肝癌及其癌旁组织中细胞凋亡抑制蛋白survivin的表达

目的：分析细胞凋亡抑制蛋白survivin在原发性肝癌（HCC）及其癌旁组织中的表达,探讨其在肿瘤血管形成和抵抗肿瘤血管内皮细胞凋亡中的作用。方法：采集HCC癌组织、癌旁组织和正常肝组织标本,通过免疫组织化学方法分析survivin蛋白表达阳性率与HCC病理参数的关系,采用流式细胞术分析survivin蛋白在不同组织中的表达水平,用荧光定量PCR方法分析不同组织中survivin基因的表达水平。结果：survivin蛋白在肝癌组织中表达水平与门静脉癌栓的形成有关联（P<0.05）,与肿瘤大小、包膜、甲胎蛋白（AFP）水平及HCC病理分期均无关联（P＞0.05）;流式细胞术结果,肝癌组织中survivin蛋白表达水平高于癌旁组织和正常肝组织（P<0.05）,癌旁组织中survivin蛋白表达水平高于正常肝组织,但差异无统计学意义（P＞0.05）;荧光定量PCR检测,survivin基因只在肝癌组织中表达,在癌旁组织和正常肝组织中无表达,其表达水平组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论：细胞凋亡抑制蛋白survivin在肝癌组织中表达水平较高,但在癌旁组织中检测不到其基因的表达,survivin蛋白可能是通过旁分泌作用从肝癌病变处进入癌旁组织细胞中发挥抑制细胞凋亡的功能。     

肝癌及癌旁组织中HSP70和bcl-2表达及意义

目的 探讨肝癌及癌旁组织中HSP70和bcl-2表达及意义。方法 应用免疫组织化学Elivision法检测58例肝细胞癌及癌旁组织HSP70和bcl-2表达,并作HE染色,进行肝癌组织学分级（Ⅰ-Ⅳ级,Edmondson-Kondo标准）。结果 58例肝癌中Ⅰ级7例,Ⅱ级28例,Ⅲ级18例。Ⅳ级5例,癌旁有肝硬化改变者47例（81．0％）;HSP70阳性反应产物呈棕黄色颗粒状,主要定位于胞质,部分细胞同时出现核及胞膜着色。癌组织HSP70阳性率（70．7％）及阳性强度明显高于癌旁肝组织（37．9％）,肝癌分化越差,HSP70表达越强。另外,癌旁肝硬化组织中增生的小胆管上皮细胞内HSP70呈普遍中度阳性表达;癌旁肝组织的bcl-2阳性率为77．6％,呈簇状和／或片状分布,癌组织中bcl-2阳性率为19．0％,且阳性细胞数明显少于癌旁组织,多呈碎点状。结论 HSP70表达水平可反映肝癌细胞的增殖及恶性程度,有一定诊断和预后价值;肝癌和癌旁组织bcl-2染色对比显示肝癌细胞发生发展过程中抑凋亡机制减弱;HSP70可能参与肝癌及癌旁细胞的凋亡调控。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中c—myc蛋白表达与细胞凋亡的关系

利用原位脱氧核糖核酸末端转移酶标记技术和ＳＰ免疫组化方法检测了肝细胞癌和癌旁肝组织中细胞凋亡和ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。结果显示，癌组织中凋亡细胞密度明显氏于癌旁组织（Ｐ〈０．０１），ｃ－ｍｙｃ蛋白在癌组织和癌旁肝组织中的阳性率分别为４０％（１２／３０）和８６．７％（２６／３０），差异有显著性，其表达强度亦以癌旁肝组织为强（Ｐ〈０．０１）。结果提示，ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达既可诱导细胞凋亡又可促进细胞增殖     

