鱼肌丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2、HS1相关蛋白X-1(Hax-1)和自噬蛋白Beclin1的蛋白表达。结果：E组运动后比目鱼肌细胞内出现明显的肌小节撕裂以及细胞器肿胀、异常聚集等超微结构变化,并伴有大量的自噬体形成,同时Omi/HtrA2和Beclin1的蛋白表达量在0 h、12 h、24 h、48 h时间点均较C组升高（P<0.05或P<0.01）,前者在1...     

胃癌细胞中FasL表达及其与细胞凋亡的关系

Fas配体(Fas ligand,FasL)是一种介导细胞凋亡的膜蛋白,属TNF家族成员.目前研究认为FasL是死亡因子,Fas则是它的受体,当FasL与Fas结合时,Fas可向细胞传递"死亡信号",触发Fas所在靶细胞凋亡[1].过去认为人类只有激活的T淋巴细胞有FasL表达[2],但近来发现一些肿瘤细胞亦有FasL表达[3～6].为了解FasL是否在胃癌中表达及其在胃癌发病中的作用,作者采用免疫组织化学方法及脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术对胃癌组织中FasL表达状态及其与细胞凋亡的关系进行了研究.     

恶性间皮瘤细胞凋亡与凋亡调节蛋白Bax及Bcl-2表达的关系

目的研究恶性间皮瘤组织中Bcl-2、Bax表达,肿瘤细胞自发凋亡率(AI)与患者生存时间之间的关系。方法选取79例恶性间皮瘤标本,采用免疫组织化学方法检测肿瘤细胞中Bcl-2、Bax的表达。采用脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端原位标记法(TUNEL)检测肿瘤细胞的自发凋亡率。结果79例中,女性患者32例,男性47例。发病年龄11~79岁,发病高峰年龄40~50岁。患者生存时间5~160个月。根据组织学亚型分类:上皮细胞型51例,肉瘤样型20例,混合型8例。肿瘤细胞自发凋亡率(AI)为0.14~6.9%,高凋亡指数组的生存时间明显短于低凋亡指数组(P<0.01)。另外,Bcl-2阴性表达组的凋亡指数(AI=1.92)大大高于Bcl-2阳性组的凋亡指数(AI=0.82,r=0.288 0,P=0.01),说明Bcl-2的表达与肿瘤细胞凋亡之间存在联系。但是凋亡指数与另外一种凋亡调节蛋白Bax之间无显著联系(r=0.0770,P=0.46)。Bcl-2和Bax两种凋亡调节蛋白表达情况对恶性间皮瘤患者的生存时间没有显著性影响(分别为r=0.077 3,P=0.43;r=0.145 7,P=0.26)。结论恶性间皮瘤细胞凋亡指数可以作为判断其预后的重要指标,Bcl-2的表达与肿瘤细胞的凋亡有相关性。     

Fas和Bcl2在受照射小鼠脾淋巴细胞中的表达及与细胞凋亡的关系

目的：探讨Ｆａｓ和Ｂｃｌ－２蛋白在受大剂量＾６０Ｃｏγ射线照射小鼠脾淋巴细胞中的表达及与细胞凋亡的关系。方法小鼠全身一次性γ射线照射,吸收剂量分别为０、６、９、１２、１５和２０Ｇｙ,于照射后３、６、１２、２４ｈ、３、７、１４和２８ｄ活杀取材,免疫组化ＬＳＡＢ染色观察后进行定量分析。结果照射后６ｈ,ｆａｓ的表达呈强阳性,６－１２Ｇｙ剂量范围内阳性表达更明显,而随时间递增表达逐渐减少,但无明显的剂量效     

Bcl-2基因家族与细胞凋亡

目前已知在多细胞生物体中细胞有两种不同的死亡形式:坏死(Necrosis)和凋亡(Apoptosis).细胞凋亡是指细胞在一定生理或病理条件下,由基因调控的主动而有序的自我消亡过程,在形态学、生化和分子水平上与细胞坏死有明显区别.     

