晚期糖基化终产物受体、可溶性晚期糖基化终产物受体与2型糖尿病心血管并发症的关系

晚期糖基化终产物受体(RAGE)是细胞表面分子免疫球蛋白超家族受体成员之一,作为一种细胞信号转导受体,与多种配体结合后,激活多种细胞信号转导通路,引起氧化应激和炎症反应等,参与动脉粥样硬化的形成,与2型糖尿病、冠状动脉粥样硬化性心脏病密切相关;可溶性RAGE是游离的RAGE胞外段,可与RAGE配体竞争性的结合,抑制RAGE介导的信号传递,拮抗配体-RAGE轴过度活化所致的生物学效应,起保护作用。     

可溶性晚期糖基化终产物受体与慢性肾脏病患者动脉粥样硬化的相关性研究

目的 探讨慢性肾脏病(CKD)患者可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)水平及其与动脉粥样硬化的相关性.方法 102例CKD患者作为观察组,41例健康人群作为对照组,测定两组患者血清sRAGE水平、颈动脉内膜中层厚度(IMT)以及血肌酐、血脂等指标,探讨sRAGE水平与CKD患者各临床指标的相关性.结果 与对照组比较,观察组患者心血管事件发生率高,且sRAGE、血肌肝、C反应蛋白、收缩压、甘油三酯、空腹血糖和血磷水平升高(P<0.05),血红蛋白和胆固醇水平降低(P<0.05);观察组患者颈动脉内径和斑块总数大于/多于对照组(P<0.05);观察组患者sRAGE水平与年龄、标准化肾小球滤过率、IMT均呈负相关(P<0.01).结论 sRAGE可作为评价CKD患者动脉粥样硬化病变的重要参考指标,为诊断及预防CKD患者心血管病变提供帮助.     

慢性肾脏病患者可溶性晚期糖基化终产物受体与 动脉粥样硬化的相关性研究

目的　了解慢性肾脏病(CKD)患者的可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)水平与动脉粥样硬化是否具有相关性.方法　选取２０１４年６月至２０１５年 １０月入住我院的CKD患者１０２例,分为观察组与对照组,测定血清可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)水平,颈动脉内膜中层厚度(IMT)以及部分生化指标,分 析sRAGE水平与CKD患者动脉粥样硬化是否相关.结果　与对照组比较,CKD患者心血管事件发生率高,且有较高的收缩压、甘油三酯、葡萄糖和血磷水平,较 低的血红蛋白和胆固醇水平(P ＜０．００１),CKD患者颈动脉内径和斑块总数的均高于对照组(P ＜０．００１),CKD 组患者sRAGE 水平与年龄、估算的肾小球滤过率、 IMT均呈负相关(P ＜０．０１).结论　sRAGE可作为生物标志物,为诊断及预防CKD引起的心血管疾病提供依据.     

羧甲基赖氨酸和可溶性糖基化终产物受体水平与2型糖尿病冠状动脉钙化相关性研究

目的探讨羧甲基赖氨酸(CML)和可溶性糖基化终产物受体(sRAGE)水平与2型糖尿病冠状动脉钙化及其危险因素的关系。方法 101例2型糖尿病患者采用ELISA法检测sRAGE和CML水平;根据64排螺旋CT冠状动脉钙化积分(CACS)结果分为钙化组(CACS>0),无钙化组(CACS=0),并进一步分四个亚组;测定踝臂指数(ABI)、颈动脉内膜中层厚度(IMT)及糖脂指标等;所有资料均以SPSS 16.0软件进行统计分析。结果二项分类Logistic回归分析发现年龄及ABI是冠状动脉钙化独立相关因素;CACS与年龄呈正相关,与ABI呈负相关;重度钙化组sRAGE水平较无钙化组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ABI可作为评估冠状动脉钙化的独立预测因子;年龄是冠状动脉钙化的独立危险因素;sRAGE是冠状动脉硬化、钙化进程中的预测指标和保护因子。     

