姜黄素损伤线粒体诱导食管癌Ec-109细胞凋亡的研究

目的:探讨姜黄素损伤线粒体诱导食管癌Ec-109细胞凋亡的作用机制。方法:80μmol/mL姜黄素作用于食管癌Ec-109细胞不同时间后,流式细胞仪检测细胞亚二倍体凋亡峰变化及线粒体膜电位变化;蛋白质印迹法检测细胞色素C释放及Caspase-9表达。结果:姜黄素呈时间依赖性诱导食管癌Ec-109细胞凋亡,12、24和48 h细胞亚二倍体凋亡峰分别为(15.89±2.12)%、(26.80±1.87)%和(36.97±1.80)%,对照组为(3.23±0.24)%,总体比较差异有统计学意义,F=6.75,P<0.01,各组间比较差异均有统计学意义,P<0.01。姜黄素作用3、6和12 h后线粒体膜电位分别为84.78%、67.03%和63.16%,对照组为97.17%,差异有统计学意义,F=5.12,P<0.05,各组间比较,6 h组与12 h组差异无统计学意义,P=0.062,余各组间有差别;6 h出现细胞色素C表达,12 h表达最高;12 h检测到Caspase-9表达,24 h表达最高。结论:姜黄素呈时间依赖性诱导食管癌细胞凋亡是通过损伤细胞线粒体、使之释放出细胞色素C以及激活Caspase-9实现的。     

survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制

目的 研究survivin反义寡核苷酸（ASODN）诱导肺癌细胞凋亡的作用,探讨survivin抗肺癌细胞凋亡的分子机制。方法 在脂质体介导下,分别以100mmol／L、300mmol／L和500mmol／L浓度的survivin ASODN,作用于肺癌细胞株NCI-H44624h、48h和72h后,用RT-PCR和Western blot检测survivin mRNA及蛋白表达,流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡;Rh123染色法检测细胞线粒体膜电位（△ψm）变化;ELISA法检测胞浆细胞色素C（cyt C）浓度;比色法检测胞浆内天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9（caspase-9）、caspase-3的活性;Western blot检测caspase-8蛋白表达;加入环孢霉素A（CsA）后,以FCM检测细胞凋亡。结果 与各对照组相比,survivin ASODN显著下调了survivin mRNA表达,且呈时间和浓度依赖性,其中以500mmol／L作用72h时效果最佳,抑制率达62．7％,其蛋白表达也显著下调。NCI-H446细胞的凋亡指数（AI）为48．35％,明显高于对照组（3．75％）、空脂质体组（3．41％）、无义寡核苷酸（NSODN）组（4．69％）、100和300mmol／LASODN组（19．85％和34．39％）;增殖指数（PI）为24．38％,明显低于上述各组（75．54％、73．12％、71．76％、51．03％和38．94％,P均〈0．01）。survivin ASODN导致细胞△ψm逐渐下降,并相继引起cytc的释放、caspase-9和caspase-3的激活,而caspase-8酶原无变化。CsA显著抑制了survivin ASODN诱导的细胞凋亡。结论 survivin通过调控线粒体凋亡途径发挥抗肺癌细胞凋亡作用;survivin ASODN能够显著下调survivin mRNA及蛋白表达,诱导肺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。     

姜黄素诱导人卵巢癌细胞株A2780凋亡及其分子机制的研究

背景与目的：姜黄素（curcumin）是传统中药姜黄的主要有效成分,其选择性抑制肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡作用日益成为研究的焦点,但其中所涉及的机制仍然不十分明确。本研究旨在探讨姜黄素对人卵巢癌细胞株A2780的诱导凋亡效应及其分子机制。方法：10-50μmol/L姜黄素分别处理A2780细胞6-24h后,MTT法检测癌细胞的生长活性;流式细胞仪（FCM）和吖啶橙-溴化乙啶荧光染色法检测细胞凋亡;SP免疫组化法检测细胞内NF-kB蛋白（P65）、caspase-3蛋白表达水平。结果：各浓度姜黄素对癌细胞生长抑制率为62.05％-89.24％,DNA直方图上可见亚“G1“峰;荧光显微镜下部分细胞发生凋亡形态学改变,凋亡率为21.5％-33.5％。NF-kB（P65）表达减弱、caspase-3表达增强,并呈时间依赖性。结论：姜黄素能显著抑制卵巢癌细胞的体外生长;上调caspase-3、下调NF-kB蛋白表达、诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。     

