犬肺静脉心肌袖内P样细胞

目的：通过对肺静脉组织形态学的观察探讨异位兴奋和局灶性房颤起源于肺静脉的形态学基础。方法：取材于5例成年健康犬的左房和肺静脉。将组织声连续切片后行HE染色和Masson三色染色,光镜观察。结果：左房心肌延伸入肺静脉内形成心肌袖,肺静脉内心肌走行方向各异,有时呈内环外纵,有时呈纵行或斜行。肺静脉壁由三层组成,即内膜层,中间层和外膜层。P样细胞散在分布于心肌袖内,主要分布于心肌袖的中间部,并且几乎都是在上肺静脉中。肺静脉的心肌细胞与左房内的心肌细胞形态上无明显差异。结论：P样细胞可能是引发房颤的异位兴奋的形态基础。     

犬48h房颤结构重构及心功能变化的研究

目的 探讨心房颤动(AF)持续48 h对犬心房结构重构及心功能的影响.方法 全麻状态下,快速起搏(600次/min)犬右心房建立房颤模型,观察犬起搏前及起搏48 h心房超微结构的变化及AF后0、12、24、36、48 h左右心房横径、心室射血分数(EF)的变化及心房组织结构的变化.结果 随着AF的持续,左右房横径均逐渐增大,增大幅度与AF 0h比较差异无统计学意义(P>0.05).房颤12 h心室射血分数降低21.4%,24 h降低22.8%,36、48 h分别降低25.5%和31.4%,与AF 0h比较差异有统计学意义(P<0.05～0.01).右房组织HE染色可见AF组心肌细胞增大,排列紊乱,细胞间隙增宽.对照组心肌细胞结构完整,排列整齐.Masson染色AF组与对照组相比可见少量胶原沉积.PAS染色AF组可见糖原沉积.电镜下可见AF 48 h犬心肌细胞内质网扩张、线粒体肿胀及糖原沉积.结论 600次/min刺激频率起搏右心房诱发48 h房颤,可致心房肌心房结构和功能发生改变,即发生结构重构,同时伴有心功能降低.     

人肺静脉前庭心肌的组织病理学特点

目的通过对比观察左心房、肺静脉及肺静脉前庭的组织学特点,以探讨心房颤动发生与维持的机制。方法10例非心脏原因死亡的尸检标本．观察肺静脉的分布与走行,沿肺静脉走行剥离肺静脉与心包及周围结缔组织,翦下左心房与肺静脉。观察肺静脉前庭部肌束的分布与走行。并同时将标本由近至远心端分别环行剪取左上及右上肺静脉、左上及右上肺静脉前庭、左心房3 0nn宽组织标本。取出组织,置于4％的多聚甲醛溶液中固定1周以上进行取材。经酒精脱水,石蜡包埋,分别作纵向和横向连续切片,常规HE染色。选取部分标本进行Masson染色。随机选取肺静脉前庭部纵切3mm宽的组织标本,进行PGP9．5单克隆抗体S-P免疫组化染色。肺静脉前庭指肺静脉开口和左心房体部之间,类似漏斗样扩张的区域,其边缘通常距离肺静脉开0．5-1．5 cm。观察指标:肺静脉前庭心肌厚度、细胞分布与排列特点、神经分布特点。结果①肺静脉前庭内心肌平均厚度为(2．6±0．4)mm,显著薄于左心房的(3．0±0．5)mm(P=0．047)。②细胞分布:心肌纤维自左心房至肺静脉前庭向肺静脉连续延伸,逐渐变薄,心肌细胞数逐渐减少。与左心房心肌细胞分布相比较,肺静脉前庭处,从横切面上可以观察到心肌在肺静脉前庭内分布不均一,有的部分相对数量较多而有的部分则较稀疏。③细胞排列:从纵切面观察,左心房心肌纤维总体呈横行排列,密度均匀,而肺静脉前庭内的心肌纤维的走行方向呈横行、纵行或斜行等不规律排列,在近心内膜部分肌束排列较紧密,近心外膜部分则排列较疏松。随着向肺静脉延伸,心肌细胞分布逐渐稀疏,心内膜和心外膜的差别渐无。④特殊细胞:未观察到有结样细胞或形成传导束的特殊细胞。见到染色呈深褐色的特殊细胞。⑤免疫组化染色结果,肺静脉前庭的心肌细胞处存在PGP9．5免疫组化染色阳性的神经纤维。结论人肺静脉前庭内心肌细胞的分布不均匀、排列紊乱,可能是发生心律失常的结构基础。有丰富的神经纤维分布,可能解释肺静脉前庭内易于出现自律性、不应期、传导速度等电生理特征异常的电活动,并触发或维持心房颤动。     

