HIV-1病毒基因分型研究：异源双链泳动分析法的建立

建立一种ＨＩＶ－１病毒基因亚型的分析方法,为了解福建省ＨＩＶ－１各型的分布情况,提供方法学依据。方法采集ＨＩＶ－１感染者全血,分离单核细胞（ＰＢＭＣｓ）提取核酸后用套式ＰＣＲ扩增ＨＩＶ－１ｅｎｖ基因的核酸片段,与各标准亚型对照质粒的ＰＣＲ产物进行杂交,使同源部位配对形成异源双链二聚体,根据其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的泳动率确定其亚型。结果应用异源双链泳动分析方法（ｈｅｔｅｒｏｄｕｐｌｅｘｍｏｂｉｌｉ     

克拉玛依市ＨＩＶ １犲狀狏犵犪犵狆狅犾基因特征变异研究

摘要：目的　研究克拉玛依市ＨＩＶ １犲狀狏、犵犪犵、狆狅犾基因特征及不同亚型混合感染情况。方法　巢氏ＰＣＲ 方法扩增２０１７年克拉玛依市ＨＩＶ 新发现病例犲狀狏、犵犪犵、狆狅犾基因,结合已知亚型利用Ｍｅｇａ软件分析测序 结果。结果　４８份样本犲狀狏、犵犪犵、狆狅犾三种基因分别获得合格序列３６ 份、３５ 份和４１ 份,ＣＲＦ０７＿ＢＣ 是 三种基因分型的主要亚型,ＣＲＦ０１ ＿ＡＥ 排第二位。除此外还发现克拉玛依市存在其他亚型和重组型, ＨＩＶ １狆狅犾基因有新型变异亚型ＣＲＦ７９＿０１０７、ＵＲＦ＿０１Ｂ、ＵＲＦ＿０２Ｂ。有６份样本存在三种基因分型不 完全一致情况,即不同亚型混合感染。结论　克拉玛依市ＨＩＶ １ 防控形势相对于新疆其他地市更加严峻, 预防和控制艾滋病在不同人群间相互传播、防止混合感染为目前首要任务。 关键词：ＨＩＶ １;犲狀狏、犵犪犵、狆狅犾基因;混合感染;系统进化树;亚型 中图分类号：Ｒ５１２．９　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１８）１１ ０８２２ ０４     

山东省HIV感染者合并HBV、HCV和HGV感染调查

由于一些病毒性传染病具有相同的传播途径和感染方式,因此有必要对ＨＩＶ感染者合并ＨＢＶ、ＨＣＶ和ＨＧＶ感染进行调查。本次对山东省46例ＨＩＶ感染者进行了ＨＢＶ、ＨＣＶ和ＨＧＶ的血清学调查,以了解这一人群的合并感染情况。材料与方法(1)调查对象:调查对象为1992～1999年2月经国家艾滋病监测中心及山东省ＨＩＶ确认实验室确认的ＨＩＶ间感染者,计46例。(2)标本采集:采集ＨＩＶ感染者静脉血3ｍｌ,分离血清,置-20℃冰箱保存备用。(3)实验室检测项目、方法及试剂:调查ＨＢＶ5项检测,ＨＣＶ及ＨＧＶ感染检测均采用ＥＬＩＳＡ法,所用试剂:…     

马鞍山市1995～1998年有偿献血与无偿献血检验结果分析

马鞍山市中心血站对有偿献血者和无偿献血中ＨＢｓＡｇ、抗ＨＣＶ、抗ＨＩＶ、梅毒和抗ＨＣＶ阴性者全血用ＰＣＲ法进行ＨＣＶ ＲＮＡ等 5项检测。现对检测结果进行总结分析。材料和方法　 (1)研究对象 :本站 1995～ 1998年 9月2 5 5 6 2人次的有偿献血者和 2 495人次的无偿献血者。 (2 )试剂 :ＥＬＩＳＡ、ＨＢｓＡｇ、抗ＨＣＶ、抗ＨＩＶ试剂分别由洛阳华美、上海科华生物工程公司、上海荣盛生物公司提供 ;ＴＲＵＳＴ试剂由上海荣盛生物公司提供 ;ＰＣＲ法检测ＨＣＶ ＲＮＡ试剂盒由洛阳华美生物工程公司和上海遗传所提供 ;ＨＢｓＡｇ 1ｕ…     

