小檗碱逆转高糖对血管内皮细胞迁移的抑制作用

目的：观察小檗碱对高糖条件下血管内皮细胞迁移的影响,并研究可能的作用机制。方法以体外培养的EA．hy926人脐静脉血管内皮细胞为模型,采用划痕试验的方法研究高糖及不同浓度条件下对内皮细胞迁移的影响;采用电泳迁移率变动分析法检测核因子-κB（NF-κB）的DNA结合活性。结果33mmol/L浓度的葡萄糖可抑制内皮细胞的迁移;小檗碱可逆转高糖对内皮细胞迁移的抑制作用。作用机制的研究表明,高糖可诱导NF-κBDNA结合活性上调,而采用小檗碱处理后可降低NF-κB活性。结论小檗碱可逆转高糖对内皮细胞迁移的抑制作用,该作用可能涉及抑制NF-κB的DNA结合活性上调。     

高糖通过Akt信号通路诱导内皮细胞衰老

目的:探讨高糖对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)衰老及Akt表达的影响。方法:不同浓度的葡萄糖(5.6mmol/L、16.7mmol/L、33mmol/L)加入体外培养的人脐静脉内皮细胞,24小时后β半乳糖甘酶染色检测细胞衰老率和免疫组化法检测Akt活性。结果:5.6mmol/L葡萄糖对内皮细胞衰老作用不明显,16.7mmol/L和33mmol/L均导致细胞的衰老,并且随着浓度增加,衰老更为显著。同时,出现了Akt磷酸化水平的下降。结论:高糖可导致血管内皮细胞的衰老,其机制可能与Akt蛋白活性下调有关。     

Baicalein抑制人血管内皮细胞ECV-304的增殖和迁移

目的　探讨选择性 12 -脂氧酶抑制剂baicalein对血管内皮细胞增殖和移行的抑制作用。方法　采用倒置显微镜、光镜、流式细胞仪进行细胞周期分析、MTT检测、缺损闭合实验观察分析不同浓度baicalein作用后 ,人脐静脉内皮细胞系ECV 30 4细胞形态、增殖和迁移的变化。结果　 (1)不同浓度 (0 .1～ 10 0 μM )的baicalein处理ECV 30 4细胞 2 4～ 12 0h后或一定浓度 (30 μM)的baicalein处理ECV 30 4细胞不同时间 (1～ 6d)后 ,内皮细胞变形 ,有不同程度的变性、坏死 ,与baicalein的浓度和作用时间成正比 ;(2 )细胞周期分析显示baicalein处理后细胞周期阻滞在G0 /G1期 ,4 8h时相点最为显著 ;并在G0 /G1期前出现高于对照的凋亡峰 (Sub G1) ,12h时相点最高(10 .6 % ) (P <0 .0 1) ;(3)缺损闭合实验baicalein处理组的ECV 30 4细胞缺损区面积显著大于对照组 (P <0 .0 1)。结论　选择性 12 脂氧酶抑制剂baicalein抑制血管内皮细胞的增殖和迁移 ,初步证明亦有诱导凋亡的作用 ,在影响血管生成中有一定意义     

PI3K／AKT及MEK／ERK信号通路在肿瘤血管内皮细胞迁移中的作用

目的：研究磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）／丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（AKT）及丝裂原细胞外信号调节激酶（MEK）／细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路在肿瘤血管内皮细胞迁移中的作用及机制。方法用不同浓度的PI3K／AKT信号通路抑制剂LY294002（2．50、7．50、15．00μmol／L）;MEK／ERK信号通路抑制剂PD98059（2．50、7．50、15．00μmol／L）分别处理肿瘤血管内皮细胞,以DMEM‐F12培养基,加入0．10％二甲基亚砜（DMSO）的培养基分别作为对照,通过细胞划痕试验,定向迁移试验和Transwell试验来检测不同的信号通路抑制剂对肿瘤血管内皮细胞的水平、垂直和定向迁移能力的影响。结果0．1％DMSO对内皮细胞的迁移无明显影响,其作用后内皮细胞的迁移能力与DMEM‐F12单独作用无明显区别,说明小剂量DMSO作为LY294002、PD98059的溶剂不影响肿瘤血管内皮细胞的迁移功能;应用信号通路抑制剂LY294002、PD98059处理后,内皮细胞迁移能力受抑制,且随着抑制剂浓度增高而增大;LY294002与PD98059组比较,前者迁移距离更小,细胞迁移数较后者少,二者比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论抑制PI3K／AKT和MEK／ERK信号通路均能抑制肿瘤血管内皮细胞的水平、垂直和定向迁移,且与抑制剂浓度呈正相关;PI3K／AKT信号通路对内皮细胞迁移的影响比MEK／ERK信号通路明显。     

