125I-白蛋白-黄芪多糖毫微粒在小鼠体内分布的研究

用乳液固化方法制备了１２５Ｉ－牛血清白蛋白－黄芪多糖毫微粒,透射电子显微镜测得粒径为（１６８±６２）ｎｍ,小鼠口服毫微粒（１４８×１０８Ｂｑ／只）后,主要分布在肝、脾、肺中,而心、脑组织中有少量分布。微观放射自显影实验结果表明,毫微粒分布在肝脏的Ｋｕｆｅｒｓ细胞和肝实质细胞中,以及在肺和脾脏的吞噬细胞中。实验数据用３Ｐ８７程序处理,按血管外给药开放二室模型计算得代谢动力参数,Ｔｍａｘ为２．１１ｈ,Ｃｍａｘ为２．４３×１０７Ｂｑ,ｔ１／２为９．３３ｈ,曲线下面积为３．７×１０９Ｂｑ。     

~(125)碘标记单克隆抗体检测钩端螺旋体抗原在豚鼠体内的分布

作者用~(125)碘标记抗黄疸出血群赖型017株钩体的McAb(LB_1株IgG_2b)静脉注入钩体病肺弥漫性出血型豚鼠,证实钩体抗原主要分布在肝、肾、肺及脾器官内。以往抗血清抗体放射自显影实验在肺内钩体抗原很少,本结果表明肺内有不少钩体抗原(平均为82.2 16×10~3cpm/200mg),揭示了用单克隆抗体结合~(125)碘探讨钩体特异性抗原在肺组织分布,具有高特异性和敏感性。     

~(125)Ⅰ标记铁传递蛋白作移植性人肝癌LTNR_1裸大鼠的扫描

以移植性人肝癌LTNR_1裸大鼠为模型,观察肝癌组织对碘标记铁传递蛋白(~(125)I-t_f)的摄取。结果表明从尾静脉注射~(125)I-T_f后48～72h,肝癌组织对~(125)I-T_f的摄取比同一动物肝脏及其他各组织显著增高。肝癌/肝放射强度比平均为3.58,肝癌/血放射强度比为1.80。肝癌与其他各组织的放射强度比,除甲状腺、肺、脊椎较低外,均在3以上。注射~(125)I-T_f后,自24h起,每隔24h对癌鼠作全身γ-闪烁显象,阳性显象以72h最清晰。     

天然杀伤活性的测定——(1)体外8h(125)I-UdR释放试验

用~(125)I—UdR标记靶YAC—1细胞建立8h~(125)I-UdR释放试验(8IRA),体外测定小鼠脾脏细胞NK活性。靶细胞标记的理想条件是:YAC—1细胞2×10~5/ml;加~(1250I-UdR74～111kBq/L;FUdR3×10~(-5)mol/L;在37℃、5%CO_2湿环境中培养5～7h,其~(125)I-UdR掺入量(标记率)为0.5cpm/细胞以上。影响~(125)I-UdR释放因素的研究表明,采用8IRA时,自发释放率在20%以下,而且NK活性的测定结果也稳定。     

肝靶向载药缓释毫微粒的研究进展

临床用药后药物的体内分布和代谢是影响其治疗效果的重要因素。改变药物在体内分布和代谢的途径之一是将其包封于亚微粒药物载体中。在这些载体中 ,脂质体、毫微粒 (ＮＰ)及药质体已得到广泛研究。目前 ,人用脂质体的发展仍受到限制 ,主要问题是其不稳定 ,泄漏快及贮存期变质。为克服这些缺点 ,自 70年代末以来研究了聚合物毫微粒 (纳米级的颗粒 )的制备。毫微粒是毫微球和毫微囊的统称 ,其粒径大小为 10～10 0 0ｎｍ之间 ,由大分子物质构成并可作为药物载体[1] 。本文就肝靶向载药缓释毫微粒的研究进展综述如下。1　毫微粒的靶向性毫微粒作…     

