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1.
目的:分离并克隆大鼠吗啡依赖相关基因。方法:SD大鼠用递增剂量的吗啡作皮下注射,形成吗啡依赖的动物模型。分离鼠脑的中脑导水管周围灰质、伏核、纹状体等核团,提取总RNA,用mRNA差异显示(diferentialdisplayPCR,DDPCR)的方法,筛选吗啡依赖大鼠特异表达产物的cDNA片段。用3组锚定引物(T12MN,M=A,G,T或C,N=A,C或G)和6组随机引物(AP1~AP6)作不同组合进行PCR扩增。结果:获得了80余个差异表达产物的cDNA片段,经斑点杂交初步筛选,克隆了10个阳性片段,选取4个克隆进行序列分析,获得了4个cDNA片段。结论:通过BLAST数据库序列比较,现已确认获得了4个吗啡依赖表达的新基因片段。 相似文献
2.
目的:研究绞股蓝总皂苷在急性脑缺血再灌注损伤中的抗氧化作用。方法:采用大脑中动脉阻断法(MCAO)造成大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,测定脑亚细胞器内丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量的变化,用透射电镜观察脑组织超微结构。结果:大鼠局灶性脑缺血再灌注后,脑亚细胞器内MDA含量显著升高,SOD含量显著降低。绞股蓝总皂苷能显著降低脑亚细胞器内MDA含量,升高SOD含量,改善脑缺血再灌注损伤导致的脑组织超微结构改变。结论:绞股蓝总皂苷可能通过抗脂质过氧化提高体内抗氧化酶活性,发挥保护脑组织,减轻缺血再灌注损伤的作用。 相似文献
3.
目的:探讨维生素A抑制Shope肿瘤细胞生长的机理。方法:电镜观察Shope肿瘤细胞凋亡的形态学改变;琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段化;流式细胞仪检测凋亡细胞的百分比。结果:电镜下可见VA诱导的Shope肿瘤细胞变小,细胞浆固缩,染色质聚集并靠近核膜,在1.5%琼脂糖凝胶电泳中,Shope肿瘤细胞DNA呈现明显的阶梯状图谱。流式细胞仪检测经10^-5MVA作用24h、48h、72h后,凋亡细胞百分比 相似文献
4.
针灸治疗窒息脑瘫幼鼠的实验研究 总被引:5,自引:0,他引:5
窒息后脑瘫患儿的治疗及功能恢复是目前世界医学界研究的重点课题 ,针灸治疗临床效果较满意 ,但其作用机理以及对脑细胞功能恢复的影响研究甚少。本研究利用新生大鼠窒息后实验性脑瘫动物模型 ,观察针刺治疗窒息脑瘫幼鼠后在脑部血流量、脑细胞水肿、脑组织中一氧化氮 (nitricoxide ,NO)水平 ,以及氧自由基损伤产物丙二醛 (malondialdehyde ,MDA)等水平变化 ,观察针刺治疗的效果。1 材料和方法1.1 动物分组 :新生 7日龄Sprague Dawley大鼠92只 ,体质量 11~ 17g ,由河北医科大学实验动物中… 相似文献
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血塞通对缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察血塞通预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤脑细胞凋亡的影响。方法:采用线栓法复制大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型,检测再灌注后缺血脑细胞凋亡情况,并测定脑组织Ca^2+含量变化。结果:血塞通能减轻缺血脑组织脑细胞的凋亡(P〈0.01),能降低脑组织Ca^2+含量(P〈0.01)。结论:血塞通对大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤具有明显保护作用,可能与其降低脑组织钙含量、减轻脑细胞凋亡有关。 相似文献
6.
采用四氯化碳(CCl4)制成原代培养大鼠肝细胞损伤模型,观察了绞股蓝总皂甙(GPS)对肝细胞损伤的保护作用。结果表明,预先用GPS处理肝细胞1hr,可明显减轻CCl4引起的肝细胞DNA合成速率降低,减少肝细胞ALT逸出,抑制增减上清液中MDA含量的升高和SOD/MDA比值的缩小,并与GPS浓度呈依赖关系。提示GPS能减轻CCL4能减轻CCl4对离体培养的大鼠肝细胞损伤,保护肝细胞DNA合成,其作用 相似文献
7.
采用四氯化碳(CCl_4)制成原代培养大鼠肝细胞损伤模型,观察了绞股蓝总皂甙(GPS)对肝细胞损伤的保护作用。结果表明,预先用GPS处理肝细胞1hr,可明显减轻CCl_4引起的肝细胞DNA合成速率降低,减少肝细胞ALT逸出,抑制培养上清液中MDA含量的升高和SOD/MDA比值的缩小,并与GPS浓度呈依赖关系。提示GPS能减轻CCL_4能减轻CCl_4对离体培养的大鼠肝细胞损伤,保护肝细胞DNA合成,其作用机理与抗脂质过氧化有关。 相似文献
8.