microRNA-145通过靶向抑制CREB调节内皮细胞增殖和血管新生

目的 构建微小RNA 145(microRNA-145,miR-145)过表达及干扰腺病毒载体,并探究miR-145对内皮细胞增殖和血管新生的影响及机制.方法 利用T4连接酶分别将miR-145过表达和干扰目的序列插入到pHBAd-EF1-MCS-GFP和pHBAd-U6-CMV-GFP载体,构建出重组miR-145过表达和干扰腺病毒质粒.将重组miR-145过表达和干扰腺病毒质粒分别与骨架质粒pHBAd-BHG共转染人胚肾HEK293细胞进行重组腺病毒的包装与扩增,TCID50法检测病毒感染滴度.miRNA qRT-PCR检测感染腺病毒的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中miR-145的表达水平,MTT及Western blot检测PCNA蛋白表达量以检测细胞增殖情况.小管形成实验检测血管生成能力的变化.采用miRanda、miRwalk等生物信息学方法预测miR-145的靶基因及与环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding protein,CREB) 3'UTR的结合位点.Western blot检测CREB及其调控的VEGF的表达情况,双荧光素酶实验验证miR-145与目的基因CREB 3'UTR相互作用.结果 基因测序提示miR-145过表达及干扰质粒序列与目标序列一致,qRT-PCR结果亦提示病毒构建成功.细胞增殖和小管形成实验结果显示,与转染空载体组相比,过表达miR-145使570 nm处光密度值明显降低(P＜0.05),亦显著抑制了HUVECs PCNA蛋白表达和小管样结构的形成(P＜0.01),而干扰miR-145表达则使光密度值增高(P＜0.01),亦促进HUVECs PCNA蛋白表达和小管样结构的形成(P＜0.05).同时,过表达miR-145可显著抑制CREB和VEGF蛋白表达(P＜0.05),而干扰miR-145表达则明显促进CREB和VEGF蛋白上调(P＜0.05).双荧光素酶实验亦证实了miR-145与CREB 3'UTR的直接结合作用.结论 miR-145调节内皮细胞增殖和血管新生,其机制与miR-145直接靶向抑制CREB/VEGF信号有关.     

TL1A抗体通过抑制活性氧产生阻止高糖诱导血管内皮细胞凋亡

目的:探讨TL1A抗体在高糖所致活性氧(ROS)增多及细胞凋亡中的作用。方法:将培养的人脐静脉内皮细胞分为正常对照组、正常糖+TL1A组、高糖对照组、高糖+SOD+CAT组、高糖+TL1A抗体组和高渗对照组。采用流式细胞术检测人脐静脉内皮细胞ROS生成量;Annexin V/PI荧光双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:与正常对照组相比,高糖对照组ROS生成量增加53%,细胞凋亡率达正常的5.8倍(P<0.01)。于正常糖培养液中加入外源性TL1A蛋白,活性氧的生成量及细胞凋亡率均明显增多,显著高于正常对照组和高糖对照组(P<0.01);在高糖培养液中加入9μg/ml TL1A抗体,活性氧生成量由(71.63±6.61)降至(50.63±4.05),细胞凋亡率由(23.70±3.20)%降至(5.07±0.47)%(P<0.01)。结论:TL1A抗体通过抑制ROS产生阻止高糖诱导血管内皮细胞凋亡。     

