湖北汉人全身性红斑狼疮患者补体第4成分基因限制性片段长度多态性的研究

用Ｃ４５末端探针和限制性内切酶ＴａｑⅠ对７５例湖北汉人ＳＬＥ患者和５８例正常人进行了ＲＦＬＰ检测，同时用琼脂糖凝胶电泳免疫固定方法测定了其中５１例患者和５７例正常对照的Ｃ４蛋白质表达情况，结果发现，患者中２４例（３２．０％）的ＲＦＬＰ带型为７．０－５．４ｋｂ（Ａ型），１０例（１３．３％）为７．０－６．０ｋｂ（Ｂ型），４０例（５３．３％）患者ＲＦＬＰ带型为７．０－６．０－５．４ｋｂ（Ｃ型），仅一例（１．３％）带型为７．０－６．４－５．４ｋｂ（Ｄ型），即带有表示Ｃ４Ａ基因缺失的６．４ｋｂ片段。正常对照组中ＲＦＬＰ带型仅检出Ａ、Ｂ、Ｃ三型，与患者组在分布上无统计学差异。Ｃ４表型分析结果发现，患者中Ｃ４ＡＱ０者为２２例（４３％），正常对照中Ｃ４ＡＱ０者为１０例（１７．５％），计算ＲＲ值＝３．５６，χ２＝８．４６，Ｐ＜０．０１。上述结果表明，Ｃ４Ａ蛋白质缺失与ＳＬＥ易感性密切相关，但在湖北人群中Ｃ４Ａ蛋白质缺失的主要原因可能不是由于Ｃ４Ａ基因的缺失所致。     

湖北汉族人群C4性片段长度多态性的研究

用限制性内切酶ＴａｑＩ和Ｃ４基因５＇末端探针ｐＡＴ－Ａ检测５８份湖北地区健康献血员基因组ＤＮＡ的Ｃ４基因限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ），观察到７．０ｋｂ、６．０ｋｂ和５．４ｋｂ三种Ｃ４基因片段，它们共组成三种常见的Ｃ４基因ＲＦＬＰ表型，即Ａ：７．０－５．４ｋｂ（频率为２４．１４％）；Ｂ：７．０－６．０ｋｂ（频率为２０．６９％）和Ｃ：７．０－６．０－５．４ｋｂ（频率为５５．１７％）。在所检测的样本     

湖北汉族人群C4限制性片段长度多态性的研究

用限制性内切酶ＴａｑＩ和Ｃ４基因５￣＇末端探针ｐＡＴ－Ａ检测５８份湖北地区健康献血员基因组ＤＮＡ的Ｃ４基因限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ），观察到７．０ｋｂ、６．０ｋｂ和５．４ｋｂ三种Ｃ４基因片段，它们共组成三种常见的Ｃ４基因ＲＦＬＰ表型，即Ａ：７．０５－４ｋｂ（频率为２４．１４％））；Ｂ：７．０－６．０ｋｂ（频率为２０．６９％）和Ｃ：７．０－６．０－５．４ｋｂ（频率为５５．１７％，在所检测的样本中未观察到６．４ｋｂ的Ｃ４基因片段。     

中国人C4Qo表型的C4DNA限制性片段长度多态现象：静息基因的机制初探

对１７例中国人Ｃ４Ａ／Ｃ４Ｂ表型中含有Ｑ０的个体的基因组ＤＮＡ进行了ＨｉｎｄⅢＲＦＬＰ的检测。从五型Ｃ４Ａ／Ｃ４Ｂ（３，０／１，１；３；０／２．１；３．３／１．０：３．２／１．０；３．０／１．０）中共检出５种ＲＦＬＰ片段组合Ａ：３２－２５－１５ｋｂ；Ｂ：３２－１５ｋｂ；Ｃ：２５－１５ｋｂ；Ｄ：３２－１５－８．５ｋｂ；Ｅ：２５－１５－８．５ｋｂ）。根据代表Ｃ４Ａ基因缺失的８．５ｋｂ片段的有无，测出大约５０％的Ｃ４ＡＱ０是由基因缺失造成的。此外，本文还对Ｃ４ＡＱ０时Ｃ４Ｂ长、短基因的分配，Ｃ４ＢＱ０时Ｃ４基因的变动情况等进行了分析与讨论。     