心房颤动对右心室超微结构影响的研究

目的:探讨心房颤动(atrial fibrillation,AF)时右室心肌超微结构的变化。方法:健康杂种犬17只,随机分为快速心房起搏组(11只)和对照组(6只),通过快速心房起搏建立慢性AF动物模型,采用光镜和电镜技术观察AF犬右室心肌结构变化。结果:与对照组相比,AF犬右室心肌可见:肌原纤维排列紊乱,肌节结构模糊、断裂;线粒体数量明显增多,丛状聚集,肌原纤维之间线粒体少见,线粒体变长, 大小不一;肌浆网肿胀、破裂,数量减少;核膜凹凸明显,有时可见分叶核,异染质成簇聚集在胞浆中;闰盘结构不连续,扭曲、模糊;糖原在肌溶解区积聚,偶可形成"糖原湖",右室心肌胶原含量显著增高(7.62±0.73 vs 12.40±4.47,P<0.05)。结论:AF时右室心肌超微结构发生了明显变化,右室心肌结构重构可能是其收缩和舒张功能改变的基础。     

猪肺静脉心肌袖的组织学观察

目的对猪肺静脉心肌袖进行组织形态学观察,寻找可能引起局灶性心房颤动的形态学基础。方法成年家猪肺静脉心肌袖取自12只家猪心脏,石蜡包埋切片HE染色,光镜观察。结果猪肺静脉心肌袖组织分2~3层,随肺静脉的延续逐渐由环行变为斜行、纵行,在末端由结缔组织分隔包绕,呈卷曲散在分布。结论猪肺静脉心肌袖组织在肺静脉壁上的特征性分布,为局灶性房颤的发生提供了形态基础。     

犬肺静脉的组织学与 HCN 通道的表达研究

目的观察犬肺静脉的纤维走行方向及起搏细胞的存在,研究犬急性心房颤动模型时肺静脉及左心房中起搏电流(funny current,If)通道亚单位超极化激活的环核苷酸门控通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channel,HCN)1、2、4的表达变化。方法 14只健康杂种犬随机分为房颤组与对照组,快速心房起搏建立犬急性房颤模型,取对照组的肺静脉肌袖组织做苏木素-伊红(HE)及高碘酸-希夫反应(PAS)染色;取两组的肺静脉、左心房组织,用逆转录-PCR(RT-PCR)方法测定HCN1、HCN2、HCN4 3种通道的mRNA表达水平。结果肺静脉尤其是肺静脉左心房交界处肌纤维排列紊乱;肺静脉肌袖的内膜面可以见到传导细胞;两组犬的肺静脉及左心房中均有HCN2、HCN4的mRNA表达,而无HCN1的表达。HCN4的mRNA表达水平从高到低依次为:房颤组肺静脉、房颤组左心房、对照组肺静脉、对照组左心房,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。HCN2的mRNA表达水平从高到低依次为:房颤组肺静脉、房颤组左心房、对照组,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05),对照组的肺静脉与对照组左心房中HCN2的mRNA表达水平无明显差异。结论犬肺静脉肌袖存在纤维各向异性及传导细胞,急性房颤时肺静脉及左心房HCN2、HCN4的表达上调,可能参与房颤的发生与维持。     

