固本生血丸对人骨髓造血祖细胞体外增殖的影响

应用造血祖细胞体外培养法研究了中药复方制剂——固本生血丸对人骨髓造血祖细胞体外集落形成的影响。结果表明：该制剂在０．０１～１０μｇ／ｍｌ浓度范围内与细胞因子（ＧＭ－ＣＳＦ或ＥＰＯ）协同促进正常骨髓和再障骨髓ＣＦＵ－ＧＭ、ＨＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ的集落形成；作用高峰在１０μｇ／ｍｌ浓度上；当超过该浓度时，集落数量增加不明显（Ｐ＞０．０５），而单独应用该制剂时无集落形成。     

重组人白细胞介素2对骨髓造血祖细胞体外增殖的影响

重组人白细胞介素２对骨髓造血祖细胞体外增殖的影响郝思国邹正辉①杨吉成②虞斐①盛伟华②王苏③沈美凤①（安徽医科大学附一院，合肥２３００２２）①苏州医学院附二院，苏州２１５００４②苏州医学院，苏州２１５００７③辽宁省人民医院血液科，沈阳１１０００３作者简...     

雷公藤多甙抑制小鼠骨髓造血细胞体外增殖的研究

本文研究了不同剂量的雷公藤多甙对小鼠骨髓造血干细胞体外增殖作用及其对造血干细胞抑制的可逆性,以探讨雷公藤多甙对骨髓造血功能影响的药理作用。实验表明,雷公藤多甙对骨髓造血干细胞体外增殖有明显的抑制作用,并与剂量密切相关,50％的抑制率为0.5μg/ml;该药作用8h以内,其抑制作用是可逆的,超过8h则趋不可逆性。由此提示临床用药掌握适当的剂量至关重要,长期应用必须对机体造血功能进行监测。     

分枝杆菌多糖对小鼠骨髓造血祖细胞GMCFU的影响

对分枝杆菌多糖（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）促进小鼠骨髓造血祖细胞形成ＧＭＣＦＵ的量效关系进行了实验研究。结果表明，给予不同剂量的ＭＰＳ使ＧＭＣＦＵ提高的水平在一定剂量范围内（０．６～１．０ｍｇ／ｋｇ）随剂量增加而升高，剂量大于１．２ｍｇ／ｋｇ时不再继续升高。共进行３批试验，重复性好（Ｐ＞０．０５）。说明ＭＰＳ的升白作用具有一定的量效关系     

造血干/祖细胞体外扩增的最新研究进展

造血干/祖细胞体外扩增方法的快速发展为造血于/祖细胞广泛应用于临床开辟了广阔的前景,就造血干/祖细胞体外扩增的方法和培养系统的最新进展做一综述.     

造血干/祖细胞体外扩增的最新研究进展

造血干/祖细胞体外扩增方法的快速发展为造血干/祖细胞广泛应用于临床开辟了广阔的前景,就造血干/祖细胞体外扩增的方法和培养系统的最新进展做一综述。     

造血干祖细胞体外扩增与其再植入能力的研究进展

造血干祖细胞移植 (hematopoietic stem / progenitor cellstransplantation)用于治疗恶性血液病、某些遗传性疾病、先天性免疫缺陷和各类自身免疫病等 ,也用于实体瘤的治疗。而造血干祖细胞体外扩增是提高移植成功率和拓展造血干祖细胞移植应用领域的有效途径 ,有助于解决移植时所面临的细胞数量不足、移植后造血恢复等问题 ,也是移植物净化 ,提高外源基因导入造血干祖细胞进行基因治疗的有效方法。而在造血干祖细胞体外扩增过程中扩增最早期和早期祖细胞以及保留干细胞长期重建造血的能力是造血干祖细胞体外圹增的关键 ,是目前的研究热点 …     

骨髓增生异常综合征的造血抑制活性

采用体外单层琼脂培养技术，观察了10例骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓和外周血单个核细胞条件培养液和血清对正常骨髓粒单系祖细胞集落形成影响．并与16例急性髓细胞性白血病(AML)患者进行比较．结果表明，与AML-样，MDS患者骨髓、外周血单个核细胞条件培养液和血清可抑制粒单系祖细胞集落形成，存在白细胞和关抑制活性和血清抑制活性，推测这种抑制活性可能与患者粒细胞减少有关。     

生血丸对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的影响

目的:研究生血丸对小鼠骨髓造血功能的增强作用。方法:将小鼠分成4组:对照组、环磷酰胺模型组、生血丸低剂量组、生血丸高剂量组。模型组、生血丸组腹腔注射环磷酰胺造模, 同时生血丸组给不同剂量生血丸灌胃, 对照组、模型组生理盐水灌胃。结果:高、低剂量生血丸对环磷酰胺所致小鼠外周血像、骨髓有核细胞数的降低均有升高作用(P<0.01)。对骨髓微核细胞增加有明显的拮抗作用(P<0.05)。生血丸组小鼠骨髓细胞染色体畸变率显著低于模型组, 低剂量组和高剂量组抑制率分别为51.2%、61.5%。结论:生血丸可拮抗环磷酰胺诱发的小鼠造血功能损伤。     

