加味葛根芩连汤对2型糖尿病db/db小鼠胰腺组织TGR5/cAMP/GLP-1信号通路的影响

目的 探讨加味葛根芩连汤对肥胖型2型糖尿病（T2DM）模型小鼠血糖血脂及胰腺组织中G蛋白偶联胆汁酸受体5（TGR5）相关途径的影响。方法 将10只7周龄无特定病原体（SPF）级雄性m/m小鼠及50只7周龄SPF级雄性db/db小鼠在SPF级实验室适应性喂养1周。m/m小鼠作为空白组。成模后随机分为5组,每组10只,分别作为模型组、二甲双胍组（0.2 g·kg^-1）、加味葛根芩连汤高、中、低剂量组（31.9、19.1、6.4 g·kg^-1）,灌胃体积均为10 mL·kg^-1,模型组和空白组灌服等体积蒸馏水,1次/d,连续12周。定期检测小鼠空腹血糖（FBG）。药物干预12周后,检测血清中糖化血清蛋白（GSP）、血清葡萄糖（GLU）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平;采用苏木素-伊红（HE）染色观察各组小鼠胰腺组织病理改变,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胰腺组织TGR5、蛋白激酶A（PKA）、磷酸化（p）-PKA、环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）、p-CREB、前蛋白转化酶1/3（PC1/3）、胰高糖素样肽-1（GLP-1）蛋白的表达水平,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测胰腺组织环磷腺苷（cAMP）的含量。结果 与空白组比较,模型组小鼠胰腺组织出现病理学改变;小鼠FBG、GSP、GLU、TC、TG、LDL-C水平显著增高（P<0.01）,HDL-C水平明显降低（P<0.05）;胰腺组织中TGR5、p-PKA（Thr197）/PKA、p-CREB（Ser133）/CREB、PC1/3、GLP-1蛋白表达水平显著降低（P<0.01）;胰腺组织中cAMP的含量显著降低（P<0.01）。与模型组比较,治疗组胰腺组织病变程度减轻;加味葛根芩连汤高剂量组及二甲双胍组均能够明显降低db/db小鼠FBG、GSP、GLU、TC、TG、LDL-C水平（P<0.05,P<0.01）,显著增高db/db小鼠HDL-C水平（P<0.01）;除加味葛根芩连汤中剂量组GLP-1蛋白外,加味葛根芩连汤高、中剂量组及二甲双胍组TGR5、p-PKA（Thr197）/PKA、p-CREB（Ser133）/CREB、PC1/3、GLP-1蛋白表达水平均有不同程度的增加（P<0.05,P<0.01）;加味葛根芩连汤高、中剂量组及二甲双胍组胰腺组织中cAMP的含量明显增高（P<0.05,P<0.01）。结论 加味葛根芩连汤能够改善T2DM模型db/db小鼠的葡萄糖稳态,其机制可能与调控TGR5/cAMP/GLP-1信号通路相关蛋白表达有关。     

肉桂对糖尿病大鼠肠促胰素效应的调节作用

目的 探讨通过建立链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病（DM）大鼠模型,观察肉桂对DM大鼠肠促胰素效应的药效学作用,并基于胰高血糖素样肽-1（GLP-1）、二肽基肽酶-4（DPP-4）蛋白探讨其作用机制。方法 40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、西格列汀组（0.1 g·kg^-1）、肉桂低、高剂量组（0.45、0.9 g·kg^-1）,除空白组外采用高脂饲料喂养联合腹腔注射STZ（40 mg·kg^-1）建立DM大鼠模型。给药干预时间为8周,观察大鼠状态、体质量、饮水量、摄食量、空腹血糖（FBG）等情况,采用苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠胰腺病理变化,采用免疫组化法检测DM大鼠胰腺中胰高血糖素蛋白表达,生化法检测大鼠血清脂代谢指标总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）及高密度脂蛋白（HDL）水平。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中糖化血红蛋白、胰岛素、胰高血糖素、GLP-1、葡萄糖依赖性促胰岛素多肽（GIP）含量。采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测DM大鼠胰腺中GLP-1、DPP-4的蛋白表达。结果 各组干预8周后,与正常组比较,模型组大鼠体质量、空腹血糖、TC、TG、LDL、糖化血红蛋白、胰高血糖素、胰岛素、胰岛素抵抗指数显著升高（P<0.01）,HDL、GLP-1、GIP明显降低（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,肉桂各剂量组大鼠体质量、空腹血糖、TC、TG、LDL、糖化血红蛋白、胰高血糖素、胰岛素、胰岛素抵抗指数明显降低（P<0.05,P<0.01）,HDL、GLP-1、GIP明显升高（P<0.05,P<0.01）。HE染色结果显示,肉桂各剂量组胰岛细胞形态明显好转,未出现细胞核密集现象。免疫组化结果显示,与模型组比较,肉桂各剂量组胰高血糖素蛋白在胰岛细胞中央明显减少,含量下降。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组大鼠DPP-4的蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,GLP-1的蛋白表达水平显著降低（P<0.01）;与模型组比较,肉桂高剂量组DPP-4的蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,GLP-1的蛋白表达水平表达明显升高（P<0.05）。结论 肉桂可有效降低DM大鼠血糖,改善肠促胰素效应,进而发挥降糖作用,作用机制可能是通过激活调控DPP-4和GLP-1蛋白来实现。     

