三色流式细胞术对儿童急性白血病免疫表型的分析

目的 探讨三色荧光标记流式细胞术CD45辅助设门检测儿童急性白血病免疫表型的临床应用及意义.方法 采用流式细胞仪和几组三色荧光标记抗体检测34例FAB分型为ALL与AML的儿童骨髓或外周血免疫表型.结果 25例ALL儿童中,B型淋巴细胞白血病14例,T型淋巴细胞白血病6例,双标记5例,在T-ALL中,淋系抗原阳性率表达顺序为CD7＞CD3＞CD5,在B-ALL中,淋系抗原阳性率表达顺序为CD19＞CD10＞CD22＞CD20,在T-ALL、B-ALL及双标记中还可同时表达髓系抗原（CD13、CD14、CD15、CD33）.9例AML儿童中,同时或分别表达髓系标志抗原CD15、CD33、CD13、CD14,其阳性表达率为89%、89%、79%、11%,9例中有3例还不同程度表达淋系抗原CD3、CD7、CD19.结论 三色流式细胞术,可准确将白血病分为淋系与髓系白血病,并能将淋系白血病分为B型和T型及双标记,同时能反映髓系抗原阳性的ALL（My＋ALL）与淋系抗原阳性的AML（AL＋AML）,对指导临床治疗有重要价值.     

成人急性髓细胞系白血病免疫分型特点

目的：探讨成人急性髓细胞系白血病（AML）三色流式细胞术免疫分型特点及AML抗原表达规律.方法：采用CD45/侧散射（SSC）双参数散点图设门方法对156例成人AML进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果：156例AML主要表达CD117（90.4%）、CD13（87.2%）、CD33（71.8%）、CD34（64.7%）、HLA-DR（60.9%）.34.0%的AML患者伴有淋系抗原表达,最常见为CD7（24.4%）.结论：流式细胞仪三色荧光标记法进行AML免疫分型,对白血病的准确分型诊断、发生发展和预后判断有重要的指导意义.     

106例成人急性白血病流式细胞术免疫分型分析

OBJECTIVE: To study the immunophenotyping of adult patients with acute leukemia and its association with the prognosis. METHODS: Immunophenotyping was performed in 106 adult patients with acute leukemia by three-color flow cytometry analysis using CD34/SSC gating. RESULTS: The antigens expressed in 71 patients with acute myeloid leukemia (AML) were mainly CD13, CD33, HLA-DR, CD34 and CD117. Lymphoid antigen expression was identified in 23.9% adult AML patients and CD56 antigen expression in 15.5% of the AML patients. In 29 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL), the expressed antigens were mainly HLA-DR, CD10, CD19, CD34 and CD7, and 34.5% of these patients were found to be positive for myeloid antigen expression. Complete remission (CR) rate in AML patients with lymphoid antigen expression after chemotherapy was lower than that in AML patients without lymphoid antigen expression (52.9% vs 77.8%, P<0.05), and no significant impact was noted of myeloid antigen expression in ALL on the CR of the patients (70.0% vs 94.7%, P>0.05). The CR rate in AML with CD56 antigen expression was lower than that in AML without CD56 expression (36.4% vs 78.3%, P<0.025), and the CR rate in CD34+ AML was lower than that in CD34- AML (56.0% vs 80.4%, P<0.05). CONCLUSIONS: Gating of CD45/SSC can eliminate the interference of normal cells to render more reliable immunophenotyping results. The expressions of CD56+, CD34+, lymphoid antigen in adult AML patients, who have lower CR rate, often signify poor prognosis.     

三色流式细胞术在检测儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型中的应用

目的:探讨三色荧光标记流式细胞术CD45辅助设门检测儿童急性淋巴细胞白血病(CALL)免疫表型的临床应用及意义。方法:采用流式细胞仪和几组三色荧光标记抗体检测25例FAB分型为ALL的儿童骨髓或外周血免疫表型。结果:25例ALL儿童中,B型淋巴细胞白血病14例,T型淋巴细胞白血病6例,双标记5例,在T-ALL中,淋系抗原阳性率表达顺序为CD7>CD3>CD5,在B-ALL中,淋系抗原阳性率表达顺序为CD19>CD10>CD22>CD20,在T-ALL、B-ALL及双标记中还可同时表达髓系抗原(CD13、CD14、CD15、CD33),且髓系标记抗原在T-ALL与B-ALL中出现的频率相同。结论:三色荧光标记流式细胞术CD45/SSC设门技术检测儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型,可准确将幼稚细胞从正常细胞群中分离出来并专门对异常细胞群进行免疫表型分析,将淋巴细胞白血病分为B型和T型白血病及双标记,并能反映髓系抗原阳性的ALL(M y+ALL),对指导临床治疗有重要价值。     