克隆的人LAK细胞对骨髓粒单系造血祖细胞体外增殖的抑制作用

本文应用琼脂半固体培养法观察了克隆化的人LAK细胞对骨髓粒单系造血细胞(CFU-GM)增殖的影响。LAK细胞对CFU-GM集落形成有抑制作用:2×10~5/mlLAK细胞与1×10~5/ml骨髓单个核细胞BMMNC预孵育0.5小时可使集落数减少43.8%(P<0.01),LAK与BMMNC预孵育4小时对CFUGM的抑制更为明显,0.5×10~5/ml LAK细胞即可使集落数减少58.8%(P<0.01),随LAK浓度加大抑制效应增强;当LAK与BMMNC在双层培养体系中不接触时,高浓度(4×10~5/ml)亦可表现集落抑制活性。抑制率28.8%(P<0.05)。自体LAK细胞对CFU-GM的抑制效应与异体相比无显著差异(P>0.20)。作者认为LAK细胞对CFU-GM的抑制作用为细胞直接作用与分泌可溶性因子介导的双重效应。     

白藜芦醇对于外周血内皮祖细胞体外增殖分化的影响

目的:观察白藜芦醇对内皮祖细胞体外扩增分化过程中内皮系基因的表达及粘附、迁移功能的影响。方法:密度梯度离心法获得人外周血单个核细胞,在向内皮祖细胞诱导分化的同时,加入不同浓度的白藜芦醇(1、5、15、60μM)干预7天,随后采用流式细胞术观察CD34、CD31、KDR基因的表达;用RT-PCR和ELISA方法检测干预后内皮型一氧化氮合成酶的表达;同时测定干预后细胞的粘附和迁移功能。结果:低浓度白藜芦醇(5μM)不同程度促进内皮祖细胞增殖分化中CD34、CD31、KDR的表达,上调eNOS的mRNA和蛋白水平表达,并促进内皮祖细胞粘附和迁移功能;而高浓度白藜芦醇(60μM)则不同程度下调CD34、CD31、KDR、eNOS的表达和抑制粘附、迁移功能。结论:低浓度白藜芦醇可促进外周血内皮祖细胞内皮系基因的表达,并且促进其粘附和迁移,而高浓度则产生相反的作用。     

人参总皂甙对骨髓巨噬细胞的影响及与造血调控的关系

目的：研究人参总皂甙(TSPG)对骨髓巨噬细胞(BMMφ)生物学活性的影响及其与造血调控关系。方法：采用骨髓造血祖细胞体外培养,造血生长因子生物活性检测,免疫细胞化学,核酸探针原位杂交等技术。结果：经TSPG诱导制备的BMMφ的培养上清可提高髓系造血祖细胞的集落产率;经TSPG诱导后,BMMφ表达EPO,IL-3,IL-6,GM-CSF的蛋白水平有不同程度提高;EPO mRNA,GM-CSF mRNA的表达水平和强度明显提高。结论：TBPG可以刺激造血诱导微环境中的巨噬细胞,从基因水平和蛋白水平2级层次上促进造血调控因子的合成和分泌,进而促进CFU-Mix,CFU-E,CFU-GM的增殖分化。     

巨细胞病毒对人巨核系祖细胞体外增殖的影响及干预研究

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)对脐血巨核系祖细胞(CFU-Mk)体外增殖的影响及黄芪对此的干预作用.方法采用造血祖细胞体外半固体培养技术,观察、计数HCMV感染的CFU-Mk集落数、抑制率、集落峰值及维持时间;并用定性和定量PCR检测集落细胞内HCMV-DNA;在10-1感染组中加入黄芪后,观察黄芪对HCMV抑制CFU-Mk集落生长的干预作用. 结果①HCMV感染组CFU-Mk集落数较对照组明显减少(P<0.01);②各组集落峰值出现时间无明显差异(P>0.05), 但感染组集落维持时间较对照组明显缩短(P<0.01);③用PCR技术在感染组集落细胞内检测到HCMV-DNA的存在;④黄芪组CFU-Mk集落数明显提高,荧光定量PCR显示集落细胞内HCMV-DNA copies较10-1感染组明显减少.结论在体外HCMV-AD169对CFU-Mk的增殖和分化有明显抑制作用.HCMV能直接感染巨核系祖细胞,此作用可能与临床HCMV感染出现血小板减少有关;黄芪在体外有明显的抗HCMV活性.     