全身性红斑狼疮病人C4基因组DNA限制性片段长度多态性的检测

以Ｃ４基因５＇ｃＤＮＡ片段为探针，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交法对２４例全身性红斑狼疮（ＳＬＥ）病人基因组ＤＮＡ的Ｃ４基因限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）进行了分析，并与６０例健康人资料进行了对比。结果显示，ＳＬＥ病人Ｃ４Ａ基因缺失的表型频率与基因型频率远较健康人为高，分别为２９．２％对６．７％（Ｘ＾２＝７．７５，Ｐ＜０．０１）及１８．７％对３．３％（Ｘ＾２＝１０．８，Ｐ＜０．００５）。在两名同合子     

中国人细胞色素P4502D6基因多态性

目的为探讨中国人ＣＹＰ２Ｄ６酶基因的多态性分布规律。方法应用聚合酶链反应和ＸｂａⅠ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）对１００名正常汉族人的ＣＹＰ２Ｄ６基因做了研究。结果发现在中国人群该基因Ａ、Ｂ、Ｄ和Ｅ４种引起酶活性缺失的突变频率分别为１％、６．５％、０．５％和１％；ＸｂａⅠＲＦＬＰ显示：２９ｋｂ／２９ｋｂ、４４ｋｂ／２９ｋｂ和４４ｋｂ／４４ｋｂ基因型的频率分别为３８％、４６％和１３％；而且还发现虽然Ａ和Ｂ突变主要于２９ｋｂ／２９ｋｂ基因型，但也有１２％的Ｂ突变见于４４ｋｂ／４４ｋｂ基因型。结论中国人ＣＹＰ２Ｄ６基因的这四种引起酶缺乏性的突变频率均较欧美人低。ＸｂａⅠ４４ｋｂ等位基因频率相对较高。     

胃粘膜肠化生组织中多种抑癌基因的杂合缺失

目的 探讨多种抑癌基因异常在胃粘怕化生组织中的作用。方法 应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测了６０例肠化生组织中ＹＮＺ２２、ＡＰＣ、ＭＣＣ、ＤＣＣ基因杂合性失现象。结果 ＹＮＺ２２杂合性缺失率为１９．４％（６／３１例）,ＡＰＣ、ＭＣＣ、ＤＣＣ杂剑性缺失率分别为１２．０％（３／２５例）、１３．０％（３／２３例）、４．３％（２／４７）。将肠化生分为Ⅰ、Ⅱ型肠化生（Ｐ〉０．０５）。２例Ⅲ型肠化分别同时检出ＡＰＣ     

免疫印迹技术检测抗中性粒细胞胞浆抗体的应用研究

用免疫印迹技术（ＩＢＴ）检测了１０１例不同原因的血管炎、ＳＬＥ和类风湿性关节炎（ＲＡ）患者血清中的抗中性粒细胞胞浆抗体（ＡＮＣＡ），ＡＮＣＡ与凝胶电泳时２９ＫＤａ处的中性粒细胞胞浆抗原形成一条明显的沉淀带。韦格纳氏／多血管炎组患者的阳性率为５４．５％（６／１１例），显著高于其他血管炎、ＳＬＥ和ＲＡ患者的１４．２％（３／２１例），４．２％（２／４８例）和０％（０／２１例）。３５份正常人血清全呈阴性。用ＡＮＣＡ阳性血清作用于中性粒细胞，在间接免疫荧光检测时均呈胞浆型（Ｃ－ＡＮ－ＣＡ）。此法特异、简便、易于推广应用，有助于血管炎的诊断。     