高糖环境对血管内皮细胞增殖和氧化应激的影响

目的探讨不同浓度的葡萄糖对体外培养的ECV-304细胞增殖和氧化应激的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304细胞,用浓度为5.5mmol/L(正常对照组)、15mmol/L(HG15组)、25mmol/L(HG25组)、35mmol/L(HG35组)、45mmol/L(HG45组)的葡萄糖培养液分别干预培养48、72和96h。采用MTT法检测不同干预组的细胞增殖能力;硫代巴比妥酸盐法测定细胞中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量;采用二硫代双硝基苯甲酸比色法测定细胞中还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量。结果随着葡萄糖浓度和暴露时间的增加,细胞增殖明显被抑制,细胞内GSH含量显著降低,与正常对照组比较各组细胞间差异有统计学意义(P<0.01)。同时,高浓度葡萄糖组MDA含量显著增加,与正常对照组比较各组细胞间差异有统计学意义(P<0.01)。结论葡萄糖可以明显抑制体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304细胞增殖,并造成显著的细胞内氧化应激,并且随着葡萄糖浓度的升高和暴露时间的延长,上述效应呈现出向严重发展的趋势。     

人参皂苷Rb3对高糖诱导的内皮细胞迁移和增殖及糖尿病小鼠视网膜功能的影响

目的 探究人参皂苷Rb3(Ginsenoside Rb3)对高糖诱导的恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞（RF/6A）迁移和增殖及db/db小鼠视网膜功能的影响及其作用机制。方法 RF/6A细胞分为正常组（5.5 mmol/L D-葡萄糖）、高糖组（25 mmol/L D-葡萄糖）、高糖+Ginsenoside Rb3(100、150、200μg/mL)组。采用CCK-8法检测各组细胞活力,5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromodeoxyuridinc,BrdU）染色评估细胞增殖能力以及Transwell法检测各组细胞迁移能力,Western blot技术检测各组RF/6A中YES相关蛋白1(yes-associated protein 1,YAP1)和磷酸化YES关联蛋白1(p-YAP1)的表达。db/db小鼠分为模型组和Ginsenoside Rb3组,给药4周后,运用光学相干断层扫描实验和视网膜电生理检查评价db/db小鼠视网膜形态和功能的变化,并采用免疫荧光染色法观察YAP1在视网膜中的表达。结果 结果显示,与对照组比较,高糖组细胞活力和BrdU阳性细胞率显著增加（P<0.01）...     

迷迭香酸对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞迁移、凋亡的作用

目的探讨迷迭香酸对高糖诱导下人视网膜血管内皮细胞迁移、凋亡的作用。方法将人视网膜血管内皮细胞按培养方案分为对照组、迷迭香酸组、高糖组、联合组。Transwell法观察各组细胞迁移能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,ELISA检测各组白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。Western blotting法与qRT-PCR技术检测各组细胞中血管内皮生长因子(VEGF)与凋亡相关蛋白Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白X(BAX)的表达水平。结果迷迭香酸组与对照组各项指标差异均无显著性(P＞0.05)。与对照组比较,高糖组人视网膜血管内皮细胞迁移能力及细胞凋亡水平显著增加,炎症指标IL-6、IL-8与TNF-α的含量增加,VEGF、Caspase-3、BAX蛋白及mRNA水平增加,Bcl-2蛋白及mRNA水平降低(P＜0.05)。与高糖组比较,联合组迁移细胞数量、细胞凋亡水平、IL-6、IL-8与TNF-α的含量、VEGF、Caspase-3与BAX的蛋白及mRNA水平降低,Bcl-2蛋白及mRNA水平增加(P＜0.05)。结论迷迭香酸可抑制高糖环境下人视网膜血管内皮细胞的迁移及凋亡状态,其机制可能与调控VEGF有关。     

