PCT荧光免疫层析检测方法的建立及性能评价

目的建立一种荧光定量降钙素原(PCT)检测方法。方法利用双抗体夹心法原理,建立PCT免疫检测方法,并对本方法进行了精密度、灵敏度、线性、相关性等性能指标的测定。结果本检测方法的灵敏度为0.04ng/mL,精密度CV10%,线性范围为0.04~51.14ng/mL,与罗氏Cobas E601PCT相关系数r为0.996。结论本研究建立了PCT荧光免疫检测方法,各项性能指标均达到临床检测要求,可用于临床血清PCT浓度的检测。     

化学发光免疫法检测AFP的空白限、检出限和定量检测限的建立与评价

目的 建立并评价化学发光免疫法检测甲胎蛋白（AFP）的空白限（LoB）、检出限（LoD）和定量检测限（LoQ）。 方法 参考CLSI EP17-A文件,将AFP空白样品和系列低浓度样品在Bayer Centaur 240化学发光免疫检测系统上进行检测,依据数据的分布规律,采用相应的统计学方法,确定血清AFP的LoB、LoD和LoQ,同时用传统方法建立AFP的检测低限(LLD)、生物检测限(BLD)和功能灵敏度(FS)。 结果 用EP17-A方案建立的LoB为0.80 ng/ml,LoD为2.60 ng/ml,LoQ为3.30 ng/ml;应用常规方法建立的LLD为1.00 ng/ml,BLD为2.20 ng/ml,FS为2.20 ng/ml。 结论 应用两种方法建立的LoB和LLD均低于仪器说明书声明的灵敏度性能,Bayer Centaur 240化学发光免疫系统检测AFP的分析灵敏度得到验证确认;实验室在验证仪器声明的LoB时,应同时建立检测系统的LoD和LoQ,以便为临床提供更为可靠的检验结果。两种评价方案均具有实用性,国内实验室可视具体情况选择不同的评价方案。     

Roche电化学发光免疫法检测NT-proBNP的检测限值和功能灵敏度研究

目的 探讨电化学发光免疫法检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的检测限值和功能灵敏度.方法 参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件制备空白样品及系列低浓度样品.空白样品采用配套的稀释液,系列低浓度样品采用倍比稀释的方法获得.样品制备后用Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP浓度,以确定该方法的空白限、检出限和功能灵敏度.结果 NT-proBNP的空白限为2.53 pg/ml,检出限为7.75 pg/ml,10％ CV时的功能灵敏度为8.82 pg/ml.结论 建立了Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的空白限、检出限和功能灵敏度,为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息.     

电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析性能评价

目的 评价电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析性能.方法 参考CLSI发布的方法学评价系列文件,对Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的精密度、正确度、空白限(LoB)和检出限(LoD)、功能灵敏度(FS)、分析测量范围(AMR)、最大稀释度、临床可报告范围(CRR)以及胆红素、血红蛋白和乳靡对分析的干扰进行评价,并与厂商声明的性能和有关的质量标准进行比较.根据CLSI C28-A2文件,选择18～74岁的健康体检者80名,按年龄分为4组,每组20名,以验证厂商声明的生物参考区间的适用性.结果 电化学发光免疫法检测NT-proBNP的批内CV和总CV分别为1.1％ ～2.2％和1.5％ ～2.9％,与卫生部临床检验中心室间质量评价调查品同方法组的均值和配套校准品标示值的偏差分别为2.7％ ～5.9％和2.7％～7.5％,LoB、LoD和FS分别为2.5、7.8和8.8 pg/ml,AMR为8～35 126 pg/ml,最大允许稀释度为1∶2,CRR为9～70 252 pg/ml,胆红素(428 μmol/L)、血红蛋白(2 g/L)和乳靡(2 200 FIU)对NT-proBNP测定无干扰.不同年龄组各20名健康参考个体NT-proBNP浓度除1个检测值(167 pg/ml)超出厂商提供的参考区间外,其余均在厂商提供的参考区间内.结论Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的主要分析性能达到了厂商声明的性能和有关的质量要求,建立的LoD、FS、最大稀释度和CRR可为临床提供更好的质量保证,厂商声明的生物参考区间可满足临床需要.     