正加速度对冠状动脉狭窄小型猪模型心肌显微结构的影响

目的 研究正加速度（＋Gz） 应激对不同程度冠状动脉（ 冠脉） 狭窄小型猪模型心肌显微结构的影响。方法 建立巴马小型猪左前降支不同程度狭窄的动物模型,模拟飞行环境,观察各组最大耐受加速度值,取其左心室前壁心肌组织,分别在光镜、电镜下观察不同组别心室肌显微结构的变化。结果 光镜下：伪手术对照组心内膜与心肌连接良好,心肌细胞排列紧密,间质无水肿;轻度狭窄组心肌细胞部分变形,间隙稍增大,间质稍水肿;中度狭窄组内膜细胞水肿,心肌细胞排列不规则,部分破裂,间隙增宽;重度狭窄组心肌细胞明显变形,排列紊乱,间隙明显增宽,细胞核变形甚至脱失。电镜下：伪手术对照组肌纤维排列整齐,肌节清楚,线粒体排列规律;轻度狭窄组肌纤维稍模糊,线粒体聚集,其内嵴模糊、减少;中度狭窄组肌纤维模糊,线粒体明显聚集、空泡化;重度狭窄组肌纤维断裂,线粒体严重变形、嵴浓缩,部分线粒体破裂。结论 在最大加速度耐受条件下,轻度冠脉狭窄猪心室肌结构变化不明显,中度及重度狭窄猪心室肌出现明显的显微结构变化。     

共同性斜视患者眼外肌的光镜和超微结构研究

目的：研究共同性斜视患者眼外肌的组织形态学改变，为探讨斜视的发病机制奠定基础。方法：取60例共同性斜视患者和20例眼球摘除者的眼外肌组织标本，每例标本1／2行HE染色，光镜下观察；1／2标本作超薄切片，行透射电镜观察。结果：光镜下可见肌纤维排列疏松，肌纤维数量较少，间质成分多。小年龄组中可见萎缩变性的横纹肌细胞和排列混乱的肌纤维。而大年龄组则只有少量萎缩变性的肌细胞排列在大量胶原纤维结缔组织中。电镜下整个眼肌组织结构模糊，肌膜不完整，细胞内结构紊乱，细胞核固缩。且在大龄组中肌丝紊乱，肌纤维弯曲排列、间隙变宽以及空泡样改变更明显。结论：共同性斜视患者眼外肌有明显的改变，且病程越长，肌纤维的损害程度越重。从组织学的角度进一步完善了共同性斜视的发病机理。     

解偶联蛋白2在七氟醚后处理心肌保护作用中的机制研究

目的 探讨解偶联蛋白2(UCP2)在雄性小鼠七氟醚后处理（SPostC）心肌保护作用中的机制。方法 选取健康雄性小鼠45只,按照随机数字表法分为假手术组即sham组,在体建立缺血再灌注组即I/R组,在I/R组的基础上给予1MAC七氟醚的I/R+SPostC组,每组15只。测定3组小鼠主动脉内径和左室射血分数;采用TTC+Evans Blue染色法测定心肌梗死面积;HE染色法观察心肌组织结构;透射电镜下观察线粒体结构;活性氧试剂盒测定心肌细胞能量代谢。蛋白质印迹法检测3组UCP2蛋白表达水平。结果（1）I/R+SPostC组的主动脉内径和左室射血分数变化率低于I/R组（P<0.05）。I/R+SPostC组小鼠的心肌梗死面积小于I/R组（P<0.05）。（2）与sham组相比,I/R组小鼠心肌组织排列较紊乱,部分心肌纤维断裂,心肌细胞肿胀,空泡变性。与I/R组相比,I/R+SPostC组小鼠心肌组织排列紊乱、心肌细胞肿胀、心肌纤维断裂及炎细胞浸润程度减轻。（3）电镜下线粒体结构：I/R组肌丝溶解、断裂,线粒体肿胀;I/R+SPostC组线粒体结构优于I/R组,线粒体形态基本完...     

