败酱草多糖体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究

目的: 了解败酱草多糖(AP4)对呼吸道合胞病毒的体外抑制作用.方法: 经提取、沉淀、离心、大孔吸附树脂两次层析后,得败酱草抗病毒多糖AP4.通过细胞培养法检测呼吸道合胞病毒对Hela细胞的致病变作用及AP4对呼吸道合胞病毒感染Hela细胞的治疗作用.结果: AP4半数中毒浓度(TC50)为11.07mg/ml,抑制呼吸道合胞病毒的半数有效浓度(EC50)为0.097mg/ml,治疗指数(TI)为114;病毒唑半数中毒浓度(TC50)2.087 mg/ml,抑制呼吸道合胞病毒的半数有效浓度(EC50)为0.0385 mg/ml,治疗指数(TI)为54.结论: 败酱草抗病毒有效部位AP4在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用.     

十味板蓝根颗粒剂抗病毒作用的实验研究

目的:探讨十味板蓝根颗粒剂体外抗柯萨奇病毒B3株(CVB3)、单纯疱疹病毒II型(HSV II)的作用.方法:采用组织细胞培养法,观察药物毒性和细胞病变效应,评价十味板蓝根颗粒剂的细胞毒性及抗病毒效果.结果:十味板蓝根颗粒剂对Hep-2和Hela细胞毒性均较低(TD0为1 mg·mL-1),浓度在125μg·mL-1以上时,可以明显抑制HSV-II病毒对Hela细胞感染;浓度达250 μg·mL-1以上时,明显抑制CVB3病毒对Hep-2细胞的致病变作用,对Hep-2和Hela细胞有保护作用,并且随着药物浓度的增加,CPE特征逐渐减弱,病毒抑制率(细胞存活率)明显升高.结论:十味板蓝根颗粒剂在体外能明显抑制CVB3和HSV-II病毒的致细胞病变作用.     

双黄连颗粒体外抗呼吸道合胞病毒作用的实验研究

目的研究双黄连颗粒体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法通过细胞培养,观察细胞病变(CPE),观察双黄连颗粒在人喉癌上皮细胞株(Hep-2)中抑制RSV的作用。结果双黄连颗粒能抑制RSV复制,具有明显的抗病毒作用。结论双黄连颗粒具有抑制RSV在Hep-2细胞内复制的作用。     

硫酸卡那霉素体外抑制呼吸道合胞病毒作用的研究

目的评价硫酸卡那霉素体外抗呼吸道合胞病毒作用机制。方法采用细胞培养技术观察硫酸卡那霉素对细胞的毒性和抗呼吸道合胞病毒作用。结果用空斑减数实验测得半数有效剂量(EC50)为(1.71±0.23)mg/ml,MTT法测定其半数中毒浓度(CC50)为(12.36±0.85)mg/ml,SI为7.2,SI>4(有意义);在不同时间给药对病毒的抑制实验中,呼吸道合胞病毒感染喉癌上皮细胞(Hep-2)细胞后1、2、4、6、8和10h给药均有抑制作用(P<0.05),穿入和吸附抑制实验表明其对病毒穿入过程有明显地抑制作用(P<0.05),但是对吸附过程没有抑制作用。硫酸卡那霉素对RSV病毒没有直接的灭活作用。结论硫酸卡那霉素在体外实验中对呼吸道合胞病毒穿入细胞及在细胞内复制的过程均有抑制作用。     

