羊膜移植联合自体角膜缘干细胞移植对复发性翼状胬肉的效果分析

目的:探讨羊膜移植联合自体角膜缘干细胞移植术治疗复发性翼状胬肉的效果及其影响因素。方法:对复发的翼状胬肉患者行胬肉切除 羊膜移植 自体角膜缘干细胞移植术,观察术后植片情况、角膜创面愈合时间、取材区愈合情况和患者症状;随诊观察术后复发率。结果:28例(32只眼)复发翼状胬肉患者行胬肉切除 羊膜移植 自体角膜缘干细胞移植,随诊6~12个月,平均7.6个月,角膜创面上皮愈合时间为3~7d,平均(4.4±1.5)d;最后复诊时28例(32只眼)患者中4只眼复发,复发率为12.5%;所有患者取材区实现上皮化愈合。结论:翼状胬肉切除联合羊膜移植和自体角膜缘干细胞移植能有效地减少复发性翼状胬肉的术后复发;对角膜缘受累范围大的患者应注意医源性角膜缘干细胞损害的风险。眼科学报2007;23:227-230.     

翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术后硬性角膜接触镜的干预效果

目的:探讨老年翼状胬肉切除与自体角膜缘干细胞移植术后硬性角膜接触镜的干预效果.方法:选取2015-03/2016-03经我院诊断为单侧翼胬肉老年患者90例90眼进行分组对比研究.观察组45例45眼采用自体角膜缘干细跑移植术后硬性角膜接触镜,对照组45例45眼行单纯自体角膜缘干细胞移植术.两组患者观察指标包括:角膜愈合时间和术后1、3、5、7d时两组患者疼痛程度(VAS评分)、胬肉复发几率.结果:观察组和对照组的角膜刺激症状评分存在统计学差异,观察组评分显著低于对照组患者(P<0.05).对照组患者角膜愈合时间高于观察组患者,差异具有统计学意义(P<0.05);VAS评分显示,术后1、2d时对照组患者高于观察组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者胬肉愈合复发几率对比,差异无统计学意义(P>0.05).结论:自体角膜干细胞移植术后结合硬性角膜接触镜对老年翼状胬肉效果明显,患者愈合较快,还可减轻患者术后疼痛感,同时不会增加胬肉复发率.     

复发性翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术或羊膜移植术的疗效比较

目的:观察显微镜下复发性翼状胬肉患者自体角膜缘干细胞移植术与羊膜移植术后疗效比较。方法:将复发性翼状胬肉患者90例96眼随机分为A,B两组,A组40例42眼行胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植;B组50例54眼行胬肉切除联合羊膜移植,观察术后患者自觉症状,角膜愈合情况,角膜缘处结膜组织愈合情况,新生血管及2a内胬肉组织增生情况。结果:角膜缘干细胞移植组治愈39眼(93%),复发3眼(7%);羊膜移植组治愈48眼(89%),复发6眼(11%),两组比较差异无统计学意义(χ2=0.0456,P>0.05)。角膜创面平均愈合时间角膜缘干细胞移植组为(4.12±1.08)d,羊膜移植组(7.38±1.12)d,两组比较有显著性差异(t=4.307,P<0.05)。结论:角膜缘干细胞移植与羊膜移植均效果良好,复发率低,但角膜缘干细胞移植术具有角膜创面上皮愈合快,患者不适感随之消失较快的优点,值得临床推广。     