用正交设计研究~(125)I—SOD的标记条件

选用正交设计 L_(16)(4~5)表对影响~(125)I 标记 SOD 的5个因素(标记温度、氯胺T 加入量、标记反应时间、PB 缓冲液浓度和缓冲液体积),每个因素的4个不同水平进行了研究。标记产物~(125)I-SOD 用 Sephadex G25色层柱进行分离,测定~(125)I 的标记率和~(125)I-SOD的相对活度,仅做16组试验,即可确定最佳标记条件。试验结果表明,对50μgSOD,标记温度为10℃,氯胺 T 加入量为30μg,标记反应时间为2min,PB 溶液浓度为0.1mol/L,PB 溶液体积为50μl 时,~(125)I 的标记率可达75.9%,~(125)I-SOD 的相对活度可保持在94.7%;用纸色层法分析了~(125)I-SOD 产品的放射化学纯度,可达95%以上;估算了~(125)I-SOD 产品的比活度,为～1.12×10~5Bq/μg SOD。     

睾丸细胞膜的分离鉴定及hCG受体的检测

本文应用蔗糖密度梯度离心的方法进行大鼠睾丸细胞膜分离,并以此作为膜制剂进行hCG受体的检测。结果显示,用经过蔗糖密度梯度离心方法分离的睾丸细胞膜进行hCG受体放射分析,膜制剂为200μg,30℃孵育4h时,~(125)I-hCG的饱和点为4.5ng。Scatchard分析显示B_(max)=29.59fmol/mg·pr,解离常数kd=3.69×10~(-10)mol/L,具备受体可饱和、低结合容量、高亲和力的特点。因此,我们认为用蔗糖密度梯度离心的方法分离的睾丸细胞膜完全可用于hCG受体的分析。     

3H-TdR标记人骨髓间充质干细胞移植治疗mdx鼠的实验研究

目的 探讨人骨髓间充质干细胞移植mdx鼠能否修复骨骼肌肌膜病变及干细胞在其体内的分布特点.方法 用氚-脱氧胸腺嘧啶(3H-TdR)标记人骨髓间充质干细胞(hBM-MSCs),以每只鼠干细胞1×10⁷/0.3 ml经尾静脉注入18只免疫抑制的mdx鼠(8～10周龄).于移植后24 h、48 h、2周、1月、2月、4月处死鼠,分别测定各组织器官的放射活性;用免疫荧光法检测骨骼肌肌膜营养障碍基因(dystrophin,Dys)表达情况.结果 移植后1月,多数组织、器官放射活性显著高于对照组,其中以骨髓、肝、脾放射活性增高更为明显.大多数组织器官放射活性随时间推移逐渐下降,而骨骼肌放射活性的从2周时开始逐渐升高,于1月时达到高峰(27.6±3.3 Bq/mg湿重).1月之后,骨髓、骨骼肌放射活性仍保持较高水平.免疫荧光显示移植后24 h、48 h、2周骨骼肌Dys免疫荧光呈阴性,1月后呈阳性,1月、2月、4月阳性率分别为:6.6%、8.4%、8.9%.结论 hBM-MSCs能植入mdx鼠体内,并融合、分化为骨骼肌,部分修复骨骼肌肌膜病变;hBM-MSCs移植入mdx鼠后早期主要分布在骨髓、肝、脾,后期主要分布在骨髓、骨骼肌.     

毫微粒制剂在医药上的应用

毫微粒是一类以天然或合成高分子物质为载体的载药细微颗粒。包括毫微球和毫微囊 ,直径一般为 1～ 1 0 0 0ｎｍ。自 1 976年Ｂｉｒｒｅｎｂａｃｋ首先提出以来已引起各国科学家的广泛注意 ,并得到了迅速发展。毫微粒所用载体为高分子生物降解材料 ,具有较高载药量 ,在体内可生物降解 ,具一定粘附性。毫微粒粒径非常小 ,尤适于非胃肠道给药。静脉注射后 ,主要分布于肝、脾、肺 ,少量进入骨髓[1] 。如改变毫微粒材料或接上抗体等 ,则其在体内的分布也可改变。因毫微粒体内的分布特性及载体本身具有的特点 ,使毫微粒具有以下优点 :(1 )具靶向性…     

~(125)I标记MISO及动物实验的初步探索

采用过氧乙酸法使~(125)I标记放射增敏剂MISO,标记率大于80％,高时达90％以上。研究了~(125)I-MISO在动物体内的组织分布,结果显示在静脉注射后3小时,H_(22)荷瘤鼠及EMT-6荷瘤鼠的肿瘤/血液比分别是1.09与1.00。活体闪烁显像及放射自显影均显示肿瘤区有部分放射性浓聚,但不及肝、肺、肠等组织明显。     

半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在正常大鼠体内的分布特征

目的观察半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒(ADR-GHMN)在正常肝脏中的靶向性,并观察ADR-GHMN在全身各脏器的分布特征.方法使用放射示踪技术,用125I标记纳米粒.肝动脉注射,分别于注药后5、15、30、60、120min处死,立即取肝、肾、心、肺、小肠、脾、及周围血作γ计数.结果半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在注射后5 min后最高,为15054.4 CPM/g,各时相前者的肝摄取率均为同时刻后者的2,3倍.两药在肝、肾、心、肺、小肠、脾、及周围血的分布有高度显著性(P＜0.05).结论半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在正常肝组织中有明显的主动靶向性,半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒主要分布肝脏,其它的脏器含量少.     