人可溶性晚期糖基化终产物受体的原核表达及活性鉴定

目的构建人可溶性晚期糖基化终产物受体(hsRAGE)His融合蛋白表达载体并在原核细胞表达与纯化。方法PCR扩增hRAGE基因编码区的胞质外段，利用分子克隆技术将其重组于pET-14b载体中。利用酶切、序列分析鉴定克隆正确性转化大肠杆菌BL21(DE)3，用异丙基b—D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达。以尿素对获得的包涵体进行处理，用金属螯合亲和层析的方法纯化融合蛋白并进行复性。以Western印迹和ELISA法对融合蛋白的免疫原性及与AGE的结合活性进行鉴定。结果克隆的hsRAGE完全正确．经过表达与纯化．获得了相对分子质量约45000的融合蛋白。纯化得到的变性蛋白经复性后可被相应抗体识别。所得到的hsRAGE具有与AGE相互结合的活性，并能够抑制AGE绣导的内皮细胞NF-κB的表达．结论成功地构建了hsRAGE融合蛋白原核表达载体且获得高效表达．得到大量的复性蛋白；该蛋白具有特异的免疫原性，保持与AGE的结合活性．并能够有效阻断AGE-RAGE相互作用。     

人可溶性晚期糖基化终产物受体的原核表达及活性鉴定

目的构建人可溶性晚期糖基化终产物受体(hsRAGE)His融合蛋白表达载体并在原核细胞表达与纯化。方法PCR扩增hRAGE基因编码区的胞质外段,利用分子克隆技术将其重组于pET-14b载体中。利用酶切、序列分析鉴定克隆正确性。转化大肠杆菌BL21(DE)3,用异丙基b-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达。以尿素对获得的包涵体进行处理,用金属螯合亲和层析的方法纯化融合蛋白并进行复性。以Western印迹和ELISA法对融合蛋白的免疫原性及与AGE的结合活性进行鉴定。结果克隆的hsRAGE完全正确,经过表达与纯化,获得了相对分子质量约45000的融合蛋白。纯化得到的变性蛋白经复性后可被相应抗体识别。所得到的hsRAGE具有与AGE相互结合的活性,并能够抑制AGE诱导的内皮细胞NF-kB的表达。结论成功地构建了hsRAGE融合蛋白原核表达载体且获得高效表达,得到大量的复性蛋白;该蛋白具有特异的免疫原性,保持与AGE的结合活性,并能够有效阻断AGE-RAGE相互作用。     

糖基化终产物及其受体对妊娠期糖尿病患者围产儿结局的影响

目的 研究糖基化终产物及其受体在妊娠期糖尿病和非妊娠期糖尿病孕妇中的水平差异,以及糖基化终产物及其受体水平对围产儿结局的影响.方法 选取在我院产前检查并生产的妊娠期糖尿病孕妇90例作为研究组,选取同孕期无妊娠期糖尿病的孕妇90名作为对照组.比较两组的糖基化终产物水平,并对比研究组治疗前后与同孕期对照组的糖化血红蛋白和糖基化终产物水平,检测并比较两组胎盘组织中糖基化终产物受体的水平,采用logistic回归分析围生儿结局与其糖基化受体等的关系.结果 研究组的糖基化终产物水平[（50.42±16.44）ng/L]水平明显高于对照组[（30.23±11.22）ng/L],且在治疗后差异仍然存在[（44.33±11.54） ng/L vs（37.42±9.42）ng/L];而采用West-ern印迹法测量的研究组胎盘组织中糖基化终产物受体水平（0.998±0.076）也明显高于对照组（0.475±0.013）.回归分析显示,高糖基化终产物水平是影响围产儿结局的一个危险因子（OR=7.342,P＜0.01,95％CI=3.691-10.993）.结论 高糖基化终产物水平是影响妊娠期糖尿病围生儿结局的一个不利因素,糖基化终产物水平可作为其围生儿结局异常的一个重要检测指标.     

