芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的 研究芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的增殖作用。方法 采用血清药理学和体外培养HUVEC的方法,通过倒置显微镜观察、MTT法和流式细胞术（FCM）检测芎芍胶囊高、中、低3个浓度含药血清对HUVEC增殖的影响。结果 MTT法检测结果显示高、中、低剂量的芎芍胶囊含药血清均有促进HUVEC增殖的作用,增殖率分别为54．14％、54．98％、33．77％;FCM法检测发现高、中、低剂量芎芍胶囊含药血清均可增加S期细胞比例,分别为52．14％、42．65％、37．08％;显微镜观察结果也显示各含药血清具有促进HUVEC增殖的作用。结论 芎芍胶囊能促进HUVEC的增殖,其促进细胞增殖的作用与浓度有一定的关系;提示芎芍胶囊的促血管新生作用可能是通过促进血管内皮细胞的增殖。     

通脉降浊煎剂含药血清对泡沫细胞胆固醇流出率的影响

目的研究通脉降浊煎剂含药血清(TDMS)对泡沫细胞胆固醇流出率的影响及可能机制。方法采用50mg/L ox-LDL诱导巨噬细胞48h,建立巨噬细胞源泡沫细胞模型,添加TDMS,将细胞分为对照组(正常巨噬细胞),ox-LDL组(50mg/L ox-LDL),β-环糊精(β-CD)组(50mg/L ox-LDL+10mmol/Lβ-CD),正常血清(CS)组(50mg/L ox-LDL+等体积正常血清),TDMS组(50mg/L oxLDL+5%TDMS)。检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇含量和细胞胆固醇流出率;采用Western blot方法检测细胞内三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达;Real-time PCR方法检测细胞内ABCA1、miR-33a、miR-33bmRNA表达。结果与对照组比较,ox-LDL组细胞内总胆固醇、游离胆固醇含量和胆固醇流出率均增加(P0.05,P0.01),ABCA1mRNA和蛋白表达水平降低(P0.01),miR-33a和miR-33bmRNA表达水平均升高(P0.01)。与ox-LDL组比较,β-CD组与TDMS组细胞内总胆固醇和游离胆固醇含量均下降,胆固醇流出率增大(P0.05,P0.01),ABCA1mRNA和蛋白表达水平升高(P0.01),细胞内miR-33a和miR-33bmRNA表达水平均降低(P0.01)。结论 TDMS通过调节miR-33a/b和ABCA1表达,从而提高胆固醇流出率,降低泡沫细胞内胆固醇含量。     

芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞PCNA表达的影响

目的通过观察芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨芎芍胶囊促内皮细胞增殖的分子机制。方法利用血清药理学方法制备芎芍胶囊含药血清,在体外干预培养HUVEC。MTT法检测芎芍胶囊对HUVEC增殖的影响,采用RT-PCR法测定PCNA的mRNA表达,ELISA法检测培养液中PCNA的蛋白含量。结果芎芍胶囊低、中、高剂量含药血清均有促进HUVEC细胞增殖的作用(P0.01);RT-PCR和ELISA法检测结果显示芎芍胶囊各剂量含药血清均有显著地促进PCNA的mRNA表达和蛋白表达的作用(P0.05),并具有明显的剂量依赖性。结论芎芍胶囊促进HUVEC增殖的作用机制可能与上调PCNA的表达密切相关。     

用血清药理学方法观察芎芍胶囊对兔胸主动脉平滑肌细胞增殖凋亡的影响

目的 :采用血清药理学方法观察芎芍胶囊对内皮素 (ET)致兔胸主动脉平滑肌细胞 (SMC)增殖凋亡的影响。方法 :分离正常兔胸主动脉SMC ,并传代培养 ,用ET造成胸主动脉SMC增殖模型。给正常兔灌胃芎芍胶囊混悬液 10天 ,制备含药血清 ,采用噻唑蓝 (MTT)比色法、流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳法观察其对SMC增殖凋亡的影响。结果 :ET能明显促进SMC增殖 ,芎芍胶囊含药血清可减少S +G2 期SMC所占比例 ,对ET所致SMC增殖有明显抑制作用 ,并呈剂量依赖性 ,大剂量时尚可诱导SMC凋亡。结论 :芎芍胶囊可明显抑制ET所致SMC增殖 ,并有一定的诱导SMC凋亡的作用。这可能是其临床用于预防冠状动脉介入治疗后再狭窄的作用机制之     

