新型三重抗生素糊剂对再治疗根管内粪肠球菌的抗菌效果及近期疗效

目的 观察并比较新型三重抗生素（奥硝唑、环丙沙星和米诺环素）糊剂单独及与氢氧化钙糊剂联合应用对再治疗根管内粪肠球菌的杀灭效果及近期临床疗效。方法 收集根管治疗失败病例需根管再治疗的单根管患牙149颗。随机分为5组,分别为氢氧化钙糊剂组（CH组）、传统三重抗生素（甲硝唑、环丙沙星和米诺环素）糊剂组（TAP组）、新型三重抗生素糊剂组（NTAP组）、氢氧化钙＋新型三重抗生素糊剂组（CH＋NTAP组）、樟脑酚组（CP组）。取出根管内充填物后,分别于根管预备前、根管预备后及根管封药7 d后检测根管内粪肠球菌数量,并于封药7 d后进行近期临床疗效评定。结果 各组根管预备后及根管封药7 d后根管内粪肠球菌数量均较根管预备前下降（P均<0.05）,根管封药7 d后根管内粪肠球菌数量均较根管预备后下降（P均<0.05）。根管封药7 d后CH组、TAP组、NTAP组、CH＋NTAP组根管内粪肠球菌数量均低于CP组（P均<0.05）,NTAP组和CH＋NTAP组均分别低于CH组和TAP组（P均<0.05）,TAP组低于CH组（P<0.05）。根管封药7 d后CH组、TAP组、NTAP组、CH＋NTAP组的临床疗效均优于CP组（P均<0.05）,TAP组、NTAP组及CH＋NTAP组的疗效均优于CH组（P均<0.05）,但TAP组、NTAP组及CH＋NTAP组3组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论 氢氧化钙糊剂、三重抗生素糊剂、氢氧化钙联合三重抗生素糊剂作为根管消毒药物,均对再治疗根管内粪肠球菌有较好的抗菌效果和近期临床疗效,特别是新型三重抗生素糊剂,值得临床上推广应用。     

裸项栉鰕虎鱼感染创伤弧菌初报

目的 分离及鉴定感染实验用鰕虎鱼的病原菌。方法 将病料分离培养,纯化培养后,用16s rRNA及生理生化方法鉴定病原菌。结果 分离到了革兰阴性弧菌,命名为：GDLAMI-1210株,显微镜下观察为逗点样形态,电镜下可看到菌的一端钝圆,一端长杆弯曲的鞭毛,生理生化鉴定结果与弧菌一致,16s rRNA测序结果与创伤弧菌标准菌株（ATCC27562T）等聚为一类菌,回归实验证实该菌对裸项栉鰕虎鱼有一定的致病性。结论 裸项栉鰕虎鱼感染创伤弧菌初报。     

鼠三毛滴虫新疆灰仓鼠分离株形态学观察及其16S rRNA基因分析

目的 对从新疆实验动物研究中心饲养的封闭群灰仓鼠体内分离到的1株鞭毛虫进行形态学鉴定及基因鉴定。方法 取灰仓鼠回盲部内容物进行直接涂片和常规姬姆萨染色后镜检观察,提取虫体总DNA,PCR扩增该鞭毛虫的16S rRNA基因,测序后与国外已报道的鞭毛虫进行核酸同源性分析,并应用MEGA5.22软件绘制系统发育进化树。结果 形态学观察表明分离到的鞭毛虫为鼠三毛滴虫。测序后核酸同源性分析表明鼠三毛滴虫新疆灰仓鼠分离株16S rRNA序列与国外已报道的三毛滴虫高度同源。系统发育进化树表明鼠三毛滴虫新疆灰仓鼠分离株序列与已报道的鼠三毛滴虫16S rRNA（序列号AY886846.1） 位于同一进化分支,与其他相关三毛滴虫亲缘关系较远。结论 形态学鉴定和16 S rRNA基因分析表明,此次从新疆实验动物研究中心饲养的封闭群灰仓鼠体内分离到的鞭毛虫为鼠三毛滴虫。     