自体角膜缘干细胞及羊膜移植治疗假性胬肉

目的 评价自体角膜缘干细胞移植联合羊膜移植治疗假性胬肉的临床应用及疗效.方法 将145例(162眼)假性胬肉随机分成2组:A组75例(82眼)行假性胬肉切除自体角膜缘干细胞移植联合羊膜移植术;B组70例(80眼)行假性胬肉切除羊膜移植术.术后均随访6月以上.结果 145例(162眼)术后随访时间平均(24.30±12.15)月.A组75例(82眼),术后随访时间平均(23.84±12.47)月,有5眼复发,复发率为6.10%;B组70例(80眼),术后随访时间平均(24.75±11.62)月,有14眼复发,复发率为17.50%.两组比较,复发率差异有统计学意义(X2=5.085,P＜0.05).角膜创面上皮愈合时间自体干细胞移植联合羊膜移植组平均为(4.25±1.02)d;单纯羊膜移植组平均为(6.42±1.36)d,两组比较,角膜创面上皮愈合时间差异有统计学意义(μ=11.417,P＜0.05).全部病例均无感染、排斥、复视或眼球运动障碍等并发症.结论 自体角膜缘干细胞移植联合羊膜移植术治疗假性胬肉复发率低,是一种较好的手术方法 .     

翼状胬肉手术中自体角膜缘干细胞移植与生物羊膜移植的对比

目的观察翼状胬肉手术中自体角膜缘干细胞移植与生物羊膜移植的效果。方法72例（84眼）翼状胬肉随机分为自体角膜缘干细胞移植组（A组）和生物羊膜移植组（B组）。术中首先进行翼状胬肉切除,之后分别进行自体角膜缘干细胞移植或生物羊膜移植。随访6～24个月。结果A组术后角膜上皮平均于（3．19±0．65）d愈合,B组术后角膜上皮平均于（6．22±1．35）d愈合,（P〈0．05）。A组术后1眼复发,复发率为2．38％,B组术后3眼复发,复发率为7．14％（P〉0．05）。结论自体角膜缘干细胞移植与生物羊膜移植均能降低翼状胬肉术后复发率,其中自体角膜缘干细胞移植更易于角膜创面愈合。     

深低温保存角膜缘干细胞自体移植实验研究

目的:评价深低温冷冻保存兔眼角膜缘干细胞活性及自体移植治疗角膜干细胞缺乏眼表疾病的疗效。方法:12只新西兰白兔用刀片制备带2mm周边角膜和2mm球结膜的环行浅层角膜缘植片,去除余下的角膜上皮,制成角膜干细胞缺乏眼表疾病模型。角膜缘植片通过程序降温仪程序降温后-196℃深低温保存。30天和60天后作自体移植行兔眼眼表重建术。结果:角膜干细胞缺乏导致角膜上皮愈合延迟,7眼在术后22～26天愈合,平均24±1天,4眼复发性上皮糜烂;基质混浊水肿;角膜血管化,平均5±1天出现新生血管。深低温保存角膜缘干细胞自体移植能促进角膜上皮愈合,平均10±2天愈合,基质混浊逐渐吸收,新生血管消退、变细,2眼消失。结论:深低温保存法能保存角膜缘干细胞活性;能随时按需为临床提供活性角膜缘材料;为临床深低温保存角膜缘干细胞移植治疗眼表疾病提供了实验依据。眼科学报1998;14:224～226。     

高海拔地区少数民族翼状胬肉治疗的临床观察

目的:探讨高海拔地区哈萨克族翼状胬肉患者不同方法治疗的效果.方法:将66例69眼患者随机分为两组,分别采用翼状胬肉显微切除加自体角膜缘干细胞移植联合丝裂霉素C术(33例34眼)和翼状胬肉显微切除+丝裂霉素C术(33例35眼),术后随诊1~2d.结果:角膜上皮愈合时间:角膜缘干细胞组为3~5(平均4.5±2.4)d,胬肉切除组5~8(平均6.5±2.6)d,两组比较差异有统计学意义(t=3.317,P<0.05).角膜缘干细胞组有1眼复发,复发率3%,胬肉切除组8眼复发,复发率为22%,两组比较差异有统计学意义(χ2=4.389,P<0.05).结论:在高海拔地区,由于气压低、风沙大、干燥、紫外线辐射强等特点,造成少数民族患病率增高.采用胬肉切除加自体角膜缘干细胞移植联合丝裂霉素C治疗,角膜创面修复快,复发率低,是一种安全、有效、值得推广应用的方法.     