姜黄素对子宫颈癌HeLa细胞增殖抑制作用及其机制的研究

目的:探讨姜黄素(Curcum in)对体外培养人子宫颈癌HeLa细胞抗癌作用及分子机制。方法:MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测凋亡和细胞周期,PI/Hoechst33258荧光双染法检测细胞凋亡,W estern b lot法检测细胞凋亡相关蛋白Bc l-2和Bax蛋白的表达。结果:姜黄素对HeLa细胞生长有抑制作用,并呈剂量依赖性;流式细胞仪分析证实姜黄素能使HeLa细胞阻滞在S期,并出现亚二倍体凋亡峰;荧光双染法可见凋亡细胞;W estern b lot结果显示Bax蛋白表达均上调,而Bc l-2的表达无明显影响。结论:姜黄素对人子宫颈癌HeLa细胞的增殖具有显著的抑制作用并可诱导细胞凋亡;Bax蛋白的表达上调可能参与了诱导细胞凋亡。     

蝙蝠葛提取物对人肺癌细胞系A549诱导凋亡作用的研究

目的探讨蝙蝠葛提取物对人肺癌细胞系A549诱导凋亡和抗增殖作用及其机制,为开发抗肿瘤新中药提供实验依据。方法应用MTT法测定蝙蝠葛提取物对人肺癌细胞系A549的生长抑制作用;通过倒置显微镜、光学显微镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学变化;采用流式细胞术检测A549细胞的凋亡率;应用免疫组织化学技术检测药物处理前后凋亡相关蛋白酶caspase-3、caspase-8、caspase-9的表达。结果 （1）MTT法检测结果：蝙蝠葛提取物对人肺癌细胞系A549有明显的抑制生长的作用,且呈现出浓度的依赖性;（2）倒置显微镜观察结果：实验组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质凝集,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱;（3）HE染色观察结果：实验组肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质浓缩或染色质块形成,有的细胞膜起泡形成凋亡小体;（4）流式细胞术检测结果显示：蝙蝠葛提取物可以诱导A549细胞发生凋亡,加药组出现亚二倍体峰。结论 （1）蝙蝠葛提取物在体外对人肺癌细胞系A549有显著的诱导凋亡作用;（2）蝙蝠葛提取物诱导凋亡作用机制可能通过上调caspase-3、caspase-8和caspase-9蛋白表达,经由细胞凋亡的死亡受体和线粒体通路完成凋亡的启动和执行;（3）蝙蝠葛提取物具有显著的体外抗肿瘤作用,有望开发成一种新的抗肿瘤药物。     

