人脑胶质瘤的表皮生长因子基因表达

采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和斑点杂交的方法检测了５０例胶质瘤、４个恶性胶质瘤体外细胞系和７例正常脑组织表皮生长因子（ＥＧＦ）ｍＲＮＡ表达水平。结果显示：上述组织或细胞都可表达５．０ｋｂ的ＥＧＦｍＲＮＡ片断，高恶度胶质瘤较低恶度胶质瘤和正常脑组织ＥＧＦｍＲＮＡ表达水平增高，低恶度胶质瘤与正常脑组织的表达无显著差异。在５０例胶质瘤中２９例（５８％）ＥＧＦｍＲＮＡ过表达，其中多见于恶性胶质瘤，ＥＧＦｍＲＮＡ表达与肿瘤的分级呈正相关。提示胶质瘤可以合成ＥＧＦ，在胶质瘤的发生发展过程中，ＥＧＦ参与或促进了其恶性进展。     

人脑胶质瘤中表皮生长因子受体表达的研究

目的：探讨表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）基因表达与胶质瘤恶性程度的关系。方法：采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交及免疫组织化学技术从ｍＲＮＡ及蛋白水平检测了５０例人脑胶质瘤、４个体外恶性胶质瘤细胞系及８例正常脑组织的ＥＧＦＲ的基因表达。结果：免疫组化检测高恶度胶质瘤（ＷＨＯⅢ－Ⅳ级）ＥＧＦＲ表达６９％（２０／２９），而低恶度胶质瘤（ＷＨＯⅠ－Ⅱ级）表达率为３３％（７／２１），差异显著（Ｐ＜０．０１）；４例细胞系阳性表达１００％；８例正常脑组织无ＥＧＦＲ蛋白表达。ＷＨＯ分级与ＥＧＦＲ蛋白表达呈正相关（ｒ＝０．５５９７，Ｐ＜０．００１）。对５０例胶质瘤进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交，其结果与免疫组化检测结果一致，ＥＧＦＲｍＲＮＡ也随胶质瘤恶性程度的增加而表达增高。结论：ＥＧＦＲ可能在恶性胶质瘤的发生发展中起重要作用，ＥＧＦＲ过表达与胶质瘤分级相关性为从分子水平评估肿瘤的恶性程度及选择基因治疗的靶基因提供了参考。     

人脑肿瘤转化生长因子β_2基因表达与其增殖活性相关性研究

目的探讨人脑肿瘤转化生长因子β２（ＴＧＦβ２）基因表达与其恶性进展及增殖活性的相关性。方法采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、免疫组化和Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交法检测了５０例胶质瘤、３０例脑膜瘤、３个恶性胶质瘤体外细胞系和８例正常脑组织ＴＧＦβ２的表达水平。用Ｋｉ６７标记指数（Ｋｉ６７ＬＩ）检测肿瘤增殖活性。结果正常脑组织无ＴＧＦβ２表达，而脑肿瘤均表达２８ｋｂ和／或５１ｋｂＴＧＦβ２ｍＲＮＡ片段和约２５ｋｄ及３０ｋｄ的蛋白；其在胶质瘤中的表达显著高于脑膜瘤，而低恶度胶质瘤（Ⅰ、Ⅱ）、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤、体外细胞系四者表达水平也有显著性差异；ＴＧＦβ２表达水平与Ｋｉ６７ＬＩ呈正相关。结论ＴＧＦβ２表达水平有随肿瘤增殖活性增高而升高的趋势，提示其可能为胶质瘤恶性进展的重要原因之一。且有可能作为基因治疗的候选基因     

人脑胶质瘤免疫抑制因子研究

实验表明人脑胶质瘤原代培养细胞及４个人脑恶性胶质瘤体外细胞系细胞培养上清液（Ｓｕ－ｐｅｒｎａｔａｎｔ，ＳＮ）显著抑制植物血凝素ＰＨＡ－Ｐ刺激的正常人或胶质瘤患者自体和异体外周血淋巴细胞增殖。我们发现用抗转化生长因子－β_２（ＴＧＦ－β_２）单克隆抗体可显著降低胶质瘤ＳＮ的免疫抑制活性。４个人脑胶质瘤体外细胞系应用抗ＴＧＦ－β_２单抗免疫组化染色呈阳性反应，３例正常脑组织呈阴性反应。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交实验表明上述４个人脑胶质瘤体外细胞系均表达６ｋｂ的ＴＧＦ－β_２ｍＲＮＡ，而４例人胎脑则无表达。这些结果提示人脑胶质瘤细胞可以自体分泌免疫抑制因子抑制患者的免疫功能，而这抑制因子的主要成份是ＴＧＦ－β_２。     