吡喃糖氧化酶法检测1,5-脱水葡萄糖醇的空白限、检出限和功能灵敏度的建立及评价

目的建立吡喃糖氧化酶法检测1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG)的空白限(LoB)、检出限(LoD)和功能灵敏度(FS)并进行评价。方法参考美国临床和实验室标准化委员会(NCCLS)发布的EP17-A文件,将1,5-AG空白标本和系列低水平标本在ADVIA2400生化分析仪上测定1,5-AG,确定该方法的LoB、LoD和FS。结果依据NCCLS EP17-A方案建立吡喃糖氧化酶法检测1,5-AG的LoB为0.35μg/mL,LoD为0.64μg/mL,FS为0.960μg/mL。结论该研究建立了适合实验室ADVIA2400生化分析仪吡喃糖氧化酶法检测1,5-AG的LoB、LoD和FS,其分析性能指标基本满足实验室的要求,可为临床提供准确、可靠的检验结果。     

游离前列腺特异性抗原性能指标的建立

目的建立Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析仪检测游离前列腺特异性抗原(f-PSA)的空白限(LoB)、最低检出限(LoD)及定量检出限(LoQ)。方法参照美国临床实验室标准化协会2012年颁发的EP17-A2《临床实验室评价检测能力(第2版)》,将f-PSA的空白样品及系列低浓度样品在Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析系统进行检测,根据数据的分布规律,采用相应的统计学方法,确定该方法检测f-PSA的LoB、LoD及LoQ。结果 f-PSA的LoB为0.05ng/mL,LoD为0.16ng/mL,LoQ为0.35ng/mL。结论建立的Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析系统f-PSA的LoB、LoD、LoQ,其检测能力符合临床检验要求。     

Roche Cobas E601电化学发光分析仪检测降钙素原的方法学评价

目的:对Roche Cobas E601电化学发光分析仪检测降钙素原(PCT)进行方法学评价.方法:通过Roche Cobas E601测定PCT的精密度、准确度、分析测量范围和携带污染率来评价其性能.结果:低、高值批内精密度的变异系数(CV)分别为1.16％、0.51％,批间精密度的CV为2.98％、1.96％;测定4份定值校准品的检测结果与靶值的偏倚为-5.26％ ～ 3.16％;线性为0.039 ng/mL ～ 86.325 ng/mL;携带污染率为0.019％.结论:该系统检测性能能够满足PCT的测定要求.     

化学发光免疫法检测B型利钠肽的检测限值和功能灵敏度研究

目的 探讨西门子ADVIA Centaur 240化学发光免疫系统检测B型利钠肽(BNP)的检测限值和功能灵敏度.方法 参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件和有关文献,选择BNP通用稀释液作为空白标本,批内重复测定10次,计算光量子值的均数、标准差和变异系数(CV),用以确定检测低限(LLD);同时,空白标本每天上、下午各检测1批,每批重复检测3次,连续检测5 d,共获得30个空白结果,用非参数方法确定空白限(LoB).制备接近1～4倍LoB浓度的系列实验标本,各浓度每天上、下午各检测1次,连续检测5 d,计算每个浓度水平光量子值的均数、标准差和CV,用以确定生物检测限(BLD)和CV值为10%条件下的功能灵敏度(FS);同时对所有80个测定结果,按EP-17A文件采用非参数方法确定检出限(LoD).结果 ADVIA Centaur 240检测系统BNP的LLD为1.47 pg/mL,LoB为0.86 pg/mL,均低于厂家声明的灵敏度;BLD为3.27～3.71 pg/mL,LoD为3.54 pg/mL,10%CV条件下的FS为4.64 pg/mL.结论厂商声明的LLD和BLD得到验证,同时建立了实验室BNP检测的LoB、LoD和FS,为临床提供了准确、可靠的检验结果.建议临床实验室使用EP-17A文件确定LoB和LoD,并确定在一定精密度条件下的FS.     