白芷、川芎药对配伍挥发油成分的GC-MS分析

目的 研究白芷、川芎单味药及其药对的挥发油成分,并考察白芷、川芎药对配伍对挥发油成分的影响。方法 采用水蒸气蒸馏法提取白芷、川芎单味药及其药对的挥发油,运用气相色谱-质谱联用技术,结合计算机检索,并与文献资料比对,进行化学成分的分离和鉴定。色谱条件：TR5-MS毛细管色谱柱（30 m× 0.25 mm,0.25 μm）;载气为高纯氦气;进样口温度250℃;进样量1 μL,分流比50：1;恒流模式,载气流速1.00 mL/min;程序升温：起始温度50℃,保持1 min,以5℃/min 的速率升至240℃,保持1 min,然后以5℃/min 升至280℃,并保持1 min。质谱条件：电子轰击（EI）离子源,电子能量70 eV,离子源温度220℃,传输线温度280℃,质量范围（m/z）：50～650 amu,数据采集扫描模式为全扫描,溶剂延迟5 min。结果 在白芷、川芎、药对（1：1）、药对（4：1）的挥发油及白芷、川芎等浓度挥发油混合物（药对等浓度挥发油）中分别鉴定出69、59 、59、60、78 种化合物,其中共有成分19种。结论 从挥发油的组分及含量来看,不同配伍比例药对挥发油的成分有很大的不同,单味药挥发油组分的含量在药对中都发生了变化。     

粪肠球菌胶原黏附素ace基因对生物被膜形成的影响

目的 探讨粪肠球菌ace基因在细菌生物被膜形成中的作用。 方法 将粪肠球菌野生株U8-ace^-、空质粒对照株EU8-ace^-、转化株ZU8-ace⁺接种至96孔细胞板,分别于37 ℃及46 ℃培养6 h,测定OD₅₉₅,比较粪肠球菌ace基因阳性、阴性菌株在不同温度下的早期黏附能力; 将U8-ace^-,EU8-ace^-,ZU8-ace⁺接种到96孔板,46 ℃培养3,6,12,24,36及48 h,结晶紫染色,测定OD₅₇₀,微量滴定板法比较粪肠球菌ace基因野生株、空质粒对照株、转化株的生物被膜形成能力; 将U8-ace^-,EU8-ace^-,ZU8-ace⁺在含盖玻片的细胞培养皿内46 ℃培养6～72 h,激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察比较ace⁺,ace^-肠球菌生物被膜的平均厚度、密度、活菌比例。 结果 转化株ZU8-ace⁺于46 ℃培养的早期黏附OD₅₉₅ 值高于37 ℃培养的OD₅₉₅ 值,差别有统计学意义(P<0.01)。粪肠球菌U8-ace^-,EU8-ace^-37 ℃培养的早期黏附OD₅₉₅与46 ℃培养的值比较,差别无统计学意义(P>0.05); 微量滴定板法显示不同时间点ace基因转化株的OD₅₇₀值均大于野生株的OD₅₇₀值; 转化株与野生株生物被膜形成能力OD₅₇₀比较,差别有统计学意义(P<0.01); 空质粒对照株与野生株比较,差别无统计学意义(P>0.05); CLSM观察不同培养时间点生物被膜的平均厚度、细菌的密度以及活菌比例,ace⁺粪肠球菌的值均高于ace^- 粪肠球菌,ZU8-ace⁺与U8-ace^-比较,差别有统计学意义(P<0.01); EU8-ace^-与U8-ace^-比较,差别无统计学意义(P>0.05)。 结论 粪肠球菌胶原黏附素ace基因或有利于肠球菌生物被膜的形成。     

香附对川芎中阿魏酸在正常及偏头痛模型大鼠体内药代动力学的影响

目的：研究香附对川芎中阿魏酸（FA）在正常及偏头痛模型大鼠体内的药代动力学影响。方法：用硝酸甘油制作偏头痛大鼠模型,给正常及模型大鼠灌服川芎和川芎-香附合煎液,采用HPLC法检测给药后不同时间大鼠血浆中FA的浓度,DAS2.0软件计算药代动力学参数。结果：正常组中川芎配伍香附后FA的吸收半衰期t1/2Ka明显缩短（P<0.05）,达峰时间tmax提前（P<0.05）,但其他参数与配伍前并无差异。模型组中川芎配伍香附后FA的Cmax、药时曲线下面积AUC(0-t)、分布半衰期t1/2α、表观分布容积V1/F 显著增大（P<0.01）,达峰时间tmax提前,清除率CL/F显著降低（P<0.01）。结论：在正常大鼠体内,香附加快了FA的吸收,而在偏头痛模型大鼠体内,香附能减慢FA在体内的分布和代谢,延长药物成分在体内的作用时间,从而提高了FA的生物利用度。     

