重组人Endostatin/MBP融合蛋白片段的构建及体外抑制内皮细胞增殖活性

肿瘤会产生多种促血管生长因子和血管生长抑制因子,这些因子构成一个动态的平衡体系,调节血管的生成,而血管生成是实体瘤生长与转移的必要条件,故可以通过抑制肿瘤血管生成来抑制肿瘤的生长和转移.1997年,O‘Reilly等发现了一种分子量为20kD的新蛋白,经序列分析证明为鼠胶原蛋白十八的C末端片段,并将其命名为Endostatin.我国徐根兴等也发现了人Endostatin,并从人肝脏cDNA文库中筛选克隆得到人Endostatin基因,经大肠杆菌表达出的人Endo-statin分子量为18kD.Endostatin是一种沉淀蛋白,研究中有一定困难,为此我们采用Endostatin/MBP融合蛋白使其可溶.     

人血管内皮抑素的研究及治疗进展

人血管内皮抑素Endostatin，为胶原XⅧC-末端的氨基酸片段，其能通过抑制血管内皮细胞迁移而抑制肿瘤血管生成，阻断肿瘤细胞的营养供给，从而达到抑制肿瘤增殖或转移目的。Endostatin目前作为新的血管生成抑制类生物制品，已经经过临床Ⅲ期实验，取得了良好效果。现就其进展作一综述。     

Endostatin抗肿瘤机制研究进展

肿瘤的生长转移与肿瘤血管生成密切相关，抗血管生成治疗是抑制肿瘤生长、防止肿瘤转移的新策略。Endostatin是1997年O＇Reilly等从小鼠血管内皮瘤细胞（EOMA）的培养血清中分离出的一种新的内源性血管生成抑制剂，体内外实验证明，它可以特异性地作用于新生血管的内皮细胞，抑制内皮细胞的迁移、诱导其凋亡，从而抑制肿瘤新生血管形成和肿瘤生长。但近年来也有研究表明，Endostatin还可直接抑制某些肿瘤细胞的生长、诱导肿瘤细胞凋亡、Endostatin作为肿瘤抗血管生成治疗的新策略，已显示出良好的临床应用前景。但有关Endostatin的具体作用机制及信号传导通路尚不十分明确，现综述近年来有关Endostatin抗肿瘤机制研究的进展。     

重组人分泌型endostatin的纯化及其抑癌活性探讨

目的：纯化毕赤酵母菌GSll5株表达的分泌型人endostatin蛋白，并对其抑癌活性进行研究。方法：利用SepharoseG—25及Heparin亲和层析柱纯化重组蛋白，并以MTT法测定重组endostatin对人脐静脉血管内皮细胞(ECV-304)增殖的抑制活性；另以HepG2.2．15细胞注射裸鼠成瘤后，体内验证重组蛋白的抑瘤活性。结果：MTT结果显示纯化后的endostatin在体外可特异性抑制人脐静脉内皮细胞的增殖，最高抑制率为86．0％；动物实验证明其可明显抑制荷瘤动物肿瘤的生长。结论：经纯化后的重组endostatin具有较强抑癌活性，将为临床抗血管生成治疗实体瘤研究奠定基础。     

内皮抑素及其抗肿瘤作用的研究进展

新生血管的形成（Angiogenesis）是肿瘤生长转移过程中的必要条件之一,它是一个多因素、多步骤的发展过程。因此控制血管生成己成为抑制肿瘤生长的重要途径之一。内皮抑素（Endostatin）是一种新发现的特异性血管内皮细胞增殖抑制剂,在血管生成过程中起负性调节作用。体外实验表明内皮抑素能有效抑制血管内皮细胞增殖、迁移及新生血管形成,是一种特异性的血管形成抑制剂,     