过表达PRRX1 通过p53 介导的线粒体凋亡途径诱导肝癌SMMC7721 细胞凋亡

[摘要] 目的：探讨配对相关同源框1 蛋白（PRRX1）过表达对肝癌SMMC7721 细胞凋亡的影响及其分子机制。方法：分别用慢病毒介导PRRX1 过表达载体（pGMLV-PRRX1）、空载质粒（Vector）感染人肝癌SMMC7721 细胞,用qPCR和WB实验检测慢病毒感染后细胞中PRRX1 mRNA和蛋白的表达变化,用CCK-8 法、Annexin-V FITC/PI 染色流式细胞术分别检测PRRX1 过表达对SMMC7721 细胞增殖、凋亡的影响,用线粒体膜电位检测试剂盒（JC-10 染色法）检测细胞线粒体膜电位变化,用caspase 活性检测试剂盒（分光光度法）测定细胞中caspase-8 和caspase-9 酶活性,用WB实验检测细胞中p53、Bcl-2、Bax、Fas、Cleaved-caspase-3以及线粒体和细胞质中细胞色素C（Cty C）蛋白的表达。结果：成功构建PRRX1 过表达的SMMC7721 细胞株,感染细胞中PRRX1 mRNA和蛋白的表达水平显著升高（均P<0.01）。与对照组和空载组比较,PRRX1 过表达组SMMC7721 细胞的增殖能力显著下降、细胞凋亡率显著增高、Cleaved-caspase-3 剪切水平显著升高、线粒体膜电位显著下降、线粒体中Cty C蛋白表达下调、胞质中Cty C蛋白表达上调以及caspase-9 酶活性升高（P<0.05 或P<0.01）,同时p53 和Bax 蛋白表达增加而Bcl-2 蛋白表达降低（均P<0.05）,但Fas 蛋白表达及caspase-8 酶活性无显著变化（均P>0.05）。结论: PRRX1 过表达可诱导肝癌SMMC7721 细胞凋亡,其机制可能与p53介导的线粒体凋亡途径被激活有关。     

新型多胺缀合物NNAMB诱导K562细胞凋亡及其机制

目的 探讨新型多胺缀合物NNAMB诱导K562细胞凋亡及其分子机制.方法 采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法、台盼监拒染法检测细胞活力;Hoechst33258染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞周期变化、凋亡率、线粒体膜电位的变化;Western blot检测caspase-3、caspase-8、caspase-9和cytochrome c的表达.结果 NNAMB抑制K562细胞的生长,并呈现剂量及时间依赖性.随着NNAMB浓度的增加和作用时间的延跃,Sub-G1期细胞明显增加,线粒体膜电位下降.经NNAMB处理后的K562细胞中,可见到明显的凋亡细胞.蛋白印迹检测表明,NNAMB可诱导caspase-3、easpase-9的活化及线粒体cytochrome c释放到胞浆中,但caspase-8的表达无明显变化.结论 NNAMB能显著抑制K562细胞增殖,并可通过内源性线粒体途径诱导细胞凋亡.     

维生素E琥珀酸酯诱导K562/ADM细胞凋亡过程中线粒体结构和功能的改变

目的：观察维生素E琥珀酸酯（vitamin E succinate，VES）诱导K562／ADM耐药细胞凋亡过程中线粒体形态及功能的改变。方法：采用annexin V／PI双标记法和透射电镜检测K562／ADM细胞凋亡；电镜观察凋亡细胞线粒体形态结构变化；流式细胞仪（FCM）检测线粒体跨膜电位（△ψm）和caspase-3活性变化；激光共聚焦显微镜分析细胞色素C（cytochrome c，Cyt c）的释放。结果：20μmol／L和40μmol／L VES处理K562／ADM细胞12～24h，annexin V／PI染色检测发现早期凋亡细胞明显增加，并呈现典型的凋亡形态改变。线粒体内外膜融合、缩小、碎片化，嵴减少且紊乱；线粒体△ψm降低，细胞质内Cytc释放增多；caspase-3活性显著增强。结论：VES可能通过改变线粒体的形态结构和稳定性，导致线粒体膜电位降低，Cytc释放，caspase-3激活而诱发K562／ADM耐药细胞凋亡。     