时间分辨荧光分析法检测低值乙型肝炎病毒表面抗原的质量评价

目的评价时间分辨荧光分析法检测低值乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的性能。方法使用不同浓度试剂盒标准品、二级标准品进行重复测定,建立相应的数学模型,进行检测低限（lower limit of detection,LLD）、生物检测限（biologic limit of detection,BLD）、功能灵敏度（functional sensitivity,FS）、空白限（limit of blank,LoB）、检出限（limit of detection,LoD）、定量检出限（limit of quantifications,LoQ）的统计计算。结果 LLD为0.044ng/mL、BLD为0.18ng/mL、FS为0.18ng/mL、LoB为0.03ng/mL、LoD为0.108ng/mL,尝试计算低值HBsAg检测结果的不确定度,确定定量检出限（LoQ）约为0.5ng/mL。结论使用灵敏度性能和不确定度2种方法进行评价,该检测系统对低值HBsAg分析能够达到试剂盒规定的性能要求。     

两台全自动电化学发光分析仪测定结果的比对评估

目的对同一实验室的Roche Elecsys2010和Roche Cobas E601两台全自动电化学发光仪进行方法学对比及偏差评估。探讨肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原126（CA125）、糖类抗原199（CA199）在不同仪器间测定结果是否具有可比性,以确保不同免疫分析系统检测结果的准确性及一致性。方法按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP9-A文件的要求,以Roche Cobas E601全自动电化学发光仪为目标检测系统（X）,Roche Elecsys2010为待评系统（Y）,对患者血清样品进行检测,计算两个分析系统的相对偏差。结果两个检测系统测定结果预期偏倚在方法线性范围内均可以接受。结论两个检测系统测定结果具有可比性,可满足临床需要。     

酶联免疫分析检测乙型肝炎e抗原的空白限、检出限及定量限的建立与评价

目的建立并评价酶联免疫分析手工操作检测HBeAg的空白限(LoB)、检出限(LoD)及定量限(LoQ)。方法参照美国临床实验室标准化协会EP-17A文件和有关文献,结合工作实际,将HBeAg的空白样品及系列低浓度样品进行酶联免疫分析手工操作的检测,根据数据的分布规律,采用相应的统计学方法,建立酶联免疫分析手工操作检测HBeAg的LoB、LoD及LoQ并进行评价。结果 HBeAg的LoB为0.131PEI U/mL,LoD为0.350PEI U/mL,LoQ为0.450PEI U/mL。结论厂商声明的LoB得到验证,同时建立了实验室检测HBeAg的LoB、LoD和LoQ,为临床诊断和治疗提供更有价值的信息。     

罗氏Cobas E601全自动电化学发光免疫分析仪检测癌胚抗原(CEA)的临床分析

目的 探究癌胚抗原(CEA)应用罗氏Cobas E601全自动电化学发光免疫分析仪检测的价值。方法 选取2021年1～5月我院进行健康体检人群中抽取422例进行研究,取其空腹静脉血液作为血清样本,应用罗氏Cobas E601全自动电化学发光免疫分析仪检测,对CEA的检查情况进行评估。结果 CEA在A、B浓度下、批内精密度测定值,批间精密度均值均在ISO15189认定规定的范围内:变异系数不超过15%为基础,本次研究批内、批间的变异系数均在认定范围内;样本交叉污染率为0.06%。结论 应用全自动电化学发光免疫分析仪(罗氏Cobas E601)检测癌胚抗原(CEA),精密度、准确度高,交叉污染率低,值得推广应用。     

Roche Cobas e411检测心肌损伤标志物和降钙素原性能验证

目的验证Roche Cobas e411电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测心肌损伤标志物超敏肌钙蛋白T(hs-cTnT)、肌酸激酶同工酶质量(CK-MB mass)、肌红蛋白(MYO)、脑利钠肽前体氨基末端(NT-proBNP)和降钙素原(PCT)的分析性能。方法参照美国临床和实验室标准化委员会(NCCLS)相关文件,对Cobas e411检测hscTnT、CK-MB mass、MYO、NT-proBNP和PCT的准确度、精密度、携带污染率、线性范围进行验证。结果按照EP9-A2、EP5-A2、EP7-A2、EP6-A2文件要求验证得到各检测项目精密度的变异系数(CV)均小于3%,携带污染率小于0.1%;所验证项目的相关系数(r)0.99;验证hs-cTnT的功能灵敏度为3pg/mL;与厂家声明一致。结论 Roche Cobas e411全自动电化学发光分析仪检测心肌损伤标志物和PCT的主要分析性能与厂家声明一致,适用于临床医学实验室用于这些项目的检测。     