小儿双金清热口服液体外抗病毒作用研究

目的观察小儿双金清热口服液体内外的抗病毒作用。方法设置双金药物组、双黄连对照组、利巴韦林对照组、病毒对照组及空白对照组,采用人喉癌细胞培养法检测双金体外抗呼吸道合胞病毒、肠道病毒、柯萨奇B3型病毒、口唇疱疹病毒1型;犬肾细胞培养法检测双金抗甲型流感病毒H1N1病毒作用,采用MTT法检测细胞OD值并计算半数有效浓度、半数中毒浓度及治疗指数。结果体外试验表明双金可抑制呼吸道合胞病毒、肠道病毒、柯萨奇B3型病毒、口唇疱疹病毒1型、甲型流感H1N1病毒的繁殖,半数有效浓度分别为0.003 8、0.006 1、0.003 6、0.008 6、0.001 0 mg·m L-1,半数中毒浓度为对人喉癌细胞半数中毒浓度为0.064 mg·m L-1,对犬肾细胞半数中毒浓度为0.032 mg·m L-1,治疗指数TI分别为16.7、10.4、17.8、32.3。对口唇疱疹病毒1型病毒的繁殖没有抑制作用,TI=7.4;体外试验表明,与双黄连比较,双金的大、中剂量组具有相同的抗甲型流感病毒H1N1、呼吸道合胞病毒的作用。结论双金清热口服液有较好的体外抗呼吸道合胞病毒、肠道病毒、柯萨奇B3型病毒、口唇疱疹病毒1型、甲型流感H1N1病毒作用。     

复方野马追胶囊抗呼吸道合胞病毒研究

目的观察复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒(RSV)感染及炎性因子IL-8释放的抑制作用。方法采用细胞病变(CPE)观察和活细胞染色方法,观察复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒感染细胞的保护。同时,通过ELISA法测定培养上清IL-8的变化。结果复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒感染有抑制作用,其中以治疗法效果最为明显。同时该药对呼吸道合胞病毒感染后引起的IL-8释放也有明显抑制作用。结论复方野马追胶囊具有明显的体外抗呼吸道合胞病毒感染、降低感染后气道炎症因子释放的作用。     

复方抗病毒制剂体外抗流感病毒和呼吸道合胞病毒作用及毒性研究

目的 测定复方抗病毒制剂体外对流感病毒和呼吸道合胞病毒的抗病毒作用. 方法 用鸡红细胞血凝素滴定法测定不同浓度复方抗病毒制剂在狗肾传代细胞（MDCK）中对流感病毒的抑制作用;用中和实验测定复方抗病毒制剂在Hep 2细胞中对呼吸道合胞病毒的活性. 结果 复方抗病毒制剂浓度＜1.5 mg&#8226;mL^-1时对MDCK细胞及Hep 2细胞无明显毒性. 浓度＞0.15 mg&#8226;mL^-1能抑制流感病毒的血凝活性和呼吸道合胞病毒对靶细胞的攻击作用. 结论 复方抗病毒制剂体外对流感病毒和呼吸道合胞病毒具有较强的抑制作用,且有较大的安全性.     

展枝马尾藻硫酸多糖对呼吸道合胞病毒的抗病毒活性及其机理研究

目的研究从褐藻展枝马尾藻Sargassumpatens中分离到的一种硫酸多糖SP2的抗病毒活性及抗病毒作用机理。方法通过细胞致病效应实验、MTT测定和空斑形成抑制实验对该多糖的抗病毒活性、细胞毒性和可能的抗病毒机理进行测定。结果通过空斑形成抑制实验测定结果显示,该多糖对呼吸道合胞病毒有好的抗病毒活性,其EC50值为1.1但没有抗流感病毒A和B、副流感病毒的活性。多糖的CC50高达3000μg.mL-1。其对呼吸道合胞病毒的抗病毒选择性指数被估计大于2727。用SP2预处理宿主细胞,不显示任何对病毒感染的保护作用。SP2对呼吸道合胞病毒有一定的杀病毒活性,其EC50值超过100μg.mL-1。时间加入实验证明,只有在37℃呼吸道合胞病毒吸附时期加入SP2才能完全抑制病毒的复制。结论SP2可能是一种有潜力的抗呼吸道合胞病毒感染的多糖。其对呼吸道合胞病毒的抗病毒作用机制与抑制病毒的吸附有关。     