三孢布拉霉菌发酵番茄红素提取工艺的优化

番茄红素作为一种类胡萝卜素,具有提高免疫力、延缓衰老等多种功能。利用发酵法生产番茄红素是满足市场需求的重要途径。为了更好地提升番茄红素的提取收率,降低发酵过程中各种杂质的含量。研究了不同的溶媒及处理方法对湿菌体进行直接高效萃取的新方法。将番茄红素发酵液经过抽滤、洗涤处理得到湿菌丝体,采用有机溶剂和超声波破碎结合的处理方法,考察了菌丝体状态、皂化条件、脱水剂、提取溶剂、菌丝量与提取溶剂的料液比例、提取时间和提取温度对番茄红素提取率的影响。实验结果表明,利用湿菌体直接提取番茄红素的方法是可行的,并确定了湿菌体直接提取的最优条件:用0.6 mol/L NaOH溶液皂化,乙醇脱水处理10 min,乙酸乙酯作为提取剂,菌丝体质量(g)与提取溶剂体积(mL)之比为1:75,在45 ℃超声处理20 min,可获得最高的番茄红素提取率。     

Prevalence of Helicobacter pylori, cytomegalovirus,and Chlamydia pneumoniae immunoglobulin seropositivity in coronary artery disease patients and normal individuals in North Indian population

Background

In present day atherosclerosis is perceived as a chronic inflammatory vascular condition and infectious diseases are believed to contribute to its pathophysiology. In this context, the microorganisms which are believed to play a role in the pathophysiology include Chlamydia pneumoniae, cytomegalovirus (CMV), and Helicobacter pylori.

Method

A case control study (retrospective) was conducted over a two-year period. The study population was divided into two groups with 200 individuals in each group. The first group comprised cases of coronary artery disease (CAD) and the second comprised healthy controls selected from the general population after matching for age and sex. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was done for immunoglobulin (IgG) antibodies to H. pylori, C. pneumonia, and CMV. They were also evaluated for conventional risk factors including hypertension, diabetes, obesity, and dyslipidaemia. Epi Info™ version 6 six software was used for analysis of data. Odds ratio, χ² for trend and multiple logistic regression analysis were used to find out statistically significant results.

Results

Seropositivity for H. pylori was present in 119 patients of CAD (59.5%) but it was present in only 76 controls (38%) (P = 0.001). There was a statistically significant association between seropositivity for H. pylori and CAD. There was no statistically significant association between C. pneumoniae and CMV seropositivity with CAD. Multiple logistic regression analysis was done with CAD as the outcome (dependent variable). The predictor covariates (independent) variables were seropositivity to H. pylori, C. pneumoniae, and CMV, hypertension, obesity, diabetes, and dyslipidaemia. It was found that seropositivity to H. pylori, hypertension, obesity, and dyslipidaemia were significant risk factors for CAD.

Conclusion

Our study shows an association between IgG antibody response to H. pylori and CAD. Multiple logistic regression analysis showed that this association was retained even on comparison with the other risk factors.     

宽叶缬草水溶性化学成分研究

目的 研究宽叶缬草（Valeriana officinalis Linn. var. latiofolia Miq.）根的水溶性化学成分。方法 利用大孔树脂Diaion HP-20柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等手段对宽叶缬草根的水溶性成分进行分离纯化,应用质谱、1D核磁共振光谱（NMR）、2D NMR等方法对分得的化合物进行结构鉴定。结果和结论 从宽叶缬草根中分离并鉴定了13个化合物,分别为甘西鼠尾甲苷A（1）、当归棱子芹醇葡萄糖苷（2）、（-）-当归棱子芹醇-2-O-β-D-呋喃芹菜糖基-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、6-羟基-7-羟甲基-4-亚甲基六氢环戊骈吡喃-1（3H）-酮（4）、缬草苷A（5）、双四氢呋喃木脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）、（+）-松脂酚-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、小蜡苷Ⅰ（8）、青木香苷A（9）、（+）-1-羟基松脂酚-1-O-β-D-葡萄糖苷（10）、（+）-松脂酚-4,4’-O-二吡喃葡萄糖苷（11）、（+）-环橄榄脂素-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（12）、松柏苷（13）。所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