106例成人急性白血病流式细胞术免疫分型分析

目的研究成人急性白血病免疫分型及与预后的关系。方法以CD45/SSC双参数散点图设门,采用流式细胞术检测106例成人急性白血病患者免疫分型情况。结果(1)71例急性髓系白血病(AML)患者主要表达CD13、CD33、HLA-DR、CD34和CD117抗原,23.9%的AML患者伴有淋系抗原表达,15.5%的AML病人伴有CD56抗原的表达。(2)29例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者主要表达HLA-DR、CD10、CD19、CD34和CD7,34.5%的ALL患者伴有髓系抗原的表达。(3)伴有淋系抗原表达的AML患者化疗完全缓解(CR)率为52.9%(9/17),显著低于未伴有淋系抗原表达的AML病人(77.8%)(P<0.05);伴有髓系抗原表达的ALL患者化疗后CR率为70.0%,而未伴有髓系抗原表达的ALL患者CR为94.7%,两者差异无显著性(P>0.05);CD56 AML患者化疗后CR率仅36.4%,显著低于CD56- AML患者(78.3%)(P<0.025);CD34 AML患者化疗后CR率为56.0%,显著低于CD34- AML患者(80.4%)(P<0.05)。结论采用CD45和SSC双标记设门可较好地排除正常骨髓细胞的影响,较准确地反映病人的免疫学分型;伴淋巴系抗原表达的AML、CD56 AML及CD34 AML化疗后CR率低,预后差。     

218例急性白血病流式细胞术免疫表型分析

目的研究急性白血病（AL）免疫表型特征及诊断价值。方法采用流式细胞术（FCM）对218例初诊急性白血病患者进行免疫分型。结果急性髓系白血病（AML）患者均表达两种以上髓系抗原,其中部分伴有淋系抗原（CD7）表达。急性淋系白血病（ALL）患者均表达淋系抗原,部分表达一种或两种髓系抗原。14例混合型白血病同时表达两种以上淋系和髓系抗原标志。4例慢粒急淋变既表达髓系抗原又表达淋系抗原。结论 FCM免疫分型是在细胞形态学和细胞化学染色基础上对急性白血病诊断与分型的重要补充。     

流式细胞术在人急性白血病免疫分型中的应用

目的 :研究流式细胞仪 (Flowcytometry,FCM)检测急性白血病 (AL)细胞表面抗原的方法及临床意义。方法 :以FCM为基础 ,应用一组三色荧光标记单克隆抗体 (Monocolonalantibody,MoAb)对 14例AL患者进行免疫分型。结果 :5例为双表型 ,即同时表达二系抗原 (急性髓细胞白血病 (AML) 3例 ,急性淋巴细胞白血病 (ALL) 2例 ) ;9例为系列专一性 (即仅表达一系抗原 ,AML 6例 ,ALL 3例 )。结论 :双表型较系列专一型预后差 ;FCM法具有测定细胞量大 ,快速和准确的优点 ,值得推广应用     

多色流式细胞术对60例成人急性髓系白血病免疫分型的研究

目的探讨成人急性髓系白血病(AML)多色流式细胞术免疫分型的特点。方法采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行多色流式细胞术免疫表型分析。结果髓系抗原CD13和CD33在AML各亚型中均有很高的表达,阳性率分别为98.3%和85.0%。CD14和CD64在AML-M4及AML-M5患者中的表达率较高。CD14和CD64在AML-M4的表达率分别为60.0%和100.0%,在AML-M5的表达率分别为80.0%和100.0%,但CD14的特异性要高于CD64。AML患者CD34、CD117、HLA-DR的表达率分别为59.3%、84.3%和71.7%;AML-M3患者CD117表达率为76.9%,CD34及HLA-DR呈低表达。AML患者淋系抗原CD7和CD19阳性率分别为20.0%和3.3%。结论采用CD45/SSC双参数散点图设门方法,使成人AML免疫分型结果更可靠。CD13、CD33、CD14可作为AML免疫分型的髓系单抗。CD34及HLA-DR低表达为AML-M3的特征。成人AML淋系抗原表达以CD7较常见。     