分枝杆菌多糖对小鼠骨髓造血祖细胞GM—CPU的影响

对分枝杆菌多糖促进小鼠骨髓造血祖细胞形成ＧＭ－ＣＦ的量效关系进行了实验研究。结果表明，给予不同剂量的ＭＰＳ使ＧＭ－ＣＰＵ提高的水平在一定剂量范围内（０．６￣１．０ｍｇ／ｋｇ）随剂量增加而升高，剂量大于１．２ｍｇ／ｋｇ时不再继续升高。共进行３批试验，重复性好（Ｐ〉０．０５），说明ＭＰＳ的升白作用具有一定的量效关系。     

人正常骨髓CD34^＋造血细胞体外扩增形成粒单系造血祖细胞 …

ＣＤ３４＾＋造血细胞以其独特的生物学功能正成为造血调控，造血干细胞移植和基因治疗最理想的靶细胞本文探讨人正常骨髓ＣＤ３４＾＋造血细胞在体外扩增形成单个核细胞（ＭＮＣ）及粒单系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）的能力，采用ＣＩＭＳ－１００新型免疫磁性无菌分离术可获得纯度〉９０％的ＣＤ３４＾＋造血细胞，其直接形成ＣＦＵ－ＧＭ的能力要较骨髓ＭＮＣ提高６５倍，并有在含ＥＧＩＩＳ组合造血生长因子的无基质液培养系统     

影响大鼠胚胎视网膜祖细胞体外增殖的两个因素

目的探讨在体外培养条件下影响大鼠胚胎视网膜祖细胞增殖的因素。方法取第18天大鼠胚胎,用无血清培养技术扩增视网膜祖细胞,以形成悬浮生长的细胞球,经免疫细胞化学、扫描电镜与透射电镜技术鉴定细胞球中已分化的细胞,并观察不同细胞接种密度对祖细胞增殖率的影响。结果①细胞球中出现分化细胞形态和NF及Nestin阳性细胞;②提高接种细胞密度,祖细胞增殖率增加。结论①此期的祖细胞分裂产生分化细胞,导致祖细胞增殖能力差;②接种细胞密度影响祖细胞增殖率。     

人正常骨髓CD34~ 造血细胞体外扩增形成粒单系造血祖细胞的能力

CD34 造血细胞以其独特的生物学功能正成为造血调控、造血于细胞移植和基因治疗最理想的靶细胞。本文探讨人正常骨髓CD34 造血细胞在体外扩增形成单个核细胞（MNC）及粒单系集落形成单位（CFU－GM）的能力，采用CIMS－100新型免疫磁性无菌分离术可获得纯度＞90％的CD34 造血细胞，其直接形成CFLJ－GM的能力要较骨髓MNC提高的倍，并且在含EGIIS组合造血生长因子的无基质液培养系统中，CD34 造血细胞在四周内可持续扩增产生大量MNC及CFU－GM，最高分别可达1770倍和48倍，但不同个体问CD34 造血细胞的这种能力差别较大。上述结果提示，CD34 造血细胞在最佳组合HGFs的无基质液培养条件下，能扩增产生大量成熟及晚期造血祖细胞，可以适用于临床治疗的需求，     

转IL—3基因的骨髓基质细胞体外以造血功能的促进作用

目的 探讨用逆转录病毒载体转入mIL-3基因的基质细胞系QXMSC1对骨央造血细胞前体的影响。方法 用含鼠IL－3基因的逆转录病毒载体感染骨央基质细胞系QXMSC1,获得IL－3高表达细胞系QXMSC1 IL－3用于实验,观察QXMSC1 IL－3细胞上清对骨央前体细胞CFU－GM、CFU－E、CFU－GEMM的影响,QXMSC1 IL－3基质细胞对长期培养起始细包的影响。结果 QXMSC1 IL－3培养上清对骨髓前体细胞、CFU－GM、CFU－E、CFU－GEMM有明显促进作用。QXMSC1 IL－3能明显增加有核细胞数和长期培养起始细胞数,诱导分化形成CFU－GM增多,阻断基质细胞与造血细胞相互接触,QXMSC1 IL－3促造血细胞增殖作用有所减弱。结论 基质QXMSC1 IL－3可能作为有效的基因载体进一步促进骨髓移植后或辐射损伤后的造血和免疫功能重建。     

Ad-LIF-OSM双基因转染饲养细胞对脐血造血细胞体外增殖和分化的影响

目的 构建表达人白血病抑制因子(LIF)和抑瘤素M(OSM)双基因的WI-38人胚肺成纤维细胞,并以此细胞作为饲养层细胞观察其对CD34+.造血干/祖细胞体外增殖和分化的影响.方法 以双启动子转移载体pAdTrack-CMV-LIF-polyA+promoterΔ为基础,将OSM基因片段酶切后插入,构建出转移质粒pAdTrack-CMV-LIF-polyA+promoterΔ -OSM.将构建正确的转移质粒与腺病毒骨架质粒共转化,获得重组腺病毒载体pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-LIF-polyA+promoter△-OSM,通过包装,收获重组腺病毒(AdLIF-OSM).将重组腺病毒感染饲养层细胞,经RT-PCR、ELISA法检测外源基因在细胞中的表达;体外与CD34+造血干/祖细胞共培养后,通过Transwell法和细胞计数检测,比较各实验组干/祖细胞体外扩增与分化情况.结果 测序结果显示重组载体中的LIF和OSM基因序列正确;转基因饲养层细胞中能检测到外源LIF和OSM基因的转录和表达;外源LIF和OSM基因在造血干/祖细胞体外培养中能够发挥作用.结论 成功构建携带人LIF和OSM的双基因重组腺病毒载体(Ad-LIF-OSM),Ad-LIF-OSM在造血干/祖细胞体外培养的过程中能够有效地扩增CD34+造血干/祖细胞,并延缓其分化.