金线莲主要成分kinsenoside的体外抗癌活性研究

目的 对金线莲Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.中富含的主要成分kinsenoside进行抗癌活性研究.方法 采用磺酰罗单明Sulforhodamine B (SRB)法和MTT分析法.结果 对3种敏感细胞株:人白血病细胞株 ( HL-60 )、人肺癌细胞株 (A-549)、人肝癌细胞株(BEL-7402) 筛选结果10-5mmol/L的化合物kinsenoside时抑制率均小于85%,评定为无效.结论 化合物kinsenoside的抗癌活性不显著.     

(2'-溴-4',5'-二甲氧基-苯基)-(2,3-二溴4,5-二甲氧基-苯基)-甲烷的合成及其PTP1B酶抑制活性研究

目的:通过化学法合成具有PTP1 B酶抑制活性的新型溴酚衍生物-(2'-溴4',5'-二甲氧基-苯基)-(2,3-二溴-4,5-二甲氧基-苯基)-甲烷.方法:采用傅克酰基化、逐级溴化、脱羰基等经典合成反应合成目标化合物6.采用EI-Ms,HREI-MS,~(1)H-NMR,~(13)C-NMR,IR等方法对合成中间体及目标化合物进行结构鉴定.通过比色法对化合物6进行PTP1 B酶抑制活性测试.结果:采用四步法成功合成了目标化合物6,体外活性测试结果表明其具有一定的PTP1 B酶抑制活性.结论:采用化学法合成了目标化合物6,总产率为20%,该化合物为新化合物,具有一定的PTP1 B酶抑制活性5 mg·L~(-1),酶抑制率为40.16%.     

盾叶木中具蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制活性的三萜类成分

目的研究盾叶木Macaranga adenantha枝的化学成分并进行蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)抑制活性和人肿瘤细胞毒活性筛选。方法用硅胶和凝胶色谱分离化合物,用波谱学等方法鉴定结构;分别以体外酶学方法和MTT法测定化合物PTP1B抑制活性和细胞毒活性。结果从盾叶木乙醇提取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为:齐墩果酸(Ⅰ)、3β-乙酰基齐墩果酸(Ⅱ)、3β-乙酰基齐墩果酸甲酯(Ⅲ)、3β,28-二羟基-12-烯-齐墩果烷(Ⅳ)、2α,3β-二羟基齐墩果酸(Ⅴ)、3β-乙酰氧基-11-烯-齐墩果烷-28,13-内酯(Ⅵ)、3β-乙酰氧基-11α,12α-环氧-齐墩果烷-28,13-内酯(Ⅶ)、3β-O-乙酰基木油醇酸(Ⅷ)。化合物Ⅰ, Ⅳ, Ⅴ抑制PTP1B酶的IC50分别为(7.2±0.3)、(12.4±5.5)、(6.2±0.9)、(7.6±1.7)μg/mL,所有化合物抑制几种肿瘤细胞的IC50均大于10μg/mL。结论8个化合物均为首次从该属植物中得到。化合物、、、为PTP1B酶抑制剂,所有化合物均无细胞毒活性。     

黑果悬钩子化学成分及其PTP1B抑制活性的研究

目的研究黑果悬钩子Rubus caesius茎叶的化学成分及其对蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的抑制活性。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、半制备液相等色谱方法进行分离纯化,根据核磁共振波谱鉴定化合物结构,利用酶标仪测定不同萃取部位和单体化合物的PTP1B抑制活性。结果从黑果悬钩子茎的醋酸乙酯部位分离得到5个化合物,分别鉴定为柚皮苷(1)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、异槲皮苷(3)、金丝桃苷(4)、(-)-表儿茶素3-O-没食子酸(5);从叶的醋酸乙酯部位分离得到2个化合物,分别鉴定为类叶升麻苷(6)、鞣花酸(7)。结论所有化合物均为首次从黑果悬钩子中分离得到。不同的萃取部位均有一定的PTP1B抑制活性,化合物6表现出较好的PTP1B抑制活性,IC_(50)为(27.41±0.61)μg/m L,推测该化合物可能是叶的醋酸乙酯部位中主要活性成分。     