流式细胞术在急性白血病免疫分型中的应用探讨

目的应用多参数流式细胞术检测急性白血病细胞表面CD抗原分子的表达水平,探讨AML和ALL中CD抗原的表达规律,为临床个体化治疗累积分子机制研究材料。方法应用流式细胞术检测44例急性髓细胞白血病患者和18例急性淋巴细胞白血病患者,以CD45/SSC设门,应用13种单克隆抗体对CD45弱表达的细胞群进行免疫分型,测定多种CD分子的表达率,并通过χ~2检验比较不同的高表达CD分子的相关性。结果 44例AML患者中表达且高表达CD33(79.6%),CD38(70.5%),CD117(52.3%),cyt-MPO(50.0%);16例B-ALL患者中CD10(75.0%),CD19(81.25%)以及CD22(81.25%)阳性表达率较高;比较AML患者高表达CD抗原,结果显示CD33/CD38、CD33/cyt-MPO的抗原表达差异均有统计学意义(P0.05)。结论不同的CD分子在急性白血病细胞上表达有差异性,或将为靶向治疗和临床个体化治疗提供有用的线索。     

广西地区儿童急性白血病流式细胞术免疫分型研究

目的:研究流式细胞术(FCM)在广西地区儿童急性白血病(AL)的免疫分型诊断价值,了解儿童白血病免疫亚型的分布情况.方法:采用CD45侧散射(SSC)双参数设门方法进行FCM白血病细胞表面分化抗原分析. 结果:120例广西地区儿童急性白血病分型可分为3型:急性淋巴细胞白血病(ALL)占65.83%;急性髓细胞白血病(AML)占27.5%;混合型白血病占6.67%.79例ALL中,B淋巴细胞白血病(B-ALL)占91.14%,T淋巴细胞性白血病(T-ALL)占7.59%.伴髓系抗原表达的ALL占 25.32 %,主要表达CD13(22.78%).髓过氧化物酶(MPO)在AML特异性表达.结论:应用FCM能对广西地区儿童急性白血病进行正确分型诊断.     

流式细胞仪测定成人急性白血病患者DNA含量的临床意义

为探讨急性白血病患者骨髓细胞的周期分布，非整倍体，及其与临床疗效的关系。作者应用流式细胞仪测定了５７例ＡＬ患者的骨髓细胞ＤＮＡ含量。不同类型ＡＬ患者骨髓细胞Ｓ％均明显低于正常对照和缓解后患者。急性早幼粒细胞白血病Ｓ％最低；ＡＬ患者骨髓细胞ＤＮＡ非整倍体检出率２９．８％，４例完全缓解的患者仍检出ＤＮＡ非整倍体细胞，随化疗进展而消失。     

71例儿童急性髓系白血病多参数流式细胞术免疫表型分析

目的为了解儿童急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)免疫表型特征,分析儿童AML不同亚型抗原表达的差异,并探讨其诊断价值.方法采用三色FCM CD45/SSC双参数散点图设门方法,对71例患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析,结合FAB分类进行比较分析.结果在儿童急性髓系白血病患者中,CD33和CD13的表达最常见,分别达97.2%和94.4%,其次为HLA-DR(69%).57.7%的病例伴有淋系抗原表达,以CD19表达最常见(36.6%),其次为CD7(28.2%),未见CD20的表达.3例M0患儿经免疫分型确诊.结论结合FAB分类,多参数流式细胞术有助于对AML的准确诊断和分型.FAB不同型别具有不同的免疫表型特征.     

急性髓系白血病四色流式细胞术免疫学分型特点分析

目的探讨急性髓系白血病(AML)的免疫表型特征与意义。方法采用流式细胞术四色免疫荧光直接标记技术与CD45/SSC设门分析技术,检测105例AML患者,根据抗体积分系统进行分型。结果 105例AML病例中免疫表型分析显示,各种抗原的阳性表达依次为CD13(97.1%)、CD33(90.5%)、MPO(79.0%);干/祖细胞分化抗原表达依次为CD117(77.1%)、HLA-DR(72.4%)、CD34(54.3%)。其中跨系表达:淋系抗原表达阳性的AML(36.4%),主要表达CD19、CD7、CD2、CD10、CD8;跨阶段表达(36.4%):以CD34+CD11b+和CD34+CD11c+共表达2种异常最多见。缺失表达(27.3%):以CD13、CD33及HLA-DR等抗原缺失表达易见。结论流式细胞术四色免疫荧光直接标记法对某些特殊类型的白血病有重要的意义,有助于指导临床诊断、治疗及判断预后。     