徐州市1995～2001年艾滋病病毒高危人群血清学监测分析

现将对徐州市 32例艾滋病病毒 (ＨＩＶ)感染者的血清学监测结果报道如下。1 .材料与方法 :①血清标本来自我市 1 995～ 2 0 0 1年ＨＩＶ高危人群 (输血 /献血员、戒毒人员、涉外宾馆服务员、因卖淫嫖娼被劳教人员、性病门诊和医院就诊患者、ＨＩＶ感染者家属、自愿匿名检测等 )监测 ,共计 2 62 2份血清标本。②尿液标本来自 2 0 0 1年本市某些ＨＩＶ感染者的乡镇 5～ 60岁健康人群 ,共计 3 32 4份。③检测方法 :用ＨＩＶ1 +2抗体检测ＥＬＩＳＡ试剂盒进行初筛 ,初筛阳性标本 ,送江苏省ＨＩＶ抗体检测确认中心实验室 ,再用蛋白免疫印迹方法 (…     

HIV-1基因亚型分型:异源双链泳动分析法

应用套式ＰＣＲ（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）对２４份ＨＩＶ感染者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）样品进行扩增，从样品中获得了ＨＩＶ１膜蛋白（ｅｎｖ）基因的核酸片段，然后与已知各标准亚型的对照质粒的相同片段ＰＣＲ产物进行杂交，使样品ＤＮＡ与质粒ＤＮＡ同源部位配对形成异源双链体，根据其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的泳动率可确定其亚型。并将这种异源双链泳动分析法（ｈｅｔｅｒｏｄｕｐｌｅｘｍｏｂｉｌｉｔｙａｓａｙ，ＨＭＡ）的结果与ＤＮＡ序列测定结果比较。实验证明，ＨＭＡ是一种快速、简便、特异和可靠的ＨＩＶ亚型的分析方法     

云南瑞丽口岸入境驾驶员中ＨＩＶ １基因型分布与新重组型发现

摘要：目的　了解云南省瑞丽口岸入境驾驶员主要流行ＨＩＶ １基因型的分布情况。方法　对云南瑞丽２５
例ＨＩＶ １抗体阳性的入境驾驶员血清样本,用ＲＴ ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ 方法扩增ＨＩＶ １ｇａｇ （１１５５ｂｐ）、ｇａｇ ｐｒｏｔ
（８８５ｂｐ）、ＲＴ （１０１０ｂｐ）基因片段,经核酸序列测定与拼接后,进行同源关系分析,确定其基因型,并进
行重组型分析并确定重组位点。结果　在本研究的２５ 例样本中,５ 例ＰＣＲ 扩增为阴性,未能有效分型。
２０例确定基因型的样本中,ＣＲＦ０１ ＿ＡＥ 比例最高（４０．００％）, 其次为Ｃ 亚型（２５．００％）、Ｂ 亚型
（５．００％）、ＣＲＦ０７＿ＢＣ （５．００％）和ＣＲＦ０８＿ＢＣ （５．００％）,还有４ 份为未知重组型（２０．００％）。重组位
点分析发现,这４例未知重组是以ＣＲＦ０１＿ＡＥ 为骨架,嵌入部分Ｂ 或Ｃ 亚型的基因片段,是在０１＿ＡＥ
重组的基础上发生的二代重组。结论　瑞丽口岸入境驾驶员中流行的ＨＩＶ １以ＣＲＦ０１＿ＡＥ 为主,Ｃ、Ｂ亚
型及ＣＲＦ０７＿ＢＣ／ＣＲＦ０８＿ＢＣ 同时存在,并出现以ＣＲＦ０１＿ＡＥ 为母株嵌入其他毒株基因片段的两种新型
重组,该人群中ＨＩＶ １基因型分布的复杂性正影响我国云南地区艾滋病分子流行病学特性。
关键词：ＨＩＶ １;基因型;重组型;分子流行病学
中图分类号：Ｒ５１２．９１　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０３ ０１８１ ０６     