蛹虫草活性成分的提取分离及体外抗氧化作用研究

目的 以抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)活性为导向,筛选蛹虫草子实体有效部位,分离纯化单体化合物,并检测其体外抗氧化作用。方法 通过硅胶色谱柱,半制备高效液相等色谱技术对蛹虫草子实体进行分离纯化,检测各组分对PTP1B的抑制活性;应用核磁碳谱、氢谱数据分析鉴定单体化合物结构;利用MTT法检测单体化合物对PC12细胞的增殖作用,及其对过氧化氢(H₂O₂)损伤的PC12细胞存活率的影响,试剂盒检测单体化合物对细胞乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影响。结果 发现5个对PTP1B具有较强抑制作用的活性成分,将其中活性最高的成分进一步分离纯化,获得单体化合物,经鉴定为β-D-吡喃葡萄糖基-9-甲基-4,8鞘氨醇(5),其对PTP1B具有较强的抑制活性,半抑制浓度(IC₅₀)为(3.42±0.59) μmol·L^-1。该单体化合物对H₂O₂诱导的PC12细胞氧化损伤具有明显的保护作用。结论 首次以抑制PTP1B活性为导向,在蛹虫草中分离得到脑苷脂类单体化合物,其具有抑制PTP1B作用和体外抗氧化活性,为蛹虫草用于糖尿病的预防和治疗奠定理论基础。     

(2′-溴-4′，5′-二甲氧基-苯基)-(2，3-二溴-4，5-二甲氧基-苯基)-甲烷的合成及其PTP1B酶抑制活性研究

目的：通过化学法合成具有PTP1B酶抑制活性的新型溴酚衍生物-(2′-溴-4′,5′-二甲氧基-苯基)-(2,3-二溴-4,5-二甲氧基-苯基)-甲烷。方法：采用傅克酰基化、逐级溴化、脱羰基等经典合成反应合成目标化合物6。采用EI-MS,HREI-MS,1H-NMR,13C-NMR,IR等方法对合成中间体及目标化合物进行结构鉴定。通过比色法对化合物6进行PTP1B酶抑制活性测试。结果：采用四步法成功合成了目标化合物6,体外活性测试结果表明其具有一定的PTP1B酶抑制活性。结论：采用化学法合成了目标化合物6,总产率为20%,该化合物为新化合物,具有一定的PTP1B酶抑制活性5 mg·L-1,酶抑制率为40.16%。     

栗色鼠尾草中抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B的活性成分

目的 探讨栗色鼠尾草Salvia castanea抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B)的活性成分及其可能的作用机制.方法 采用分子克降技术构建人源PTP1B的体外抑制活性筛选模型,利用该模型对HPLC分离的栗色鼠尾草提取物进行活性成分的追踪分析并进行结构确认,采用分子模拟方法 分析其作用机制.结果 从栗色鼠尾草根的甲醇提取物中鉴定获得了2个活性化合物,分别为已知化合物二氢丹参酮Ⅰ与丹参酮Ⅱ_A,其IC_(50)分别为34.01μmol/L和44.16μmol/L.分子模拟对接分析揭示了两个化合物的立体构型及作为氢键受体的邻醌结构均有利于与PTP1B的活性位点口袋产生亲和作用.结论 丹参酮类化合物对PTP1B具有竞争性抑制作用,并可能成为开发2型糖尿病治疗药物的新资源.     