利拉鲁肽通过PI3K/Akt 和MAPK/ERK通路促进心肌微血管内皮细胞的增殖和迁移

目的研究胰高血糖素样肽-1类似物利拉鲁肽对原代大鼠心肌微血管内皮细胞（CMECs）增殖和迁移的影响及其机制。方
法使用双酶消化法体外分离培养SD大鼠心肌微血管内皮细胞,差速贴壁法进行纯化,CD31和Ⅷ因子抗体进行免疫细胞化学
染色鉴定。采用不同浓度利拉鲁肽（0~1000 nmol/L）干预1 代细胞,MTT绘制细胞生长曲线,Western blot 检测利拉鲁肽对
PI3K/Akt和MAPK/ERK通路的激活作用,BrdU荧光标记法和划痕实验观察药物作用下细胞增殖和迁移能力,并使用相应的通
路阻断剂LY294002 和PD98059 来进一步证实。结果体外分离原代CMECs,CD31 及Ⅷ因子免疫荧光染色示双阳性率大于
95%,MTT示细胞于种植48 h后进入对数生长期,利拉鲁肽以浓度依赖方式促进CMECs的体外增殖,100 nmol/L为其最适生长
浓度（P<0.05）。予以100 nmol/L利拉鲁肽预干预细胞24 h后,Western blot显示胞内Akt和ERK磷酸化水平与正常细胞组相比
有明显升高（P<0.05）,加入相应通路阻断剂LY294002和PD98059,其磷酸化水平相较于利拉鲁肽组明显降低（P<0.05）。BrdU
和划痕实验均说明利拉鲁肽能促进CMECs的增殖和迁移能力（P<0.05）,使用LY294002和PD98059预处理后,增殖迁移能力均
显著低于利拉鲁肽组（P<0.05）。结论利拉鲁肽是通过激活胞内PI3K/Akt和MAPK/ERK通路从而促进原代大鼠心肌微血管
内皮细胞的增殖和迁移。
     

SDF-1通过PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路对人微血管内皮细胞功能产生影响

目的:观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对人微血管内皮细胞 (human microvascular endothelial cell line-1,HMEC-1)功能的影响,并对相关机制进行初步探讨,从而明确SDF-1在糖尿病血管病变中的作用?方法:体外培养HMEC-1,分别在培养基中加入不同浓度的SDF-1(0?25?50?100 ?滋g/L),Western blot检测HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路的活化情况,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况,划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况?采用PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路抑制剂LY294002和U0126阻断HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,再以SDF-1处理HMEC-1,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况;划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况?结果:Western blot结果显示,25 ?滋g/L的SDF-1处理即可显著活化HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,且随着SDF-1处理浓度的升高,PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路活化水平逐渐升高?同0 ?滋g/L 的SDF-1处理组相比,25?50?100 ?滋g/L的SDF-1均可显著加强HMEC-1的增殖和迁移能力(P < 0.01),并抑制HMEC-1的凋亡水平(P < 0.01),且这种作用具有剂量依赖性?当采用LY294002和U0126阻断HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,SDF-1促HMEC-1增殖和迁移能力及抑制HMEC-1凋亡的能力均显著降低(P < 0.01)?结论:SDF-1可通过活化PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,进而促进HMEC-1的增殖和迁移,并抑制HMEC-1的凋亡水平,从而在糖尿病血管病变中发挥一定的作用?     

Blockage of PI3K/PKB/P27 kip1 signaling pathway can antagonize 17 β -estradiol-induced Ishikawa proliferation and cell cycle progression

It is well-known that risk for endometrial adenocarcinoma increases in patients with high level ofestrogen that is unopposed by progestin. And activation of extracellular signal-regulated kinase （ERK） and phosphatidylinositol 3 kinase/protein kinase B （PI3K/PKB） pathway are responsible for hormone-dependent cell growth in endometrial carcinoma. PI3K produces phosphatidylinositol- 3-phosphates by phosphory-lating the D3 hydroxyl of phosphoinositides, leading to membrane translocation of PKB,     

LXRs激动剂T0901317通过PI3K/Akt增强人脐静脉内皮细胞的增殖能力

目的 观察肝X受体(liver X receptors,LXRs)激动剂T0901317对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖活性的影响.方法 体外分离和培养原代HUVEC,不同浓度的T0901317(0、0.5、2、5 μmol/L)干预HUVEC48h后,采用MTS法检测HUVEC增殖情况;Western blot检测磷酸化Akt( Ser473)及总Akt的表达.结果 T0901317(0～5μmol/L)呈浓度依赖性的促进HUVEC的增殖(P＜0.01)和上调HUVEC中p-Akt-Ser473的表达(P＜0.01),PI3K抑制剂LY294002(10 μmol/L)和基因转录抑制剂放线菌素-D(actinomycin D,Act-D,5μg/ml)可以阻断T0901317(5 μmol/L)上调p-Akt-Sep473的作用(P＜0.01),提示T0901317通过基因转录调节的方式激活PI3K/Akt信号,此外,PI3K抑制剂LY294002(10 μmol/L)预处理可以逆转T0901317(5μmol/L)促HUVEC增殖作用(P＜0.01).结论 LXRs激动剂T0901317可通过激活PI3 K/Akt信号通路增强HUVEC的增殖能力.     