基于VIP/cAMP/PKA/AQPs信号通路研究肺肠合治法减轻肺水肿治疗急性肺损伤的作用机制

目的 探究肺肠合治法（麻黄汤+大承气汤）减轻脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠肺水肿的作用和机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、肺肠合治低、中、高剂量组、地塞米松组。采用LPS（10 mg·kg^-1）腹腔注射复制ALI大鼠模型，造模后开始灌胃给药，正常组给予生理盐水（25 mL·kg^-1），肺肠合治低（5 g·kg^-1）、中（7.5 g·kg^-1）、高（10 g·kg^-1）剂量组分别给予（麻黄汤+大承气汤）灌胃，阳性药组给予地塞米松（5 mg·kg^-1），分别于LPS注射后0、8、16 h给药，共3次。给药结束后取肺组织及血清，肺组织苏木素-伊红（HE）染色，进行肺水肿评分；计算各组大鼠肺组织干/湿（D/W）质量比；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清血管活性肠肽（VIP）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠肺组织水通道蛋白1（AQP1）、水通道蛋白5（AQP5）、VIP、环磷酸腺苷（cAMP）、磷酸化蛋白激酶A（p-PKA）、蛋白激酶A（PKA）蛋白的表达量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组大鼠肺组织中VIP mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠肺损伤明显，水肿评分升高，肺组织D/W降低（P<0.01），肺组织AQP1、AQP5、cAMP、p-PKA/PKA明显降低（P<0.05，P<0.01），VIP含量显著升高（P<0.01），肺组织VIP蛋白和mRNA表达明显升高（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，肺肠合治组大鼠肺损伤减轻，肺组织D/W显著升高（P<0.01），肺组织AQP1、AQP5、VIP、cAMP、p-PKA/PKA升高（P<0.05，P<0.01），肺组织VIP表达升高（P<0.05，P<0.01）。结论 肺肠合治法能减轻急性肺损伤造成的肺组织水肿，其机制可能通过激活VIP/cAMP/PKA信号通路，进而促进水通道蛋白AQP1、AQP5的表达，增强肺组织的水液代谢有关。     

基于“以方测证”理论从AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF通路探讨雷公藤多苷诱导卵泡发育不良大鼠模型的中医证候属性