胶质瘤细胞PDGF BB自分泌环活怀与肿瘤细胞egr—1基因表 …

目的 探讨胶质瘤细胞血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）ＢＢ自分泌环活性与肿瘤细胞ｅｇｒ－１基因表达的关系,以及它们在胶质瘤发生、发展中的作用。方法 用ｍＲＮＡ原位杂交和免疫组化染色观察了７３例２ 脑胶质瘤组织。结果 胶质瘤细胞ＰＤＧＦＢ ｍＲＮＡ表达水平随肿瘤恶性程度增加而升高。ｅｇｒ－１ｍＲＮＡ、ＥＧＲ－１蛋白、ＰＤＧＦα受体和β受体及酷氨酸磷酸化蛋白阳性肿瘤细胞密度彼此间均呈显著性正相关,并均随肿瘤     

胶质瘤bFGF基因表达与增殖活性的相关性研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的异常表达与胶质瘤的恶性程度和增殖活性的关系。方法采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和免疫组化法对５７例人脑胶质瘤进行ｂＦＧＦ基因表达及Ｋｉ－６７标记指数检测及相关性分析。结果各组胶质瘤均有ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达，且表达水平以恶性胶质瘤为高。Ｋｉ－６７标记指数在胶质瘤中升高显著。ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达水平与胶质瘤恶性度及Ｋｉ－６７标记指数呈正相关。结论ｂＦＧＦ与胶质瘤的恶性进展有关，可作为判定胶质瘤恶性度的指标之一。     

胶质瘤碱性成纤维细胞生长因子基因表达

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在人脑胶质瘤的发生发展中的作用。方法：用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交法检测了人脑胶质瘤组织中的ｂＦＧＦ基因表达，并探讨ｂＦＧＦ基因表达与胶质瘤恶性程度的关系。结果：胶质瘤ｂＦＧＦ基因表达异常升高，５７例胶质瘤中的５２例可见ｂＦＧＦ基因表达，阳性率为９１．２％，而８例正常脑组织则未见表达，随胶质瘤恶性程度增加，ｂＦＧＦ基因表达也升高。结论：ｂＦＧＦ的促细胞增殖和促血管生成作用与胶质瘤的进展可能有密切关系     

P16基因改变与脑胶质瘤生物学特性相关性的研究

目的 研究Ｐ１６基因改变与脑胶质瘤恶性程度分级及肿瘤细胞增殖活性之间的关系。方法 检测４１例不同级别脑胶质瘤标本和７例正常脑组织Ｐ１６基因改变和ＰＣＮＡ蛋白表达情况。结果 实验组Ｐ１６基因缺失和突变２２例（５４％），ｍＲＮＡ和蛋白表达缺失分别为２３例（５６％）和２７例（６６％），三者改变非一对一关系。Ｐ１６基因改变和ＰＣＮＡ指数随脑胶质瘤恶性程度级别增高呈上升趋势（Ｐ〈０．０５）。Ｐ１６基因改变与     

人脑胶质瘤尿激酶型纤溶酶原激活因子基因表达及意义

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活因子（ｕＰＡ）基因在人脑胶质瘤中的表达及临床意义。方法 采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分子杂交和免疫组方法检测４３例人脑胶质瘤和５例正常脑组织ｕＰＡ ｍＲＮＡ的蛋白表达,并与临床床生物学参数进行综合分析。结果 上述组织或细胞均可表达２．５Ｋｂ的ｕＰＡ ｍＲＮＡ转录物,高级另胶质瘤较低级别和正常脑组织ｕＰＡ ｍＲＮＡ表达水平明显增高（Ｐ〈０．０１）,低级别胶质瘤与正常脑组织的     

CD133基因表达与人脑胶质瘤恶性程度相关性分析

目的探讨人脑胶质瘤组织中胶质瘤干细胞标志物CD133的表达与肿瘤恶性程度的关系。方法应用实时荧光定量PCR方法检测75例不同病理级别胶质瘤组织及4例正常脑组织中CD133基因的表达情况，并与肿瘤病理级别进行相关性分析；同时采用免疫组化法检测35例肿瘤组织和2例正常脑组织中CD133的表达情况，在蛋白表达水平予以验证。结果CD133在基因转录水平和蛋白表达水平具有良好的相关性。CD133在正常脑组织中未见表达，在各级别胶质瘤中均有表达，且差异有显著性（P〈0．01）；CD133表达量与肿瘤的恶性程度呈正相关（P〈0．01）。结论检测胶质瘤CD133表达水平有助于评价肿瘤的生物学行为，并为针对肿瘤干细胞的靶向治疗提供参考依据。     