自体角膜缘干细胞移植与常规翼状胬肉切除术疗效比较

目的 通过翼状胬肉单纯切除术及翼状督肉切除加自体角膜缘干细胞移植术2种手术方式治疗翼状胬肉,比较其治愈及复发情况及角膜上皮修复时间,评价其疗效.方法 将86例(88眼)翼状胬肉患者随机分为翼状胬肉单纯切除术组(A组)43例44眼及翼状胬肉切除加自体角膜缘干细胞移植术组(B组)43例44眼,组间比较采用X2检验比较其疗效.结果 A组10例10眼复发.B组仅有1例1眼复发,2组比较差异有统计学意义(P＜0.05);A组角膜上皮修复时间平均为(5.15±0.92)d.B组角膜上皮修复时间平均为(3.36±0.82)d,2组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 翼状胬肉切除加自体角膜缘干细胞移植术可以降低复发率,缩短角膜上皮修复时间,是治疗翼状胬肉较为安全有效的方法.[眼科新进展 2009;29(2):57-58]     

手术切除联合自体血清滴眼液治疗翼状胬肉的疗效观察

目的:探讨手术切除联合100%浓度自体血清滴眼液治疗翼状胬肉的疗效.方法:选取2015-03/2016-03在钟祥市人民医院眼科住院确诊的120例120眼翼状胬肉患者,将其随机分为对照组和试验组.全部患者术后结膜囊内涂妥布霉素地塞米松眼膏加压包扎患眼,次日采用妥布霉素地塞米松滴眼液滴眼,6次/d,2滴/次;对照组加用聚乙烯醇滴眼液,6次/d,2滴/次;试验组加用100%浓度的自体血清滴眼液滴眼,6次/d,2滴/次.两组滴眼液每周递减2次,均治疗3 wk.术后3 mo进行手术疗效评定.结果:两组患者手术前的一般情况、眼部症状体征评分和泪液分泌试验的比较无统计学差异(P>0.05).手术后两组患者的眼部症状体征评分、角膜上皮和/或基质缺损面积及修复时间、泪液分泌试验的比较有统计学差异(P<0.05).对照组患者术后3 mo的复发率是6.7%;试验组是3.3%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:翼状胬肉切除联合带自体角膜缘干细胞结膜瓣移植术后辅助应用100%浓度的自体血清滴眼治疗胬肉术后创面的愈合、眼表的重建,取得了很好的疗效.     

羊膜和角膜干细胞移植治疗眼表疾病临床观察

目的探讨羊膜移植、自体角膜干细胞移植及自体体外培养角膜干细胞移植重建眼表治疗眼表疾病的疗效。方法眼表疾病43例46眼（瘢痕性结膜囊狭窄、睑球粘连6例6眼，角结膜化学、热烧伤10例13眼，原发和复发性翼状胬肉切除术后结膜缺损27例27眼）进行羊膜移植、自体角膜干细胞移植及自体体外培养角膜干细胞移植，观察植片及角结膜上皮愈合、组织浸润和新生血管情况。结果羊膜移植术重建结膜囊效果满意，睑球粘连松解。羊膜、自体体外培养角膜干细胞移植术治疗角结膜烧伤均可使眼表上皮化，基质炎性浸润减轻，新生血管明显减少；自体体外培养角膜干细胞移植对角膜缘干细胞损伤严重的患者效果显著。自体和自体体外培养角膜干细胞移植治疗翼状胬肉均有良好效果，术后不适症状轻时间短，角膜创面愈合快，随访（1～2）y两种术式各复发1眼。自体体外培养角膜干细胞移植对复发性翼状胬肉切除术后较大的结膜缺损更为适合。结论羊膜移植、自体角膜干细胞移植和自体体外培养角膜干细胞移植对重建眼表都有重要的功效，手术方式的选择必须根据角膜干细胞损伤的程度、范围进行选择。     

Mesenchymal stem cell transplantation in a rabbit corneal alkali burn model: engraftment and involvement in wound healing