新藤黄酸抑制人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的实验研究

目的 探讨新藤黄酸对人乳腺癌细胞株MCF-7的增殖抑制情况及其作用机制。方法 0.5～20μg／ml新藤黄酸处理MCF-7细胞72h,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测MCF 7细胞增殖抑制率;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染色检测细胞凋亡率;线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）检测线粒体跨膜电位变化;Western blotting检测Fas、FasL、caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果 0.5～20μg／ml新藤黄酸均能够抑制MCF-7细胞增殖,且增殖抑制作用呈浓度依赖,半数抑制浓度（IC₅₀）为1763 μg／ml。0.5～3.0μg／ml新藤黄酸即可诱导MCF-7细胞凋亡,凋亡作用呈时间和浓度依赖。0.5μg／ml新藤黄酸处理MCF 7细胞48h后早期凋亡率为3.7％,总凋亡率为7.2％,72h早期凋亡率为6.7％,总凋亡率为13.7％;3μg／ml新藤黄酸48h后早期凋亡率为69.5％,总凋亡率为71.7％,72h早期凋亡率为76.9％,总凋亡率为81.5％。0.5、1.0、1.5 μg／ml新藤黄酸导致线粒体跨膜电位下降的细胞比例升高,促凋亡相关蛋白 FasL、caspase-3、caspase-8、caspase-9表达水平呈浓度依赖性上升,Fas和Bax蛋白表达水平变化不大,抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平则呈浓度依赖性下降。结论 新藤黄酸通过诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡,抑制细胞增殖,其诱导凋亡的分子机制与死亡受体及线粒体凋亡途径密切相关。     

贝母素乙通过调控PI3K/Akt信号通路诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的：探究贝母素乙（Peiminine）对乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡的影响及其可能作用机制。方法：采用不同浓度贝母素乙或联合PI3K抑制剂LY294002干预MCF-7细胞,MTT法检测细胞增殖能力;Hoechst33258染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化;Western blotting检测细胞中PI3K(p110α)、Akt、p-Akt(ser473)、Bad、Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3以及线粒体和胞浆中细胞色素C(Cyt C)等蛋白表达水平。结果：贝母素乙可呈时间-浓度依赖性抑制MCF-7细胞增殖,诱导细胞出现凋亡形态改变,促进细胞凋亡,并降低线粒体膜电位,上调细胞中Bad、Bax、cleaved-Caspase-3及胞浆中Cyt C蛋白表达水平,下调PI3K(p110α)、p-Akt、Bcl-2和线粒体中Cyt C蛋白表达水平,而Akt蛋白表达水平无显著变化。然而,联合LY294002干预可增强贝母素乙对MCF-7细胞凋亡的促进作用。结论：贝母素乙可诱导乳腺癌MCF-7细胞凋...     

姜黄素对食管癌EC-109细胞增殖抑制的研究

目的检测姜黄素对食管癌EC-109细胞的增殖抑制作用,并从细胞周期角度探讨其分子机制。方法以体外培养的食管癌EC-109细胞株作为研究对象,分为实验组和对照组,实验组给予不同浓度姜黄素,对照组给予等剂量生理盐水。20、40、80μmol/L姜黄素分别作用于食管癌Ec-109细胞,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,应用流式细胞仪检测细胞周期各时相分布情况及计算细胞增殖指数,Western-blot检测细胞周期蛋白D1、E(cyclin D1、cyclin E)表达情况。结果 20、40、80μmol/L姜黄素分别作用食管癌EC-109细胞12、24、48 h后,与对照组比较,细胞增殖抑制率随着药物作用时间延长及剂量加大而增高,有统计学意义(F=71.40,P<0.00)。相同时间点不同浓度组间比较及相同浓度不同时间组间比较均有统计学意义(P<0.01),说明姜黄素呈现时间-剂量依赖性抑制细胞增殖。上述浓度姜黄素干预24 h后,G0/G1期细胞比例逐步增大,有统计学意义(P=6.27,P<0.05),不同浓度组间比较均有统计学意义(P<0.05),说明姜黄素阻滞EC-109细胞于G0/G1期呈剂量依赖关系。同样条件下,Western-blot检测到cyclin D1、cyclin E蛋白条带逐渐变窄,说明姜黄素能抑制周期蛋白表达。结论姜黄素通过下调食管癌EC-109细胞表达cyclin D1、cyclin E,使细胞阻滞于G/G期,起到抑制细胞增殖的作用。     