斯钙素1激活PI3K/Akt/eNOS通路促进内皮祖细胞增殖和迁移

目的 研究斯钙素1(stanniocalcin 1,STC1)对内皮祖细胞(endothelial precusor cells, EPCs)增殖和迁移的影响并探讨其机制.方法 密度梯度离心法分离、培养后,采用荧光双染法鉴定SD大鼠脾源性EPCs.不同浓度人重组斯钙素1(recombinant human stanniocalcin 1,rhSTC 1)处理EPCs,结合siRNA技术干扰EPCs STC1表达,检测EPCs增殖能力及迁移能力的变化;观察STC1对蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及其磷酸化水平的影响;然后观察使用磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)特异性抑制剂LY294002和eNOS特异性抑制剂L-NAME预处理的EPCs对rhSTC1的反应.结果 荧光双染法鉴定EPCs阳性率约为88.5％;外源性给予rhSTC1呈浓度依赖性的促进EPCs增殖与迁移;而干扰内源性STC1的表达,则抑制其增殖与迁移;外源性给予rhSTC1增加EPCs中Akt和eNOS的磷酸化水平,而运用PI3K抑制剂(LY294002)和eNOS抑制剂(L-NAME)分别处理EPCs后,rhSTC1诱导的EPCs增殖与迁移能力明显降低.结论 STC1通过激活PI3K/Akt/eNOS信号通路,增强EPCs增殖、迁移能力,为损伤血管的修复提供了新的靶点.     

胰岛素通过调控PI3K和Erk通路促进人白血病细胞株K562增殖和迁移

目的:观察胰岛素对白血病细胞株K562中PI3K及Erk信号通路的影响及其对K562细胞增殖和迁移的影响?方法:分别采用0?25?50?100和200 nmol/L胰岛素处理K562细胞48 h及200 nmol/L胰岛素处理K562细胞0?12?24和48 h?采用Western blot方法检测K562细胞中PI3K及Erk信号通路的活化情况;采用MTT方法检测胰岛素对K562细胞增殖的影响;采用伤口愈合实验检测胰岛素对K562细胞迁移能力的影响;采用PI3K及Erk信号通路抑制剂LY294002及U0126处理K562细胞,观察PI3K及Erk信号通路在胰岛素促K562细胞增殖和迁移中的作用?结果:同0 nmol/L胰岛素处理组相比,25?50?100?200 nmol/L的胰岛素均可显著上调K562细胞中PI3K及Erk的磷酸化水平,加强K562细胞的增殖能力(P < 0.01)?同0 h组相比,200 nmol/L的胰岛素处理K562细胞12?24和48 h,亦可显著上调K562细胞中PI3K及Erk的磷酸化水平,加强K562细胞的增殖能力(P < 0.01)?同时,同对照组相比,200 nmol/L胰岛素处理48 h后,K562细胞迁移能力均显著增强(P < 0.01)?采用PI3K及Erk信号通路抑制剂LY294002及U0126预处理K562细胞后,胰岛素促K562细胞增殖和迁移的能力显著降低(P < 0.01)?结论:胰岛素可通过激活K562细胞中的PI3K及Erk信号通路,进而增强K562细胞的增殖和迁移能力?     