目的 采用雷公藤多苷诱导卵泡发育不良大鼠模型,基于“以方测证”理论从腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/缺氧诱导因子-1/血管内皮生长因子（AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF）信号通路探索该模型的证候属性。方法 将48只具有规律动情周期大鼠随机分为正常组（n=8）和造模组（n=40）,造模组大鼠连续灌胃雷公藤多苷混悬液（75 mL·kg^-1）30 d,造模后将其分为模型组、四物汤组（3.69 g·kg^-1）、右归饮组（3.11 g·kg^-1）、左归饮组（7.29 g·kg^-1）和归肾丸组（10.35 g·kg^-1）,每组8只。相应药物干预14 d。巴氏染色检测各组大鼠动情周期变化;体视镜观察卵巢组织形态;苏木素-伊红（HE）染色观察卵巢组织病理学及卵泡计数;酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血清促卵泡激素（FSH）、黄体生成素（LH）及雌二醇（E₂）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢组织AMPK、mTOR、HIF-1、VEGF mRNA及蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,次级、成熟卵泡减少,闭锁卵泡增多,FSH、LH、AMPK mRNA及蛋白表达显著升高（P<0.01）,E₂含量,mTOR、HIF-1、VEGF mRNA及蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,归肾丸组次级、成熟卵泡增多,闭锁卵泡减少,FSH、LH含量、AMPK mRNA表达及蛋白表达显著降低（P<0.01）,E₂含量、mTOR、HIF-1、VEGF mRNA表达及蛋白表达显著升高（P<0.01）。与归肾丸组比较,四物汤组、右归饮组、左归饮组成熟卵泡数量显著减少,闭锁卵泡数量显著增多（P<0.01）;四物汤组、右归饮组、左归饮组LH显著升高（P<0.01）,FSH明显升高（P<0.05）,E₂明显降低（P<0.05）;右归饮组AMPK蛋白表达明显升高（P<0.05）,mTOR和HIF-1 mRNA表达显著降低（P<0.01）,VEGF蛋白及mRNA表达显著降低（P<0.01）;四物汤组mTOR和HIF-1 mRNA,VEGF蛋白及mRNA表达明显降低（P<0.05）;左归饮组mTOR mRNA和VEGF蛋白及mRNA表达明显降低（P<0.05）。结论 归肾丸可以抑制AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF通路来改善卵泡发育不良大鼠模型的卵巢功能、促进卵泡成熟,且总体疗效优于左归饮、右归饮和四物汤,表明该模型的证候更符合肾精亏虚证。     

补阳还五汤对特发性肺纤维化大鼠Keap1/Nrf2/HO-1抗氧化信号通路的影响

目的 观察补阳还五汤对特发性肺纤维化（IPF）大鼠Kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）/核因子E₂相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶-1（HO-1）抗氧化信号通路的影响，探讨该方干预IPF的作用机制。方法 将40只SPF级雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、尼达尼布组，每组10只。除假手术组外，其余各组气管内滴注博来霉素（0.005 g·kg^-1）制备IPF大鼠模型。补阳还五汤组灌服补阳还五汤煎液（14.84 g·kg^-1），尼达尼布组灌服尼达尼布混悬液（0.1 g·kg^-1），假手术组、模型组灌服等容积生理盐水，共28 d。肺功能检测后，取血清及肺组织。苏木素-伊红（HE）染色和马松（Masson）染色观察肺组织病理改变并行半定量分析；检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量；测定血清和肺组织丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、免疫组化和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测Keap1、Nrf2、HO-1 mRNA与蛋白表达情况。结果 与假手术组比较，模型组大鼠呼吸系统阻力和弹力增高，顺应性显著降低（P<0.01）；肺指数和病理评分、HYP含量显著升高（P<0.01）；血清和肺组织MDA含量增加，SOD、GSH-Px、CAT活性显著降低（P<0.01）；肺组织Keap1 mRNA与蛋白表达降低，Nrf2、HO-1 mRNA与蛋白表达显著升高（P<0.01）。与模型组比较，补阳还五汤组大鼠呼吸系统阻力和弹力下降，顺应性显著升高（P<0.01）；肺指数、病理评分、肺组织HYP含量显著降低（P<0.01）；血清和肺组织MDA含量下降、SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高（P<0.01）；肺组织Keap1表达降低，Nrf2、HO-1表达升高（P<0.05，P<0.01）。结论 补阳还五汤可启动Keap1/Nrf2/HO-1介导的抗氧化效应，增强机体抗氧化能力，延缓IPF大鼠病理进程。     