湖北省HIV-1流行毒株的基因序列测定和亚型分析

１９９６年８月下旬采集２０份湖北省ＨＩＶ１感染者外周血，分离单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）提取核酸使用ＰＣＲ进行扩增获得ＨＩＶ１膜蛋白（ｅｎｖ）基因的核酸片段，并对其Ｃ２Ｖ３及邻区３５０～４５０个核苷酸序列进行了测定和分析。研究结果表明，这２０份样品均为Ｂ亚型的ＨＩＶ１毒株序列，彼此间的基因离散率为１．９％。与国际ＡＥ亚型参考序列及部分地区Ｂ亚型代表株序列相比较，湖北的２０个毒株与流行与我国云南德宏、四川和河南等地的Ｂ亚型毒株序列十分接近，均属于泰国Ｂ亚型；它们的基因离散率在１．９％～３．２％的范围内。根据以上数据及其它资料提示，ＨＩＶ１在湖北的流行时间不长，该流行区毒株的传入与流行在云南德宏州的相同亚型ＨＩＶ１毒株密切相关。     

1996—1999年HIV哨点监测结果分析

大理州自 1990年发现吸毒人群首例感染ＨＩＶ以来 ,近年又在性乱人群和孕产妇人群中发现ＨＩＶ感染者。为探讨哨点各人群监测及ＨＩＶ感染状况 ,提供科学的健教手段和防制依据 ,我们将 1996～ 1999年 5月全州相关哨点数据分析如下。对象和方法　 (1)对象 :吸毒者 ,包括口吸和针具注射吸毒者 ;性病病人 ,包括性病伴性乱史、性病伴吸毒史者 ;孕产妇 ,包括妊娠、分娩、流产、引产妇女。 (2 )方法 :初筛法 ,包括ＥＬＩＳＡ、ＰＡ法 ;确证法 ,即ＷＢ法。结果　 (1)年度别监测情况及危险人群分类 :在各哨点人群累计监测 2 0 36份血清中共检出ＨＩ…     

人类免疫缺陷病毒感染者血清唾液酸、β_2-微球蛋白和铁蛋白的检测

血清唾液酸 (ＳＡ)、β2 -微球蛋白 (β2 -ＭＧ)和铁蛋白 (ＳＦ)是近年常见的高灵敏的非特异性肿瘤标志物 ,以在癌症病人血清中升高为特征[1,3] ,国外报道[4 ] 人类免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)感染者血清中ＳＡ、β2 -ＭＧ水平增加 ,为研究ＳＡ、β2 -ＭＧ和ＳＦ在我国ＨＩＶ感染者的异常 ,进一步探讨ＨＩＶ感染与肿瘤发生的关系 ,对32例ＨＩＶ感染者进行了ＳＡ、β2 -ＭＧ和ＳＦ等三项肿瘤标志物的联合测定 ,报告如下。1　材料与方法1·1　研究对象　ＨＩＶ感染组 32例 ,均为男性 ,年龄18～ 4 2岁 ,平均 2 8 2岁 ,为强制戒毒劳教人员 ,吸毒方式…     

顺德市1999年无偿献血者的HIV抗体检测情况分析

血站开展艾滋病病毒抗体的检测是提高血液质量、预防和控制ＨＩＶ感染与传播的有效途径 ,我站于 1 999年对顺德市 2 60 2 0名无偿献血者进行血液ＨＩＶ抗体检测 ,现将结果分析如下。1　对象与方法1 1　对象1 999年 1～ 1 2月血站采集顺德市 2 60 2 0名无偿献血者血液标本。1 2　方法1 2 1　ＨＩＶ抗体初筛试验采用ＥＬＩＳＡ方法 ,检测阳性标本做双孔复检。1 2 2　ＨＩＶ抗体确证试验采用ＷＢ法。1 3　试剂1 3 1　ＨＩＶ抗体初筛试剂使用ＨＩＶ1 +2ｐｌｕｓ 0抗体酶免疫试剂盒 ,由荷兰欧嘉隆科技公司提供 ,试剂盒均经过国家批批检合…     