海藻中溴酚化合物的蛋白酪氨酸磷脂酶1B抑制活性研究

目的：通过对海藻天然产物进行活性筛选，寻找蛋白酪氨酸磷脂酶1B(PTP1B)抑制剂，为2型糖尿病和肥胖症的治疗寻找新的治疗药物。方法：以PTP1B为靶点，采用分子克隆谷胱苷肽巯基转移酶(glutathion S transferase, GST)融合蛋白的方法，重组表达获得PTP1B，通过高通量筛选模型对海藻中得到的单体化合物进行活性筛选,采用LOGIT法计算LD₅₀。结果：来源于松节藻和小黏膜藻的溴酚类化合物4-二溴-5-(甲氧基甲基)-1,2-二苯酚(1)，2-甲基-3-(2,3-二溴-4,5-二羟基)-苯丙醛(2)，3-(2,3-二溴-4,5-二羟基苯)-4-溴-5,6-二羟基-1,3-二氢异苯并呋喃 (3)表现出显著的PTP1B抑制活性，IC₅₀分别为3.4，4.5，2.8 μmol·L^-1。结论：首次对溴酚化合物作为PTP1B抑制剂进行研究， 海藻中的3个溴酚类化合物表现出显著的PTP1B抑制活性，有开发成新型抗糖尿病海洋药物的潜力。     

蛋白酪氨酸磷酸酶1B与型糖尿病的中药治疗

蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)是Ⅱ型糖尿病相关蛋白，是治疗Ⅱ型糖尿病一个重要的潜在靶点。Ⅱ型糖尿病的治疗关键是要寻到对PTP1B具有高度选择性的有效抑制剂。目前，有一些关于PTP1B抑制剂的文献报道，但这些抑制剂对PTP1B的选择力不够强。中药中有很多单味中药和复方制剂有降血糖作用，但其治疗糖尿病的作用机制还不很清楚，可能是中药制剂中的某个或某些成分与机体中PTP1B或其他糖尿病相关蛋白发生了作用等。开展药效学和基因芯片研究有利于深入探讨中药治疗Ⅱ型糖尿病的作用机制。     

绞股蓝三萜类化合物及其抑制α-葡萄糖苷酶和蛋白酪氨酸磷酸酶1B的活性研究

目的研究绞股蓝总皂苷及其水解产物中达玛烷型四环三萜类化合物及其降糖活性。方法采用反复硅胶柱色谱法、重结晶法和半制备液相色谱法等,对绞股蓝总皂苷水解产物和总皂苷进行系统分离,结合NMR数据鉴定了化合物的结构。利用体外抑制α-葡萄糖苷酶和蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)活性模型进行化合物活性筛选,并对活性较强的化合物进行了酶抑制动力学研究,采用计算机辅助药物设计的活性位点分析法,对PTP1B与化合物的相互作用进行对接模拟。结果从绞股蓝总皂苷酸水解产物中分离得到7个化合物,分别鉴定为gpsapogeninA(1)、20(S)-人参二醇(2)、gypensapogeninF(3)、20(R)-原人参二醇(4)、(23S)-3β-羟基达玛-20,24-二烯-21-羧酸21,23-内酯(5)、gypsapogenin A(6)和(20S,24S)-3β,20,21β,23β,25-五羟基-21,24-环氧达玛烷(7);从总皂苷中分离得到5个化合物,分别鉴定为(20R,23R)-3β,20-二羟基达玛-24-烯-21-羧酸21,23-内酯-3-O-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)][β-D-吡喃木...     

南海蓖麻海绵Biemna fortis Topsent化学成分及其生物活性

目的:对采自我国南海的蓖麻海绵Biemna fortis Topsent的化学成分进行研究,从中寻找有生物活性的次生代谢产物.方法:用硅胶柱层析和凝胶柱层析对蓖麻海绵的甲醇提取物进行分离纯化,根据其化学性质,结合现代波谱技术(MS,NMR等),对得到的化合物进行结构鉴定.结果:分离得到9个甾体、2个邻苯二甲酸酯、1个长链脂肪醛类化合物,其结构分别鉴定为melithasterol B(1),(24R)-ergosta-7,22-diene-3,5,6-triol(2),(24R)-ergosta-4,6,8(14),22-tetraene-3-one(3),(24R)-ergosta-4,7,22-uriene-3-one(4),(24R)-ergosta-6,22-diene-5,8-epidioxy-3-ol(5),6-hydroxy-cholest-4-en-3-one(6),cholest-4-ene-3,6-dione(7),cholest-4-en-3-one(8),cholesb5,22-diene3-one(9),bis-(2-ethylhexyl)phthalate(10),bis-diisobutyi phthalate(11)和hexaldehyde(12).结论:化合物1-4,6-10,12系首次从蓖麻海绵中分离得到:化合物7不但对T和B淋巴细胞的增殖具有显著抑制活性,而且对Ⅱ型糖尿病靶标分子蛋白质酪氨酸磷酸酯酶PTP1B具有显著的抑制活性.其IC50为1.6 mol·L-1.     