不同来源树鼩的弓形虫感染调查

目的：调查不同群体树鼩弓形虫的感染情况,为建立树鼩寄生虫学监测指标提供依据。方法分别从野外来源、人工驯化一年和人工繁殖的子一代三个树鼩群体中,随机采集动物全血样本各40份,用间接血凝试验（IHA）检测弓形虫抗体,PCR 方法检测其核酸,根据两种方法的检测结果分析树鼩弓形虫的感染情况。结果IHA 和 PCR 检测结果显示,120份树鼩血样均为阴性,两种检测方法结果一致。结论本次调查三个群体来源的树鼩均未感染弓形虫,树鼩对弓形虫的易感情况还需要通过扩大样本量和感染性实验来进一步验证。     

Comparison of IS6110 and ‘short fragment’ devR (Rv3133c) gene targets with phenotypic methods for diagnosis of Mycobacterium tuberculosis

Background

Tuberculosis (TB), declared a global emergency in 1993 by the WHO, remains a worldwide public health problem. Rapid diagnosis is required for treatment and prevention. This study compares genotypic methods using two gene targets [IS6110 and 'short fragment' devR (Rv3133c)] with phenotypic methods [Lowenstein Jensen (LJ) and BACTEC 460] for the diagnosis of TB while using Ziehl Neelsen (ZN) staining as the gold standard.

Methods

56 clinical TB samples from a tertiary care apex center along with 50 healthy control samples, excluding samples from patients already on ATT were processed by routine USP methodology. Smears were graded by ZN stain. Solid media (LJ) and liquid media (BACTEC 460) were used along with IS6110 and 'short fragment' devR (Rv3133c) specific gene amplification and comparatively analyzed.

Results

50/56 samples were positive by phenotypic methods, 53 by IS6110 and 45 by devR (Rv3133c) amplification. 38 samples were positive by both phenotypic and genotypic methods. IS6110 detected six and devR (Rv3133c) detected five phenotypically negative samples. Both IS6110 and devR (Rv3133c) were positive in 42 samples. 11 devR (Rv3133c) negative samples were positive by IS6110 and three IS6110 negative samples were positive by 'short fragment' devR (Rv3133c). Compared to phenotypic methods, the sensitivity, specificity, positive and negative predictive values of IS6110 was 94%, 89.29%, 88.68% and 94.34% while that of devR (Rv3133c) was 80%, 91.07%, 88.89% and 83.61% respectively.

Conclusion

Simultaneous use of both phenotypic and genotypic methods increases the yield of positive results.     

东方田鼠地方标准的编制以及相关研究进展

洞庭湖栖居的东方田鼠是目前所知的唯一对日本血吸虫感染有特殊抗性的啮齿类哺乳动物,受到了学者们重视并长期对它进行了实验动物化工作,规范实验东方田鼠的生产和应用并制定东方田鼠地方质量和检测标准具有实际意义.本文对东方田鼠地方标准制定的必要性和意义、标准制定的原则和依据进行了阐述;比较了其与现行法律、法规、标准的关系;简介了标准编制的具体步骤;说明了国际标准或国外先进标准的采标程度;国内外同类标准水平的对比情况以及作为推荐性标准的建议及其理由等.     

荧光光谱分析5种黄连生物碱与蛋白和DNA的作用

目的 了解5种黄连生物碱（巴马亭、黄连碱、表小檗碱、药根碱和小檗碱）与生物大分子蛋白质和DNA的作用关系及其差异。 方法 将黄连生物碱巴马亭、黄连碱、表小檗碱、药根碱和小檗碱均配成浓度分别为0、1.95×10^-6、3.9×10^-6、7.8×10^-6、1.56×10^-5和3.12×10^-5 mol/L的PBS稀释液后,分别量取1.5 mL与0.5 mL牛血清白蛋白（BSA,1.10×10^-5 mol/L）溶液作用,采用F-4500型荧光分光光度计,在280 nm激发波长条件下扫描300~500 nm范围的荧光发射光谱。将浓度均为0、1.95×10^-6、3.9×10^-6、7.8×10^-6 和1.56×10^-5mol/L的5种黄连生物碱PBS稀释液各量取1.5 mL与0.5 mL百分浓度为0.1%的质粒DNA作用后,在368 nm激发波长条件下扫描480~650 nm范围的荧光发射光谱。 结果 5种黄连生物碱对BSA荧光均有很强的淬灭作用,各生物碱之间的荧光淬灭作用差异不大。5种黄连生物碱与质粒DNA作用后,均能增强发射荧光,且各生物碱之间的荧光增强作用差异很大,荧光增强作用由大到小依次为表小檗碱、黄连碱、巴马亭、小檗碱和药根碱,其中,表小檗碱和黄连碱增强作用远大于其余3种黄连生物碱;5种黄连生物碱的最强荧光作用浓度均为7.8×10^-6mol/L。 结论 5种黄连生物碱与蛋白和DNA均存在很强的相互作用。5种黄连生物碱与蛋白之间的作用差异较小,与DNA之间的作用差异较大,提示黄连生物碱与DNA的作用强度与其分子结构有关,该类分子中9,10-亚甲二氧基和2,3-二甲氧基结构有利于与DNA作用后的荧光增强作用。     