灯盏花素通过调控LKB1/AMPK和Notch1/Jagged1通路改善高脂血症大鼠血脂水平及肝肾功能的作用机制研究＊

目的 基于LKB1/AMPK和Notch1/Jagged1通路探讨灯盏花素改善高脂血症大鼠血脂水平及肝肾功能的作用机制。方法 60只雄性SD大鼠随机为正常组、模型组、辛伐他汀组（20 mg·kg^-1）和灯盏花素低、中、高剂量组（6、12、24 mg·kg^-1），每组10只。采用先腹腔注射75%蛋黄乳液后饲喂高脂饲料的方式建立高脂血症模型，同时给药干预，1次/天，连续28d。采用ELISA法检测大鼠血清中T-CHO、TG、LDL-C、HDL-C、AST、ALT、Cr、BUN水平；测定大鼠肝脏、肾脏系数；采用HE染色法观察肝肾组织病理学变化；采用免疫组化法检测肝组织p-AMPK、LKB1、HMGCR水平及肾组织Notch1、Jagged1、Hes1水平；采用RT-PCR法检测肝组织p-AMPK、LKB1、HMGCR水平mRNA水平及肾组织Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠血清TG、T-CHO、LDL-C、ALT、AST、Cr、BUN水平明显升高（P<0.05），HDL-C水平明显降低（P<0.05）；肝脏、肾脏系数明显增加（P<0.05）且出现病理变化；肝组织中p-AMPK、LKB1水平明显降低（P<0.05），HMGCR水平明显升高（P<0.05）；肾组织Notch1、Jagged1、Hes1水平明显升高（P<0.05）。与模型组比较，辛伐他汀组和灯盏花素低、中、高剂量组大鼠血清TG、T-CHO、LDL-C、ALT、AST、Cr、BUN水平明显降低（P<0.05），HDL-C水平明显升高（P<0.05）；肝脏、肾脏系数明显减小（P<0.05）且病变程度减轻；肝组织中p-AMPK、LKB1水平明显升高（P<0.05），HMGCR水平明显降低（P<0.05）；肾组织Notch1、Jagged1、Hes1水平明显降低（P<0.05）。结论 灯盏花素能够改善高脂血症大鼠血脂水平及肝肾功能，其机制与激活LKB1/AMPK通路及抑制Notch/Jagged1通路和HMGCR水平有关。     

龙胆泻肝汤通过H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路干预湿疹大鼠的作用机制研究＊

目的 基于H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路探讨龙胆泻肝汤对湿疹大鼠的保护作用及相关机制。方法 60只大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、氯雷他定组（1 mg·kg^-1）和龙胆泻肝汤低、中、高剂量组（6.3g·kg^-1、12.6g·kg^-1、25.2g·kg^-1），每组10只。除正常组外，其余各组大鼠采用二硝基氯苯（DNCB）建立湿疹模型，然后各组大鼠灌胃相应药物干预，1次/天，连续干预21天。末次给药后，测定大鼠耳肿胀度；采用苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠背部皮肤病理学变化；采用免疫组织化学法检测大鼠皮肤组织H1R、PAR-2、TRPV1蛋白水平；采用蛋白质印迹（WB）法检测大鼠皮肤组织P38MAPK、P-P38MAPK蛋白水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠耳肿胀度显著增加（P<0.05）且背部皮肤出现湿疹病理变化；皮肤组织中H1R、PAR-2、TRPV1水平与p-P38MAPK/P38MAPK比值显著升高（P<0.05）；与模型组比较，氯雷他定组和龙胆泻肝汤低、中、高剂量组耳肿胀度显著减小（P<0.05）且病变程度减轻；皮肤组织中H1R、PAR-2、TRPV1水平与p-P38MAPK/P38MAPK比值显著降低（P<0.05）。结论 龙胆泻肝汤对湿疹大鼠具有保护作用，其机制可能与抑制H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路有关。     