TACE治疗后肝细胞癌及癌旁组织Fas抗原表达及凋亡指数变化的研究（摘要）

目的 :从细胞凋亡的角度研究肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗原发性肝癌的机制 .方法 :应用免疫组化中LAB -SA (SP)法和TUNE法检测了 2 0例正常的肝组织 ,2 3例TACE治疗后及 3 7例未经TACE治疗的癌及癌旁肝组织中Fas抗原表达及细胞凋亡水平 .结果 :不同肝组织及癌组织中Fas抗原表达及细胞凋亡指数均有显著差异 ,而且Fas抗原表达与细胞凋亡之间存在正相关关系 ,经TACE治疗后的癌及癌旁组织中Fas抗原表达明显增强 ,细胞凋亡指数明显升高 .结论 :TACE治疗原发性肝癌的部分机制可归结为由于TACE刺激和促进了肝癌细胞Fas抗原的表达 ,从…     

肝细胞癌和癌旁肝组织中PTEN蛋白表达及其临床意义

目的：探讨肝细胞癌（HCC）和癌旁肝组织中PTEN蛋白表达及其临床意义。方法：利用SP免疫组织化学技术检测PTEN蛋白在HCC及其癌旁肝组织的表达。结果：PTEN蛋白在HCC中的阳性率和阳性强度均低于癌旁肝组织（P＜0．01）,HCC中PTEN蛋白的表达强度与患者的性别和肿瘤的大小无关（P＞0．05）,但与肿瘤细胞的分化程度明显相关（P＜0．01）,分化愈差,表达愈强。结果：提示检测PTEN蛋白可能对判断HCC的预后具有一定意义。     

原发性肝癌中Bcl—2及Bax蛋白表达与细胞凋亡指数的关系

对２２例人肝细胞癌及癌旁组织分别进行Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ的免疫组织化学研究和ＴＵＮＥＬ技术标记,探讨肝细胞癌中凋亡调控蛋白的表达与凋亡指数的。在肝细胞癌中ＢＣＬ－２蛋白的表达率为２２．７３５,与癌旁组织相比无差异;Ｂａｘ蛋白呈低表达,表达率为４５．４５％,与癌旁组织相比有显著差异;肝癌组织中凋亡指数为９．５５％,低于癌旁组织１５．６８％,二者有显著差异,肝细胞癌的发生民细胞凋亡受到抑制有关,Ｂａｘｆ     

康莱特对小鼠肝癌细胞Hepa1-6增殖和凋亡的影响

目的：探讨不同浓度、不同作用时间康莱特（KLT）注射液对小鼠肝癌细胞Hepa1-6增殖和凋亡的影响。方法：采用MTT比色法观察不同浓度KLT对小鼠肝癌细胞Hepa1-6增殖抑制作用。HE染色光镜下观察细胞结构的改变。流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果：KLT对小鼠肝癌细胞Hepa1-6有明显的抑制效应,呈时间、浓度依赖性（P〈0.01）。光镜下可见细胞形态趋向良性分化。流式细胞仪检测,KLT作用Hepa1-6细胞48 h后,均出现凋亡峰,凋亡率呈浓度依赖性（P〈0.01）。结论：KLT可通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡来抑制小鼠肝癌细胞Hepa1-6的生长。     

SPARCL1基因对肝癌SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响

［摘要］目的: 探讨富含半胱氨酸酸性分泌型糖蛋白类似物1(secreted protein acidic and rich in cysteines like 1,SPARCL1)基因对肝癌SMMC 7721细胞增殖与凋亡的影响。方法: 将肝癌SMMC 7721细胞随机分为5组,即空白对照组,pIRES2 ZsGreen组,pIRES2 ZsGreen SPARCL1组,阴性 siRNA组和SPARCL1 siRNA组,空白对照组不转染,其余4组分别转染pIRES2 ZsGreen空质粒、pIRES2 ZsGreen SPARCL1、阴性 siRNA及SPARCL1 siRNA;蛋白质印迹法检测SPARCL1蛋白表达,同时联合荧光显微镜检测转染效果;MTT法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。 结果： 蛋白质印迹和荧光镜结果同时证实转染效果良好。MTT结果显示5组细胞抑制率差异有统计学意义(F=55.45,P＜0.01),pIRES2 ZsGreen SPARCL1组增殖抑制率明显高于其余4组(P＜0.05);SPARCL1 siRNA组细胞增殖抑制率低于其余4组(P＜0.05)。流式细胞结果显示pIRES2 ZsGreen SPARCL1组凋亡率明显高于其余4组 (P<0.05);SPARCL1 siRNA组凋亡率明显低于其余4组(P＜0.05)。结论： 过表达SPARCL1抑制肝癌细胞SMMC 7721生长和促进凋亡,沉默SPARCL1则反之。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中血管内皮生长因子表达与微血管密 …