晚期糖基化终产物受体Gly82Ser多态性与2型糖尿病相关性的研究

目的 探讨晚期糖基化终产物受体(RAGE)基因Glv82Ser多态性在中国汉族人中的分布特点和对中国2型糖尿病易感性的影响.方法 应用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测194例2型糖尿病患者和546例非糖尿病对照者的Gly82Ser多态性基因型.结果 中国人RAGE基因Gly82Ser多态基因型以GG型、等位基因以G型为主,其频率分布显著高于其他国家和种族.2型糖尿病患者和非糖尿病对照者间,RAGE基因Gly82Ser多态性的基因型(GG、GS、SS)频率或等位基因(G、S)分布皆无显著性差异(P＞0.05).结论 RAGE基因Gly82Ser多态性与中国2型糖尿病的发病、发展无关,提示RAGE基因Gly82Ser并非中国2型糖尿病的易感基因.然而,与其他国家、种族相比,RAGE基因Gly82Ser多态性在中国汉族人群、中国2型糖尿病人群呈高分布频率.     

RAGE、sRAGE与冠心病的关系

晚期糖基化终产物受体(RAGE)属于细胞表面分子免疫球蛋白超家族中的一个成员,可与多种配体结合后影响细胞内信号转导、刺激细胞因子释放等从而发挥其生物学效应,与炎症和冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)密切相关。仅有胞外区的RAGE称可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE),可阻断配体与RAGE结合,抑制RAGE的作用。     

急性细支气管炎大鼠气管和血清可溶性糖基化终产物受体与免疫失衡的关系

目的 复制急性细支气管炎模型,探讨气管粘膜和血清可溶性糖基化终产物受体变化与免疫失衡的关系.方法 将SPF级4周龄的雄性SD大鼠30只随机分为正常组、模型组Ⅰ组(MⅠ组)、模型组Ⅱ组(MⅡ组),每组10只.构建急性细支气管炎模型,MⅠ组在气管处一次性注射二乙酰100 mg、蒸馏水10 ml;MⅡ组在大鼠气管处插管一次性...     

糖基化终产物及其受体系统与糖尿病肾病

糖基化终末产物(AGEs)是持续高血糖状态下多种蛋白质非酶糖基化反应的终末产物。AGEs通过与其受体(RAGE)结合,激活细胞内信号通路、增强氧化应激,诱导细胞因子、炎性介质的释放,促进糖尿病肾病的发生、发展。阻断AGEs-RAGE系统在糖尿病肾病中的作用,对糖尿病肾病的防治具有重要意义。     

晚期糖基化终产物受体在糖尿病足患者中的表达特征

目的:研究晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)在糖尿病足患者中的蛋白表达水平.方法:按照病例入选标准收集25例糖尿病足患者,21例单纯糖尿病患者,以及20例非糖尿病手术患者,用 ELISA 检测血清 RAGE 表达,取各组患者足部皮肤组织标本,用Western blot检测组织中 RAGE蛋白的表达.结果:RAGE在正常血清、单纯糖尿病患者血清、糖尿病足患者血清及足部皮肤组织中均有表达;糖尿病足患者血清中 RAGE 表达( 313.34 ± 24.36) ng /L 明显高于正常对照组( 59.14 ± 23.71) ng /L及单纯糖尿病组( 86.47 ± 29.35) ng /L.糖尿病足患者足部皮肤组织中RAGE蛋白表达亦明显高于单纯糖尿病患者组及正常对照组,两组间差异有统计学意义( P ＜ 0.05).结论:RAGE 在糖尿病足患者中表达明显升高;RAGE可能与糖尿病足的发生、发展有密切关系;RAGE 可能成为一个新的糖尿病足治疗靶点,对于糖尿病足的临床治疗有积极意义.     

RAGE基因型在2型糖尿病伴慢性牙周炎患者颊黏膜中的检测

目的 对2型糖尿病伴慢性牙周炎患者颊黏膜中糖基化终产物受体(RAGE)进行检测,探讨其可能致病位点基因型.方法 分别选取2型糖尿病伴慢性牙周炎患者(DMCP组)、单纯慢性牙周炎患者(CP组)和健康对照组(H组)各50例.采集颊拭子,进行牙周检查,对比牙周状况.从样本中提取DNA,RAGE PCR产物检测,PCR质量控制,限制性内切酶酶切产物,确定可能的基因型.结果 RAGE基因中-429T/C位点和2184A/G位点在DMCP组、CP组和H组中无统计学差异(P＞0.05),而1704G/T位点GG基因型在DMCP组和CP组的表达要高于H组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 RAGE基因中内含子区域1704G/T位点GG基因型在DMCP组和CP组中出现频率高.2型糖尿病伴慢性牙周炎和单纯慢性牙周炎可能与1704G/T位点GG基因型表达有关.     