用血清药理学方法观察芎芍胶囊对兔胸主动脉平滑肌细？…

目的：采用血清药理学方法观察芎芍胶囊对内皮素（ＥＴ）致兔胸主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖凋亡的影响。方法：分离正常兔胸主动脉ＳＭＣ,并传代培养,用ＥＴ造成胸主动脉ＳＭＣ增殖模型。给正常兔灌胃芎芍胶囊混悬液１０天,制备含药血清,采用噻唑蓝（ＭＴＴ）比色法、流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳法观察其对ＳＭＣ增殖凋亡的影响。结果：ＥＴ能明显促进ＳＭＣ增殖,芎芍胶囊含药血清可减少Ｓ＋Ｇ２期ＳＭＣ所占比例,对ＥＴ所     

芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞VEGF、Ang-2基因表达的影响

目的:观察芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)VEGF、 Ang-2基因表达的影响,探讨芎芍胶囊促血管新生的作用机制.方法:芎芍胶囊高、中、低不同剂量含药血清作用于HUVEC,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,MTT法观察细胞增殖情况,RT-PCR法检测VEGF、Ang-2 mRNA的表达.结果:芎芍胶囊含药血清各剂量组均有促HUVEC增殖作用(P<0.01),高剂量组具有显著促进VEGF表达作用(P<0.01);而中、低剂量组作用不明显;高、中剂量组具有明显抑制Ang-2表达作用(P<0.05～0.01),低剂量组的作用不明显.结论:芎芍胶囊可促进VEGF的表达,降低Ang-2的表达,其促血管新生作用机制与此两条通路有关.     

芎芍胶囊对动脉粥样硬化兔血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究芎芍胶囊对实验性兔动脉粥样硬化（AS）血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响,并探讨其可能的机制。     

犬一次口服芎芍胶囊后芍药甙的药代动力学

目的测定中药复方制剂芎芍胶囊中芍药甙的药动学参数,为临床合理用药提供实验依据.方法采用反相高效液相色谱法,紫外检测.3P87药代动力学软件拟合药动学模型.结果犬灌胃芎芍胶囊后芍药甙的体内过程符合开放性一室模型,药代参数为ka=0.0082±0.0010(min-1),ke=0.0060土0.0015(min-1),t1/2ka=86.10±12.38(min),t1/2ke=119.95±27.23(min),tpeak=169.16±21.81(min),Cmax=3845.89±716.70(μg·L-1).     

白背叶根含药血清对脂多糖诱导下RAW264.7细胞分泌的影响

目的:观察不同浓度的白背叶根含药血清对脂多糖(lipopolysac-charide,LPS)诱导下RAW264.7细胞分泌的影响。方法:制作高、中、低浓度白背叶根含药血清,以CCK-8法检测不同浓度白背叶根含药血清对RAW264.7细胞活力的影响。以脂多糖刺激生长良好的RAW264.7细胞,建立细胞炎症模型,检测白背叶根含药血清对细胞上清液中炎症介质一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)、白三烯B4(LTB4)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响。结果:不同浓度的白背叶根含药血清均对RAW264.7细胞活力无影响;与模型组比较,10%、5%的白背叶根含药血清可显著抑制NO的释放(P<0.05或P<0.01),10%白背叶根含药血清可显著抑制LTB4的分泌(P<0.05),2.5%白背叶根含药血清可显著抑制IL-1β的分泌(P<0.05);但不同浓度的白背叶根含药血清对PGE2、TNF-α的分泌无显著影响。结论:白背叶根的抗炎机制可能是通过抑制炎症反应中NO,LTB4,IL-1β的释放而实现。     

丹皮酚对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响

目的探讨丹皮酚对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响。方法以氧化型低密度脂蛋白诱导RAW264.7巨噬细胞泡沫化为模型,油红O染色检测细胞内脂质,荧光探针Dil标记氧化低密度脂蛋白(oxidized low-densitylipoprotein,oxLDL)并结合高内涵筛选成像系统检测oxLDL摄取,实时荧光定量PCR检测CD36和清道夫受体A(scaven-ger receptor A,SR-A)表达。结果成功建立了RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞模型,经不同浓度丹皮酚作用后,细胞内脂质减少,oxLDL摄取下降,SR-A基因表达下降,但CD36基因表达无显著改变。结论丹皮酚可抑制RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞形成,其作用机制可能与下调SR-A表达有关。     