Fas/FasL诱导细胞凋亡及其在肺损伤中的作用

近年来，对细胞凋亡的生理及病理作用的研究已深入人体各个系统，对Ｆａｓ／ＦａｓＬ致细胞凋亡机理的描述日益完善。基础及临床实验研究揭示Ｆａｓ／ＦａｓＬ及细胞凋亡对肺损伤的发生、发展及预后起着重要作用。     

bcl—2在足叶乙甙诱导的K562细胞凋亡中的作用

目的研究ｂｃｌ－２及其表达产物在足叶乙甙诱导的Ｋ５６２细胞凋亡中的作用。方法采用细胞形态观察,ＤＮＡ电泳,ＤＮＡ缺口的原位检测观察Ｋ５６２细胞的凋亡,用原位杂交法检测ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达,用免疫荧光法检测ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果２０μｇ／ｍｌ的足叶乙甙能诱导Ｋ５６２细胞发生凋亡,在此过程中,ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ及ｂｃｌ－２蛋白的表达均下降。结论ｂｃｌ－２及其表达产物的下调在足叶乙甙诱导的Ｋ５６２细胞凋亡中起重要作用。     

Bcl—2基因家庭与细胞凋亡

目前已知在多细胞生物体中细胞有两种不同的死亡形式 :坏死 (Ｎｅｃｒｏｓｉｓ)和凋亡 (Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)。细胞凋亡是指细胞在一定生理或病理条件下 ,由基因调控的主动而有序的自我消亡过程 ,在形态学、生化和分子水平上与细胞坏死有明显区别。目前公认的凋亡形态学改变为 :细胞体积缩小、胞浆浓缩、核固缩、染色质密度增高呈半月形并凝集于核膜周边、核仁裂解及凋亡小体的形态。细胞凋亡的生化特征是细胞核ＤＮＡ被核酸酶降解成 180～ 2 0 0ｂｐ左右的ＤＮＡ片段 ,电泳呈特征性梯状带 (ＤＮＡＬａｄｄｅｒ)。细胞凋亡与增殖的动态平衡…     

线粒体在细胞凋亡中的作用研究进展

在细胞凋亡中,线粒体起着中心调控作用,在某种意义上,线粒体可以决定细胞的生存或死亡[1,2]。线粒体具有氧化磷酸化、传递电子、贮存Ｃａ2+、能量代谢、抗活性氧化等重要生理作用,它为细胞的各种生命活动提供基础能量。细胞凋亡过程中许多重要事件的发生都与线粒体密切相关,包括Ｃａｓｐａｓｅ激活因子的释放,如细胞色素Ｃ(ＣｙｔｏｃｈｒｏｍｅＣ,ＣｙｔＣ)、电子传递链的改变、线粒体膜电位(ΔΨｍｔ)的丧失、细胞内氧化还原状态的改变、Ｂｃｌ-2家族促进和抑制凋亡蛋白的参与等。不同信号的传导最终都集中到线粒体上来启动或抑制这些…     

调控Cox-2基因表达与食管癌细胞放射敏感性机制的初步探讨

目的 通过调控环氧合酶-2(Cox-2)基因表达来探讨影响食管癌细胞放射敏感性的机制.方法 通过构建C ox-2特异性siRNA,转染EC9706细胞,调控细胞内Cox-2表达,检测不同辐射剂量后MMP-2 、Bcl-2 mRNA、AKT蛋白和磷酸化AKT的表达,以及观察集落形成、细胞增殖、细胞凋亡、体外细胞侵袭能力,结果采用单因素方差分析进行统计学处理.结果 2和4 Gy照射后,上调组Bcl-2 mRNA表达量升高(F=3.36、4.32,P＜0.05);下调组MMP-2 mRNA表达量降低(F=3.86、8.09,P＜0.05),Bcl-2 mRNA表达量降低(F=3.73、5.64,P＜0.05),Bax mRNA表达量升高(F=7.03、7.42,P＜0.05).而各组细胞总AKT蛋白和磷酸化AKT蛋白印迹呈现上调组最强印迹,下调组最浅印迹.下调组细胞随照射量的增加凋亡率上升陡度最大,且差异有统计学意义(F=317.40,P＜0.05).G0～G1期细胞比例逐渐升高,S和G2～M期细胞比例逐渐降低,细胞增殖抑制率明显升高,体外侵袭实验穿透细胞数下降陡度最大.结论 调控C ox-2基因表达影响食管癌细胞放射敏感性的机制可能是,下调细胞内Cox-2 mRNA表达继而下调MMP-2、Bcl-2 mRNA表达,上调Bax表达,导致肿瘤细胞的侵袭及转移能力的降低,促进其向G0 ～G1期细胞转换,诱导细胞凋亡.同时使AKT和磷酸化AKT(pAKT)水平下降,影响PI3 K/Akt信号转导途径降低其放疗抗拒的能力.     