ILK与PKB在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨整合素连接激酶（ILK）和蛋白激酶B（PKB）在正常脑组织及脑胶质瘤组织中的表达及临床病理意义。方法采用免疫组织化学SP染色技术测定8例正常脑组织及51例脑胶质瘤组织中ILK和PKB的表达。结果ILK和PKB蛋自在正常脑组织中均阴性表达,而在各级别胶质瘤组织巾均有不同程度的表达,并随着胶质瘤恶性程度的增高,ILK和PKB表达的阳性细胞率逐渐增高,其在高级别胶质瘤中的表达明显高于低级别胶质瘤（P〈0．05）。在胶质瘤中ILK和PKB蛋白表达呈显著正相关（r=0．95,P〈0．05）。结论ILK和PKB蛋白在脑胶质瘤中的表达与肿瘤的临床病理分级密切相关,可能参与胶质瘤的发生发展,联合检测有助于判断胶质瘤恶性程度及预后。     

IL-13RoL2在脑胶质瘤中的表达及其临床诊断意义

目的探讨自细胞介素13受体α2（IL-13Rα2）在脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤恶性程度的关系。方法免疫组化染色检测59例脑胶质瘤、3例脑膜瘤、3例癫痫病灶组织、5例正常脑组织及U251细胞中IL-13Rα2蛋白的表达,分析其与肿瘤恶性程度的关系。结果正常脑组织、脑膜瘤及癫痫病灶中均无IL-13Rα2的表达;而59例胶质瘤组织中33例IL-13Rα2表达阳性,阳性率55．9％;胶质瘤组织IL-13Rα2阳性表达率显著高于非胶质瘤组织（P〈0．05）。高级别胶质瘤（Ⅲ、Ⅳ级）IL-13Rα2阳性表达率为78．1％（25／32）,低级别（Ⅰ、Ⅱ级）胶质瘤为29．6％（8／27）,两者相较差异显著（P〈0．05）。U251细胞IL-13Rα2表达阳性。结论本结果提示胶质瘤中IL-13Rα2蛋白表达与其恶性程度有关。     

肿瘤坏死因子αmRNA在实验性过敏性脑脊髓炎猴脑…

应用逆转录聚合酶链反应技术，对．Ｃｊａｃｃｈｕｓ猴实验性过敏性脑脊髓炎脑组织中肿瘤坏死因子αｍＲＮＡ的水平进行了研究。结果表明：ＥＡＥ动物脑组织ＴＮＦαｍＲＮＡ明显高于正常动物；用一种ＴＮＦα释放抑制齐环戊苯吡酮可阻断免疫动物ＥＡＥ的发生和脑组织中ＴＮＦαｍＲＮＡ水平降低。     

血小板源生长因子旁分泌效应与胶质瘤间质血管反应性增 …

目的 探讨胶质瘤细胞血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）ＢＢ表达水平与肿瘤间质血管（ＳＢＶ）增生的关系。方法 用原位杂交、免疫组和ＨＥ染色观察了７３例人胶质瘤。结果 ７３例中,仅８例（１１％）有少许ＳＢＶ表达ＰＤＧＦＢ ｍＲＮＡ,ＳＢＶ的ＰＤＧＦα受体、β受体和酷氨酸磷酸化蛋白（Ｐ－Ｔｙｒ）的阳性率分别为９５．９％、３４．３％和６１．６％,四者间均有显著性差异（Ｐ〈０．００５）。６２例（８４．９％）的肿瘤     

TGF—β高调在鼻腔给予AChR抑制EAMG中起重要作用

用放射标记的ｃＤＮＡ寡核苷酸探针，使用原位杂交技术检测表达子γ干扰素（ＩＦＮ－γ）白细胞介素４（ＩＬ－４）和转移生长因子β（ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ的单个核细胞（ＭＮＣ）。结果表明，实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）对照组大鼠Ｇｕｏ窝和腹股沟淋巴结（ＰＩＬＮ）的ＭＮＣ乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）诱导的ＩＦＮ－γ，ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达细胞数明显增高，与给予ＰＢＳＣＦＡ注射组比较差异显著。鼻腔耐受组与Ｅ     