慢性砷中毒对成年小鼠心肌细胞超微结构的影响

目的：观察慢性砷中毒对小鼠心肌细胞超微结构的改变,为探讨砷对心脏毒性作用提供实验依据。方法：选取健康成年昆明小鼠40只,雌雄各半,分为对照组、慢性砷中毒染毒组（15mg／L含砷水）,自由饮水3个月。建立慢性砷中毒动物模型后,测定各组小鼠心脏中砷含量,采用HE染色观察心肌组织的病理变化,透射电镜观察小鼠心肌细胞超微结构的变化。结果：1．染毒组小鼠心脏中砷含量明显高于对照组（P〈0．05）;2．HE染色观察染毒组心肌细胞肿胀,形态不规则,排列紊乱;3．电镜下观察染毒组心肌细胞肌原纤维排列紊乱,结构不清,线粒体嵴断裂,存在线粒体空泡化。结论：砷中毒可致心肌细胞病理及超微结构改变。     

Ectopic activity induced by elevated atrial pressure in rabbit pulmonary vein in vitro

Atrial fibrillation ( AF ) is a common tachyarrhythmia and may cause serious complications, such as stroke. When atrial pressure was elevated, the effect refraction period (ERP) was shortened and the conductivity in atria was slowed and the heterogeneity of different parts of atria was increased. These changes facilitate the occurrence and maintenance of AF.     

阵发性房颤患者大静脉肌袖与心房电连接特征的临床研究

目的：总结阵发性房颤病人肺静脉和／或上腔静脉肌的电生理标测和导管射频消融电隔离的结果，评价国人大静脉肌袖和心房的电连接类型和特点。资料与方法：顽固性阵发性房颤患者45例，在环状标测电极指导下行大静脉肌袖的电位记录、分析以及对能标测到袖电位的大静脉进行开口部的点或段的消融电隔离治疗。根据窦律和心房起搏下的肌袖内环形电极标测到的袖电位的激动顺序以及有效放电对袖电位的影响，总结和分析袖房之间的电连接特点。结果：共标测和／或电隔离肌袖115根，其中肺静脉100根，上腔静脉15根。其中呈单束状电连接43根（38％），双束状电连接54根（46％），多束状电连接12根（10％），环状电连接3根，无电连接3根。结论：根据环状电极标测到的袖电位的激动顺序和对放电的反应，提示袖房之间电连接的类型多为单束状和双束状（84％），说明对于大多数肌袖并不需要行环状消融，而只要在袖房连接处行点或节段性消融即可达到完全袖房电隔离的结果。     

TRPM7与风湿性心脏病心房颤动患者心房纤维化的关系

目的:检测风湿性心脏病心房颤动患者心房组织中瞬时受体电位通道亚族M7(TRPM7)的mRNA及蛋白水平,探讨TRPM7与房颤心房纤维化的关系.方法:19例风湿性心脏病患者于换瓣术中获取约200 mg的右心房肌组织,分为窦律(SR)组9例和房颤(AF)组10例.HE病理染色观察心肌细胞横截面积,Masson染色及心肌纤维化标志物观察心房纤维化,Western blotting和实时定量PCR测定心房肌组织中TRPM7的mRNA及蛋白水平.结果:与SR组比较,心肌细胞横截面积、胶原容积分数、心肌纤维化标志物CTGF、Collagen Ⅰ和CollagenⅢ的mRNA水平、TRPM7的mRNA及蛋白水平在AF组显著增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:风湿性心脏病房颤患者心肌组织中TRPM7的表达增加,可能通过促心房纤维化,参与房颤的发生与维持.     

酶解法分离犬肺静脉肌袖和心房肌细胞

目的:探索简单实用重复性好的犬肺静脉肌袖和心房肌细胞的分离方法。方法:采用两步酶解法,分离得到犬肺静脉肌袖细胞和心房肌细胞,用形态学和台盼蓝染色鉴别分离的心肌细胞,使用倒置显微镜观察和摄像记录。结果:分离心肌细胞的存活率为30%～60%,形态呈杆状、折光性好、横纹清晰,膜状态良好。结论:使用两步酶解法能获得存活率高,数量较多的心肌细胞,是一种简单实用的分离心肌细胞的方法。     