1999年昆明市卖淫嫖娼人员艾滋病病毒感染情况调查

我国自从 1985年发现首例艾滋病病人至今[1] ,报告病例数逐年增加 ,为了解昆明市卖淫嫖娼人员艾滋病病毒 (ＨＩＶ)感染的流行情况及ＨＩＶ感染的有关危险因素 ,为制定艾滋病(ＡＩＤＳ)防制规划和开展干预活动提供准确信息 ,现将对 1999年昆明市卖淫嫖娼人员ＨＩＶ感染情况的调查报道如下。一、材料与方法1.调查对象 :以 1999年我市公安部门扫黄中的 2 0 0 0名卖淫嫖娼人员为调查对象。2 .调查方法 :使用统一调查问卷 ,对卖淫嫖娼人员进行面对面调查 ,同时采静脉血 5ｍｌ,分离血清备检。3.试验方法 :使用巴斯德 (ＧＥＮＩＥ/ＨＩＶ 1ＨＩＶ 2…     

ELISA检测HIV抗体的内部质量控制

用ＥＬＩＳＡ方法检测血液中的ＨＩＶ抗体是检测ＨＩＶ感染最为敏感的常规方法。利用ＨＩＶ抗体检测的室内质控图判断实验的有效性 ,提高ＨＩＶ抗体检测工作质量 ,认真做好出入境人员传染病监测工作 ,从而有效地预防ＡＩＤＳ的流行和蔓延。ＨＩＶ检测是ＨＩＶ感染者或者ＡＩＤＳ病人的诊断依据。目前 ,我国在筛选献血员、临床诊断、流行病学调查、出入境人员体检等方面最常用的是血液中ＨＩＶ抗体检测。ＨＩＶ抗体检测的方法很多 ,大多简单 ,经济便于广泛推广应用。其中ＥＬＩＳＡ法敏感性高、特异性强、操作简便易行 ,是ＨＩＶ抗体初筛检测…     

河南省艾滋病毒感染者HIV毒株膜蛋白基因序列研究

对河南部分地区ＨＩＶ－１感染者采取外周血,进行淋巴细胞分离,细胞样品经裂解后提取其核酸,以此为模板,经套式ＰＣＲ扩增,获得ＨＩＶ－１膜蛋白（ｅｎｖ）基因的核酸片段,并对其Ｃ２－３及邻区３５０－４５０个核苷酸序列进行了测定分析,并与各国际亚型Ａ－Ｅ及流行于我国云南的代表株进行比较,研究结果表明,所采样品均属于ＨＩＶ－１的Ｂ亚型毒株序列,而且与我国云南德宏,四川湖北的Ｂ亚型毒株序列较为接近,基因离散率在２．８％左右,但与其它国际亚型相差较大,基因离散率在１９％以上;样品彼此之间的基因离散率不大,其Ｂ亚型毒株的传入与流行在云南德宏州的相同亚型的ＨＩＶ－１毒株密切相关。     

乙型肝炎表面抗原并非饮食从业人员筛查HBV传染源的理想指标

笔者使用分子生物学方法对乙型肝炎表面抗原(ＨＢｓＡｇ)携带者的传染性进行定量研究,以探讨ＨＢｓＡｇ作为饮食从业人员中ＨＢＶ传染源监控指标的可行性。一、材料和方法1.对象:从992例受试者中检出ＨＢｓＡｇ携带者156例。男102例、女54例,年龄6～82岁。2.方法:以ＥＬＩＳＡ法检测血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｅ;以套式ＰＣＲ检测血清ＨＢＶＤＮＡ;将套式ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ的低限作为一个ＨＢＶ感染剂量,将血液10倍系列稀释,其终末阳性ＨＢＶＤＮＡ的稀释倍数作为ＨＢＶ感染剂量的数值。二、结果1.ＨＢｅＡｇ阳性率为19.9%(31…     

国外医学信息

Ⅰ型ＨＩＶ感染时血浆和唾液亚型ＩｇＧ分布 [英 ]/ＷｕＸ… /ＡＩＤＳＲｅｓＨｕｍｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ　 2 0 0 0 ;16 (14) :142 3～ 1431对 81名Ⅰ型ＨＩＶ感染者与 30名未感染对照者的血浆与唾液ＩｇＧ亚类测定结果表明 :Ⅰ型ＨＩＶ感染者唾液ＩｇＧ1水平升高 ,而唾液ＩｇＧ2和ＩｇＧ4水平却下降。血浆抗Ⅰ型ＨＩＶ抗体升高 ,表示ＣＤ4 细胞计数较高而携带的病毒较少。腮腺唾液中抗Ⅰ型ＨＩＶＩｇＧ抗体水平升高与血浆中抗Ⅰ型ＨＩＶＩｇＧ抗体水平增高相关。在比较了唾液ＩｇＧ与血浆ＩｇＧ的Ⅰ型ＨＩＶ识别状况后 ,作者证实血浆…     