多参数流式细胞术检测白血病微小残留在急性髓细胞性白血病诱导治疗阶段的临床意义

目的研究急性髓细胞性白血病（AML）患者第1次诱导治疗后和第1次完全缓解时多参数流式细胞术（MFC）监测白血病微小残留（MRD）对预测疾病复发和判断预后的作用,探讨MRD监测的临床价值。方法回顾性研究246例成人AML患者治疗及MRD的监测数据,分析MRD水平与疾病复发和预后的相关性。结果（1）第1次标准方案诱导化疗后,ROC分析确定MRD阈值为1．5×10-2,Cox比例风险模型显示相对于MRD阴性组,MRD阳性组的相对危险度（RR）为2．41。在缓解后采用联合方案化疗的患者中,MRD阳性组和MRD阴性组的中位无复发生存时间（RFS）分别为（19．45±3．74）个月和（56．46±4．28）个月,中位总生存时间（os）分别为（29．37±4．47）个月和（77．97±4．30）个月,差异均有高度统计学意义（均P〈0．01）。（2）第1次达完全缓解时,ROC分析所确定的MRD阈值为3．0×10-3,Cox比例风险模型显示相对于MRD阴性组,MRD阳性组的RR值为1．75。缓解后采取联合化疗,MRD阳性组和MRD阴性组患者的中位RFS分别为（28．36±3．40）个月和（55．70±4．32）个月,中位OS分别为（39．30±3．73）个月和（70．19±4．34）个月,差异均有高度统计学意义（均P〈0．01）。结论MFC检测MRD在AML诱导治疗过程中具有预测复发、判断预后的价值。     

应用流式细胞仪检测白血病 MDR1的表达

目的：探讨白血病 Ｍ Ｄ Ｒ１表达的意义,建立 Ｍ Ｄ Ｒ１检测的简便快速方法。方法：用流式细胞术和经 Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ 标记 Ｍ Ｄ Ｒ１单克隆抗体检测白血病外周血有核细胞 Ｍ Ｄ Ｒ１的表达。结果：２４例急性白血病 Ｍ Ｄ Ｒ１表达为８９８±７４７,３例慢性白血病 Ｍ Ｄ Ｒ１表达为３６０±１３０,两组间差异有高度显著性（ Ｐ＜ ００１）。在急性非淋巴细胞白血病各亚型中, Ｍ ３的 Ｍ Ｄ Ｒ１表达最低,依次增高为 Ｍ ２、 Ｍ ４ ,３组间差异显著（ Ｐ＜ ００１）。结论：本方法简便、快速,可作为白血病临床治疗的评价指标。     

FCM免疫分型在急性髓细胞白血病诊断及治疗中的应用

流式细胞术(FCM)在血液病的发病机理、诊断、分类、治疗和预后判断诸方面有着广阔的应用前景,它使血液病的诊断和治疗进入了一个更精确、更客观的水平。笔者着重对流式细胞术免疫分型在急性髓细胞白血病诊断和治疗中的应用进行了综述。     

92例B系急性淋巴细胞白血病多参数流式细胞术免疫表型分析

目的 探讨B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者的免疫表型特点及其临床意义.方法 采用高分辨多参数流式细胞术CD45/SSC散点图设门方法,对92例初发性B-ALL患者的骨髓幼稚细胞表面及胞内分化抗原进行分析.结果 B-ALL患者的免疫表型具有明显特征:HLA-DR、CD10、CD19、CD22、CD34、CD38、cCD79a、TdT最为常见;髓系抗原CD11b、CD13、CD15和CD33亦可见明显表达,表达率分别为16.7%、42.4%、17.4%和37.4%.不同亚型比较,前前B-ALL中HLA-DR、CD10、CD19、CD22、CD34、CD38、cCD79a的表达率均在90%以上,而不成熟B-ALL不表达CD10,CD11b、CD13、CD33主要在前前B-ALL上表达,CD15则在前B-ALL中多见.儿童B-ALL的免疫表型与成人B-ALL之间没有显著性差异.结论 B-ALL的异常骨髓细胞具有明显的本系列特征、原始细胞标记和跨系表达.且不同免疫亚型的B-ALL具有一定的表型差异.     

儿童期急性白血病免疫分型诊断新方案的临床应用

目的 建立一种胞膜与胞浆抗原相结合、特异与敏感标志相结合的三色流式细胞术检测方法，研究儿童期急性白血病的免疫表型特点。方法 用CD45／SSC双参数点图区分白血病细胞和正常血细胞后，先用系列特异和敏感指标确定白血病细胞的系列来源，然后根据不同系列来源进一步检测。结果 CD45／SSC能明确区分白血病细胞和正常血细胞。胞浆抗原cCD79a、cCD3和MP0分别是B-ALL、T-ALL和AML的特异性抗原，且能够覆盖白血病分化的各阶段。CD19和CD7分别是B-ALL和T-ALL的系列敏感抗原。这两类抗原的结合在确定急性白血病的系列来源时特异、敏感、可靠，避免了仅用胞膜标记时因抗原跨系表达而获得可疑结果。结论 该方案可提高儿童期白血病免疫分型诊断的准确性，对患者的预后进行评估，是一种值得推广的免疫分型方案。