PinX1对食管癌细胞放射敏感性及活性氧水平的影响研究

目的 研究端粒酶抑制因子X1（PinX1）对食管癌细胞放射敏感性及活性氧（ROS）水平的影响。方法 食管癌细胞分为对照组（未做细胞转染）、照射组（8 Gy X射线）、PinX1组（转染pDsRed1-PinX1至过表达）、照射+PinX1（转染pDsRed1-PinX1至过表达后8 Gy X射线照射）。MTT测定细胞增殖,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot测定细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（Caspase-9）的活化水平,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯（DCFH-DA）法测定细胞中ROS水平,集落形成实验测定放射敏感性。构建EC9706细胞致裸鼠皮下移植瘤模型,每组20只,小鼠每4天接受5次8 Gy剂量的γ射线局部照射,分析异种移植小鼠模型中PinX1过表达与放射敏感性的关系。结果 与对照组相比,照射组和PinX1组细胞的存活率从100%降低至（67.92±4.71）%和（83.14±4.01）%,差异有统计学意义（t=9.433、4.957,P<0.05）,细胞凋亡率从（6.47±1.46）%升高到（44.38±4.16）%和（25.42±2.78）%,差异有统计学意义（t=12.882、6.439,P<0.05）,细胞中Caspase-3活化水平升高（t=6.655、2.531,P<0.05）,Caspase-9的活化水平升高（t=3.775、3.088,P<0.05）,细胞内ROS水平升高（t=12.110、7.339,P<0.05）。与照射组相比,照射+PinX1组细胞存活率从（67.92±4.71）%下降至（52.73±5.58）%,差异有统计学意义（t=8.942,P<0.05）,细胞凋亡率从（44.38±4.16）%升高至（55.29±4.98）%,差异有统计学意义（t=3.707,P<0.05）,细胞中Caspase-3活化水平升高（t=15.435,P<0.05）,Caspase-9的活化水平也升高,（t=17.990,P<0.05）,ROS水平升高（t=4.526,P<0.05）。过表达PinX1的EC9706细胞放射敏感性增加,增敏比为1.408。过表达PinX1的细胞裸鼠移植瘤体积明显减小。结论 PinX1抑制食管癌细胞增殖,诱导食管癌细胞凋亡,增加食管癌细胞放射敏感性。     

凋亡素2配体对食管癌细胞株Eca-109放射敏感性的影响

目的 研究凋亡素2配体(Apo-2 ligand,Apo2L),又称肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对体外培养食管癌细胞株Eca-109放射敏感性的影响。方法 MTT法检测TRAIL对Eca-109细胞的毒性;克隆形成实验检测TRAIL对Eca-109细胞的放射增敏作用;流式细胞仪(FCM)技术分析TRAIL对凋亡率及细胞周期的影响。结果 100~800 μg/ml TRAIL随浓度升高对Eca-109细胞的增殖抑制率增大,药物浓度与细胞抑制率正相关(r=0.981,P<0.01),50%抑制浓度(IC₅₀)为637 μg/ml;200 μg/ml TRAIL能增加Eca-109细胞的放射敏感性,放射增敏比为1.219;不同剂量(0~8 Gy)照射后,给药组的凋亡率均高于单照射组(F=16.97、76.65、92.86、209.66,P<0.05),给药组G₂/M期细胞比例较单照射组增加(F=9.40、84.99、87.61、2025.85,P<0.05)。结论 TRAIL可以抑制Eca-109细胞的生长,诱导细胞凋亡和G₂/M期阻滞,后者可能与TRAIL的放射增敏机制有关。     