二株不同基因型树鼩呼肠孤病毒的分离和鉴定

目的 从腹泻树鼩的粪便样本中分离和鉴定病毒。方法 树鼩腹泻粪便样本分别接种Vero、LLC-MK2和KMB17细胞,经连续传代,观察记录细胞病变,并对培养上清进行透射电镜检查、病毒RNA-PAGE电泳分析、轮状病毒鉴别筛查、S1全长基因片段扩增和生物信息学分析。结果 树鼩腹泻粪便样品在KMB17、Vero 和LLC-MK2细胞上经连续3代次传代后,均能产生细胞病变。经电镜检查、病毒RNA-PAGE电泳分析和轮状病毒鉴别筛查,推测其为呼肠孤病毒。病毒基因组全长S1基因扩增、序列测定和分析结果表明,KMB17培养上清中获得的病毒与I型原型株T1L同源性最高,核苷酸和氨基酸同源性分别为85%和90%,因此该病毒定义为呼肠孤病毒I型。而LLC-MK2和Vero细胞上清中的病毒S1基因与III型原型株T3D核苷酸和氨基酸同源性分别为85%和92%,因此为呼肠孤病毒III型。结论 对今后树鼩和其他宿主呼肠孤病毒的分离鉴定有一定的指导意义。     

棕背(鼠平)的实验室繁育

目的 建立棕背（鼠平）的实验室繁育方法,测定棕背（鼠平）生长和繁殖数据,为开展棕背（鼠平）实验动物化研究提供基础。方法 将黑龙江省牡丹江市牡丹峰林地的野生棕背（鼠平）引入实验室,于大型硬壁式啮齿动物负压隔离器内进行人工饲育、繁殖,测定棕背（鼠平）生长和繁育数据,评价棕背（鼠平）实验室繁育效果。结果 棕背（鼠平）在实验室条件下可以实现人工饲育、繁殖。妊娠率54.55%,平均妊娠期为20.4 d（18~22 d）;一个繁殖期内平均繁殖2.9次,最高繁殖次数为7次,远远超过自然条件下所统计到的繁殖次数（1~4次）;平均窝产仔数（4.3±1.22）只,单窝最高产仔数为8只;幼仔离乳率94.8%,生长发育状况良好。结论 实现了棕背（鼠平）的实验室繁育,测定了棕背（鼠平）在实验室条件下的生长和繁育数据,为棕背（鼠平）实验动物化打下了基础。     

金黄地鼠与白化地鼠遗传生化基因位点概貌

目的 建立金黄地鼠和白化地鼠遗传生化基因位点.方法 选用小鼠和大鼠的遗传生化基因位点,采用蛋白质和同工酶醋酸纤维电泳的方法,对金黄地鼠和白化地鼠进行生化基因位点检测.结果 建立了金黄地鼠和白化地鼠25个生化基因位点,分析金黄地鼠和白化地鼠遗传生化基因位点的多态性,为进一步研究金黄地鼠白化突变系的遗传机理奠定基础.结论 金黄地鼠生化基因位点存在多态性,白化地鼠与金黄地鼠生化基因位点存在差异.     

系统性念珠菌感染小鼠模型的制备

目的 建立稳定的系统性念珠菌感染小鼠模型,规范其操作方法。方法 采用环磷酰胺对小鼠进行免疫抑制后,选择白色念珠菌（C.albicans）和非白念珠菌（C.parapsilosis）分别接种ICR小鼠,从免疫抑制、菌株制备、接种剂量和接种途径等方面对建模过程进行质量控制,通过生存分析、组织载菌量和病理学检查对模型进行评价。结果 我们建立的系统性念珠菌感染小鼠模型显示肾脏为靶器官,多器官弥散性真菌感染的典型病理组织学改变。结论 通过对建模过程各环节进行规范,可得到稳定的系统性念珠菌感染小鼠模型,该模型可应用于系统性念珠菌感染的致病机理,免疫防御及抗真菌药物筛选等研究领域。