姜黄素抑制结肠癌SW480细胞的增殖及其机制

目的:研究姜黄素对人结肠癌SW480细胞增殖以及survivin、caspase-3和p-Akt表达的影响。方法:用不同浓度姜黄素(5～40μmol/L)作用SW480细胞24、48和72 h,MTT法检测姜黄素对SW480细胞生长的抑制作用,Western blotting法检测SW480细胞中survivin、caspase-3和p-Akt蛋白的表达。结果:姜黄素以剂量(5～40μmol/L)和时间(24～72 h)依赖的方式抑制SW480细胞的增殖(P<0.01),40μmol/L姜黄素作用72 h对SW480细胞生长的抑制率可达(75.86±3.93)%。姜黄素抑制SW480细胞中p-Akt、survivin蛋白的表达、促进caspase-3蛋白的表达,均呈时间和剂量依赖性;40μmol/L姜黄素作用SW480细胞48 h后p-Akt和survivin蛋白表达显著减少[(0.204±0.025)vs(0.367±0.035),P<0.01;(0.208±0.014)vs(0.385±0.034),P<0.01],caspase-3蛋白表达显著增加[(0.371±0.028)vs(0.127±0.023),P<0.01]。结论:姜黄素抑制SW480细胞增殖,其机制可能与抑制Akt磷酸化、下调survivin和上调caspase-3蛋白的表达有关。     

EFFECTS OF CURCUMIN ON PROLIFERATION AND APOPTOSIS IN ACUTE MYELOID LEUKEMIA CELLS HL-60

Curcuministhemajoringredientofextractsfromcurryfamilywidelyusedasayellowspiceandfoodadditive.Ithasavarietyofpharmacologicaleffectsincludinganti-inflammation,antioxidant,decreasingbloodlipid,enhancingphagocaryosisofmonocyte-macrophagesystemandregulatinghumanimmunityfunction.Ithasbeenshowntohaveanticarcinogenicpropertiesinanimalmodelsincludingcutaneous,gastrointestinaltractandbreastcancercausedbymanykindsofcarcinogenesisagents[1].Invitrostudieshaveshownthatcurcuminselectivelyinhibitgrowthofsomep…     

Curcumin induces apoptosis involving bax/bcl-2 in human hepatoma SMMC-7721 cells

Curcumin is a major active component of Curcuma aromatica salisb, which has been shown to inhibit proliferation of a wide variety of tumor cells. In this study, the molecular mechanisms of curcumin inducing apoptosis in human hepatoma SMMC-7721 cells were examined. We find that curcumin inhibits the growth of SMMC-7721 cells significantly in a concentration-depenent manner, with typical apoptotic morphological changes of cellular nuclei. Annexin-V/PI double staining detected by flow cytometry and expression of the relative apoptotic proteins (Bax, Bcl-2 and caspase-3) revealed a strong apoptosis-inducing competent of curcumin in SMMC-7721 cells. Curcumin increased the expression of bax protein while decreasing that of bc1-2 protein significantly. The results suggest that curcumin induction of apoptosis involves modulation of bax/bcl-2 in SMMC-7721 cells and provide a molecular basis for the development of naturally compounds as novel anticancer agents for human hepatomas.     

姜黄素阻断NF-κB信号通路抑制人卵巢癌细胞株3AO增殖

目的：探讨姜黄素（curcumin）对体外培养人卵巢癌细胞株3AO细胞增殖抑制及其作用机制.方法：选用人卵巢癌细胞株3AO进行体外培养,以20μg/L、40μg/L、80μg/L姜黄素分别处理3AO细胞24-48h,MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞仪检测细胞周期时相变化,Western blot法检测NF-κB、P-NF-κB、IκB、P-IκB蛋白的变化.结果：姜黄素对人卵巢癌细胞株3AO生长的抑制作用,呈剂量、时间依赖性.流式细胞仪分析证实姜黄素能使3AO细胞周期阻滞于G0/G1期,Western blot结果显示随姜黄素作用浓度的增加,NF-κB、P-NF-κB蛋白表达水平明显下降,IκB、P-IκB蛋白表达没有明显改变.结论：姜黄素对3AO细胞有明显的增殖抑制作用,此作用可以通过下调NF-κB蛋白表达及磷酸化实现,这是姜黄素抑制卵巢癌细胞生长的分子机制之一.     