达格列净对糖尿病大鼠血管内皮功能及PTEN/PI3K/Akt信号通路的影响

目的 探究达格列净对糖尿病大鼠血管内皮功能及PTEN/PI3K/Akt信号通路的影响。方法 将30只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、达格列净组,各10只。模型组、达格列净组成功复制糖尿病模型后,达格列净组给予1 mg/（kg·d）达格列净灌胃处理,连续4周;模型组、对照组分别同时间灌胃等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。采用酶联免疫吸附试验检测血清内皮素1（ET-1）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）水平;苏木精-伊红染色观察大鼠主动脉血管组织病理学变化;Western blotting检测大鼠血管内皮组织PTEN/PI3K/Akt信号通路蛋白的表达。结果 达格列净组大鼠一般情况好于模型组。达格列净组大鼠主动脉病理变化较模型组改善。与对照组比较,模型组、达格列净组大鼠血清ET-1、HIF-1α、VEGF水平升高（P <0.05）,但达格列净组大鼠血清ET-1、HIF-1α、VEGF水平低于模型组（P <0.05）。与对照组比较,模型组、达格列净组大鼠血管内皮组织PTEN蛋白相对表达量降低（P <0.05）,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量升高（P <0.05）;但达格列净组较模型组大鼠血管内皮组织PTEN蛋白相对表达量升高（P <0.05）,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量降低（P <0.05）。结论 达格列净可能通过促进PTEN/PI3K/Akt信号通路活化,改善糖尿病大鼠血管内皮功能损伤,从而防治糖尿病及其并发症的发生。     

ELK1调控PI3K/Akt信号通路促进骨肉瘤细胞增殖及其机制研究

目的 探讨E26转录因子1(ELK1)调控PI3K/Akt信号通路对骨肉瘤细胞增殖能力的影响及其发挥作用的可能机制。方法 Western blotting检测ELK1在骨肉瘤细胞系U2OS、MG-63、HOS及正常成骨细胞hFOB11.9中的相对表达量;选择相对表达量最高的骨肉瘤细胞系进行ELK1 siRNA转染,分为si-NC组、si-ELK1-1组和si-ELK1-2组;MTS检测各组细胞增殖率;平板克隆实验检测各组细胞克隆形成能力;Western blotting检测各组细胞中PI3K/Akt信号通路关键蛋白pPI3K和pAKT的相对表达量;采用PI3K/Akt信号通路激活剂SC79与ELK1 siRNA同时处理骨肉瘤细胞后MTS法检测各组细胞增殖率,平板克隆实验检测各组细胞克隆形成能力。结果 与正常成骨细胞比较,ELK1在骨肉瘤细胞系中的相对表达量均升高（P <0.05）,在U2OS细胞中的相对表达量最高（P <0.05）;U2OS细胞转染ELK1 siRNA,Western blotting结果显示,与si-NC组比较,si-ELK1-1组、si-ELK1-2组U...     

linc00346调控膀胱癌细胞增殖的分子机制

目的：探讨长链非编码RNA-linc00346 调控膀胱癌细胞增殖的分子机制。方法：通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测膀胱尿路上皮癌组织中linc00346 mRNA和PTEN mRNA的表达情况;沉默膀胱癌T24细胞系内linc00346的表达,通过RT-PCR检测T24细胞内的linc00346 mRNA和PTEN mRNA表达变化情况,通过蛋白质印迹（Western blot）法检测T24细胞内PTEN蛋白和PI3K/Akt信号通路中Akt、p-Akt蛋白的表达情况;CCK-8实验检测各组T24细胞的增殖能力。结果：与膀胱正常组织比较,膀胱尿路上皮癌组织中linc00346 mRNA表达上调,而PTEN mRNA的表达水平降低（均P ＜0.05）。沉默linc00346表达后,T24细胞内linc00346 mRNA的表达水平显著下降,PTEN mRNA的表达水平显著上调,PTEN蛋白水平升高,p-Akt蛋白水平降低（均P ＜0.05）;给予PTEN特异性抑制剂SF1670处理后,PTEN蛋白水平显著下调,p-Akt蛋白水平明显增加（均P ＜0.05）。沉默linc00346表达后,T24细胞的增殖能力明显受到抑制,给予SF1670处理后细胞的增殖能力显著增强（均P ＜0.05）。结论：linc00346可以增强膀胱尿路上皮癌细胞的增殖能力,其作用机制可能是通过抑制PTEN表达,激活PI3K/Akt信号通路实现的。