碱性成纤维细胞生长因子对胎盘屏障通透性的实验研究

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)能否通过胎盘屏障而对胎儿发挥其神经营养作用。方法：怀孕16d（孕中期）Wistar孕鼠,用^125I标记的bFGF（^125I-bFGF)经腹腔注射,30min后取孕鼠血清及胎鼠脑、心、肝、脾、肺,检测和比较各组织bFGF的放射活性,并以同一注射剂量的^125I-bFGF在肝脏的分布含量为参照,比较胎鼠脑、新生鼠脑和成年鼠脑与肝脏含量比。结果：（1）胎鼠体内有^125I-bFGF的分布,且随外源性^125I-bFGF注射剂量增加而升高。（2）在安全剂量范围（5－500ng/g）内,外源bFGF剂量增加到一定值（150ng/g）时,胎盘屏障通透性明显提高。（3）注射相同剂量^125I-bFGF,与胎鼠其他器官相比,胎鼠脑组织内^125I-bFGF含量很少。（4）以肝组织^125I-bFGF含量作参照,与新生鼠脑及成年鼠脑相比,外源性^125I-bFGF在胎鼠脑含量最高。结论：bFGF能够部分通过胎盘屏障进入胎脑。     

磁性Fe3O4纳米颗粒对大鼠脏器组织中Caveolin-1和Clathrin Heavy Chain蛋白表达的影响

目的：探讨磁性Fe₃O₄纳米颗粒对大鼠主要脏器组织中Caveolin-1及Clathrin Heavy Chain蛋白表达的影响,阐明其作用机制。方法：将24只Wistar大鼠按体质量随机分成对照组和低、中、高剂量磁性Fe₃O₄纳米颗粒组,尾静脉注射不同剂量磁性Fe₃O₄纳米颗粒24h后取脏器组织,Western blotting法检测大鼠主要脏器组织中Caveolin-1及Clathrin Heavy Chain蛋白的表达水平,荧光实时定量PCR法检测大鼠主要脏器组织中Caveolin-1及Clathrin Heavy Chain mRNA的表达水平。结果：与对照组比较,中和高剂量组大鼠肝脏和脾脏组织中Clathrin Heavy Chain蛋白和mRNA表达水平明显升高（P<0.05）。高剂量组大鼠肾脏组织中Clathrin Heavy Chain mRNA的表达水平与其他3组比较明显升高（P<0.05）。Caveolin-1蛋白表达水平在各剂量组之间比较差异无统计学意义（P>0.05）;与对照组比较,低、中和高剂量组大鼠肝脏、肺脏和脾脏组织中Caveolin-1 mRNA表达水平明显升高（P<0.05）;各组肾脏组织中Caveolin-1mRNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论：磁性Fe₃O₄纳米颗粒能够诱导大鼠肝脏、肺脏、脾脏中Clathrin Heavy Chain蛋白表达增强,通过Clathrin Heavy Chain蛋白的内吞作用是磁性Fe₃O₄纳米颗粒进入大鼠肝脏、肺脏和脾脏细胞的途径之一。     

Liver targeting and the delayed drug release of the nanoparticles of adriamycin polybutylcyanoacrylate in mice