基于OX1R/PLCβ-1/PKCα/ERK1/2信号通路探讨安寐丹对失眠模型大鼠肝脏神经递质和昼夜节律的影响及机制

目的 基于食欲素受体1（OX1R）/磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ-1（PLCβ-1）/蛋白激酶Cα（PKCα）/细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）信号通路探讨安寐丹对失眠大鼠肝脏神经递质及昼夜节律的影响及机制。方法 SPF级SD大鼠60只,随机分为空白组、模型组、苏沃雷生组、安寐丹低、中、高剂量组,各10只;除空白组外,其余各组通过腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA）进行造模,空白组给予等容生理盐水、苏沃雷生组给予苏沃雷生溶液30 mg·kg^-1·d^-1灌胃、安寐丹低、中、高剂量组分别给予安寐丹水煎液（4.55、9.09、18.18 g·kg^-1·d^-1）;观察各组一般情况、体质量和24 h自主活动情况;采用苏木素-伊红（HE）和马松（Masson）染色观察肝脏病理学改变,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肝脏神经递质γ-氨基丁酸（GABA）、5-羟色胺（5-HT）、肾上腺素（EPI）、去甲肾上腺素（NE）和乙酰胆碱（ACh）的表达,生化检测肝脏谷氨酸（Glu）的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肝脏生物钟基因Per1、Per2、Cry1、Cry2、Bmal1、Bmal2的mRNA表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）、Real-time PCR检测肝脏OX1R/PLCβ-1/PKCα/ERK1/2信号通路蛋白及mRNA表达。结果 与空白组比较,模型组体质量下降（P<0.05,P<0.01）,狂躁、静止节律紊乱（P<0.01）,肝脏肌纤维断裂、水肿伴炎性细胞浸润,GABA、5-HT、EPI、NE和ACh含量降低、Glu含量升高（P<0.01）,Per1、Per2、Cry1和Cry2 mRNA表达降低（P<0.01）,Bmal1和Bmal2 mRNA表达升高（P<0.01）,OX1R、PLCβ-1、PKCα、ERK1/2蛋白及mRNA基因表达均增高（P<0.01）;与模型组比较,苏沃雷生和安寐丹低、中、高剂量组可增加失眠大鼠体质量（P<0.05,P<0.01）,减少狂躁状态、增加其静止时间和频率（P<0.05,P<0.01）,并可上调神经递质GABA、5-HT、EPI、NE、ACh和节律基因Per1、Per2、Cry1、Cry2 mRNA表达（P<0.05,P<0.01）,抑制Glu及Bmal1、Bmal2、OX1R、PLCβ-1、PKCα、ERK1/2 mRNA和OX1R、PLCβ-1、PKCα、ERK1/2蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结论 安寐丹可通过抑制OX1R/PLCβ-1/PKCα/ERK1/2信号通路调节失眠大鼠肝脏神经递质表达,改善昼夜节律紊乱,且安寐丹高剂量组效果最佳。     

双参芎连颗粒对高同型半胱氨酸血症慢性肾病大鼠血管舒张及PI3K/Akt/eNOS通路的影响

目的 研究双参芎连颗粒对高同型半胱氨酸血症慢性肾病大鼠血管病变及磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/内皮型一氧化氮合酶（eNOS）信号通路影响。方法 大鼠随机分为5组，分别为假手术组、模型组、双参芎连颗粒高、中、低剂量（8，4，2 g·kg^-1）组。采用高蛋氨酸饲料喂养结合5/6肾摘除法建立大鼠高同型半胱氨酸血症慢性肾病模型，5/6肾摘除术后4周后开始连续灌胃给药4周。术后4，8周测定大鼠动脉血压；术后8周实验结束，取血测定血清肌酐、尿素氮、同型半胱氨酸、蛋氨酸及血脂水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胸主动脉磷酸化（p-）p85，p-Akt和p-Ser177等PI3K/Akt/eNOS信号通路相关蛋白表达，测定血清一氧化氮（NO），eNOS；采用离体血管环灌流方法，测定内皮依赖性舒张和非内皮依赖性舒张变化；苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织及胸主动脉血管改变。结果 实验8周时，与假手术组比较，模型组动脉收缩压、血清尿素氮、肌酐、高同型半胱氨酸、蛋氨酸、总胆固醇及低密度脂蛋白明显增高；给予双参芎连颗粒4周后，各剂量组动脉收缩压、血清尿素氮、高同型半胱氨酸、蛋氨酸、血清总胆固醇及血清低密度脂蛋白均明显降低（P<0.05，P<0.01），双参芎连颗粒8，4 g·kg^-1组肌酐明显降低（P<0.05）。双参芎连颗粒各剂量组NO含量较模型组明细升高（P<0.05，P<0.01），双参芎连颗粒8 g·kg^-1组血清eNOS活性较模型组明显升高（P<0.05）。模型组动物离体胸主动脉环的内皮依赖性及非内皮依赖性血管舒张均受到明显损伤，双参芎连颗粒8 g·kg^-1组在乙酰胆碱累积浓度1×10^-5.5~1×10^-4 mmo1·L^-1舒张程度较模型组明显改善（P<0.05，P<0.01）；双参芎连颗粒8 g·kg^-1组血管环在硝普钠积浓度1×10^-10~1×10^-7mmo1·L^-1舒张程度较模型组明显，差异具有明显统计学意义（P<0.05）。Western blot 结果显示，与假手术组比较，模型组血管p-85，p-Akt及p-Ser177的表达均显著升高（P<0.01）；与模型组比较，双参芎连颗粒各剂量组该通路磷酸化水平较模型组呈升高趋势，其中双参芎连颗粒8 g·kg^-1组p-Akt及p-Ser177的表达升高更明显，差异具有明显统计学意义（P<0.05）。双参芎连颗粒各剂量组的胸主动脉和肾脏组织病理变化与模型组比较有不同程度的减轻。结论 双参芎连颗粒可以改善高同型半胱氨酸血症慢性肾病大鼠高同型半胱氨酸及血脂代谢异常，降低血清肌酐及尿素氮水平，降低动脉收缩压，改善血管形态及舒张功能，其作用可能与调控PI3K/Akt/eNOS信号通路有关。     