用PCR—RFLP方法检测动脉硬化性脑梗死患者的载脂蛋白E基因多态性分布

目的 研究动脉硬化性脑梗死（ＡＣＩ）患者中的载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因的分布。方法 利用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术扩增ＡｐｏＥ基因含编码１１２位和１５８位氨基酸的片段，并用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术对ＡＣＩ患者和相应健康对照的ＡｐｏＥ基因进行分型，从而进行ＡＣＩ与ＡｐｏＥ等位基因多态性的关联分析。结果 ＡＣＩ患者中ＡｐｏＥ等位基因ε４占２８．３０％，明显高于正常人对照组的７．６４％，而等位基因ε３则占５７．５５％，低于正常人对照组的８４．１２％，均有极显著性差异（ｐ〈０．０１）。结论 ＰＣＲ－ＲＦＬＰ是一种快速有效的ＡｐｏＥ基因分型方法，ε４可能为ＡＣＩ的易感因子，而ε３则为保护因子。     

羧甲基茯苓多糖对HPBL分泌IL—2,TNF,IL—6,IFN—γ的调节作用

用ＣＭＰ培养外周血淋巴细胞（ＨＰＢＬ）２４、３６、４８、７２ｈ采样检测的ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ效价分别可达１３．６±４．３，４１．９±２．０，１８３７．４±４６４．３，１０３７．９±２１１．０Ｕ／ｍｌ，分别比无ＣＭＰ的细胞培养对照组的效价高０．８，７．４，０．５，１０．９倍（Ｐ＜０．０１），说明ＣＭＰ具有ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ的诱生剂功能。由ＣＭＰ预处理ＨＰＢＬ后经ＰＨＡ和／或ＣｏｎＡ促诱生组的ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ效价分别比无ＣＭＰ的ＰＨＡ和／或ＣｏｎＡ刺激的相应常规诱生组高１．２～２．８，０．５～１．１、０．５～０．８、０．４～０．６倍（Ｐ＜０．０１），尤以ＣＭＰ＋ＰＨＡ＋ＣｏｎＡ促诱生细胞因子效果最佳（Ｐ＜０．０１），说明ＣＭＰ又具有ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ促诱生效应。     

丙型肝炎病毒血清学分型与基因分型研究

为了解某农村单采浆供血员人群所感染丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的血清型和基因型构成，并对两种分型方法进行比较，本工作以ＨＣＶＣ区型特异性多肽对抗－ＨＣＶ进行血清学分型，对已确定血清型的血清进行５′非编码区（ＮＣＲ）逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）和限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析以确定基因型，并对６份扩增产物进行序列测定。结果显示１４０份抗－ＨＣＶ阳性血清中，血清Ⅰ型和Ⅱ型分别为４４份（３１．４３％）和１２份（８．５７％），余８４份未能分型。４４株已知血清型的ＨＣＶ中，１ｂ、２ａ和３ｂ等３种基因型分别为３４株（７７．２７％）、９株（２０．４５％）和１株（２．２７％）。两种分型方法一致率为９３．１８％（４１／４４）。对６株ＨＣＶ５′ＮＣＲ的序列分析证实了ＲＦＬＰ分型的正确性。结论认为该人群ＨＣＶ感染以血清Ⅰ型或基因１ｂ型为主；Ｃ区型特异性多肽血清学分型法与ＲＦＬＰ基因分型法符合率高，具有一定应用价值。     

我国Marfan综合征基因连锁标记的研究

为了探索对Ｍａｒｆａｎ综合征进行产前诊断和症状前诊断的方法，应用１５号染色体ＦＢＮ１基因内两个多态位点ＴａｑⅠ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）和（ＴＡＡＡＡ）ｎ扩增片段长度多态性（Ａｍｐ－ＦＬＰ）为遗传标记，在正常人群中检出前者有５．０ｋｂ（＋）和６．０ｋｂ（－）两种等位基因，基因频率各为２７％和７３％；后者有１５０ｎｔ（１）和１６０ｎｔ（２）两种等位基因，基因频率分别为３１％和６９％，未见白种人中的罕见变异型。两个患病家系的单倍型分离分析表明，致病基因均与－，２单倍型连锁，提示中国人群中Ｍａｒｆａｎ综合征也与ＦＢＮ１基因连锁。以该基因内的多态位点为遗传标记，可对该病的一些家系成员进行产前或症状前诊断。     