冠心病患者血清糖化蛋白与内源性分泌型晚期糖化终产物受体水平及意义

目的：测定冠心病患者血清糖化蛋白（GSP）和内源性分泌型糖化终末产物受体（esRAGE）水平，探讨GSP、es-RAGE水平及GSP／esRAGE比值对判断冠心病的存在及冠状动脉病变严重程度的价值.方法：入选患者135例，根据冠脉造影结果和有无糖尿病分为：单纯冠心病组（52例），冠心病合并糖尿病组（48例），正常对照组（35例），根据冠状动脉病变支数分为：单支病变组（24例），双支病变组（29例）和三支病变组（47例）。测定各组血清GSP和eaRAGE水平，计算GSP／esRAGE比值。结果：冠心病合并糖尿病组GSP水平和GSP／esRAGE比值显著高于单纯冠心病组（均P〈0．01）及对照组（均P〈0．011），单纯冠心病组显著高于对照组（P〈0．01）；冠心病合并糖尿病组esRAGE显著低千单纯冠心病组（P〈0．01）和对照组（P〈0.01），单纯冠心病组明显低于对照纽（P〈0.01）；GSP（rs=0.460，P〈0．01）、esRAGE（rs=-0，542，P〈0.001）、GSP／esRAGE比值（fs=0．536，P〈0．001）与冠状动脉病变支数显著相关。结论：血清GSP、esRAGE水平及GSP／esRAGE比值对评价血糖正常或糖尿病患者冠心病的存在和冠状动脉病变程度具有重要临床价值。     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾皮质糖基化终产物受体mRNA表达的影响

目的探讨灯盏花素对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾皮质RAGE表达水平的影响。方法雄性SD大鼠27只,随机分为3组。STZ腹腔注射建立糖尿病模型后,糖尿病灯盏花素治疗组(DD组)每日给予灯盏花素[20mg/(kg.d)]灌胃,8周后取肾脏组织行半定量RT-PCR检测RAGE mRNA的表达水平,与正常对照组(C组),糖尿病安慰剂组(D组)比较。结果成模8周时,糖尿病大鼠的体重、血糖与正常组相比有显著性差异(P<0.01),DD组与D组的血糖及体重无显著性差异(P>0.05);DD组、D组和C组的RAGE OD值/β-actin OD值分别为0.452±0.208,0.769±0.104,0.218±0.032,各组间RAGE表达有显著性差异(P<0.01)。结论糖尿病大鼠肾皮质RAGE mRNA表达明显高于正常对照组。灯盏花素能下调肾皮质RAGE的表达水平,对糖尿病肾病具有一定治疗作用。     

香烟烟雾暴露的大鼠晶状体白内障样改变中高度糖化终末产物及其相关荧光的研究

目的：通过检测在体暴露于香烟烟雾大鼠的晶状体中的高度糖化终末产物及其相关荧光，探讨香烟烟雾凝聚物在吸烟致大鼠晶状体白内障样改变中的可能作用机制。方法：雄性Wistar大鼠随机分2组，实验组每天暴露于香烟烟雾1h，连续90d，对照组大鼠只暴露于普通室内空气，其他条件相同。每只大鼠两只眼球在处死后摘除，一只做组织病理学检查，另一只用于研究体内糖化情况。荧光质谱仪检测激发吸收光370／440nm处高度糖化终末产物相关荧光，并通过HPLC检测N-羧甲基赖氨酸及pentosidine。结果：实验组晶状体上皮细胞发生显著组织形态学改变。如增生、肥大，上皮多层化，并有晶体上皮细胞移行于晶状体后囊，对照组未见上述改变。吸烟组晶体水溶性和非水溶性组分中高度糖化终末产物荧光和N-羧甲基赖氨酸及pentosidine显著升高。结论：香烟烟雾吸入致大鼠晶状体白内障样改变，伴随高度糖化终末产物形成，糖化是吸烟致白内障形成的一个可能机制。     