前清蛋白定量检测限和功能灵敏度的评价及临床应用

目的：对 Roche Modular P 全自动生化分析仪检测前清蛋白（PA）的空白限（LoB）、检测限（LoD）、定量检测限（LoQ）以及功能灵敏度（FS）进行评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）EP-17A 文件,将空白样品生理盐水及系列低浓度样品在 Roche Modular P 全自动生化分析仪上进行检测确定该方法的空白限、检出限和定量检测限。依据国内通用方法确定功能灵敏度。结果 PA 的空白限为16．35 mg/L ,检测限为18．23 mg/L ,定量检测限暂无法评价,功能灵敏度为25．00 mg/L。结合其可报告范围的低值,确定其临床的报告范围及报告方式。结论建立了 PA 在 Roche Modular P 全自动生化分析仪上检测的定量检测限,为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息,对不同评价的方法进行比较,明确了不同方法实际应用的优点以及局限性。     

化学发光免疫法检测B型利钠肽的分析性能评价

目的 验证西门子ADVIA Centaur 240化学发光免疫系统检测B型利钠肽(BNP)的精密度及判断准确度性能的可接受性,以及探讨BNP的分析灵敏度及BNP的最适血液标本类型.方法 参照美国临床与实验室标准化协会(CLSI)EP15-A2文件和相关文献,对ADVIA Centaur 240 检测BNP的精密度和准确度进行评价.分别采用肝素抗凝管、EDTA抗凝管、分离胶管和干燥血清管进行抽血,样本在不同时间进行BNP检测,比较BNP的测定值与变化趋势,判断BNP的最适血液标本类型.通过EP17-A文件确定BNP检测的空白限(limit of blank,LoB)、检测低限(limit of detection,LoD)和功能灵敏度(functional sensitivity,FS).结果 ADVIA Centaur 240 化学发光免疫检测系统检测BNP精密度的批内CV和总CV均为＞3.5%,准确度与定值校准品的偏差为1.1%~2.6%,BNP检测的最适血液标本类型为EDTA抗凝血浆,LoB,LoD及FS分别为0.86,3.61和4.64 pg/ml.结论 西门子ADVIA Centaur 240化学发光检测系统检测BNP的主要分析性能均达到了厂商声明的性能和有关的质量要求.最佳血液标本类型的选择及建立临床实验室的LoB,LoD和FS可为临床提供更加准确可信的检测值.     

Roche Cobas E601全自动电化学发光仪检测单元配制及质量管控的应用

目的减少Roche Cobas E601全自动电化学发光双模块分析仪检测单元间检测结果的差异以及试剂开瓶后于试剂仓、冰箱的停留时间,提高工作效率、保证检测结果的准确性。方法利用Cobas E601操作软件对仪器检测单元进行配制及质量管控,为标本量多的项目设置两检测单元,标本量少项目仅设置一检测单元;按照"剩余试剂优先使用"的原则添加、整理试剂;使用"屏蔽法"对检测单元进行质量监测。结果通过管控保证开瓶试剂效期内使用、减少同一项目不同检测单元间的检测差异、减少试剂添加、整理所占用的工作时间、充分利用剩余试剂降低成本、全面监控检测质量。结论利用Cobas E601操作软件对仪器检测单元进行配制及质量的有效管控,保证检测质量、提高工作效率、降低成本。     