用免疫组织化学法研究肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌旁肝组织血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达与微血管（ＭＶ）密度的关系。ＶＥＧＦ在癌旁肝组织中的阳性率较ＨＣＣ中者为高（８５．４％ｖｓ６６．７％,Ｐ〈０．０５）;其表达强度在两者中差异无显著性（Ｐ〉０．０５）,其阳性信号主要位于癌细胞、癌旁肝细胞和血管内皮细胞胞浆。ＨＣＣ中ＭＶ密度明显高于癌肝组织（Ｐ〈０．０１）,并随癌细胞分化程度的降低而升高。结果提示,在     

肝细胞癌及癌旁肝组织中PTEN表达与MAPK磷酸化的相关性

目的：研究肝细胞癌（HCC）及癌旁肝组织中PTEN表达与丝裂素激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK)磷酸化的相关性。方法：利用SP免疫组织化学检测75例HCC及其癌旁肝组织中PTEN蛋白和p42/44^MAPK的表达。结果：①HCC中PTEN蛋白的阳性率（62．7％）和阳性强度明显低于癌旁肝组织（89．3％）（P＜0．01），且阳性信号强度与HCC分化程度相关（P＜0．01），即HCC分化愈差，PTEN蛋白表达愈弱。②HCC中p42/44^MAPK的阳性率（85．3％）和表达强度明显高于癌旁肝组织（34．7％）（P＜0．01），但阳性信号强度与癌细胞分化程度无关（P＞0．05）。③相关性分析表明，HCC及癌旁肝组织中PTEN蛋白表达强度和MAPK磷酸化程度呈明显负相关（P＜0．01）。结论：提示在HCC发生中，可能是由于PTEN蛋白表达降低或缺失，不能有效抑制由致癌因子异常激活的Ras/Raf/MAPK信号转导通路，从而使肝细胞异常增殖和发生恶性转化。     

MMP2和CA50在膀胱移行细胞癌、癌旁组织及正常膀胱组织中的表达及临床意义

膀胱移行细胞癌是泌尿系常见的肿瘤,术后易复发,肿瘤在侵袭和转移过程中基质金属蛋白酶类(MMP2)和糖链抗原CA50起重要作用,采用免疫组化法,联合检测MMP2和CA50在各组织中的表达,据其不同的阳性表达程度,分析其与肿瘤分期、分级的关系及意义.     

肝癌细胞凋亡相关基因bcl—2及bax的表达意义

目的：探讨凋亡抑制基因和凋亡促进基因bax表达与肝癌生物学行为的关系及对肝癌预后的关系。方法：用免疫组化LSAB法测定40例肝癌细胞和16例正常肝组织的bcl-2和bax蛋白表达水平。结果：bcl-2及bax蛋白表达率在正常肝组织及肝细胞分别为12．5％、45．0％、87．5％、52．5％,两组间差异有显著性（P＜0．05）。bcl-1,bax蛋白表达与肿瘤病理分级、分期、淋巴结转移及患者预后相关,结论：bcl-2和bax蛋白的表达与了肝癌的发生及进展,并存在相互作用的关系.bcl-2蛋白表达在肝癌有独立预后价值。     