肿瘤停滞因子的功能与结构

引言美国哈佛医学院的Folkman医师1972年首先提出肿瘤的生长和转移与血管的新生有关[1,2],这观点随后得到了大量的基础研究和临床实验的证明[3]。迄今为止,在体内已发现了多种血管生成的促进和抑制因子,如vascular endothelial growthfactor(VEGF)、angiostatin、endostatin、throm-bospondin-1、canstatin和tumstatin等[4-7]。其中,很多血管生成抑制因子能通过作用于增殖和转移的内皮细胞来抑制肿瘤生长。Tumstatin(肿瘤停滞因子)就是其中一种,而且与其他的血管生成抑制因子不同的是它能选择性地作用于肿瘤血管的内皮细胞,而不影响到正常的内皮细胞。本文报道了肿瘤停滞因子的功能及其结构研究的结果。1肿瘤停滞因子与血管基底膜之间的关系在血管新生的过程中,内皮细胞必须依附于血管基底膜(vascular basement membrane)才能形成血管。血管基底膜是特化的细胞外基质,它不仅对内皮细胞提供了机械的支持,而且也影响细胞的生物学行为,如分化、增殖和迁移等[8]。对基膜的组成进行研究发现,IV型胶原蛋白是组成血管基底...     

重组人血管内皮抑素联合化疗治疗非小细胞肺癌的观察与护理

内皮抑素（endostatin,ES）为内源性抗血管生成因子,特异性地作用于内皮细胞,尤其是微血管的内皮细胞,抑制其迁移,诱导其凋亡,从而抑制血管生成和肿瘤生长,近年来已成为肿瘤治疗的新策略。2006年7月我国国家食品药品监督管理局正式批准重组人血管内皮抑制素（商品名：恩度）上市,成为世界上第一个血管内皮抑制素抗肿瘤新药。我院自2006年9月至今对36例非小细胞肺癌患者使用重组人血管内皮抑制素注射液联合化疗治疗,     

内抑素(endostatin)对移植大肠癌新生血管密度影响的动物实验研究

目的：探讨内皮细胞生长抑素（内抑素endostatin）对裸鼠大肠血管生成的影响及其作用机理，为endostatin的临床应用提供理论依据。方法：采用免疫组化方法检测肿瘤新生血管密度，对用药过程中瘤 体积进行测量，对endostatin抑制肿瘤的效果进行分析。结果：endostatin能够抑制裸鼠大肠癌肿瘤血管生成，减轻肿瘤的血管密度。结论：endostatin通过抑制血管形成抑制肿瘤的生长。     

上皮性卵巢癌中内皮抑素与血管内皮生长因子的表达

肿瘤侵袭和转移与肿瘤新生血管的生成密切相关。内皮抑素（Endostatin）是近期发现的血管生成抑制剂,它能选择性地抑制内皮细胞的增殖并可诱导其凋亡。血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）是目前发现的最为关键的血管形成刺激因子,在实体瘤的发生发展中发挥着重要作用,它能提高血管的通透性,引起血浆蛋白外渗,为新生血管提供必需的基质。     

RNA干扰研究进展

一种能特异性抑制血管内皮细胞生长的抑制因子－内皮抑素（endostatin)，可以抑制内皮细胞的增殖和迁移，在体内具有良好的抗肿瘤效果。内皮抑素的抗肿瘤效果可能与诱导凋亡，以及与原肌球蛋白，黏附受体整合蛋白以及基质金属蛋白酶等重要因子有关。     