半夏泻心汤对溃疡性结肠炎大鼠NLRP3/Caspase-1细胞焦亡信号通路的影响

目的 探讨半夏泻心汤（BXT）对溃疡性结肠炎（UC）大鼠细胞焦亡通路NOD样受体蛋白3（NLRP3）/胱天蛋白酶-1（Caspase-1）及其下游因子的影响，阐释BXT治疗UC的作用机制。方法 将SD大鼠随机分为正常组、UC模型组、BXT低剂量组6.3 g·kg^-1·d^-1、BXT高剂量组12.6 g·kg^-1·d^-1、柳氮磺吡啶（SASP）组0.42 g·kg^-1·d^-1，每组各7只。依据分组灌胃大鼠2.5%浓度的葡聚糖硫酸钠盐（DSS）溶液10 d建立UC模型后，灌胃给药7 d。实验期间观察大鼠一般状态，给药期间统计疾病活动指数（DAI）评分，实验结束后，采集结肠组织进行苏木素-伊红（HE）染色观察病理学改变，以观察BXT疗效。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测结肠组织NLRP3、Caspase-1、消皮素D（GSDMD）、白细胞介素（IL）-1β mRNA转录水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白表达情况，以探讨BXT的治疗机制。结果 与正常组比较，UC模型组大鼠DAI评分明显升高，结肠组织出现病理学改变，结肠组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β mRNA的表达及蛋白水平明显上调（P<0.05，P<0.01）；与UC模型组比较，各给药组大鼠DAI评分显著降低，结肠组织病理学改变得到改善；BXT给药组结肠组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β mRNA及蛋白的表达水平明显下调或趋于下调，以BXT低剂量组效果最佳（P<0.05，P<0.01）。结论 BXT可通过调控NLRP3/Caspase-1通路抑制细胞焦亡，缓解溃疡性结肠炎大鼠的炎症反应。     

清化颗粒对db/db小鼠胰高血糖素样肽-1合成和分泌的影响

目的:探讨清化颗粒对db/db小鼠肠道胰高血糖素样肽-1(GLP-1)合成和分泌的影响。方法:选取db/m小鼠为空白对照组,db/db糖尿病小鼠随机分为模型对照组和清化颗粒(低、中、高剂量)组,干预4周,观察小鼠糖代谢变化;ELISA法分析小鼠血清GLP-1的水平;qRT-PCR法检测小鼠回肠胰高血糖素原和激素原转化酶1/3(PC1/3)的mRNA水平;Western blot法检测小鼠回肠PC1/3的蛋白表达水平;组织病理学观察小鼠回肠组织形态变化。结果:与模型对照组比较,清化颗粒降低db/db糖尿病小鼠的空腹血糖(FBG)(P0.01);提高血清GLP-1的浓度(P0.01);上调小鼠回肠组织胰高血糖素原和PC1/3酶的mRNA水平(P0.01);上调小鼠回肠组织PC1/3的蛋白表达水平(P0.01);并具有剂量依赖效应。另外,清化颗粒明显改善db/db糖尿病小鼠回肠组织形态。结论:清化颗粒能够降低db/db糖尿病小鼠的血糖水平,提高血清GLP-1水平,上调胰高血糖素原和PC1/3的mRNA水平,促进肠道GLP-1的合成和分泌,改善回肠组织形态。     

