祁紫菀中5种重金属元素富集特性及净化方法研究

目的 研究安国道地药材祁紫菀中5种重金属元素的含量、在不同部位的分布特征、富集规律及净化措施。方法 采用GFAAS和ICP-MS测定祁紫菀中重金属含量,分析祁紫菀中重金属污染指数、富集规律和净化效果。结果 各重金属的标准曲线分别Hg:Y=0.001 3X+5.028 8×10^-6,As:Y=0.001 6X+1.438 9×10^-4,Cd:Y=0.051 2X+1.32×10^-2,Cu:Y=0.002 3X + 4.3×10^-3,Pb:Y = 0.003 9X+1.00×10^-2;7批紫菀样品中,除1份样品中的Pb超标外,其它均合格,且Cu元素的含量较高;随着生长期的延长,Cu元素的含量逐渐增加,采收期11月份达到最高值,Cd、Pb、As和Hg元素含量呈现先升高,然后逐渐降低的变化趋势;紫菀不同部位对重金属元素的富集能力各不相同,紫菀叶中Cu、Cd、Hg含量均较高,根茎中As含量较高;水洗可明显降低紫菀中重金属含量,降低程度由高到低依次为:Pb、Hg、Cd、As、Cu;各元素单因子污染指数P_i值为Cu>Pb>As>Hg>Cd,综合污染指数P_N值为Pb、Cu>As>Cd、Hg,其中Pb、Cu元素的P_N>0.7。结论 祁紫菀对重金属元素Cu的富集能力较强,水洗、去除非药用部位,可以减少紫菀重金属污染。     

右美托咪定对神经病理性疼痛的作用及其机制

目的 观察右美托咪定对坐骨神经结扎所致神经病理性疼痛的镇痛作用,从离子通道角度探讨其机制。方法 SD大鼠随机分为3组：CCI组、CCI+Dex组及Sham组,每组9只。CCI组和CCI+Dex组通过结扎坐骨神经建立神经病理性疼痛模型,Sham组只暴露坐骨神经不结扎。术后7天,CCI+Dex组腹腔注射右美托咪定40μg/kg,CCI组腹腔注射等量生理盐水,1次/天,连续3天。大鼠术前、CCI术后7天及注药后3天采用Von Frey纤维测定机械性缩足阈值（PWMT）,热辐射法测定缩足潜伏期（TWL）。麻醉后处死大鼠,采用酶解法分离大鼠的腰段背根神经节（DRG）细胞,另将HCN1与HCN2质粒转染至HEK293细胞,全细胞膜片钳记录HEK293细胞及大鼠DRG神经元的HCN电流。结果 CCI术后7天,CCI组及CCI+Dex组大鼠PWMT、TWL较术前降低（P<0.05）,而Sham组大鼠的PWMT、TWL与术前比较差异无统计学意义（P>0.05）。给药3天后,CCI+Dex组PWMT、TWL较给药前增加（P<0.05）;而CCI组给药前后PWMT和TWL无明显变化。与Sham组比较,CCI组与CCI+Dex组DRG神经元I_h幅度均增加,V_1/2值降低（P<0.05）;与CCI组比较,右美托咪定治疗后的大鼠DRG神经元I_h幅度降低,V_1/2值增加（P<0.05）。另外右美托咪定（0.1~10μmol/L）抑制HEK 293细胞中的HCN1和HCN2电流,导致最大电流降低,I_h抑制率增加,V_1/2向超极化方向改变（P<0.05）。结论 右美托咪定可缓解神经病理性疼痛,这可能与其抑制DRG神经元I_h有关。     

NKp44+NK 细胞在1 型糖尿病患者 外周血中的表达

目的 探讨NKp44+ 自然杀伤（NK）细胞及其白细胞介素22（IL-22）在1 型糖尿病中的表达 及可能的临床意义。方法 选取湖北省荆州市中心医院19 例1 型糖尿病患者和20 例健康者作为对照组。常 规生化指标检查及糖尿病相关慢性并发症筛查，流式细胞仪检测NKp44+NK 细胞，酶联免疫吸附测定检测 IL-22 表达，分析各指标间的相关性及可能影响因素。结果 在1 型糖尿病患者外周血中NKp44+NK 细胞比 例及IL-22 表达均较对照组升高（P <0.05），NKp44+NK 细胞比例与IL-22 浓度具有相关性（r =0.513，P = 0.025）。NKp44+NK 细胞在外周血中比例增加与糖化血红蛋白具有相关性（r =0.465，P =0.045），NKp44+NK 细胞比例及IL-22 浓度与谷氨酸脱羧酶抗体等指标无相关。无糖尿病周围神经病变组NKp44+NK 细胞比 例较糖尿病周围神经病变组升高（P <0.05），NKp44+NK 细胞比例及IL-22 浓度在有无糖尿病下肢动脉病 变、糖尿病肾脏病变及糖尿病视网膜病变组间差异无统计学意义（P >0.05）。结论 1 型糖尿病患者外周血中 NKp44+NK 细胞比例及其IL-22 表达升高，其可能与1 型糖尿病患者血糖控制及糖尿病周围神经病变有关。     