4种化学物质对HaCaT细胞氧化应激相关基因表达的影响

目的: 探讨过氧化氢、姜黄素、槲皮素及叔丁基对苯二酚对84种氧化应激相关基因表达的影响。方法: 取对数生长期的HaCaT细胞,采用不同浓度的过氧化氢、姜黄素、槲皮素及叔丁基对苯二酚,用四甲基噻唑蓝(MTT)法评价受试物的细胞毒性。将不同浓度的过氧化氢(0.5和1.25 mmol/L)、姜黄素(5和20μmol/L)、槲皮素(200和500μmol/L)及叔丁基对苯二酚(10和50μmol/L)分别处理HaCaT细胞4 h及24 h后,提取RNA,对RNA质量进行评价,然后采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测HaCaT细胞中84种氧化应激相关基因的表达水平。结果: MTT试验显示,过氧化氢、姜黄素和叔丁基对苯二酚浓度分别在>1 mmol/L、>10μmol/L和>50μmol/L时,HaCaT细胞的存活率在80%以下;而槲皮素在浓度为1 000μmol/L仍未显示出明显的细胞毒性。qPCR结果显示,上述4种化学物质在不同浓度不同时间对HaCaT细胞氧化应激相关基因的表达有一定的影响。过氧化氢1.25 mmol/L作用4 h能引起HMOX1、SPINK1等基因表达上调而1.25 mmol/L作用24 h时CCL5表达下调;姜黄素20μmol/L作用4 h能引起HMOX1、ALB等基因表达上调以及GSR等基因表达下调;槲皮素500μmol/L作用4 h能引起ALB、HMOX1等基因表达上调以及SEPP1等基因表达下调;叔丁基对苯二酚10μmol/L作用4 h能引起基因EPX、HMOX1等基因表达上调,而10μmol/L作用24 h时AOX1等基因表达下调。结论: 过氧化氢、槲皮素、姜黄素及叔丁基对苯二酚,这4种化学物质均可引起氧化应激相关基因发生改变,均能引起基因HMOX1表达上调,而且高浓度的化学物质引起的基因表达变化高于低剂量,为抗氧化剂的添加提供了一定的理论依据。     

姜黄素对肝癌细胞凋亡及TNF-ɑ、IL-1β、IL-6炎性因子影响的机制研究

目的 探讨姜黄素对肝癌细胞凋亡及肿瘤坏死因子α(TNF-ɑ)、白介素1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)炎性因子的影响及机制.方法 采用5、10、20、40、80、160μmol/L的姜黄素处理人肝癌HepG2细胞24、48 h后,CCK8实验检测细胞的增殖情况,计算IC50值;50μmol/L的姜黄素处理HepG2细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot检测TNF-ɑ、IL-1β、IL-6、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Notch1、Hes1蛋白表达情况.结果 细胞抑制率随着姜黄素作用时间及浓度的增加显著升高.根据IC50值选择50μmol/L的姜黄素作为研究对象;以50μmol/L的姜黄素处理肝癌细胞的凋亡率及Cleaved Caspase-3蛋白表达明显高于对照组,TNF-ɑ、IL-1β、IL-6、Notch1、Hes1蛋白表达均明显低于对照组(P﹤0.01).结论 姜黄素可呈时间及剂量依赖式抑制人肝癌HepG2细胞增殖,可诱导细胞的凋亡,可通过降低TNF-ɑ、IL-1β、IL-6的表达达到抗炎作用,其机制与抑制Notch1信号通路有关.     