PURPOSE: To investigate whether systemically transplanted mesenchymal stem cells (MSCs) can home and engraft in tissue to promote cornea wound healing after alkali burn, as a new source for treatment. METHODS: Corneal alkali burn was created in four group rabbits: Group I, normal bone marrow function, without MSCs transplantation; Group II, normal bone marrow function, with MSCs transplantation; Group III, bone marrow suppressed by cyclophosphamide, without MSCs; Group IV, bone marrow suppressed by cyclophosphamide, with MSCs. Clinical outcome was evaluated by cornea re-epithelization, cornea opacity, and neovascularization. Cell engraftment into bone marrow, circulation, and cornea was monitored. Immunohistochemistry, using proliferating cell nuclear antigen (PCNA), P63, vimentin, and alpha-smooth muscle actin (alpha-SMA) was carried out to assess the cell proliferative and differentiative ability. RESULTS: At the time of 1-month follow-up, Group II rabbits showed the best clinical results with a clearer healed cornea compared with other groups. Well-formed neovascularization appeared on day 14 after alkali burn in Group II, that coincided with the maximum engraftment of MSCs. PCNA, P63, vimentin were more strongly expressed in Group II at multiple time points. DiI-labelled MSCs were differentiated into myofibroblast by the expression of alpha-SMA. Delayed and insufficient cell engraftment, with malformed neovascularization and retarded corneal wound healing was found in Groups III and IV. CONCLUSIONS: Systemically transplanted MSCs can engraft to injured cornea to promote wound healing, by differentiation, proliferation, and synergizing with haemotopoietic stem cells.     

复合自体脂肪干细胞的脱细胞猪角膜基质移植治疗兔角膜碱烧伤

目的:研究复合脂肪干细胞的脱细胞猪角膜基质对碱烧伤角膜的治疗效果。方法:制备晾干的脱细胞猪角膜基质,取第3代体外培养的兔自体脂肪干细胞,体外种植到脱细胞猪角膜基质上,培养3d后用于板层角膜移植。结果:板层角膜移植2mo后,术眼角膜基本恢复透明,未发生排斥反应,新生血管较少,3mo后新生血管基本消退。结论:复合自体脂肪干细胞的脱细胞猪角膜基质对兔碱烧伤角膜具有良好的修复能力。     

热烧伤后的人角膜组织中基质金属蛋白酶-2、-9表达的研究

目的:研究热烧伤后人角膜组织中的基质金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、MMP-9)的表达与分布,探讨其含量的变化与角膜病变的相关性。方法:收集铁水烫伤后行角膜移植患者病变角膜19例,正常角膜组织10例。应用免疫组化染色方法检测MMP-2、MMP-9在角膜各层次中的分布与表达,应用图像分析系统进行半定量分析。结果:MMP-2、MMP-9在正常角膜组织中均未见阳性表达,平均灰度值分别为117.8188±3.7967,119.1902±0.9679。热烧伤后角膜组织中,MMP-2的阳性表达主要分布于角膜基质层,平均灰度值为94.4197±5.8327;MMP-9的阳性表达主要分布于角膜上皮层和基底膜附近,平均灰度值为115.0188±0.7149。将正常角膜组织中和病变角膜组织中两种酶的平均灰度值分别进行统计学分析,P值均<0.05。随着病程的发展,在病变角膜组织中MMP-2的阳性表达先呈现逐渐增高趋势14d后逐渐下降,角膜基质层溶解达高峰时阳性表达的量最高;MMP-9在患病初期角膜基底膜病变明显时表达较高,后期逐渐下降。结论:MMP-2、MMP-9对热烧伤后的人角膜组织病变的发展起重要的作用。MMP-2主要参与角膜基质层的损害,MMP-9主要参与角膜上皮层和基底膜的损害。     