Na^＋／H^＋交换在急性呼吸性酸中毒脑脊液酸碱调节中的作用

犬急性呼吸性酸中毒（ＡＲＡ）模型通过吸入８－１０％ＣＯ２气体产生。在ＡＲＡ６ｈ期间，对照组和氨苯喋啶组ＰａＣＯ２、「ＨＣＯ３」ｓ和脑脊液（ＣＳＦ）ＰＣＯ２分别升高约５．０ｋＰａ，４．０ｍｍｏｌ／Ｌ和５．８ｋＰａ，两组之间比较无显著差异，然而，两组ＣＳＦ「ＨＣＯ３」的改变却相差非常显著（Ｐ〈０．０１），对照组平均升高８．５ｍｍｏｌ／Ｌ，氨苯喋啶组平均同４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，两组ＣＳＦ「ＨＣＯ３」的差不     

汕头市中枢神经系统感染的肠道病毒病原学分析

对汕头市２３６例临床诊断中枢神经系统（ＣＮＳ）感染患者进行肠道病毒（ＥＶ）病原学及血清学检测，结果从２３６例的２５７份标本中分离出病毒６２株（５５例），检出率为２４．１％。５７例患者做了双份血清检测，中和抗体≥４倍增高者４８例，阳性率为８４．２％。以上患者病毒分离和／或血清学阳性而确诊者７８例，确诊率为３３．１％，患者感染的病毒型别分布及构成比分别为：脊髓灰质炎（Ｐｏｌｉｏ）病毒３３例（０．４２３１），其中Ⅰ型６例、Ⅱ型１８例、Ⅲ型４例和多型混合感染５例；柯萨奇（Ｃｏｘ）病毒２１例（０．２６９２），其中Ａ２４型６例、Ｂ１型７例、Ｂ４型２例和Ｂ５型６例；埃可（ＥＣＨＯ）病毒１１例（０．１４１０），其中７型５例、２４型２例和１１、１２、１５、２７型各１例；肠道病毒１０例（０．１２８０），其中７０型３例、７１型７例及多种病毒混合感染３例（０．０３８５）。     

长春地区汉族人群C—ab1等位基因的遗传多态性

以完整的Ｖ－ａｂ１癌基因为探针，用ＤＮＡ印迹杂交方法在长春地区汉族人群中随机检测到Ｃ－ａｂ１癌基因位点存在限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ），其原因是Ｃ－ａｂ１癌基因位点存在ａ，ｂ，ｃ３个等位基因。ａ等位基因频率为９４．７％，ｂ等位基因频率为１．９％，ｃ等位基因频率为３．４％，与Ｃａｕｃａｓｉａｎ人群Ｃ－ａｂ１ ＲＦＬＰ比较，ａ，ｂ等位基因相同，基因频率相似，而在中国人群中新发现一个Ｃ等位基因。     

游离三碘甲状腺原氨酸酶免疫的分析

半三碘甲状腺原氨酸（Ｔ３）与β－Ｄ半乳糖苷酶联结，制成Ｔ３－酶联结物（Ｔ３－Ｅ）。用Ｔ３－Ｅ作为示踪剂建立了游离Ｔ３（ＦＴ３）酶免疫分析（ＥＩＡ）。本法灵敏度为０．２９ｐｍｏｌ／Ｌ，批内和批间变异系数分别为７．６％￣８．７％和７．８％￣１４．９％，与二碘甲状腺原氨酸（Ｔ２）、反Ｔ３（ｒＴ３）和甲状腺素（Ｔ４）的交叉反应率分别为９．７×１０＾－４、１．１×１０＾－４和３．１×１０＾－５。本法与ＦＴ３     