Endostatin体外抑制SKOV3细胞生长作用机制的初步研究

背景与目的：肿瘤的侵袭和转移与血管新生密切相关。体内外实验证实，原发性恶性肿瘤细胞中存在多种促进和抑制血管形成因子，抑制血管形成可能成为治疗人类恶性肿瘤最有价值的战略之一。Endostatin是一种特异性血管内皮生长抑制因子，尽管目前研究仍处于实验阶段，但应用前景十分广阔。动物实验已证实Endostatin具有高效抑制肿瘤血管生成，进而抑制肿瘤生长、侵袭和转移的作用，且治疗后不易复发、反复应用不产生耐药性、毒副作用极低、对各期肿瘤均有效等优点。作为治疗用药，Endostatin有希望用于任何病态的血管生成，最近有报道显示Endostatin配合外科手术、化疗、放疗和免疫治疗等传统方法，可显著提高其抗肿瘤效果。本实验研究目的在于探讨人Endostatin对卵巢癌SKOV、细胞生长的抑制作用及其机制。方法：①MTT法检测Endostatin对SKOV3细胞的生长抑制作用；②透射电镜观察Endostatin处理SKOV3细胞后的凋亡情况，流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期；③免疫细胞化学法、RT—PCR法及Western blot法检测Endostatin处理SKOV3细胞后凋亡调控基因bcl-2和bax mRNA和蛋白的表达。结果：Endostatin具有体外抑制SKOV3细胞增殖的作用15μg／ml 72h0．454（A值）明显低于对照组1．369（P〈0．01）；能诱导SKOV3细胞凋亡；Endostatin对SKOV3细胞中bcl-2和bax的表达无明显改变。结论：人Endostatin具有抑制SKOV3细胞生长的作用，其机制可能与诱发细胞凋亡相关。     

贝伐单抗治疗恶性肿瘤相关不良反应的发生机制及处理方法

肿瘤生长和增殖过程中需要新生血管的形成,而血管内皮生长因子(VEGF)在其中起重要的作用.VEGF家族包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D等多个相关因子,而在肿瘤新生血管形成中最重要的是VEGF-A因子,它可促进血管内皮细胞生长、增殖,并与血管内皮细胞产生的生长因子受体相结合,激活下游信号转导通路,最终促进新生血管的生成.贝伐单抗(Bevacizumab)是与VEGF结合的重组人源化单克隆抗体,能与VEGF-A结合,阻止其与VEGF受体的相互作用,起到抗新生血管形成的作用,进而抑制肿瘤生长.     

血管内皮抑制素抗肿瘤作用

血管内皮抑制素(endostatin)是继血管抑素(angiostatin)后发现的另一种特异性内源性血管生成抑制剂,能阻断促进肿瘤血管生长的多种途径,特异地抑制血管内皮细胞的增殖和迁移,从而抑种制肿瘤的生长和转移,又具有抗瘤谱广、毒性低和无获得性耐药性等优点,而且与多种治疗方法联合具有协同作用.     

抗肿瘤新生血管靶向治疗进展

肿瘤的生长和存活依赖于生成的血管为它所提供的氧气和营养物质,没有血管的生成,肿瘤最大也只能长至1～2mm^3。1971年,Folkman等提出可通过阻断肿瘤血管的生成来抑制肿瘤的生长,防止肿瘤的转移。基于肿瘤血管生成机理,抑制肿瘤血管生成的策略包括：（1）利用小分子药物和内源性血管生成抑制因子直接抑制血管内皮细胞增殖、迁移,抑制细胞外基质形成,诱导血管内皮细胞凋亡;（2）利用中和抗体、可溶性受体、受体拮抗剂阻断血管生成因子传递;（3）利用反义核酸或生物因子抑制血管生成促进因子表达。     

肿瘤特异增殖腺病毒CNHK200-hEndo的构建及其抗裸鼠肺癌移植瘤疗效

目的：构建一种携带抗肿瘤血管生成基因Endostatin的新型肿瘤基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo,观察其对人肺癌细胞裸鼠移植瘤的治疗效果。方法：克隆人抗血管生成基因Endostatin,利用病毒重组技术将该基因插入肿瘤特异性增殖腺病毒CNHK200的基因组中,扩增并纯化CNHK200-hEndo病毒。建立裸鼠肺癌细胞移植瘤模型,观察CNHK200-hEndo抗肿瘤的效果,并与非增殖病毒Ad-hEndo对照。结果：成功构建一种新型的基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo,其E1b55kDa蛋白表达缺失。CNHK200-hEndo能在肿瘤细胞内大量增殖并高效表达Endostatin蛋白,表达量明显高于非增殖病毒Ad-hEndo（P〈0.05）。动物实验证实,CNHK200-hEndo对人类肺癌细胞的裸鼠移植瘤模型具有抑制肿瘤生长的疗效,与Ad-hEndo和空白对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：构建的基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo能在肺癌细胞中增殖复制,提高Endostatin蛋白的表达,明显抑制肺癌细胞移植瘤的生长。     