目的:观察N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801对脑损伤后脑水肿的影响,并探讨其作用机理。方法:45只SD大鼠,随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组15只。根据Marmarou’s法,将大鼠制成加速性弥漫性脑损伤模型。采用干湿重法、Ito’s法分别检测脑组织含水量和脑组织Na^+、K^+、Ca^2+、Mg^2+含量。结果:①损伤组脑组织含水量、Na^+、Ca^+含量显著高于对照 相似文献
9.
目的观察诱导型一氧化氮合酶抑制剂-氨基胍(AG)对大鼠脊髓损伤后运动功能的影响。方法大鼠脊髓压迫伤后给予AG进行治疗,24 h后用分光光度法测定脊髓组织中一氧化氮(NO)含量和NOS活性;72 h后用流式细胞仪检测神经细胞凋亡情况;4周后用电生理和动物行为学等指标评价运动功能的恢复情况。以正常大鼠和损伤未治大鼠为对照。结果AG可以抑制组织中的NO含量和NOS活性,同时降低神经细胞的凋亡比率,提高动物后肢运动功能评分,恢复运动诱发电位的振幅和潜伏期,与对照及损伤未治大鼠相比均有显著差异(P<0.05)。结论脊髓损伤后应用NOS抑制剂可以使伤后运动功能得到改善,提示iNOS活性变化可能对脊髓损伤的恢复更具决定作用,其作用机制与抑制伤后细胞凋亡有关。 相似文献
10.
灯盏乙素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:观察灯盏乙素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:采用大脑中动脉栓线阻断法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型,用TTC染色检测灯盏乙素对再灌注损伤大鼠脑梗死体积的影响,用流式细胞术检测细胞凋亡百分率,用免疫组织化学和RT-PCR技术检测诱导细胞凋亡Cas-pase-3mRNA及其蛋白的表达。结果:灯盏乙素应用于缺血再灌注损伤大鼠可明显缩小脑梗死体积,降低脑细胞凋亡百分率,抑制脑组织Caspase-3mRNA及其蛋白的表达。结论:灯盏乙素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制脑缺血后神经细胞凋亡有关,与抑制诱导凋亡Cas-pase-3mRNA及其蛋白的表达有关。 相似文献
11.
目的:研究内皮素-1对肾小球系膜细胞周期G1期进展的调控机制。方法:应用免疫组织化学、免疫印迹分析等技术检测系膜细胞在内皮素-1刺激增殖时,细胞内G1期调控蛋白cyclinD1和cdk4表达的变化。结果:正常指数式生长的系股细胞核内表达二种蛋白,在内皮素1刺激下G1期进展中cyclinD1表达增加,cdk4表达变化不明显。结论:cyclinD1是体外培养肾小球系膜细胞针对炎症因子内皮素1刺激时G1期进展的重要调节蛋白。 相似文献
12.
阐明肾小管上皮细胞损伤及再生过程中细胞凋亡的意义。方法:给Wistar大鼠腹腔注射庆大霉素,分别造成急性和慢性肾小管损伤模型,不同时间宰杀。用原位末端标记法及DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡,增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化观察增殖情况。将不同浓度的庆大霉素加入培养的大鼠肾小管上皮细胞诱导凋亡。结果:大剂量庆大霉素主要造成肾小管上皮细胞坏死,少量细胞凋亡。小剂量庆大霉素长时间作用以空泡变性、凋亡为主。各个时间点后者的凋亡细胞数均高于前者。肾小管上皮细胞第5天出现再生,第9天达高峰,细胞凋亡于第5天出现第一个高峰,第12天出现第二个高峰,发生于再生高峰之后。体外实验中,小剂量庆大霉素引起较多细胞凋亡,大剂量庆大霉素主要引起细胞坏死。结论:大剂量庆大霉素造成肾小管上皮损伤以坏死为主,小剂量庆大霉素造成肾小管上皮细胞损伤以变性、凋亡为主。凋亡在肾小管上皮细胞再生过程中,有重要的修饰和改建作用。 相似文献
13.
目的:探讨细胞因子对血小板生成素(thrombopoietin,TPO)及其受体表达水平的调控方式。方法:Feulgen染色结合图像分析测定HEL细胞DNA含量的变化,细胞传感器检测TPO与其受体MPL的特异结合,非放射性同位素细胞原位杂交法检测cmpl,tpomRNA。结果:rhTPO使cmplmRNA下调,IL3使cmplmRNA上调,EPO(erythropoietin)使cmplmRNA下调;未发现rhTPO、IL3、GMCSF、EPO影响tpomRNA的转录。结论:MPL是在转录水平调控的 相似文献
14.