黄芪注射液对人单核细胞源性泡沫细胞内胆固醇外流的影响

目的观察黄芪注射液是否对人外周血单核细胞源性泡沫细胞内胆固醇外流产生作用和影响,从机体胆固醇逆转运（RCT）的角度探讨黄芪的调脂机制和抗动脉粥样硬化的作用。方法采用密度梯度离心法和塑料吸附法从人外周血中分离出单核细胞,以50nmol／I。佛波酯（PMA）刺激48h使之转化为巨噬细胞。细胞分为对照组与实验组,以黄芪注射液干预后分别测定细胞内总胆固醇（TC）、游离胆固醇（FC）与蛋白（Pro）含量的变化,观察黄芪注射液对细胞内TC／Pro影响的量效关系和时效关系。结果成功建立人单核细胞源性泡沫细胞模型。经不同浓度黄芪注射液作用后,细胞中TC／Pro随黄芪注射液浓度的增加而呈剂量依赖性降低,细胞泡沫化程度也随着药物浓度的升高而降低（P〈0．01）,且在药物浓度一定的情况下,细胞中TC／Pro随黄芪注射液处理时间的延长而呈时间依赖性降低（P〈0．01）。结论黄芪注射液通过降低细胞内TC含量,一定程度上减轻巨噬细胞的泡沫化程度,推测可能与其抑制巨噬细胞上SR—B1受体功能从而抑制细胞对胆固醇摄取,或是通过增强巨噬细胞上ABCA1转运体的功能而促进了细胞内胆固醇的外流有关,或者是两者共同作用的结果。     

黄连解毒汤含药血清对泡沫细胞ABCA1表达与胆固醇含量的影响

目的:观察黄连解毒汤含药血清对泡沫细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达及胆固醇含量的影响,探讨黄连解毒汤抗动脉粥样硬化的可能作用机制。方法:SD大鼠给予大、中、小剂量黄连解毒汤灌胃后制备含药血清。用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导RAW264.7巨噬细胞分化为泡沫细胞,将细胞分为空白组、模型组、黄连解毒汤含药血清大剂量组、中剂量组、小剂量组,每组1.5×10^6个细胞,分别加入无血清培养液和不同浓度含药血清干预24 h,总胆固醇及游离胆固醇试剂盒检测细胞中胆固醇含量,实时荧光定量PCR检测细胞ABCA1 mRNA的表达。结果:与模型组比较,黄连解毒汤含药血清各剂量组泡沫细胞内总胆固醇(TC)含量明显降低(P<0.05或P<0.01),大剂量组游离胆固醇(FC)含量显著下降(P<0.01);含药血清各剂量组ABCA1 mRNA表达均明显升高(P<0.05)。结论:黄连解毒汤上调泡沫细胞ABCA1的转录与表达,促进胆固醇流出,可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。     

芎芍胶囊对兔实验性动脉粥样硬化血管重构的影响

目的 研究芎芍胶囊对实验性兔动脉粥样硬化(AS)模型血管重构的影响,并探讨其可能的机制。方法 采用4Fogarty导管剥脱损伤腹主动脉内皮后继喂高脂饲料的方法,复制兔节段性AS模型。术后随机分为8组,即模型3天组、2周组、6周组,单纯内皮损伤组,普罗布考组,芎芍胶囊小剂量组、大剂量组及正常对照组。除正常对照组及单纯内皮损伤组外均予高脂饲料喂养,对腹主动脉病变最明显处标本作病理形态学检查,并利用计算机图像分析系统观察动脉损伤后血管重构相关指标的变化及药物对其的影响并进行内膜增殖与血管重构的相关性分析。结果 球囊损伤腹主动脉内皮后,随时间延长,动脉内膜逐渐增厚,模型6周组与模型2周组及内皮损伤组比较差异有显著性(P<0．01),芎芍胶囊大剂量与普罗布考组可明显减少内膜最大厚度(MIT)及内膜面积(IA),与模型6周组比较差异有显著性(P<0．01);随内膜增厚,动脉出现早期代偿性扩张,模型2周组内弹力膜围绕面积(IELa)、外弹力膜围绕面积(EELa)及管腔最小直径(MLD)、管腔面积(LA)均较正常组明显增加(P<0．01),至模型6周时,随内膜进一步增厚,IELa、EELa反而有所缩小,血管代偿性扩张不足,管腔明显缩窄,MLD缩小(P<0．01),各药物组均可增加MLD、LA,与模型6周组比较差异有显著性(P<0．01)。结论 单纯内皮损伤可能是病理性血管重构的始动因素之一,高脂血症可加重这一病理改变;内膜增殖和病理性血管重构共同参与了内皮损伤后AS管腔狭窄的病理过程;芎芍胶囊通过抑制球囊损伤后的内膜增殖,干预病理性血管重构,发挥防治AS作用。     