72例HIV感染者合并HBV、HCV、梅毒感染调查

为了解山西省ＨＩＶ感染者与其他传染病合并感染情况 ,将 1995～ 1998年初已确认的ＨＩＶ感染者血清进行了ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＣＶ、梅毒螺旋体 (ＴＰ)的血清学检测。1　材料与方法1 1　调查对象　 1995～ 1998年初经国家艾滋病参比室和山西省艾滋病确认实验室检测确认的ＨＩＶ 1抗体阳性者 72名。1 2　检测方法和试剂　检测ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＣＶ ,试剂均应用上海科华生物技术有限公司生产的ＥＬＩＳＡ试剂盒 ,有效期内使用 ,实验操作及判定结果严格按说明书进行。ＴＰ血清试验应用日本富士株式会社生产的ＴＰＰＡ试剂盒 ,按说明书进行检测…     

预防艾滋病,减少危害势在必行

联合国艾滋病规划署 (ＵＮＡＩＤＳ) 2 0 0 1年 12月报告 :从艾滋病开始流行到今天 ,全球已超过 6 0 0 0万人感染艾滋病病毒 (ＨＩＶ) ,其中 2 0 0 0万人已死亡 ,成为全球第四位死因。亚洲和太平洋地区估计2 0 0 1年新感染者为 4 3.5万人 ,累计ＨＩＶ感染者 710万。中国卫生部估计我国ＨＩＶ感染者为 6 0万 ,但ＵＮＡＩＤＳ估计中国到 2 0 0 1年底ＨＩＶ感染者累计已超过 10 0万。广东省 1986年发现首例输入性ＨＩＶ感染者 ,1990年首次从出境归来的本省人群中发现ＨＩＶ感染者。此后感染例数逐年上升 ,尤其是 1996年首次从本省静脉吸毒者检…     

某劳教所嫖娼人员HIV感染调查分析

四川省从 1991年发现首例ＨＩＶ感染者以来 ,ＨＩＶ感染途径是以血途径为主 ,1997年开始在我省发现有经性途径感染ＨＩＶ的 ,近两年在哨点监测中均在性乱人群中发现ＨＩＶ感染者。为掌握我省嫖娼人员中ＨＩＶ感染情况和防制措施提供依据 ,我们在某劳教所中对嫖娼人员进行了ＨＩＶ感染情况的调查 ,结果如下。1　材料与方法1 1　对象　成都市某劳教所内被劳教的嫖娼人员共 71名。由调查组采用统一的嫖娼人员监测登记表 ,对该所的嫖娼人员进行调查。1 2　样本　采用一次性注射器采集嫖娼人员静脉血 3ｍｌ ,分离血清后迅速进行ＨＩＶ抗体初筛检…     

CCR5-894ΔC等位基因在普通人群和艾滋病病毒亚型感染者中的分布

ＣＣＲ5既是一种重要趋化因子受体 ,也是艾滋病病毒 1亚型 (ＨＩＶ 1 )感染ＣＤ+ 4Ｔ细胞的协同受体。在粒细胞发育、分化以及艾滋病发生过程中均起重要作用。研究发现ＣＣＲ5Δ32等位基因与多种疾病相关。但中国人群ＣＣＲ5Δ32等位基因的频率很低[1 ] 。本研究进一步分析新近发现的ＣＣＲ5编码区 893～ 894位一个Ｃ缺失的等位基因 (ＣＣＲ5 894ΔＣ)在我国汉、藏、蒙、回族普通人群和ＨＩＶ 1感染者中的分布。1 .对象与方法 :本研究标本主要采自中国北方地区 (汉、维、回等不同民族 ,年龄 1～ 66岁 )所有普通人群中 ,不同个体间三代内无血…