痰热清对呼吸道合胞病毒体外抑制作用研究

目的研究中草药痰热清注射液对呼吸道合胞病毒体外抑制作用。方法以利巴韦林为阳性对照药,采用细胞培养技术及四氮唑蓝（MTT）比色法,观察在痰热清干预下,感染呼吸道合胞病毒Hep-2细胞的病变效应（CPE）及光密度值（D）,计算各组细胞的病毒抑制率。比较不同药物剂量及不同给药方式（预防给药、直接灭活及治疗给药）下痰热清对呼吸道合胞病毒的抑制作用。结果 3种给药方式下,CPE法及MTT比色法测得痰热清抗呼吸道合胞病毒的半数有效浓度（EC50）分别为0.735、0.815、0.766g/L和0.854、0.842、0.887g/L,治疗指数（TI）分别为11.32、10.21、10.86和9.74、9.88、9.38;3种方式给药下痰热清对呼吸道合胞病毒的抑制作用无差异（P〉0.05）。结论痰热清对呼吸道合胞病毒有直接灭活及抑制增殖作用,对其感染靶细胞有阻断作用,并呈明显量效关系。     

褪黑素对病毒唑体外抗呼吸道合胞病毒的协同作用研究

目的:研究褪黑素对病毒唑体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的协同作用。方法:采用MTT比色法,观察2种药物联用时对RSV在人喉癌上皮细胞(Hep-2)所致细胞病变的抑制效应,统计学及金正均法q值判断2种药物的相互作用。结果:病毒唑对RSV具有抑制作用,且呈浓度依赖的趋势;褪黑素几乎没有抗RSV活性,但能增强病毒唑对RSV的抑制作用;2种药物合用对病毒的抑制作用明显增强,褪黑素(25、50mg·L-1)分别与病毒唑(50、100、200mg·L-1)合用时,q值均>1.15,呈现协同作用。结论:病毒唑与褪黑素联合可协同增强对RSV的抑制作用。     

热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用

目的:研究中草药热毒宁注射液对流感病毒FM_1的抑制作用。方法:以利巴韦林为阳性对照药,采用细胞培养技术及四氮唑蓝(MTT)比色法,观察在热毒宁干预下,受FM_1感染的犬肾传代细胞(MDCK细胞)的病变效应(CPE)及光密度值(D),计算各组细胞的病毒抑制率。比较不同药物剂量及3种不同给药方式(预防给药、直接灭活及治疗给药)下热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用。结果:热毒宁注射液半数中毒浓度(TC_(50))为10.11g·L~(-1)。预防给药、直接灭活及治疗给药方式下,CPE法测得其抗流感病毒FM_1的半数有效浓度(EC_(50))分别为0.625、0.725、0.629 g·L~(-1),治疗指数(TI)分别为16.17、13.94、16.07;MTT比色法测得其抗流感病毒FM_1的EC_(50)分别为1.135、0.770、0.661 g·L~(-1),TI分别为8.91、13.12和15.29。3种方式给药,MTT法测定时,热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用无差异;CPE法测定时,热毒宁浓度在0.812 51 g·L~(-1)及以上对流感病毒FM_1的抑制作用无差异。结论:热毒宁对流感病毒FM_1有直接灭活及抑制增殖作用,对其感染靶细胞有阻断作用,且呈明显量效关系。     

复方大青叶注射液体外抑菌作用及抗内毒素作用的研究

目的研究复方大青叶注射液体外抑菌作用及抗内毒素作用。方法体外抑菌作用采用液体培养基连续稀释法测定复方大青叶的最小抑菌浓度(MIC);抗内毒素作用采用细菌内毒素检查法。结果体外抑菌实验结果表明复方大青叶注射液对被测微生物的最小抑菌浓度为:金黄色葡萄球菌,MIC62 g.L-1;藤黄微球菌,MIC62 g.L-1;枯草芽孢杆菌,MIC62 g.L-1;大肠埃希菌,MIC125 g.L-1;变形杆菌,MIC125 g.L-1;新型隐球菌,MIC62 g.L-1;白假丝酵母菌,MIC125 g.L-1;啤酒酵母菌,MIC125 g.L-1。抗内毒素结果:复方大青叶注射液62 g.L-1即具有抗内毒素作用。结论复方大青叶注射液体外具有广谱抗菌作用,不仅对革兰阳性细菌有较强的抑菌作用,而且对某些真菌也有较强的抑菌作用;复方大青叶注射液有较强的抗内毒素活性。     