代谢组学在食管癌的研究现状

代谢组学是一门新兴的学科,运用分析化学(磁共振和色谱-质谱)方法研究生物体对病理生理刺激产生的代谢变化,采用多因素统计分析方法综合评估内源性代谢产物变化水平,最终实现从代谢角度进行疾病诊断、肿瘤分期、治疗指导以及预后评估。食管癌是上胃肠道常见的恶性肿瘤,临床早期诊断困难,目前代谢组学及相关技术在食管癌的研究越来越深入,有望成为诊断及评价食管癌治疗效果的另一手段。就代谢组学及其相关研究技术用于食管癌的研究进展作一综述。     

双向调控Cox-2表达对人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的 探讨上调和下调Cox-2基因表达对食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法 构建针对Cox-2基因的siRNA载体及Cox-2基因真核表达载体,通过脂质体转染技术将其转入食管癌EC9706细胞,G418筛选得到稳定转染细胞系。荧光定量RT-PCR和Western blot分别检测细胞中Cox-2 mRNA和Cox-2蛋白表达水平;裸鼠移植瘤实验检测上调和下调Cox-2表达联合X射线照射对食管癌的生长抑制作用。结果 Cox-2下调组食管癌EC9706细胞内Cox-2基因表达明显降低,Cox-2上调组明显升高。Cox-2下调组裸鼠移植瘤平均体积明显小于对照组(F=34.26,P<0.05);Cox-2上调组的瘤体平均体积大于对照组(F=26.38,P<0.05)。20 Gy γ射线照射后Cox-2下调组瘤体平均体积较照射前明显减小(F=16.35,P<0.05);而上调组裸鼠皮下种植瘤平均体积较照射前无明显变化。结论 下调Cox-2表达能抑制人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的生长,增强瘤体的放射敏感性,上调Cox-2表达则使肿瘤辐射抗拒。     

阿帕替尼对食管癌Kyse-150细胞放射敏感性影响的实验研究

目的 观察阿帕替尼对食管癌Kyse-150细胞放射敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法 将食管癌Kyse-150细胞分为空白对照组、阿帕替尼组、单纯照射组、阿帕替尼联合照射组。CCK-8法检测不同浓度阿帕替尼（0、5、10、20、30、40 μmol/L）对细胞增殖的影响;克隆形成法检测不同浓度阿帕替尼（0、10、20、40 μmol/L）对细胞放射敏感性的影响;流式细胞术分析阿帕替尼（20 μmol/L）联合射线（4 Gy）对细胞周期和细胞凋亡的影响。结果 阿帕替尼能抑制Kyse-150细胞的增殖,且呈剂量-时间依赖性（r=0.89~0.96,P<0.05）;随着阿帕替尼浓度的增加,Kyse-150细胞的放射生物学参数D₀、D_q、SF₂值逐渐减小,而放射增敏比SER_D0值逐渐增加。阿帕替尼联合照射组分别与空白对照组、单纯照射组及阿帕替尼组比较,细胞凋亡率均显著增加,差异具有统计学意义（t=12.36、5.99、15.47,P<0.05）。与空白对照组比较,阿帕替尼组、单纯照射组及阿帕替尼联合照射组G₂/M期比例均增高,差异均具有统计学意义（t=8.81、39.69、20.61,P<0.05）。阿帕替尼组、阿帕替尼联合照射组分别与空白对照组及单纯照射组相比,S期比例均增高,差异均具有统计学意义（t=6.06、3.82、8.81、6.24,P<0.05）。而阿帕替尼组与阿帕替尼联合照射组相比,S期比例差异无统计学意义（P> 0.05）。结论 阿帕替尼能增加食管癌Kyse-150细胞的放射敏感性,其机制可能与抑制细胞增殖、促进细胞凋亡及诱导细胞周期再分布有关。     