骨髓间充质干细胞移植治疗眼表损害的初步实验研究

目的观察体外培养的人骨髓间充质干细胞（hMSCs）移植到碱烧伤的兔角膜表面后,干细胞的成活、迁移和分化情况。方法采用NaOH溶液制作兔角膜碱烧伤模型,1个月后将培养有hMSCs的羊膜缝合到碱烧伤的兔角膜表面,以羊膜作为对照组,在裂隙灯显微镜下观察角膜的临床改变。术后1个月,摘除眼球,石蜡切片,苏木素-伊红（HE）染色观察角膜组织结构的变化,并进行抗人核抗体和细胞角蛋白12（CK12）的免疫组化染色以观察hMSCs的分布和分化情况。结果兔眼碱烧伤1个月后,角膜表面和基质层均可见大量血管,角膜呈瓷白色混浊,表面粗糙干燥,出现大量杯状细胞。hMSCs移植1个月后,角膜表面粗糙程度减轻,新生血管略有减少,但是角膜混浊未见明显改善,角膜表面杯状细胞消失;角膜表面和基质浅层存在抗人核抗体染色阳性的细胞;角膜表面细胞CK12染色阳性,而基质层未见CK12阳性细胞。对照组在羊膜移植1个月后,角膜状况较移植前无明显改善,角膜表面仍可见杯状细胞,角膜各层均未见抗人核抗体和CK12染色阳性的细胞。结论hMSCs移植到碱烧伤兔角膜表面后,能够成活并向角膜基质迁移,未发生移植排斥反应。hMSCs由于所在部位不同,可以在周围组织的诱导下向不同方向发生分化,角膜表面的细胞向角膜上皮细胞分化。而基质层中的细胞未分化为角膜上皮细胞。移植后角膜表面结膜化程度有所减轻。     

基质金属蛋白酶抑制剂治疗碱烧伤后兔角膜融解的研究

目的研究基质金属蛋白酶抑制剂(GM 6001)在治疗兔角膜碱烧伤后角膜融解中的作用.方法将28只兔随机分为A、B组,将浸有2 mol/L(16只)及1 mol/L(12只)氢氧化钠的滤纸片分别置于A、B组兔右眼角膜上制备角膜重和中度碱烧伤模型;每组均设治疗和对照组,A、B治疗组术眼分别滴浓度为400及200 mg/L的GM 6001滴眼液,对照组滴药物基质液;均治疗30 d,然后处死动物.观察其角膜融解及混浊等情况,并进行病理组织学检查.结果 A组对照组8只兔眼角膜自伤后(13±5) d开始全部发生融解,2只兔眼发生角膜穿孔;治疗组,仅有2只兔眼烧伤后(19±4) d发生角膜融解,无角膜穿孔;两组角膜融解发生率及角膜穿孔率比较,差异有显著意义(P<0.05).治疗组角膜融解开始的时间亦明显迟于对照组(P＜0.05).B组对照组6只兔角膜自伤后(14±6) d全部融解,1只兔眼角膜穿孔;治疗组2只兔眼角膜自伤后(19±4) d融解,无角膜穿孔;两组角膜融解发生率间比较,差异有显著意义(P＜0.05);治疗组角膜混浊程度明显低于对照组(P＜0.01).病理检查结果显示治疗组角膜胶原纤维破坏轻,炎性细胞浸润明显少于对照组.结论 GM 6001可抑制和延迟碱烧伤后角膜融解的发生和发展,降低角膜胶原纤维的破坏及角膜组织中炎性细胞的浸润.     

金雀异黄素对兔角膜碱烧伤新生血管的抑制作用

目的:探讨金雀异黄素(genistein,Gen)对兔角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的抑制作用。方法:取新西兰大白兔13只,不造模1只观察药物对眼表前房等组织的不良反应。其余12只24眼采用浸润1mol/LNaOH滤纸片贴敷角膜中心60s,诱导碱烧伤CNV形成,左眼用二甲亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)溶液,右眼用Gen的DMSO溶液点眼。碱烧伤后3,7,14,21d测量角膜CNV面积,处死相应组别的动物取眼球做切片HE染色和免疫组织化学染色观察角膜和前房等情况。结果:兔角膜碱烧伤后CNV存在生长和消退的病理变化,Gen+DMSO组角膜CNV面积与DMSO组相比有明显的统计学差异性(P<0.01)。结论:Gen对于兔角膜碱烧伤模型的CNV有明显的抑制作用。     