氧化苦参碱黄芩苷组合物对HepG2.2.2.15细胞乙肝病毒抗原表达的抑制作用

目的研究氧化苦参碱黄芩苷组合物对HepG2.2.2.15细胞乙型肝炎病毒抗原表达的影响。方法培养HepG 2.2.2.15细胞并在使用药物处理细胞之后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色分析法检测药物对细胞的毒性作用,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测药物对细胞向培养上清液中分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用。结果氧化苦参碱在0.125~1 g.L-1浓度范围内,对HepG 2.2.2.15细胞毒性较小,而2 g.L-1和4 g.L-1的剂量对细胞毒性较大;氧化苦参碱对HBsAg和HBeAg的抑制作用,在0.125~1 g.L-1剂量范围内逐渐增加。黄芩苷在0.625~2 g.L-1浓度范围内,对细胞的毒性作用逐渐增加;黄芩苷对HBsAg和HBeAg的抑制作用,在0.625~1 g.L-1剂量范围内逐渐增加,但是抑制效果明显弱于氧化苦参碱。氧化苦参碱黄芩苷组合物(A~F组)对HepG2.2.2.15细胞株分泌乙肝病毒抗原具有良好的抑制作用,而且对HBeAg的抑制效果优于HBsAg。其中C组氧化苦参碱黄芩苷组合物对乙肝病毒抗原分泌抑制作用优于单独使用氧化苦参碱(HBsAg:P=0.043;HBeAg:P=0.026)。结论氧化苦参碱黄芩苷组合物对HepG 2.2.2.15细胞株分泌乙肝病毒抗原有良好的协同抑制作用。     

血管生成抑制因子arresten抑制huvec细胞增殖和迁移的实验研究

目的探讨arresten对人脐静脉内皮细胞huvec增殖和迁移的影响,了解其抑制血管生成的途径。方法采用MTT比色法,观察不同浓度的arresten对huvec细胞增殖的影响,Transwell小室检测arresten对huvec细胞迁移的影响。结果MTT比色法显示,arresten对huvec细胞增殖具有抑制作用,随着浓度的增加,arresten对huvec细胞增殖抑制作用也增强,但当其浓度增加到800μg·L-1后其增殖抑制率不再提高;arresten浓度为0、400μg·L-1及800μg·L-1时迁移至Transwell小室膜下的huvec细胞数分别为105±8、77±9、53±6(0·05>P>0·01)。结论arresten能够抑制hu-vec细胞的增殖和迁移,这可能是其抑制血管生成的途径之一。     

康莱特联合阿霉素的体外抗肿瘤活性

目的探讨康莱特与阿霉素联合应用的体外抗肿瘤活性及其相关机制。方法将康莱特与阿霉素单独及联合应用于骨肉瘤细胞,采用MTT法检测细胞毒性作用,流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例,倒置相差显微镜、荧光显微镜下观察凋亡细胞形态改变。结果康莱特质量浓度达到1 g.L-1时,细胞抑制率不再明显改变,但如与1 mg.L-1阿霉素合用将使细胞抑制率进一步提升(P<0.01)。细胞形态观察及凋亡率测定也显示,康莱特与阿霉素联用可诱导更多骨肉瘤细胞凋亡。结论康莱特与阿霉素合用可高效杀伤肿瘤细胞。     

反相离子对高效液相色谱法测定威替米星及其有关物质的含量

目的:建立一种用于分析新的氨基糖苷类抗生素———威替米星的反相离子对高效液相色谱法。方法:直接采用紫外检测器检测威替米星及其有关物质。在AgilentXDBC8柱上威替米星和有关物质达到完全分离,柱温为30°C,流动相为乙腈∶缓冲液(20mmol·L-1庚烷磺酸钠,30mmol·L-1三乙胺,加磷酸调pH至2.5)(25∶75)。结果:方法评价结果显示本法具有良好的线性和重现性。威替米星的最低检测限为0.1μg。结论:本研究建立的方法可以用于测定原料药和注射液中威替米星的含量和有关物质检查。     