目的:研究同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)对心肌细胞钙摄取的影响及其作用机制。方法:采用同位素技术测定培养大鼠心肌细胞钙的摄取,观察不同HCY浓度对培养心肌细胞钙摄取的影响及蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)抑制剂或蛋白磷酸酶抑制剂与HCY同时培养对培养心肌细胞钙摄取的影响。结果:HCY呈浓度依赖性促进心肌细胞钙的摄取,HCY促进心肌细胞钙摄取的作用为PKC抑制剂H7和多粘菌素(polymycinB,PB)所抑制,并且受蛋白磷酸酶抑制剂Okadaicacid作用而增强。结论:HCY促进心肌细胞钙摄取,可能与PKC所介导的蛋白磷酸化过程有关。 相似文献
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目的:为提高卵巢癌抗独特型抗体的免疫原性,构建表达6B11scFv/hGMCSF融合蛋白质,并对其活性进行测定。方法:用DNA重组技术,将以前构建的6B11scFvLinkerhGMCSF融合基因克隆至pET16(a+)表达载体,表达可溶蛋白质。用ELISA分析技术和细胞增殖试验测定融合蛋白质的抗体和细胞因子活性。结果:融合蛋白质实现可溶表达,能与COC1669单抗和小鼠抗人GMCSF单抗特异结合,并能刺激GMCSF依赖株增殖。结论:融合蛋白质保留了2种蛋白质的活性,为进一步研究其功能和临床应用提供基础 相似文献
16.
目的:观察血管平滑肌细胞(VSMC)牛磺酸跨膜转运的特征及缺氧-复氧损伤后的改变。方法:用3H标记的牛磺酸在培养的家兔主动脉VSMC上进行实验。结果:VSMC的牛磺酸转运是钠浓度依赖的高亲和转运,Na+-K+-ATP酶抑制剂哇巴因呈浓度依赖性地抑制其转运。VSMC经缺氧-复氧处理后Vmax下降34%(P<0.01),但Km值无明显改变。结论:VSMC具有高亲和牛磺酸转运系统,缺氧-复氧处理可能损伤这一转运系统。 相似文献
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反义端粒酶RNA对肺癌细胞A549抑制作用研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨反义人端粒酶RNA(human telomeric,RNA,hTR)对肺癌细胞A549端粒酶活性和细胞增殖的抑制作用,研究以端粒酶为靶的肺癌基因治疗的可能性。方法 将端粒酶hTR的cDNA反向插入到逆转录病毒载体pLXRN中,转染包装细胞PT67后获得反义hTR重组病毒,感染肺癌细胞A549。处理前后采用TRAP法检测端粒酶活性,光镜观察细胞形态,DNA电泳观察凋亡情况。结果 作用后端粒酶活性和细胞增殖受到明显抑制,并出现明显的细胞凋亡。结论 反义hTR 对肺癌细胞A549端粒酶活性具有明显的抑制作用,使肺癌细胞A549生长抑制,促进细胞凋亡。 相似文献
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目的:探讨超氧化物歧化酶(SOD)对肝癌细胞增殖的抑制作用。方法:利用逆转录病毒载体介导的基因转移技术,将人铜锌SOD基因导入人肝癌细胞系HepG2细胞内,获得高表达。检测其对HepG2细胞生物学特性的影响。结果:与对照相比SOD基因转染后的肝癌细胞生长受到抑制,细胞体积变大,分裂象减少,S期细胞比率减少,软琼脂集落形成率低,裸鼠成瘤瘤体小。结论:铜锌SOD基因具有抑制HepG2肝癌细胞增殖的作用。 相似文献
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过氧亚硝基阴离子致豚鼠气道反应性增高的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨过氧亚硝基阴离子(ONPP-)在气道上皮损伤致气道高反应性中的作用。方法 以离体豚鼠气管条建立组织胺累积-浓度反应曲线,电镜观察气道上皮细胞的形态学变化。结果 豚鼠气管条与ONOO-孵育后,气管条的反应性增高,同时电镜观察有气道上皮细胞损伤脱落。结论 ONOO-参与了气道上皮细胞的损伤,并导致了气道高反应笥的形成。 相似文献
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目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞体外向神经细胞诱导分化的潜能,及分化后的凋亡情况?方法:体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,用含有表皮生长因子(EGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的诱导培养基对第三代MSCs进行诱导分化,诱导分化的细胞按分化时间3?7?14 d分成A?B?C三组?三组诱导分化细胞分别进行NSE免疫组织化学,MAP2免疫荧光化学以及TUNEL凋亡细胞检测?结果:A?B?C三组细胞在细胞形态上与神经细胞相似,并且表达神经细胞特异性标记抗原NSE?MAP2,但是C组细胞表达强度弱于B组,并且阳性细胞比例少于B组(P < 0.05)?A?B?C三组TUNEL凋亡阳性细胞比例呈逐渐增多趋势(P < 0.05)?结论:含有表皮生长因子(EGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的诱导培养基可以诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化,随着诱导时间的推移,分化细胞状态下降,凋亡比例增多? 相似文献