艾灸督脉组穴对血管性痴呆大鼠学习记忆能力和RAGE、LRP-1表达的影响

目的 观察艾灸督脉组穴对血管性痴呆（vascular dementia,VD）大鼠脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells,BMECs）晚期糖基化终产物受体（receptor for advanced glycation end products,RAGE）和低密度脂蛋白受体相关蛋白-1（LDL-receptor related protein-1,LRP-1）表达的影响,探讨艾灸督脉组穴治疗VD的作用机制。方法 采用Morris水迷宫筛选后,将SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组12只。采用颈总动脉结扎反复缺血再灌注法复制模型,艾灸组取“百会”“大椎”“风府”温和灸30 min,每日1次,7次为1个疗程,共治疗4个疗程。采用Morris水迷宫法对大鼠进行行为学检测,采用免疫组织化学法检测皮质和海马组织中RAGE和LRP-1表达水平,并分析行为学检测结果与RAGE和LRP-1之间的相关性。结果 各时间点模型组逃避潜伏期均较正常组明显延长（P＜0.05）,艾灸组逃避潜伏期均较模型组明显缩短（P＜0.05）;模型组大鼠穿越平台次数明显少于正常组（P＜0.05）,艾灸组大鼠穿越平台次数明显多于模型组（P＜0.05）。与正常组比较,模型组大鼠海马和皮质中RAGE表达增多,LRP-1表达减少,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与模型组比较,艾灸组大鼠海马和皮质中RAGE表达减少、LRP-1表达增多,差异均有统计学意义（P＜0.05）。大鼠穿越平台次数与海马和皮质内RAGE存在显著负相关关系,与海马和皮质内LRP-1存在显著正相关关系。结论 艾灸督脉组穴可明显改善VD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与下调大鼠BMECs的RAGE表达和上调LRP-1表达有关。     

可溶性晚期糖基化终末产物受体及其基因多态性与2型糖尿病的易感性分析

目的 探讨可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)水平及晚期糖基化终末产物受体(RAGE)基因单核苷酸位点多态性与2型糖尿病的关联。方法 选择184例2型糖尿病患者作为糖尿病组,190例健康体检者作为正常对照组。ELISA方法检测sRAGE水平,PCR-TaqMan-MGB探针检测rs2070600、rs1800624、rs1800625及rs184003基因分型。结果 糖尿病组sRAGE水平[M(P₂₅,P₇₅)]为1087.4(713.5,1213.4)pg/mL,正常对照组sRAGE为908.2(674.6,1107.1)pg/mL,两组差异有统计学意义(P<0.001)。糖尿病组与正常对照组间4个位点的最小等位基因频率分布均无统计学差异,且在基因型分析中也无阳性发现。线性相关分析表明,4个位点与sRAGE水平均无明显关联性。结论 sRAGE水平与2型糖尿病的发病相关,但RAGE位点多态性与糖尿病无明显关联。RAGE位点多态性与sRAGE水平无关联。     

汉族人群RAGE基因多态性与非糖尿病性冠心病严重程度的关联研究

目的探讨汉族人群中晚期糖基化终产物受体（RAGE）基因G82S、-429T/C和-374T/A多态性与非糖尿病性冠心病及其严重程度的相关性。方法以冠状动脉造影证实的112例健康个体（正常对照组）和270例非糖尿病性冠心病患者（冠心病组）为研究对象进行病例对照研究,冠心病严重程度采用冠脉病变支数进行评估,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测RAGE基因G82S、-429T/C和-374T/A的多态性。结果汉族人群RAGE基因G82S、-429T/C和-374T/A多态性的分布与高加索人群有显著差异（均P〈0.05）,这三个多态性的基因型分布和等位基因频率在正常对照组和冠心病组之间差异无统计学意义（均P〉0.05）,在冠脉病变支数分组间差异也无统计学意义（均P〉0.05）。结论 RAGE基因G82S、-429T/C和-374T/A多态性的分布具有种族差异,这三个多态性与汉族人群非糖尿病性冠心病及其严重程度无相关性。