不脱钙骨组织免疫组织化学与原位杂交的方法研究

目的 :探讨在低温塑料包埋制备的不脱钙骨切片上运用免疫组化和原位杂交技术的可行性。方法 :采用改进的甲基丙稀酸甲酯低温塑料包埋法包埋SD大鼠胫骨近端 ,制备不脱钙的骨组织切片。切片行Goldner′s三色法染色观察骨小梁结构 ;采用免疫组化SABC法和原位杂交技术检测骨组织细胞中胰岛素样生长因子 1(IGF 1)mRNA和蛋白表达。结果 :三色法染色示骨小梁结构完整 ,部分骨小梁边缘可见红染的类骨质 ,成骨细胞与破骨细胞清晰可见。免疫组化和原位杂交示IGF 1mRNA和蛋白表达于成骨细胞 骺板软骨细胞及骨髓腔中部分单核细胞的胞浆中。此外 ,在骨小梁基质中也可见IGF 1蛋白的阳性表达。结论 :利用低温塑料包埋制备的不脱钙骨切片可同时进行免疫组化和原位杂交检测观察 ,该方法为骨质疏松等代谢性骨病的分子病理学研究提供了有效的技术平台。     

非接触三维标测系统指导下环肺静脉电隔治疗心房颤动的临床评价

目的:探讨非接触三维标测系统指导下环肺静脉电融隔离治疗心房颤动(房颤)的可行性和临床疗效.方法:28例药物治疗无效或不能耐受的房颤患者.其中23例阵发性房颤、5例持续性房颤.采用非接触三维标测系统(Ensite navX)建立左心房、肺静脉的三维等时电势图和电解剖图,并在距离肺静脉口1～2 cm处行环肺静脉及其周围组织电隔离.消融终点包括:完成所有环肺静脉消融径线;全部肺静脉均达电隔离;阴性诱发结果.结果:28例患者均达到消融终点;手术的总操作时间和X线曝光时间分别为(161.3±23.2)min和(38.0±6.8)min;随访6～17月,20例(71%)无房颤发作;8例(29%)有房颤复发,其中2例因其发作次数及时间均较术前明显减少未再消融,予以可达龙治疗可控制(术前可达龙治疗无效),6例行第2次消融,术中均发现肺静脉电位有不同程度的恢复,第2次术后4例房颤无再发,2例仍有发作但未再消融,予以可达龙治疗可控制.术中及随访期间无任何操作相关并发症.结论:非接触三维标测系统指导下的环肺静电隔离是治疗房颤的有效而安全的方法.肺静脉既是房颤的诱发机制,亦有可能参与房颤的维持.     

三种不同染色技术在体内组织工程中的组织学研究

目的分析对比三种染色方法在显示新生骨成骨情况的差异性,为体内组织工程研究提供更好的组织学鉴别方法。方法将大节段多孔生物陶瓷/聚乳酸复合支架植入犬4个不同的非骨部位,6个月后取材脱钙,石蜡包埋及切片分别做苏木精-伊红染色、Masson染色和亚甲基蓝-碱性品红染色,在光镜下观察其组织学形态并做比较。结果苏木精-伊红染色下可以清楚的观察到成骨细胞、类骨质等成分;Masson染色胶原纤维及成骨现象着色鲜艳,易于观察;亚甲基蓝-碱性品红染色成骨细胞更加清晰,与周围组织对比明显。结论苏木精-伊红染色更符合常规病理学观察习惯,Masson染色和亚甲基蓝-碱性品红染色在胶原纤维、成骨细胞等成分的观察上更具优势,因此三者结合更有利于镜下组织形态学观察。     

单中心球囊冷冻消融术后房性快速性心律失常的电生理标测和再消融治疗

目的 对阵发性心房颤动(简称房颤)患者行球囊冷冻消融后复发房性快速性心律失常的电生理机制进行初步探讨.方法 连续入选阵发性房颤行球囊冷冻消融后复发房性快速性心律失常、并行再次消融的患者.术中使用三维电解剖标测系统,先对左心房进行电压标测,判断各支肺静脉及肺静脉前庭是否仍有电传导,若有,则行射频消融,完成肺静脉及肺静脉前...