血管抑素研究的新进展

针对某些原发性肿瘤能抑制远处转移性肿瘤和继发性肿瘤的生长 ,或伴随转移性肿瘤的快速生长 ,某些原发性肿瘤能够自发消退的现象 ,学者们先后提出了伴随免疫、营养剔除、抗有丝分裂因子生成和肿瘤生长依赖肿瘤血管生成等学说。免疫组化研究也证实 ,肿瘤的生长与肿瘤组织内血管生长呈现比例关系。数十年中 ,已发现了ＴＮＰ 4 70、ＣＭ 10 1、血小板因子 4和内皮抑素等血管内皮细胞增殖抑制因子 ,干扰素也具有抑制作用 ,它们共同构成了血管增殖抑制因子家族[1] 。1994年Ｏ′Ｒｅｉｌｌｙ等自荷瘤鼠血清和尿液中分离出一个相对分子质量为 38× …     

血管内皮细胞生长抑制因子的研究进展

血管内皮细胞生长抑制因子（vascular endothelial growth inhibitor, VEGI）是一种新型的血管内皮细胞生长抑制因子，属于 TNF超家族，是Ⅱ型跨膜蛋白。重组VEGI 不仅可以抑制内皮细胞增殖和诱导血管内皮细胞凋亡，而且可阻止新生血管生成，从而产生抗肿瘤生长的作用。VEGI作为一个内皮细胞产生的血管生成负调控因子可激活JNK、Ｐ３８ＭＡＰＡ及胱冬肽，也可激活NFκB，从而诱导内皮细胞的凋亡。VEGI的N段部分缺失可影响其生物活性，具有重要的病理生理意义，在肿瘤生物治疗方面有很大的应用前景。     

内皮抑素与脑胶质瘤

内皮抑素是一种内源性血管生成抑制因子,能特异性抑制内皮细胞增殖和迁移,诱导血管内皮细胞凋亡.研究表明脑胶质瘤组织亦可表达内源性内皮抑素,而外源性内皮抑素则能有效抑制胶质瘤生长.     

恩度联合尼莫司汀治疗复发脑胶质瘤的临床观察

血管内皮抑制素（Endostatin）能特异性的抑制内皮细胞的增殖及血管生成,使肿瘤处于休眠状态,从而抑制肿瘤生长。重组人血管内皮抑制素（Endostar,恩度）是我国学者自主研发的新型人血管内皮抑制素,Ⅰ、Ⅱ期临床研究结果证实该药单药应用有效,且恩度与化疗联合可能具有协同作用,因此我们选择恩度联合尼莫司汀治疗复发脑胶质瘤,取得良好的效果,现报告如下。     

大肠癌组织endostatin的表达与血管生成的关系

目的　探讨内皮抑制素 ( endostatin)蛋白在大肠癌组织中的表达及其与 VEGF、微血管密度 ( MVD)的关系。方法　应用免疫组化 S- P法 ,检测 6 8例大肠癌及其正常大肠组织 endostatin表达、VEGF表达及 MVD。结果　 endostatin蛋白可在大肠癌组织的肿瘤细胞、内皮细胞及浸润淋巴细胞中表达。 endostatin表达与 Dukes分期密切相关。endostatin高表达组的 MVD( 12 .35± 4.96 )明显低于 endostatm低表达组 ( 16 .38± 6 .2 8)。 VEGF染色阳性组与阴性组的 endostatin蛋白表达差异无显著性。结论　 endostatin在大肠癌组织的不同类型细胞中出现 ,与大肠癌血管生成密切相关 ,endostatin的表达水平随着 Dukes分期的进展而降低反映了血管生成促进因子和抑制因子之间平衡的转变。