顺铂对人宫颈癌Hela细胞超弱发光影响的观察

目的：探讨人宫颈癌Hela细胞株经顺铂（DDP）作用后其超弱发光与细胞增殖活性变化的关系．方法：选择DDP诱导人宫颈癌Hela细胞株,比较人宫颈癌Hela,Hela＋DDP细胞株形态变化．MTT比色法、流式细胞仪检测细胞生长周期变化及凋亡情况;用IFFM-D型流动式化学发光仪检测Hela,Hela＋DDP细胞的超弱发光强度变化．结果：DDP对Hela细胞有生长抑制作用,并呈时间和浓度依赖性,其48h的Ic5。值为3mg,／L,当DDP浓度在3mg／L以下时,对Hela细胞无明显毒性作用,超过此浓度时,其毒性呈剂量效应关系（P〈0．01）．流式细胞仪结果表明,与Hela细胞相比较,Hela＋DDP细胞G2期细胞数增多,而G1,S期的细胞数明显减少（P〈0．01）;细胞凋亡率在24,48,72h分别为（11．4±5．8）％,（21．8±7．9）％,32．5±11．6）％．在1×10^-4mol／L鲁米诺及3mL／L双氧水（H2O2）条件下超弱发光强度随着时间的变化,Hela＋DDP细胞明显降低（P〈0．01）．结论：在DDP非毒性剂量作用后,Hela＋DDP细胞超弱发光强度降低,提示超弱发光检测可能作为筛选敏感化疗药物的一项指标．     

载多西紫杉醇脂质微泡联合超声靶向微泡破裂对人肝癌细胞增殖和凋亡影响的初步研究

目的：初步研究载多西紫杉醇脂质微泡（docetaxel-loaded lipid microbubbles,LDLM）联合超声靶向微泡破裂（ultrasound targeted microbubbles destruction,UTMD）对人SMMC-7721肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法：体外培养人SMMC-7721细胞,确定适宜的多西紫杉醇浓度,细胞分为6组,比较各组的细胞增殖抑制率、超微结构改变、凋亡率和细胞周期分布。结果：载药微泡+超声组的细胞增殖抑制率明显高于其他组,与其他各组相比差异有统计学意义（P=0.000）;电镜下观察载药微泡+超声组的凋亡细胞最多;流式细胞仪检测结果显示载药微泡+超声组的细胞凋亡率最高（P=0.000）,LDLM+US组G0/G1期细胞比例明显减少,为（0.79±0.27）%（P=0.000）,G2/M期细胞比例升高最明显,为（90.54±0.48）%（P=0.000）。结论：LDLM联合UTMD可抑制人SMMC-7721细胞的增殖、促进其凋亡,为后续进一步从蛋白、基因层面探索其作用的机制奠定了重要基础。     

幽门螺杆菌与胃癌BGC-823细胞凋亡

目的研究幽门螺杆菌（Halicobacter pylori,Hp）在胃癌细胞BGC-823凋亡中的作用及作用机制。方法将BGC-823细胞与Hp以不同浓度培养,倒置显微镜观察细胞形态学变化;透射电镜观察细胞凋亡及超微结构变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果与对照组相比,低中浓度Hp作用BGC-823细胞后,倒置显微镜观察到细胞增殖旺盛,并出现明显的凋亡抑制现象;电镜观察到细胞凋亡形态特征及凋亡数目减少。流式细胞仪检测结果：与对照组相比,中低浓度组凋亡率下降,有显著性差异（P〈0.05）,高浓度组细胞的凋亡率上升,有显著性差异（P〈0.05）,以上作用均呈细菌浓度和作用时间依赖性。结论 Hp可抑制胃癌细胞BGC-823凋亡,这可能与凋亡抑制基因上调有关。     

姜黄素对人急性髓性白血病细胞的作用及机理的初步探讨

目的：探讨姜黄素对急性髓性白血病（HL－60）增殖和细胞周期的调控及细胞凋亡的影响。方法：采用MTT法测定姜黄素在不同浓度、不同时间对HL－60的抑制作用；流式细胞仪分析细胞周期分布；透射电镜观察细胞的超微细胞变化。结果：姜黄素可抑制HL－60细胞的生长，其抑瘤率与药物浓度和作用时间呈依赖关系；中效浓度（IC50）为24．8μmol/L时，流式细胞仪分析证实姜黄素能使HL－60细胞聚积在S期、G2／M期；电镜观察发现姜黄素可使HL－60细胞超微结构发生改变。结论：姜黄素可干扰HL－60细胞的周期分布，具有抗细菌增殖及诱导细胞凋亡的作用。     