IASPP在胶质瘤组织中的表达及其意义

目的通过检测人脑胶质瘤患者肿瘤组织中p53凋亡刺激蛋白抑制因子（inhibitorymemberoftheASPPfamilY）的表达水平,探讨其在肿瘤的发生、发展及预后中的作用。方法采用RT—PCR法检测p53凋亡刺激蛋白抑制因子（IASPP）mRNA在45例脑胶质瘤组织和13例正常脑组织中的表达水平。结果IASPP在胶质瘤Ⅱ～Ⅳ级中的表达均明显高于正常脑组织,而且在低分化组（Ⅲ～Ⅳ级）胶质瘤中的表达量显著高于高分化组（I～Ⅱ级）。结论IASPP在胶质瘤组织中高表达,而且表达水平和恶性程度有密切联系。IASPP的检测可作为胶质瘤恶性程度判断的参考,为从基因水平上探讨胶质瘤的生物学行为、预后及治疗提供新的思路。     

实时荧光定量RT-PCR法测定脑胶质瘤中MT1-MMP基因mRNA表达水平

目的探讨胶质瘤恶性程度和MT1-MMP基因mRNA表达水平的关系。方法采用实时荧光定量RT-PCR法检测34例脑胶质瘤和7例正常脑组织（取自癫痫病人手术切除脑组织）中MT1-MMP的mRNA表达水平。结果经实时荧光定量RT-PCR法检测，正常脑组织和低级别、高级别胶质瘤的△△Ct（循环阈值）值分别为（0．834±0、517）、（4．063±2．309）和（7.072±4．072）。正常脑组织与低级别、高级别胶质瘤之间，低级别、高级别胶质瘤之间MT1-MMP基因mRNA表达水平的差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论脑胶质瘤中存在MT1-MMP基因mRNA高水平的表达，随着肿瘤恶性级别的增加，MT1-MMP基因mRNA表达水平有增高趋势。     

逆转录病毒介导人肿瘤坏死因子α基因治疗胶质瘤的实验研究

材料与方法以ＲＰＭＩ１６４０培养人脑恶性胶质瘤体外细胞系ＳＨＧ４４。逆转录病毒载体ｐＬ（ｈＴＮＦα）ＳＮ采用磷酸钙共沉淀法转染包装细胞系ＰＡ３１７，收集整合有ＴＮＦα基因的复制缺陷型病毒（小鼠白血病病毒ＭｏＭＬＶ）上清液转染ＳＨＧ４４胶质瘤细胞，转基...     

TGF－β高调在鼻腔给予AChR抑制EAMG中起重要作用

用放射标记的ｃＤＮＡ寡核苷酸探针，使用原位杂交技术检测表达γ干扰素（ＩＦＮ－γ）、白细胞介素４（ＩＬ－４）和转移生长因子β（ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ的单个核细胞（ＭＮＣ）。结果表明，实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）对照组大鼠窝和腹股沟淋巴结（ＰＩＬＮ）的ＭＮＣ乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）诱导的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达细胞数明显增高，与给予ＰＢＳＣＦＡ注射组比较差异显著。鼻腔耐受组与ＥＡＭＧ对照组相比，某些淋巴器官中ＡＣｈＲ诱导的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４数降低，ＡＣｈＲ诱导的ＴＧＦ－β细胞明显上调。提示ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４和ＴＧＦ－β与ＥＡＭＧ的发病有关，而ＴＧＦ－β高调在鼻腔ＡＣｈＲ耐受ＥＡＭＧ中起重要作用。     

AVP_(4-8)增加海马组织内NGF mRNA和蛋白含量

本文采用了Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和ＥＬＩＳＡ法，观察了神经肽ＡＶＰ４－８对大鼠海马组织中神经生长因子（ＮＧＦ）ｍＲＮＡ和蛋白水平的影响，结果显示：给大鼠皮下注射ＡＶＰ４－８１２ｈ后，海马组织中ＮＧＦｍＲＮＡ的水平明显高于生理盐水对照组。而给大鼠皮下注射精氨酸加压素（ＡＶＰ）和催产素（ＯＴ）对ＮＧＦｍＲＮＡ的水平均无显著影响。另外，用ＡＶＰ４－８孵育离体大鼠海马组织切片，能使ＮＧＦ蛋白表达量升高，且在４．５ｈ左右达到高峰。