芎芍胶囊干预冠心病介入治疗后再狭窄的研究

目的 在以往临床初步证明芎芍胶囊有预防冠心病介入治疗（PCI）后再狭窄（RS）的基础上,进一步评价其干预PCI后RS的作用。方法 采用双盲、随机、安慰对照方法,124例冠心病支架置入患者。随机分为芎芍胶囊试验组和安慰剂对照组,每组62例,随访6个月。依据冠状动脉造影（CAG）,以RS率为主要疗效指标,结合心绞痛复发率、临床终点事件发生率和血瘀证计分,观察芎芍胶囊对PCI后患者RS的干预作用。结果 118例有效病例中62例进行了6个月CAG随访,随访率为52．5％。试验组RS发生率为24＋1％,支架内RS率为14．0％。对照组RS发生率为48．5％,支架内RS率为42．0％。与对照组比较,试验组RS率明显降低（P〈0．05）。试验组6个月后CAG复查病变血管管腔直径为（2．21±0．85）mm、血管狭窄程度为（26．58±20．72）％,对照组血管管腔直径为（1．72±0．99）mm、狭窄程度为（41．19±30．92）％;与对照组比较,试验组狭窄程度显著降低、管腔直径丢失显著减少（均P〈0．05）。试验组6个月临床终点事件发生率为11．7％,对照组为27．6％,试验组较对照组下降,已明显接近统计学差异水平（P=0．051）。6个月后血瘀证计分试验组显著低于对照组（P〈0．01）。结论 在西药常规治疗基础上加用芎芍胶囊,对PCI后RS可以起到较好的防治作用。     

芎芍胶囊对兔动脉粥样硬化模型脂质代谢及血小板聚集的影响

目的 观察芎芍胶囊对兔动脉粥样硬化模型脂质代谢及血小板聚集的影响并探讨其可能机制。方法 用4F·Forgarty导管剥脱损伤腹主动脉内皮后继喂高胆固醇饲料的方法,复制节段性兔动脉粥样硬化模型。70只动物术后随机分为7组,即模型3天、2周、6周组(A、B、C组),单纯内皮损伤组（D组）,普罗布考组(E组),芎芍胶囊小剂量组（F组）,芎芍胶囊大剂量组（G组）,另10只为假手术组（N组）。除D组和N组外,其余各组均在高胆固醇饲料基础上分别喂以不同种类及剂量的药物。在各观察时点,动物处死前心脏抽血测定TC、TG、HDL-C、LDL-C等指标;术后3天及实验结束时心脏取血,测定5 min内血小板最大聚集率（mPAGR）。结果 （1）对AS兔血脂水平的影响：D组血脂水平与N组比较无明显变化（P>0.05）;动物喂食高脂饲料3天后TC、LDL-C即明显升高,A、B、C组与N组比较差异均有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）;实验结束时,与C组比较,G、E组TC、LDL-C均明显降低,G、E、F各组均能降低LDL-C/HDL-C比值,尤以G组明显（P＜0.01）;G组尚有升高HDL-C的趋势,E组变化不明显。G组可明显降低致动脉粥样硬化指数（AI,TC/HDL-C）,与C、E组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）对血小板聚集的影响：内皮损伤后3天A、B、C组及D组mPAGR均明显升高,与N组比较差异均有统计学意义(P＜0.01);G、E、F各组均明显降低术后3天mPAGR,与C组比较,G组差异有统计学意义（P＜0.05）。G、E、F各组均可降低术后6周mPAGR,与C组比较有统计学意义（P＜005,P＜0.01）,以G组作用更为显著。结论 芎芍胶囊可降低兔动脉粥样硬化模型TC、LDL-C水平及动脉粥样硬化指数AI,还可抑制该模型的早期及术后6周血小板集聚,这些可能是其抗AS的机制之一。     

芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生的影响

目的:观察芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生的影响.方法:采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,清洁级(或SPF级)SD大鼠(雌雄各半)分为模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组8只,分别用生理盐水、芎芍胶囊高、中、低剂量进行灌胃给药,连续给药6周后采集血,分离样本,并按规定保存,用免疫组化评分法...     

芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌mRNA表达水平的影响

目的用RT-PCR检测中成药芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生作用。方法采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,SD大鼠分为模型对照组和芎芍胶囊高、中、低剂量组,灌胃给药,连续给药6周;RT-PCR法检测缺血心肌EGF、VEGF、TGF-β1、PDGF-A、PDGF-BB等促血管生成因子的表达。结果其中芎芍胶囊低、中、高剂量组VEGF、EGF与模型对照组比较均有统计学意义,高剂量组对VEGF的促进作用较中、低剂量组有统计学意义,中剂量组对EGF的促进作用较高、低剂量组有统计学意义,对照组对TGF、PDGF促进作用较高、中、低剂量组有统计学意义。结论芎芍胶囊具有促进心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生、提高心肌梗死大鼠心肌细胞VEGF、FGF、EGF蛋白的表达、具有保护心肌缺血性损伤的作用。