贯叶金丝桃化学成分研究

目的:研究贯叶金丝桃Hypericum perforatum的化学成分。方法:通过各种柱色谱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据对所得化合物进行结构鉴定;测定化合物对基因重组人PTP1B的抑制率。结果:从中分离并鉴定了10个化合物:D-甘露醇(1),邻苯二甲酸二异丁酯(2),(7E,6R,9S)-9-hydroxy-4,7-megastigmadien-3-one(3),(6S,9R)-roseoside(4),2,6-dim-ethoxy-4-hydroquinone-1-O-β-D-glucopyranoside(5),2,6-dimethoxy-4-hydroxybenzyl alcohol 1-O-β-D-glucopyranoside(6),syringate4-O-β-glucopyranoside(7),金丝桃素(8),skyrin-6-O-β-D-glucopyranoside(9),(R)-3,4-二羟基-苯甲酸-1’-丙三醇酯(10)。在2μmol.L-1时,化合物9对基因重组人PTP1B的抑制率为96.4%,IC50为2.5μmol.L-1。结论:化合物10为新化合物,化合物2～4,7为首次从该属中分离得到,化合物5,6从该植物中首次得到。体外活性筛选表明化合物8具有显著的PTP1B抑制作用。     

柱前衍生HPLC法分析榅桲多糖中单糖组成及PTP1B抑制活性

目的 建立柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定榅桲多糖中单糖的组成及摩尔比,检测榅桲多糖的蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)抑制活性。方法 采用水提醇沉法提取榅桲多糖,并用PTP1B体外模型进行抑制活性测定。榅桲多糖样品经三氟醋酸(TFA)(2 mo1·L-1)和硫酸(2 mo1·L-1)的混合溶液降解为单糖后,经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化,利用RP-HPLC法,检测单糖的PMP衍生物。结果 榅桲多糖中含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等单糖,摩尔比为0.10 ∶ 0.72 ∶ 1.12 ∶ 4.23 ∶ 4.73。榅桲多糖具有良好的PTP1B抑制活性,其IC50为 2.068 μg·mL-1,初步推测榅桲多糖具有抗Ⅱ型糖尿病的潜力。结论 该方法具有简便、快速、重现性好的特点,可用于榅桲多糖的单糖组成分析及质量控制。     

红树林植物榄李的化学成分

目的:对采自中国北海的红树林植物榄李(Lumnitzera racemosa)的化学成分进行研究,从中寻找有生物活性的次生代谢产物。方法:用硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析对榄李的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,并利用现代波谱技术对得到的化合物进行结构鉴定。结果:分离得到10个化合物,其结构分别鉴定为2-methyl-1,3-dihydroxy-5-tridecylbenzene(1),1,3-dihydroxy-5-undecylbenzene(2),ergosta-7,22-dien-3-βol(3),e-modin(4),kaempferol(5),quercetin(6),quercitrin(7),isoquercitrin(8),epigallocatechin(9),gallic acid(10)。结论:这些化合物均为首次从该植物中分离得到。在活性筛选中,化合物1和2对PTP1B显示抑制活性,其IC50分别为(13.38±1.98)和(10.40±0.88)μmol.L-1。     