芬太尼对缺氧复氧损伤相关的心肌细胞凋亡的影响

目的观察不同剂量芬太尼对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响,在细胞水平上为临床应用芬太尼减轻心肌缺血再灌注损伤提供理论依据。方法以常规方法制备与培养心肌细胞。实验分为正常对照组（C组）、单纯缺氧复氧组（A/R组）、各试验组（F1、F2、F3、F4组）。C组不经任何处理。A/R组、各试验组均经历2h缺氧及1h复氧。缺氧前,各试验组分别给予终浓度为2、10、50、250ng/ml的芬太尼。分别以MTT快速比色法检测细胞存活情况（OD值）、流式细胞仪检测细胞凋亡率及透射电子显微镜观察细胞超微结构改变。结果各试验组OD值均显著高于A/R组,细胞凋亡率显著低于A/R组,电镜显示A/R组细胞超微结构改变呈典型的凋亡细胞形态学改变,F3组细胞形态大致正常,凋亡细胞少见。F3组（50ng/ml）在所有试验组中OD值最高,细胞凋亡率最低。芬太尼剂量在50ng/ml内,OD值与剂量呈正相关（r=0.720,P〈0.01）,细胞凋亡率与剂量呈负相关（r=-0.990,P〈0.01）。结论①芬太尼对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤有保护作用;②在一定剂量范围内芬太尼的保护效应与剂量成正相关。     

GDNF在慢性收缩性损伤大鼠脊髓背根神经节中的蛋白表达

目的探讨胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）在慢性收缩性损伤（CCI）所致神经病理性疼痛大鼠的L4背根神经节中的蛋白表达。方法实验1：24只SD大鼠,随机分为正常组（Naive组）、假手术组（Sham组）和CCI组（每组n=8）。Naive组不做任何手术;Sham组仅暴露坐骨神经;CCI组按Bennett法结扎右侧坐骨神经主干制备CCI模型。分别测定Sham组和CCI组术前2天（基础值）及术后第1、3、5、7、14、21天（Naive组则在相对应的时间点）大鼠同侧（本实验为右侧）后足机械缩足反射阈值（MWT）和热缩足反射潜伏期（PWL）。实验2：18只SD大鼠随机分为正常组（Naive组）、假手术组（Sham组）和CCI组（每组n=6）。CCI组制备CCI模型,术后第7天处死大鼠,取同侧L4背根神经节;Naive组不做任何手术,直接取右侧L4背根神经节;Sham组仅暴露坐骨神经,术后第7天处死大鼠,直接取右侧L4背根神经节。采用Western blot法检测脊髓L4背根神经节GDNF的蛋白表达。结果实验1：与Sham组相比,CCI组大鼠从术后第3天开始至术后21天内各时间点MWT和PWL均显著降低（P〈0.05或P〈0.01）。实验2：与Sham组相比,CCI组在L4背根神经节的GDNF表达明显减少（P〈0.01）。结论CCI大鼠的L4背根神经节的GDNF表达减少,可能参与CCI所致神经病理性疼痛的发病机制。     

COX-2选择性抑制剂诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡及自噬的体外研究

目的：初步探讨环氧化酶-2（COX-2）选择性抑制剂塞来昔布对人喉癌Hep-2细胞诱导凋亡的作用及可能的机制并观察其引起的自噬现象。方法用四甲基偶氮唑盐（MTT）法,检测塞来昔布以不同浓度（0～100μmol/L）及作用时间（0～72 h）处理Hep-2细胞后细胞增殖活力的变化;流式细胞仪检测不同浓度及时间塞来昔布处理后Hep-2细胞的凋亡率;透射电镜观察塞来昔布处理后的细胞超微结构改变;Western blotting 检测凋亡诱导因子（AIF）移位改变。结果塞来昔布呈时间和浓度依赖性地抑制Hep-2细胞的增殖;诱导喉癌细胞凋亡并呈浓度依赖性;药物处理72 h与48 h相比凋亡率的改变无统计学意义（P＞0．05）,药物处理72 h后在电镜下观察到自噬现象;AIF蛋白逐渐从线粒体释放、移位到细胞核。结论塞来昔布可诱导喉癌细胞凋亡,其机制涉及非caspase依赖的AIF机制,Hep-2细胞产生的自噬可能会对抗塞来昔布诱导的凋亡。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。     

儿童腹痛328例病因诊断及分析

目的：根据儿童急性腹痛的特点,诊断儿童腹痛应综合临床及相关检查提供的依据,做出准确诊断,给予适当治疗。方法：对临床328例腹痛患儿进行选择性辅助检查和分析。结果：小儿腹痛病因复杂,腹腔内疾病占64．63％,共17种病因;腹腔外疾病占35．37％,共6种病因。结论：仔细询问病史、认真体格检查、密切观察病情、针对性地选择辅助检查,在儿童腹痛的诊断上具有重要的意义。