Active roles of caspase-3 in human gastric carcinoma cell death by apoptosis inducing nucleosides from CD57+HLA-DRbright natural suppressor cell line

The six apoptosis inducing nucleosides (AINs), which were isolated by high performance liquid chromatography from CD57+HLA-DRbright natural suppressor (57.DR-NS) cell cultures, induced apoptosis in human gastric carcinoma (GCIY) cells demonstrating the accumulation of sub-G1 DNA content and morphological changes. By means of DNA unwinding assay, it has been revealed that DNA strand breaks were initially involved in the apoptotic cell death of GCIY cells treated with AINs followed by activation of caspase cascades, especially caspase-3. Actually, the cleavage of fluorogenic substrate for caspase-3 was identified in the reaction. Whereas, the addition of caspase-3 inhibitor into the reaction prevented the cleavage of fluorogenic substrate for caspase-3 and resulted in the blockage of the sub-G1 DNA accumulation and DNA fragmentation as apoptotic signals. Thus, it was definitely elucidated that the activation of caspase-3 displayed a key feature during AIN-induced apoptosis in GCIY cells.     

姜黄素对胆管癌 MZ-Cha-1细胞凋亡的诱导作用

目的： 研究姜黄素对胆管癌MZ-Cha-1细胞凋亡的诱导作用。方法：用0、10、20、40 μg/mL姜黄素处理MZ-Cha-1 细胞12、24、36 h后，应用噻唑蓝 (MTT)检测姜黄素对MZ-Cha-1细胞的抑制情况，再选择10 μg/mL姜黄素处理MZ-Cha-1细胞24 h后应用Giemsa和Hoechst33258染色检测MZ-Cha-1细胞的凋亡情况，应用流式细胞术检测细胞周期分布。结果：与对照组相比较，各姜黄素处理组对胆管癌MZ-Cha-1细胞有明显的抑制作用，并显示出对剂量和时间的依赖效应 (P<0.05)。10 μg/mL姜黄素诱导处理24 h后，经Giemsa染色显示细胞体积缩小、核固缩、染色质凝聚等显著的凋亡特征；细胞核经Hoechst33258 染色出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光；细胞周期检测出现细胞被阻滞在G0/G1期，G2/M期细胞较对照组显著减少 (P<0.05)。结论：姜黄素能够有效诱导人胆管癌MZ-Cha-1细胞的凋亡。     

Curcumin Encapsulated into Biocompatible Co-Polymer PLGA Nanoparticle Enhanced Anti-Gastric Cancer and Anti-Helicobacter Pylori Effect

Background: The current disadvantages (high cost, toxicity, resistance) of chemotherapy for gastric cancer opted people for alternative therapy from natural source. Curcumin (natural product) possess multiple biological activities but low bio-availability limits their uses as therapeutic. The Nano-formulation of curcumin increased the bioavailability and productivity of anti-cancer and anti-bacterial properties. The present study was initiated to determine the anti-cancer and anti-bacterial effect of Nano curcumin against gastric cancer and H. pylori. Methods: Curcumin loaded PLGA nanoparticles (CUR-NPs) was prepared by single emulsion solvent evaporation method. The MIC were determined using agar dilution method to find the anti-H. Pylori activity of Nano curcumin. The cytotoxicity of Nano curcumin was evaluated by MTT assay and the apoptotic effect (cell cycle arrest and morphology change) was shown by PI staining and microscopy. Results: The MIC of nanocurcumin and curcumin for all four H. pylori strains were 8 µg/ml and 16 µg/ml respectively. The inhibition rate of gastric cancer cells after treatment with curcumin was increased from 6% to 67% for 24h, from 8% to 75% for 48h, from 10% to 83% for 72h. In case of nanocurcumin, the inhibition rate increased from 7% to 69% for 24h, 11% to 87% for 48h and 16% to 97% for 72h. The IC50 of curcumin and Nano-curcumin were 24.20 µM and 18.78 µM respectively for 72 h. The population of cells in sub-G0 population increased from 4.1% in the control group to 24.5% and 57.8% when treated with curcumin and nanocurcumin respectively. After 72h of treatment with nanocurcumin, the apoptotic cells population increased as compared to native curcumin treated cells. Conclusion: The Nano curcumin might be used as a potential therapeutics against gastric cancer and H. Pylori. There is need of further in vivo study in order to validate CUR-NPs activity.