Background Liver targeting drug delivery systems can improve the curative effects and relieve the cytotoxicity of the chemotherapy drugs in the treatment of liver diseases. Nanoparticles carrying therapeutic drugs are currently under hot investigation with great clinical significance. This study was aimed to investigate the different tissue distribution of the adriamycin polybutylcyanoacrylate nanoparticle (ADM-PBCA-NP) in the mice body after an injection via lateral tail vein, and to study the liver targeting effects of ADM-PBCA-NP in different diameters on normal mice liver. Methods One hundred and eighty Kunming mice were randomly divided into 6 groups with 30 mice in each group (5 treatment groups of ADM-PBCA-NP in the different diameter ranges, non-conjugated free adriamycin injection was employed as the control group). A single dose of either conjugated or free adriamycin equaled 2 mg/kg of body weight was delivered via the tail vein. Five mice in each trail were sacrificed at 5, 15, 30 minutes, 1, 5 and 12 hours postinjection, respectively. The adriamycin concentrations in the respectively collected liver, kidney, spleen, heart, lung and plasma were demonstrated using a high performance liquid chromatography with fluorescence detector. Results Compared with the control group, adriamycin was hardly detected in the heart muscle of the treatment groups (P&lt;0.05). The nanoparticle-conjugated adriamycin was cleaned up quickly from the kidney tissue. The adriamycin concentrations of the mice liver and spleen in the experimental groups were significantly higher than that in the control group, except for the group with the nanoparticles diameters of (22.3±6.2) nm (P&lt;0.05). The ADM-PBCA-NP in (101.0±20.3) nm diameter had the highest liver distribution, and the second highest adriamycin distribution in liver was the group of (143.0±23.5) nm diameter (P&lt;0.05). Moreover, adriamycin was released slowly in the liver during the detection period in the experimental groups. ADM-PBCA-NP in (22.3±6.2) nm diameter was not distributed in the tissue of the liver, kidney, heart, spleen, and lung. Conclusions ADM-PBCA-NP in 100－150 nm diameter range has the best liver targeting with a characteristic of slow medicine release. It also decreases the medicine distribution in the heart, kidney and lung. In the treatment of liver cancer, the polybutylcyanoacrylate nanoparticles system has a good liver targeting ability, which increases the anticancer activity and markedly decreases the toxicity of adriamycin.     

大鼠肝,脾,肺对疟原虫子孢子的拘捕及与巨噬细胞活性的关系

大鼠感染~(125)I标记的约氏疟原虫子孢子后2h,子孢子在肝、脾、肺的含量分别为1.67％、0.046％、0.49％。2～18 h子孢子在肝的分布下降缓慢;脾内基本保持恒定;肺内下降较快。活体灌注子孢子,较大流速不影响肝对子孢子的拘捕率,但使肺的拘捕率显著降低。巨噬细胞吞噬活性增加的大鼠肝、脾脏内子孢子含量高于巨噬细胞吞噬活性受抑制的大鼠,肺内子孢子含量不受巨噬细胞吞噬活性影响。实验结果表明肺对子孢子的拘捕主要为机械性拘捕,肺巨噬细胞在子孢子入侵过程中的作用不大;肝、脾对子孢子的拘捕以巨噬细胞的生物性拘捕为主。     

BALB/c小鼠结肠癌肝转移模型建立

目的建立BALB/c小鼠结肠癌肝转移模型。方法以BALB/c小鼠为对象,随机分为3组,分别经腹腔脾脏内（分为保脾组和切脾组）、直肠粘膜内注射小鼠结肠癌CT-26细胞0.2ml（浓度为1×107 ml）,观察小鼠平均生存期、成瘤情况、肝转移率、肝脏转移肿瘤大小和其他脏器的转移情况。结果这3种方法均能建立大肠癌肝转移模型,切脾组小鼠平均生存期为（28±5）d,肝转移率为100%,均有肺、胃、膈肌转移及腹水形成,保脾组小鼠平均生存期为（30±5）d,肝转移率为95%,均有肺、胃、膈肌转移及腹水形成;直肠黏膜内注射组小鼠平均生存期为（20±5）d,肝转移率为30%,无肺、胃、膈肌转移及腹水形成。结论保脾组和切脾组比直肠黏膜注射组的成瘤率、转移率更高,小鼠平均生存期较长,同时也增加了其他脏器的肿瘤转移率,建模更稳定,观察期能更好地完成各项指标的评价。     

外加磁场对半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在大鼠体内分布影响的研究

目的观察半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒(ADR-GHMN)在正常肝脏中的靶向性,并观察ADR-GHMN在全身各脏器的分布特征及外加磁场对其分布的影响.方法大鼠正中开腹,肝动脉插管并固定,肝动脉注射125I-ADR-GHMN(相当于阿霉素0.5 mg/kg),左外叶加磁场,磁场应用30 min,移去磁场后,动物立即处死;对照组:肝动脉注射ADR-GHMN,左外叶不加磁场,30min后,移去磁场后,动物立即处死,立即取靶区肝、非靶区肝、肾、心、肺、小肠、脾及周围血作γ计数.肝组织作病理切片.结果注入的纳米粒75～85%分布于肝脏,其它脏器极少.病理切片显示磁区小动脉见大量纳米粒存在,对照组及非磁区肝中纳米粒很少见.结论ADR-GHMN在正常肝组织中有明显的磁靶向性;在磁场作用下,ADR-GHMN主要分布于肝脏,其它脏器含量很少;试验组肾、心、肺、小肠、脾及外周血于对照组的放射活性比较明显降低,表明磁性物质的存在使这些脏器的相对药物暴露明显减少.     