大鼠严重体表烫伤后心脏β－肾上腺素能受体腺苷酸环化酶系统的变化

大鼠背部３０％体表面积皮肤三度烫伤后３、６、１２、２４、４８ｈ，心肌ｃＡＭＰ含量分别减少１７．１％、２４．７％、３８．１％、３４．２％、２５．６％（Ｐ＜０．０５或０．０１）；心肌腺苷酸环化酶（ＡＣ）基础活性分别降低３２．７％、４２．３％、５７．７％、４６．２％、４０．４％（Ｐ＜０．０５或０．０１）；心肌磷酸二酯酶活性无明显变化；β－肾上腺素能受体（β－ＡＲ）密度明显降低（下调），但亲和力无明显变化。相关分析表明，ｃＡＭＰ含量的减少与ＡＣ活性降低呈显著正相关。实验还发现，烫伤后３、６ｈ，心肌膜ＡＣ基础活性及异丙肾上腺素（Ｉｓｏ）刺激活性均明显降低，而氟化钠（ＮａＦ）和法司可林（ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ，ＦＳＫ），刺激活性无明显变化，提示此时ＡＣ活性降低主要由β－ＡＲ下调所致。烫伤后１２、２４、４８ｈ．ＡＣ基础活性和Ｉｓｏ刺激活性降低更为明显，ＮａＦ刺激活性也显著降低，但ＦＳＫ刺激活性仍无变化，提示此时ＡＣ活性的降低与β－ＡＲ下调和Ｇ－蛋白偶联ＡＣ催化亚基的功能障碍有关。上述β－ＡＲ－ＡＣ系统功能的减低是体表烫伤后心功能障碍的重要机制之一。     

液相人血清TSH免疫放射分析的建立

本文利用兔抗人ＴＳＨ（ｈＴＳＨ）多克隆抗体、（１２５）~Ｉ－鼠抗ｈＴＳＨ单克隆抗体、固相驴抗兔二抗建立了液相高灵敏度人血清ＴＳＨ免疫放射分析。方法学考核显示，灵敏度为０．００８ｍＩＵ／Ｌ，批内和批间变异系数分别为１．６％～４．１％和２．７％～８．６％，回收率为９５．２％～１０１．４％，与ｈＦＳＨ和ｈＨＣＧ的交叉反应率分别为４．４１×１０~（－５）和５．０８×１０~（－７）．用本法测定了３４名正常人、２７例甲亢和９例甲低患者血清值，结果与临床相符。     

7型腺病毒疫苗株87mu-97.4mu片段核苷酸序列分析

目的获得７型腺病毒（Ａｄ７）疫苗株８７ｍｕ－９７．４ｍｕ核苷酸序列，分析该区段的基因结构和功能。方法应用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧法进行核苷酸序列分析。结果Ａｄ７疫苗株８７ｍｕ－９７．４ｍｕ全长３６９８个核苷酸，推测编码纤维蛋白（３２５个氨基酸）和Ｅ３区１５．４ｋＤ蛋白，Ｅ４区５个蛋白（ＯＲＦ１４．２，ＯＲＦ１５．７，ＯＲＦ８．１，ＯＲＦ４２．８和ＯＲＦ１０．３）。结论这一结果为阐明Ａｄ７的基因结构与功能及利用该病毒做为基因工程疫苗载体打下一定的基础     

口腔扁平苔藓等病变组织中免疫沉积物的检测

用免疫金银染色检测被临床和组织病理确诊的２８例口腔扁平苔蓟（ＯＬＰ）和２０例慢性盘状红斑狼疮（ＤＬＥ）口腔损害组织标本中ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、补体Ｃ３和纤维蛋白原（Ｆｇ）的沉积状态，研究结果显示：ＯＬＰ在基底膜区（ＢＭＺ）的主要沉积物为Ｆｇ，占９６％，而ＩｇＧ（１０％）、ＩｇＡ（３．５％）、ＩｇＭ（７％）、Ｃ３（７％）沉积极少；ＤＬＥ在ＢＭＺ为Ｆｇ（９５％）、ＩｇＧ（８５％）、ＩｇＡ（９０％）、ＩｇＭ（７５％）、Ｃ３（８５％），其中ＩｇＧ、ＩｇＡ、ｌｇＭ、Ｃ３的沉积率明显高于ＯＬＰ，具有高度显著性差异（Ｐ＜０．０１）。