青荚叶的化学成分

目的：为阐明青荚叶（Helwingia japonica（Thunb．）Dietr．）地上部分95％乙醇提取物中具有蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B（protein tyrosine phosphatase,PTP1B）抑制活性的化学成分。方法：分别从四川芦定县和平武县采得青荚叶样品A和B,运用多种层析手段进行分离纯化,通过渡谱数据和理化性质进行化合物的鉴定。结果：样品A的95％乙醇提取物按极性分段后,HC、HE、HF、HG部分具有强的抑制PTP1B活性。从样品A的95％乙醇提取物中分离并鉴定了9个化合物（1-9）。样品B的95％乙醇提取物的乙酸乙酯部分显示PTP1B抑制活性OC504．63g·mL-1）,从中分离得到5个化合物（10．14）。鉴定它们为谷甾醇（1）、廖胡萝卜奇（2）、羽扇豆醇（3）、桦木醇（4）、桦木酸（5）、棕榈酸甘油酯（6）、桂皮酸（7）、6aH-4-烯-3-酮-豆甾醇（8）、6aH-4-烯-3-酮-豆甾醇（9）、P-menth-2-en-1β,4β,8-triol（10）、blumenolA（11）、2’,3’,4’,5’,6＇-五羟基查尔酮02）、洋芹素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（13）和木犀草素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（14）。结论：除了化合物13与14,其余均是在该植物中首次分离得到。据报道化合物5有PTP1B抑制活性,但考虑其在植物中的含量,青荚叶中的活性戍分有待进一号研究。     

芒果苷酰化衍生物降血糖活性的研究

目的 制备高脂溶性的芒果苷酰化衍生物,并评价其降血糖活性.方法 将芒果苷分别与乙酸酐、丙酸酐和丁酸酐反应,得到芒果苷酰化衍生物PAM、HPM和HBM.采用链脲佐菌素(STZ)所致糖尿病小鼠模型、肾上腺素(AD)所致高血糖小鼠模型和体外抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)试验评价PAM、HPM和HBM的降血糖作用.结果 STZ所致糖尿病小鼠试验,与空白对照组比较,PAM、HPM和HBM高中低剂量组(0.25,0.125,0.063 mmol·kg-1)和芒果苷高中剂量组(1.0,0.5mmol·kg-1)均显示显著的降血糖作用(P＜0.01或P＜0.05);AD所致高血糖小鼠试验,芒果苷、PAM、HPM和HBM高剂量组(1.0mmol·kg-1)均没有对抗AD的升血糖作用(P＞0.05);体外抑制PTP1B试验,在5μg·ml-1浓度时,PAM、HPM和HBM显示较高的PTP1B酶抑制作用,在20 μg·ml-1浓度时PTP1B酶产生明显沉淀.结论 PAM、HPM和HBM为首次报道的新结构化合物;PAM、HPM和HBM只需相当于芒果苷1/4的摩尔剂量,即可显示出与芒果苷相似的降血糖作用,提示其降血糖活性比芒果苷的高;PAM、HPM和HBM是强PTP1B酶抑制剂.     

红树林植物桐花树的化学成分

目的:对采自中国北海的红树林植物桐花树(Aegiceras corniculatum)的化学成分进行研究,从中寻找有生物活性的次生代谢产物。方法:用硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析对桐花树的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,用波谱技术进行结构鉴定。结果:9个化合物分别鉴定为镰叶芹二醇(1),茴香酸对羟苯乙酯(2),邻苯二甲酸二辛酯(3),正三十一烷醇(4),白黎芦醇(5),1,5-二羟基-3-甲氧基-7-甲基蒽醌(6),1,3,5-三羟基-7-甲基蒽醌(7),槲皮素(8),羽扇豆醇(9)。结论:这些化合物均为首次从该植物中分得。在体外活性筛选中,化合物1对PTP1B显示抑制活性,其IC50为9·15±2·48μmol·L-1。     