乳糖酸红霉素对葛根素药物动力学的影响

目的研究葛根素在大鼠体内的药物动力学过程以及乳糖酸红霉素对葛根素在大鼠体内药物动力学过程的影响。方法对大鼠分别单独静注葛根素溶液 ,联合静注葛根素和不同剂量的乳糖酸红霉素溶液 ;采用高效液相色谱法测定葛根素在大鼠体内的血药浓度 ;用 3P97药动学程序计算其药物动力学参数。结果葛根素在大鼠体内的药物动力学过程呈双隔室开放模型 ;乳糖酸红霉素在低剂量时 (0 2 5g·L-1和 2 5 0g·L-1)对葛根素的药动学过程无显著性影响 (P >0 0 5 ) ,但在高剂量时 (12 5 0 g·L-1)有显著性影响 (P <0 0 1)。结论葛根素与乳糖酸红霉素合用时 ,乳糖酸在一定质量浓度内 ,二者可联合用药 ;在较高质量浓度 (12 5 0g·L-1)时会显著抑制葛根素从大鼠体内的消除 ;二者合并用药时应对葛根素进行临床给药监测     

三肽化合物酪丝亮肽(YSL)对腹水型肝癌H_(22)小鼠免疫调节作用实验研究

目的观察三肽化合物酪丝亮肽(tyroserleutide,YSL)对腹水型肝癌H22小鼠的抗肿瘤作用,观察YSL对荷瘤小鼠T淋巴细胞转化及NK细胞杀伤活性的影响。方法建立腹水型肝癌H22小鼠动物模型,观察YSL对腹水型肝癌H22小鼠生存时间的影响;以MTT法检测YSL对荷瘤小鼠T淋巴细胞转化及NK细胞杀伤活性的影响。结果YSL能够明显延长腹水型肝癌H22小鼠生存时间;YSL在5μg.kg-1和50μg.kg-1时可以促进腹水型肝癌H22小鼠T淋巴细胞的转化;YSL在0.5、5和50μg.kg-1时增强荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性。结论YSL可以延长腹水型肝癌H22小鼠的生存时间;促进荷瘤鼠的T淋巴细胞转化及NK细胞杀伤活性。     

提高难溶性药物尼群地平溶出率和口服生物利用度的研究

目的通过制剂手段提高难溶性药物尼群地平的体外溶出率和家犬体内的相对生物利用度。方法用共研磨法制备研磨混合物,并用差热分析法、X射线衍射法、显微镜法鉴别药物在共研磨混合物中的存在状态,在此基础上采用直接压片法制备口腔速崩片,测定体外溶出速率,所有试验均以物理混合物为参照进行比较;用HPLC法测定3只健康家犬分别口服尼群地平口腔速崩片(受试制剂)、市售普通片(参比制剂)后不同时间血浆中尼群地平的浓度,计算药物代谢动力学参数及相对生物利用度。结果共研磨混合物中尼群地平的粒径远小于物理混合物,并以微晶状态存在;以共研磨混合物制备的口腔速崩片的溶出速度和程度均大于以物理混合物制备的口腔速崩片;在家犬体内受试制剂和参比制剂的tmax分别为1.5 h和4.25 h,ρmax分别为176.54μg.L-1和111.12μg.L-1,AUC0-t分别为903.78μg.h.L-1和651.99μg.h.L-1,AUC0-∞分别为1 030.46μg.h.L-1和903.68μg.h.L-1,受试制剂的相对生物利用度为138.5%;受试制剂的体内吸收和体外溶出速率均高于参比制剂。结论通过制备共研磨混合物和口腔速崩片的方法,提高了尼群地平的体外溶出度和家犬体内的相对生物利用度。     

茵陈水溶性提取物体外抗巨细胞病毒效应的实验研究

目的:探讨茵陈水溶性提取物溶液体外抗人巨细胞病毒(HCMVAD169)的效应。方法:采用细胞病变(CPE)抑制法观察茵陈水溶性提取物溶液对HCMVAD169毒株的抑制作用,使用MTT比色法检测细胞的损伤程度,并利用吸光度(A)值评价茵陈水溶性提取物溶液的抗HCMV的效应。结果:茵陈水溶性提取物溶液半数中毒浓度(TC50)为904.49mg·L-1,半数有效浓度(IC50)为195.11mg·L-1mg·L-1,治疗指数(TI)为4.64。茵陈水溶性提取物溶液具有抗HCMV的作用,且其作用随药物浓度的增高而增强。结论:体外实验证实,茵陈水溶性提取物是理想的抗HCMV中药。