GM6001对碱烧伤角膜组织中基质金属蛋白酶表达及活性的影响

目的 检测正常和碱烧伤后不同时间角膜组织中明胶酶(MMP-2，MMP-9)和胶原酶(MMP-1)的表达，探讨在角膜融解发生中的作用．方法 兔角膜碱烧伤20眼，分为对照组和GM600l治疗组，于伤后12、24、48、72h，1、2周和1个月取材，酶谱法检测角膜组织中明胶酶MMP-2、MMP-9的表达，Western blot检测胶原酶MMP-1的表达。结果 在正常兔角膜中，仅检测到微弱的明胶酶原MMP-2，碱烧伤后1周后开始明显升高，至烧伤后1个月维持较高水平，并在2周时出现MMP-2活性酶的表达，并持续至烧伤后1个月。明胶酶MMP-9在正常角膜组织中检测不到，但烧伤后24h开始表达，于烧伤后1周达到最高，然后逐渐下降，至伤后1个月已检测不到。胶原酶MMP-1在正常组织中检测为阴性，从伤后24h开始升高，1个月内无下降。GM6001治疗组角膜组织MMP-2、MMP-9及MMP-1的表达均明显低于对照组。结论 基质金属蛋白酶参与碱烧伤角膜组织的融解，GM6001可抑制MMPs的活性，进而抑制角膜融解的发生。     

自体骨髓间充质干细胞移植改善重度眼表损伤临床观察

目的 评价自体骨髓间充质干细胞在严重眼表损伤移植后的治疗效果.方法 选取了化学烧伤4例,Stevens-Johnson综合征2例.骨髓间充质干细胞取自患者,细胞培养14 d后,经细胞检测鉴定为骨髓间充质干细胞,将细胞种植在羊膜表面,细胞扩增融合达90％后使用.手术切除表面结膜化组织达角膜缘外3 mm,将羊膜上培养的自体骨髓间充质干细胞移植到角膜及角膜缘表面,术后予抗生素、激素、人工泪液点眼治疗;病人定期随访,进行裂隙灯显微镜及印迹细胞学检查.结果 6例患眼均覆盖了含有自体骨髓间充质干细胞的羊膜片,术后1周角膜上皮完整.3例患者视力有改善,2例患者视力保持术前水平,1例患者视力下降.术后所有患者眼表面光滑程度有所改善,但新生血管没有明显减少.术后12周印迹细胞学检查结果,1例患者角膜表面可检测到上皮样细胞及杯状细胞.结论 自体骨髓间充质干细胞移植可以改善眼表条件,有潜在应用于治疗角膜缘功能障碍的价值.     

丝裂霉素C联合自体角膜缘干细胞治疗复发性翼状胬肉的疗效分析

目的:探讨丝裂霉素C联合自体角膜缘干细胞移植治疗复发性翼状胬肉的疗效。方法:将69例87眼复发性翼状胬肉随机分成两组,治疗组:35例45眼行翼状胬肉切除后联合丝裂霉素C及自体角膜缘干细胞移植。对照组:34例42眼行翼状胬肉切除后联合自体角膜缘干细胞移植。结果:术后随访观察了3～12mo。治疗组治愈44眼,治愈率98%,复发1眼,复发率2%;对照组治愈36眼,治愈率86%,复发6眼,复发率14%,两组复发率有统计学意义(χ2=4.273,P=0.039)。结论:丝裂霉素C联合自体角膜缘干细胞移植明显提高治愈率,降低复发率,临床中值得推广。     

新鲜羊膜移植对角膜急性炎症抑制作用的实验研究

目的探讨新鲜羊膜移植在角膜急性炎症治疗中的抑制多形核白细胞作用,并与保存羊膜移植作比较.方法以48只新西兰大白兔制作角膜碱烧伤实验模型,24小时后设立新鲜羊膜移植组、保存羊膜移植组和对照组.术后14天、30天取材角膜进行组织病理学检查,以计算机图像分析系统测量其多形核白细胞含量.结果新鲜羊膜移植组角膜组织中多形核白细胞含量低于保存羊膜移植组,两者均低于对照组(P＜0.01).结论在角膜急性炎症期治疗中,新鲜羊膜移植能够抑制多形核白细胞浸润,其抑制炎症作用较保存羊膜移植强.