新疆3种植物不同提取部位的抗氧化活性及其对PTP1B的抑制作用

目的:考察新疆树莓、黑果悬钩子和天山茶藨不同萃取部位的抗氧化活性及其对蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的抑制作用,筛选具有抗氧化及降血糖活性的有效部位。方法:采用甲醇提取、分步萃取的方法分别制备了不同的极性部位。测定了3种植物不同部位的总黄酮含量,果实提取物经AB-8型大孔树脂纯化后制备了果实花青素部位;利用2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐法,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼法及PTP1B抑制活性实验比较了不同部位的相关活性,并分析了黄酮含量和活性的相关性。结果:经AB-8型大孔树脂纯化后,树莓果实花青素含量由(12.72±0.14) mg·g^-1提高到(238.13±1.18) mg·g^-1,天山茶藨果实的花青素含量由(35.36±0.45) mg·g^-1提高到(548.05±1.11) mg·g^-1,随着花青素含量的升高,其抗氧化活性和PTP1B抑制活性也显著升高。黑果悬钩子茎乙酸乙酯部位总黄酮含量最高,为(658.65±11.43) mg·g^-1;黑果悬钩子茎水部位抗氧化活性最高,ABTS和DPPH自由基清除能力分别为(4.53±0.07),(2.82±0.09) mmol Trolox·g^-1当量;黑果悬钩子茎水部位对PTP1B的抑制率最高,半数抑制浓度为(0.08±0.01) mg·L^-1。结论:这3种植物不同萃取部位均具有良好的抗氧化活性和PTP1B抑制作用,黑果悬钩子茎水部位为主要的抗氧化活性和PTP1B抑制活性的有效部位,树莓和天山茶藨果实中花青素是主要的活性成分,天山茶藨茎叶中黄酮是主要的抗氧化活性成分。     

大萼金丝桃中的新成分

作者观察到大萼金丝桃(Hypericumcalycinum L.)地上部分的石油醚提取物显示了重要的抑制Co-115人结肠癌细胞系生长的活性。原亲脂性提取物经DCCC,石油醚-94％乙醇-乙酸乙酯-水(83:67:33:17,上行法)分出了3个有活性的部分。主要活性部分从己烷中结晶,再经RP-18半制备HPLC,甲醇-水(85:15)+0.1％乙酸,得到化合物(1)和(2)。与早先从金丝桃(H.chinense L.)中分出的抗菌素金不换素(chinensin)Ⅰ和Ⅱ相比,(1)与金不换     

冷蒿的化学成分研究

目的研究冷蒿Artemisia frigida全草的化学成分,并初步筛选其药理活性。方法应用多种色谱技术对冷蒿全草的粗提取物进行系统的分离纯化,采用光谱学和波谱学方法鉴定化合物结构,并对部分单体化合物进行过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动活性及蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)抑制活性的筛选。结果从冷蒿全草提取物中分离得到了26个化合物,分别鉴定为柳穿鱼黄素(1)、棕矢车菊素(2)、金圣草黄素(3)、麦黄酮(4)、3-羰基-吉玛-1(10),11(13)-二烯-6α,12-内酯(5)、蓍素(6)、1,10β-环氧蓍素(7)、滨蒿内酯(8)、4-羟基苯乙酮(9)、猫眼草黄素(10)、棕鳞矢车菊黄酮素(11)、11α,13-二氢魃蒿内酯(12)、chrysanthemin A(13)、异泽兰黄素(14)、泽兰黄素(15)、南艾蒿烯内酯(16)、6-甲氧基麦黄酮(17)、hanphyllin(18)、蓟黄素(19)、利得亭(20)、desacetylmatricarin(21)、subchrysine(22)、木犀草素(23)、咖啡酸(24)、藿香苷(25)、田蓟苷(26)。结论化合物5、7、11、18、25、26为首次从蒿属植物中分离得到,化合物10、12、13、16、17、22为首次从该植物中分离得到;化合物2和15有较弱的PPARγ激动活性,化合物1和3对PTP1B有中等强度的抑制作用。