两种检测降钙素原方法的比较研究

目的采用循环增强荧光免疫法和电化学发光法定量检测降钙素原(PCT),对其检测结果的一致性进行比较分析。方法以电化学发光法为对比方法,循环增强荧光免疫法为实验方法,用两种方法分别检测219例住院患者的样本。循环增强荧光免疫法检测的血清组(Core血清组)结果、微量全血组(Core微量全血组)结果与电化学方法检测的血清组(Roche血清组)结果进行两两进行配对t检验和相关性分析,计算在医学决定水平(0.5ng/mL与2.0ng/mL)的相对灵敏度、相对特异性、约登指数并进行Kappa一致性检验。结果Core血清组、Core微量全血组与Roche血清组三者之间比较均无统计学差异(P0.05)。Core血清组与Roche血清组呈正相关(r=0.993,P0.01),一元直线回归方程为Y=-0.061+1.041 X(0.04≤X≤60)。Core微量全血组与Roche血清组成正相关(r=0.989,P0.01),一元直线回归方程为Y=0.022+1.023 X(0.04≤X≤60)。Core血清组和Core微量全血组呈正相关(r=0.986,P0.01),一元直线回归方程为Y=0.129+0.973 X(0.04≤X≤60)。三个对比组在医学决定水平(0.5ng/mL和2.0ng/mL)的相对灵敏度均大于92%,相对特异性均大于95%,约登指数与Kappa值均大于0.9,表明一致性较好。结论循环增强荧光免疫法与电化学发光法检测结果具有很好的一致性,符合临床检测要求。     

定量检测降钙素原的方法学评价

目的评价酶联免疫荧光法与电化学发光法用以定量检测降钙素原(PCT)的分析性能,并探讨两种方法检测结果的相关性和一致性,为合理选择PCT的检测系统提供依据。方法酶联免疫荧光法采用mini VIDAS全自动荧光免疫分析仪(简称mini VIDAS),电化学发光法采用Cobas E411电化学发光分析仪(简称Cobas E411)。测定相应配套低、高值质控品,计算日内和日间精密度;测定相应试剂非同批号的定值标准品观察偏倚程度,分析和比较两种方法检测结果的相关性和一致性。结果 mini VIDAS检测PCT低值和高值质控品的日内精密度分别为2.02%、1.83%,日间精密度分别为3.59%、3.09%;Cobas E411检测的日内精密度分别为1.30%、0.87%,日间精密度分别为3.33%、3.06%。mini VIDAS检测PCT低值和高值定值标准品的偏倚分别为2.98%、-1.97%;Cobas E411的偏倚分别为5.26%、0.90%。两种方法的PCT检测结果比较差异有统计学意义(P0.01),但两者的相关性(r=0.993)和一致性(Kappa=0.76)良好。结论两种方法定量检测PCT的分析性能都能满足实验室要求,且具有良好的相关性和一致性,实验室可根据实际情况选择合适的检测系统。     

电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析测量范围和临床可报告范围研究

目的对Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的分析测量范围(AMR)进行验证性研究,并建立临床可报告范围(CRR)。方法参考美国临床与实验室标准化协会(CLSI)EP6-A文件,选用超出厂商声明的分析测量范围下限和上限浓度的样本,按比例精确配成等间距的不同浓度样本,每个浓度样本重复测定2次,用多项式回归评价并验证厂商声明的AMR;选用NT-proBNP浓度在分析测量范围内的高值样本5份,用稀释液作不同倍数稀释后测定,计算稀释回收率,确定最大允许稀释度,并结合功能灵敏度建立CRR。结果 NT-proBNP的分析测量范围:5~35 126 pg/mL,最大允许稀释度1∶2。根据其功能灵敏度,临床可报告范围:8.82~70 252 pg/mL。结论 Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP在厂商声明的分析测量范围内线性良好,所建立的临床可报告范围可以满足临床需要。     

罗氏Cobas E602全自动电化学发光分析仪检测贫血指标的方法学性能验证

目的验证Cobas E602全自动电化学发光免疫分析仪检测贫血指标的方法学性能。方法按照美国临床实验室标准化协会（CLSI）推荐的方法测定叶酸、铁蛋白及VitB12的精密度、正确度、线性范围、灵敏度、生物参考区间、携带污染率等,并进行验证。结果 Cobas E602全自动电化学发光免疫分析仪检测叶酸、铁蛋白及VitB12的批内、日间精密度变异系数分别为3.27%-4.72%和3.65%-4.95%;高、低值校正品的检测结果与靶值的相对偏倚（%）在-5.3%-4.2%之间;测量范围与厂家提供的测量范围相近;叶酸、铁蛋白及VitB12的测量数值与仪器厂家提供的参考区间符合率分别为92.50%、90.70%及93.20%;仪器检测的携带污染率为0.02%-0.18%。结论 Cobas E602全自动电化学发光免疫分析仪检测叶酸、铁蛋白和VitB12的方法学性能良好。