SKP2表达对受照食管癌细胞诱导辐射旁效应的影响

目的：探究SKP2表达水平对受照食管癌细胞所诱导辐射旁效应的影响。方法：Western blot法筛选出SKP2高表达和低表达的食管癌细胞系,微核检测法探讨SKP2对受照食管癌细胞所诱导辐射旁效应的影响。建立SKP2高表达和低表达的转染细胞系,Western blot法验证转染效率,微核检测法进一步验证SKP2对受照食管癌细胞所诱导辐射旁效应的影响。通过γ-H2AX聚集点检测法探究SKP2影响受照食管癌细胞所诱导辐射旁效应的作用机制。结果：微核检测结果表明,SKP2高表达的受照细胞诱导的辐射旁效应显著低于SKP2低表达的受照细胞诱导的辐射旁效应（t=8.06,P<0.01）。SKP2转染细胞系的微核检测结果进一步验证了SKP2的表达对受照食管癌细胞诱导的辐射旁效应的抑制作用,SKP2表达升高,辐射旁效应减弱（t=11.12、10.16,P<0.01）;SKP2表达降低,辐射旁效应增强（t=8.39、8.83,P<0.01）。γ-H2AX聚集点检测结果表明,受照细胞SKP2表达升高可提高旁效应细胞的DNA损伤修复能力（t=6.85、7.10,P<0.01）。反之,会抑制旁效应细胞的DNA损伤修复能力（t=7.66、8.47,P<0.01）。结论：SKP2的表达抑制受照食管癌细胞诱导的辐射旁效应,并且这一机制至少部分是通过SKP2对DNA损伤修复能力的调节来实现的。     

食管癌术后复发的X线表现及其原因分析

目的：探讨食管癌术后复发的Ｘ线表现特点,并分析其原因。方法：经Ｘ线钡餐造影诊断为食管癌术后复发病例共４５例,分析其Ｘ线表现特点;查阅病历,了解切除范围,探讨术后复发的原因。结果：吻合口复发３４例,在钡餐造影片上表现为吻合口壁毛糙、僵硬,粘膜破坏,吻合口狭窄;胸胃复发１１例,在Ｘ线片上表现出外压改变,或充盈缺损,粘膜破坏。结论：Ｘ线钡餐造影是诊断食管癌术后复发的重要手段之一。适当扩大手术切除范围可能     

沙利度胺联合放疗治疗食管癌的临床观察

目的 前瞻性研究沙利度胺干预下食管癌患者放疗过程中血清血管内皮生长因子(VEGF)水平的动态变化及近期疗效和耐受性.方法 采集86例食管癌患者放疗前、中、后的血清,应用酶联免疫吸附法( ELISA)测定血清VEGF水平,根据患者放疗中VEGF水平的变化给予沙利度胺干预,将83例(另外3例因不耐受放疗而中断治疗)患者分成服药组32例(放疗中VEGF水平升高或不变的患者给予口服沙利度胺至放疗结束)和未服药组51例(VEGF水平降低的患者不服用沙利度胺放疗至结束),观察沙利度胺干预下食管癌放疗的疗效及服用药物的安全性.另设30例健康对照组.结果 86例食管癌患者放疗前血清VEGF表达水平较30例健康对照者升高,差异有统计学意义(t=5.07,P＜0.01),且与原发肿瘤大小(t=4.55,P＜0.01)、淋巴结转移(t=7.50,P ＜0.01)、组织病理类型(F=3.40,P＜0.01)及临床分期均有关(t=2.52,P＜0.01),而与病变部位、远处转移、X射线分型、患者性别、年龄均无关(P均＞0.05).服药组患者放疗后较放疗中血清VEGF的表达水平降低(t=2.37,P＜0.05),放疗有效率为71.88％;未服药组患者放疗中、后血清VEGF的表达水平差异无统计学意义(t=0.18,P＞0.05),服药组与未服药组的患者比较,头晕、倦怠反应的发生率分别为62.50％和15.69％(x2=19.28,P=0.000),嗜睡的发生率分别为18.75％和1.96％(x2=5.168,P=0.023),Ⅲ-Ⅳ度食管炎发生率分别为12.50％和11.76％(x2=0.061,P=0.806),Ⅲ-Ⅳ度白细胞下降发生率分别为6.25％和9.80％(x2=0.026,P=0.872),Ⅲ～Ⅳ度血小板下降发生率分别为3.13％和5.88％(x2=0.002,P=0.965),Ⅲ～Ⅳ度恶心呕吐发生率分别为9.38％和27.45％(x2=2.913,P=0.088),过敏反应的发生率均为0.结论 沙利度胺能够降低食管癌患者血清VEGF的表达水平,患者服用沙利度胺后耐受性较好.