漆黄素及漆黄素纳米粒对卵巢癌细胞作用的研究

目的 探讨一种新的饮食性黄酮类化合物——漆黄素及漆黄素纳米粒对人卵巢癌细胞株SK0V3的抗增殖和促凋亡作用。 方法 体外实验采用MTT法测定漆黄素和漆黄素纳米粒作用后对卵巢癌细胞存活率的影响，选取下一步实验的药物浓度。裸鼠荷瘤后取肿瘤块制成SKOV3细胞混合液。取15只裸鼠腹腔接种人卵巢癌SKOV3细胞混合液肿瘤造模，第5天随机分成3组尾静脉注射药物，每3 d注射1次，每次0.2 mL，共12次:A组为肿瘤模型组（注射50 mL/L葡萄糖溶液），B组为漆黄素组（注射1.25 mg/kg漆黄素），C组为漆黄素纳米粒组（注射1.25 mg/kg漆黄素的米粒）。治疗结束后记录肿瘤质量，取心、肝、脾、肺和肾切片行HE染色观察组织病理损害，肿瘤组织切片通过Ki67免疫组织化学染色检测SKOV3细胞增殖，TUNEL法检测SKOV3细胞凋亡。 结果 MTT结果显示，随漆黄素及漆黄素纳米粒质量浓度的增加，SKOV3细胞的存活率减小；漆黄素及漆黄素纳米粒半数抑制浓度（IC₅₀）值分别为125~250 μg/mL和62.5~125 μg/mL，故选择工作浓度为125 μg/mL。共11只小鼠完成体内肿瘤造模并存活至实验结束（A组3只，B组4只，C组4只）。A组裸鼠腹腔内散在菜花状肿瘤结节，B、C组仅见极小颗粒状肿瘤结节，B、C组腹腔内肿瘤质量相当（P>0.05），但均低于A组（P<0.05）。各组心、肝、脾、肺和肾切片HE染色均未见明显损害。与A组相比，B组和C组肿瘤组织增殖指数Ki67均降低，细胞凋亡率均升高（P<0.05），但B组和C组之间差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 漆黄素及漆黄素纳米粒均具有抗卵巢癌细胞增殖和促进其凋亡的作用，安全性好。     

多发伤合并休克早期大鼠多脏器细胞凋亡的观察

目的探讨多发伤合并休克早期大鼠多个脏器中细胞凋亡的发生情况及其意义。方法应用ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳、光镜和电镜、原位末端标记法（ＩＳＥＬ）,并测定ＤＮＡ片段百分率（ａｐ％）,观察细胞凋亡情况。结果在胸腺、脾、肝、肺和小肠中均检测到凋亡所特有的ＤＮＡ梯形条带,而心、肾、脑则否。在复苏后６小时,胸腺、脾、肝、肺和小肠的ａｐ％均随创伤程度的加重而升高;在６处创伤合并休克组,复苏后１小时这５个脏器的ａｐ％均已显著升高,３小时升高更为显著,此时脾、肝、肺和小肠已达顶峰,以后逐渐下降,胸腺则于３小时后继续升高,６小时后趋于平稳至２４小时。ＩＳＥＬ法发现８个脏器均呈现不同程度的阳性反应。形态学显示,胸腺中凋亡主要发生于皮质,脾脏主要发生于白髓生发中心,肝细胞凋亡主要位于小叶周边部和汇管区,肺脏中包括肺泡上皮细胞、血管内皮细胞和中性粒细胞等多种细胞发生了凋亡,小肠凋亡主要发生于粘膜上皮层和固有层。结论多发伤合并休克早期大鼠胸腺、脾、肝、肺和小肠中均发生了细胞凋亡,并可能在早期的脏器功能损害和晚期的多器官衰竭中发挥作用