喉癌及癌旁组织中P53蛋白的表达

应用枸橼酸－ＬＳＡＢ－微波免疫组化技术，。用Ｐ５３单克隆抗体检测了３０例喉鳞癌，癌旁交界处及癌旁０．１，１．０，１．５，２．０ｃｍ处粘膜和４例正常喉粘膜和Ｐ５３蛋白的表达。结果显示；１．Ｐ５３在喉癌组织中的阳性表达率为６３．３％；在癌旁交界处，癌旁０，５，１．０，１．５，２．０ｃｍ处的阳性表达率分别为６０％，３６．７％，１０％，０．０％，０．１＾％；４例正常喉粘膜中无阳性表达，其间差异显著。２．Ｐ     

肝细胞癌中抑制细胞凋亡相关基因的差异表达

目的:研究肝癌细胞系的基因表达概况,筛选表达差异的抑制细胞凋亡相关基因,探索肝细胞癌发生发展机制及肝细胞癌治疗的新靶点?方法:通过基因芯片技术检测肝癌细胞系bel－7402?hep－3b与胎儿肝细胞的全基因组序列,筛选表达差异的抑制细胞凋亡相关基因,采用rt－pcr?免疫组化对部分差异表达基因进行了验证?结果:在检测的54 614个探针组中,bel－7402?hep－3b两株肝癌细胞与胎儿肝脏细胞相比表达共同上调2倍及2倍以上的有1 452个基因;表达下调2倍及2倍以上的有2 054个基因?与抑制细胞凋亡相关表达上调的基因有12个,选取2个基因进行rt－pcr?免疫组化验证,结果与基因芯片结论基本一致?结论:肝细胞癌中有众多的抑制细胞凋亡基因表达增高,通过影响tnf通路?bcl－2蛋白等多种方式共同抑制细胞凋亡,促进肿瘤细胞增殖?对这些基因的研究有助于阐明肝细胞癌发生发展机制,为肝细胞癌的治疗提供新的靶点?     

KSRP对肝癌HepG2细胞增殖、周期及凋亡的影响

目的 探讨KH型剪接调控蛋白(KSRP)对肝细胞癌(HCC)HepG2细胞增殖、周期以及凋亡的影响。方法 使用GEO数据库探讨HCC患者的肿瘤组织及癌旁组织中KSRP的表达水平。实验分为3组：对照组、过表达组KSRP及敲低组shKSRP,使用慢病毒敲低或过表达KSRP,通过嘌呤霉素筛选敲低或过表达KSRP的稳定表达HepG2细胞系,Western blot检测HepG2中KSRP蛋白的表达水平;CCK-8法检测24h、48h、72h和96h时各组HepG2细胞增值率;采用流式细胞术和RNA-seq分别检测shKSRP以及对照组的HepG2细胞周期和抗原KI-67(MKI67)的表达;Annexin V-FITC/PI双染法检测shKSRP以及对照组的HepG2细胞凋亡情况。结果 HCC患者癌组织中KSRP表达较癌旁组织升高(P<0.001);CCK-8法结果表明,敲低KSRP的HepG2细胞增殖明显减慢(P<0.01)。RNA-seq显示,KSRP敲低后可抑制MKI67基因的表达(P<0.05)。流式细胞术检测,KSRP敲低后,将HepG2细胞阻滞于S期(细胞周期),...     

卵巢癌组织及癌旁组织端粒酶活性的表达

目的:探讨卵巢癌组织与癌旁组织端粒酶的表达情况。方法:利用TRAP-银染方法对36例卵巢癌组织标本及时应32例癌旁组织标本检测分析。结果:卵巢癌组织、癌旁组织和卵巢良性肿瘤组织端粒酶表达活性分别为91.67％、3.13％和6.67％,卵巢癌组明显高于其他两组,差异显著P<0.01;癌旁组织与卵巢良性肿瘤之间无显著性差异P>0.05。结论:卵巢癌组织与癌旁组织端粒酶活性表达存在质的区别,为卵巢癌患者保留卵巢功能手术提供理论依据。