基于GPR119/cAMP/GLP-1通路探讨葛根芩连汤的降糖机制

目的:探讨葛根芩连汤(GGQL)对肠道上皮细胞增殖和凋亡的影响,并通过其对细胞环磷酸腺苷(cAMP),G蛋白偶联受体119(GPR119)表达的影响探讨其对胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的影响和潜在降糖机制。方法:对25只Wistar大鼠按生药23 g·kg-1,每天2次予以葛根芩连汤灌胃,每只大鼠每天灌胃6 mL,以制备含葛根芩连汤的血清,连续给药7次。用不同浓度葛根芩连汤含药血清(1%,2.5%,5%,7.5%,10%)培养肠道上皮L细胞系NCI-H716细胞;细胞增殖与活性检测(CCK-8)评估细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液中GLP-1,cAMP含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测GLP-1,GPR119 mRNA水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测GLP-1,GPR119蛋白表达水平。结果:与空白组比较,葛根芩连汤明显减少了NCI-H716细胞的增殖(P<0.05),且随着葛根芩连汤浓度的增加,其抑制作用更加明显;每种浓度的葛根芩连汤均明显促进NCI-H716细胞凋亡...     

GLP-1受体激动剂与非酒精性脂肪性肝病

非酒精性脂肪肝病在组织学表现上主要是:在无过量饮酒因素,并排除继发性肝损伤所出现的肝内脂肪堆积过多,其发病机制与2型糖尿病的胰岛素抵抗(insulin resistance)有密切联系。胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1),是一种能改善胰岛功能,提高胰岛素敏感性的新型降糖药物。在最近的体内和体外研究中,发现GLP-1可通过增加脂肪酸氧化,改善肝脏的葡萄糖代谢,对非酒精性脂肪肝起到明显的改善作用。鉴于以上因素,本文作者就GLP-1减轻NAFLD的作用机制进行探讨,为NAFLD的临床治疗决策提供相应参考。     

大黄素通过激活PPARδ促进胰高血糖素样肽1分泌的研究

目的探讨中药活性成分大黄素对胰高血糖素样肽1(GLP-1)的分泌的影响及机制。方法①以高糖培养基(DMEM)培养小鼠肠道肿瘤内分泌细胞株(STC-1)进行体外的实验研究,以ELISA法检测GLP-1含量,探索大黄素体外对STC-1分泌GLP-1的影响。②利用C57BL/6J小鼠进行体内实验研究,分析小鼠给予大黄素灌胃对口服葡萄糖负荷的小鼠分泌GLP-1及胰岛素的影响。结果大黄素可剂量依赖性地促进STC-1细胞株分泌GLP-1,PPARδ特异性阻断剂GSK0660可阻断大黄素的作用;大黄素灌胃可提高口服负荷葡萄糖小鼠血浆GLP-1的水平,但同样可被GSK0660所阻断。结论体外和体内实验证实,大黄素可促进GLP-1分泌,该作用可能与激活代谢性核受体PPARδ亚型有关。     

GLP-1���弤�����ཱུ��ҩ��Ѫ�ܰ�ȫ�Ե�Meta����

??OBJECTIVE To evaluate the cardiovascular safety of glucagon-like peptide-1 receptor agonists (GLP-1 RA) for diabetes systematically. METHODS Medline, Embase, ClinicalTrails.gov, Cochrane Liabrary, CBM, and CNKI were retrieved to collect all the randomized controlled trials (RCT) with a duration of at least 24 weeks, comparing a GLP-1RA with a non-GLP-1 RA agent in type 2 diabetes, and then a Meta-analysis was performed with RevMan5.3 software. RESULTS Fifty-one RCTs, invovling 26 140 individuals with type 2 diabetes, were included in the analysis. The difference in the incidence of major adverse cadiovascular events (MACE) between GLP-1RA and comparators did not reach statistical significance, and the odds ratio was 0.78 (0.57, 1.08), although a favorable trend was observed; while in comparisons with placebo, the incidence of MACE was significantly decreased and the odds ratio was 0.5 (0.28, 0.87); compared with comparators, a significant decrease of the incidence of all-cause and cardiovascular mortality were detected and the odds ratio were 0.53 (0.27, 0.93) and 0.38 (0.16, 0.90), respectively. As for the cardiovascular risk factors, GLP-1 RA significantly decreased the HbA1c, weight, TG, LDL, SBP, but increased the heart rates. CONCLUSION GLP-1 RA may have a protective effect on cardiovascular diseases, compared with the comparators, especially compared with placebo.     

化浊解毒方联合二甲双胍对2型糖尿病患者肠促胰素GLP-1的影响

[目的]观察化浊解毒方联合二甲双胍对2型糖尿病(T2DM)患者血清胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的影响。[方法]筛选符合浊毒内蕴证型的T2DM患者,随机分为治疗组和对照组。治疗组在常规治疗基础上加服化浊解毒方,8周后评价患者临床证候的改善情况,检测血糖、胰岛素及GLP-1等相关指标。[结果]治疗后,治疗组较对照组临床症状体征明显改善,血糖、糖化血红蛋白水平明显降低(P0.05),GLP-1分泌显著增加(P0.01),胰岛素水平无明显变化。[结论]化浊解毒方联合二甲双胍能增加T2DM患者GLP-1分泌,从而增强其降糖疗效。     

补肾活血、解毒化浊法联合盐酸二甲双胍片治疗对肥胖型多囊卵巢综合征患者GLP-1、GLP-2、PYY的影响

目的:观察补肾活血、解毒化浊法对肥胖型多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者胰岛素抵抗的改善作用及其对胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、胰高血糖素样肽-2(GLP-2)、酪酪肽(PYY)的影响。方法:受试者为广西中医药大学第一附院医院门诊诊断为肥胖型PCOS患者80例,按随机数字表法分组,对照组40例采用盐酸二甲双胍片治疗;治疗组40例采用补肾活血、解毒化浊法联合盐酸二甲双胍片治疗。治疗前后空腹采血,测定血清FINS、FBG、T,FSH、LH、GLP-1、GLP-2、PYY水平,计算HOMA-IR值。结果:两组患者治疗后血清FINS、HOMA-IR、T、FSH,LH显著降低(P 0. 01),GLP-1、GLP-2、PYY显著升高(P 0. 01);与对照组比较;治疗组FINS、HOMA-IR、T、FSH、LH下降均更加明显(P 0. 05),而GLP-1、GLP-2、PYY升高更加明显(P 0. 05)。结论:补肾活血、解毒化浊法治疗可能通过升高肥胖型多囊卵巢综合征患者血清GLP-1、GLP-2、PYY水平,从而改善胰岛素抵抗和性激素水平。     

基于GLP-1的中药降糖作用研究进展

胰高血糖素样肽-1(GLP-1)可从多种途径实现降糖作用,近些年来已成为糖尿病研究领域的热点之一。中药治疗糖尿病历史悠久,现代药理学研究证实其具有多途径、多靶点的降糖作用机制。基于GLP-1降糖作用的中药干预研究也日益增多,现对中药干预GLP-1实现降糖作用的相关研究进行综述,以期为从GLP-1角度阐明中药的降糖作用机制及筛选研制新的降糖中药提供参考。     

三丫苦对高脂饮食性胰岛素抵抗模型大鼠GLP-1mRNA的影响

目的:观察三丫苦对高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠GLP-1mRNA的影响。方法:40只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、三丫苦组、罗格列酮组,建立高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠模型。检测各组大鼠TC、TG、FBG、FINS等指标的变化,清醒状态下高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验检测葡萄糖输注率,Real-time PCR法检测肝脏组织GLP-1mRNA的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组TC、TG、FBG、FINS升高(P0.01),葡萄糖输注率降低(P0.01)。给予三丫苦后,大鼠TC、TG、FBG、FINS降低(P0.01或P0.05),GIR水平升高(P0.05),与罗格列酮组比较TC和TG降低(P0.05)。与正常对照组比较,模型对照组GLP-1mRNA表达显著降低(P0.01)。与模型对照组比较,三丫苦组和罗格列酮组GLP-1mRNA表达均有不同程度的升高(P0.01或P0.05)。与罗格列酮比较,三丫苦组GLP-1mRNA表达升高(P0.05)。结论:三丫苦对高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢及GLP-1mRNA有一定调节作用。