东莨菪碱对吗啡致小鼠依赖性的影响

背景：莨菪碱类药物在改善微循环、抗休克和作为中药麻醉剂在我国临床上已广泛应用。但东莨菪碱抗吗啡成瘾作用的动物实验报道较少。目的：了解东莨菪碱对吗啡致小鼠依赖性的影响，为开发东莨菪碱药物有无戒毒作用提供实验室依据。设计：完全随机、实验对照、开放性实验研究。地点和对象：河北工程学院生理实验室；实验对象为清洁级雄性昆明小鼠60只，2月龄，体质量(20&;#177;2)g，由河北医科大学实验中心动物室提供。干预：将60只小鼠随机抽签分为6组，每组10只。正常对照组(盐水组)，吗啡组，4mg／kg东莨菪碱组，0．4mg／kg东莨菪碱组，吗啡+4mg／kg东莨菪碱组，吗啡+0．4mg／kg东莨菪碱组。各组小鼠腹腔注射相应药物，1次／d，连续7d。6组分别于第1～7天用热板法观察给药后1h的痛阈。并于第7天给药后6h，腹腔注射纳络酮5mg／kg催促，观察30min内小鼠跳跃次数，并结合第1，7天肛温评定小鼠依赖形成。主要观察指标：各组小鼠痛阈；跳跃次数和跳跃动物数(率)：肛温结果：吗啡依赖组小鼠痛阈下降，跳跃次数和跳跃动物率增加，肛温下降。东莨菪碱(0．4，4mg／ks&;#215;7d)能明显提高依赖性小鼠的痛阈．减少跳跃次数和跳跃动物率，恢复其肛温。结论：东莨菪碱有对抗吗啡致小鼠依赖性的作用。     

莨菪类生物碱与吗啡并用对小鼠吗啡成瘾性的影响

背景莨菪碱类药物改善微循环和作为中药麻醉剂已在国内临床上广泛应用,但莨菪类生物碱抗吗啡成瘾作用的动物实验缺乏深入报道.目的观察莨菪类生物碱与吗啡合用对抗吗啡致小鼠依赖性的作用,以期为开发防治阿片类物质成瘾的莨菪类药物提供实验学依据.设计以实验动物为研究对象的随机对照实验.单位一所大学医学院的生理学实验室.材料本实验于2004-06/2004-08在河北工程学院医学部生理学实验室完成.选择健康雄性昆明小鼠50只,2月龄,体质量(20±2)g,由河北医科大学实验动物中心提供,清洁级.方法依据吗啡成瘾动物的依赖性评价指标,选择痛阈和纳络酮跳台反应作为观察项目.将50只小鼠随机分为5组,即对照组、吗啡组、东莨菪碱组、山莨菪碱组和阿托品组,每组10只.分别于第1天至第7天每天用热板法观察腹腔注射生理盐水、吗啡及莨菪类生物碱合并吗啡后1 h的痛阈.并于末次(第7天)给药后6 h,腹腔注射纳络酮5 mg/kg催促,观察30 min内小鼠跳跃次数.主要观察指标①吗啡成瘾小鼠的痛阈;②吗啡成瘾小鼠的跳跃次数和跳跃动物数(率).结果与对照组比较,吗啡组小鼠的痛阈明显下降(P＜0.05或P＜0.01),跳跃次数和跳跃动物率明显增加.东莨菪碱与吗啡合用7 d后,明显提高吗啡依赖小鼠的痛阈(P＜0.01),并减少跳跃次数和跳跃动物率(P＜0.05);阿托品和山莨菪碱与吗啡合用在提高吗啡依赖小鼠痛阈方面作用较弱,但减少跳跃次数和跳跃动物率的作用较强(P＜0.01).结论莨菪类生物碱均具有不同程度对抗吗啡依赖性的作用,为吗啡依赖患者的戒断作用提供重要的实验学依据.     

莨菪类生物碱与吗啡并用对小鼠吗啡成瘾性的影响

背景：莨菪碱类药物改善微循环和作为中药麻醉剂已在国内临床上广泛应用，但莨菪类生物碱抗吗啡成瘾作用的动物实验缺乏深入报道。目的：观察莨菪类生物碱与吗啡合用对抗吗啡致小鼠依赖性的作用．以期为开发防治阿片类物质成瘾的莨菪类药物提供实验学依据。设计：以实验动物为研究对象的随机对照实验。单位：一所大学医学院的生理学实验室。材料：本实验于2004-06／2004-08在河北工程学院医学部生理学实验室完成。选择健康雄性昆明小鼠50只，2月龄，体质量(20&;#177;2)g，由河北医科大学实验动物中心提供，清洁级。方法：依据吗啡成瘾动物的依赖性评价指标，选择痛阈和纳络酮跳台反应作为观察项目。将50只小鼠随机分为5组，即列照组、吗啡组、东莨菪碱组、山莨菪碱组和阿托品组，每组10只。分别于第1天至第7天每天用热板法观察腹腔注射生理盐水、吗啡及茛菪类生物碱合并吗啡后1h的痛阈。并于末次(第7天)给药后6h，腹腔注射纳络酮5mg／kg催促，观察30min内小鼠跳跃次数。主要观察指标：①吗啡成瘾小鼠的痛阈；②吗啡成瘾小鼠的跳跃次数和跳跃动物数(率)。结果：与对照组比较，吗啡组小鼠的痛闯明显下降(P&;lt;0．05或P&;lt;0．01)，跳跃次数和跳跃动物率明显增加东莨菪碱与吗啡合用7d后，明显提高吗啡依赖小鼠的痛阈(P&;lt;001)，并减少跳跃次数和跳跃动物率(P&;lt;0．05)；阿托品和山莨菪碱与吗啡合用在提高吗啡依赖小鼠痛阈方面作用较弱，但减少跳跃次数和跳跃动物率的作用较强(P&;lt;0．01)。结论：莨菪类生物碱均具有不同程度对抗吗啡依赖性的作用，为吗啡依赖患者的戒断作用提供重要的实验学依据。     

莨菪类生物碱对吗啡依赖小鼠痛阈影响的比较

目的:观察莨菪类生物碱对吗啡依赖小鼠痛阈的影响。方法:连续腹腔注射吗啡(10mg/kg,1次/d,共7d)建立小鼠依赖模型,并腹腔注射莨菪类生物碱(4mg/kg,1次/d,共7d)。结果:吗啡组小鼠痛阈明显下降。东莨菪碱能显著提高吗啡依赖小鼠的痛阈。同剂量山莨菪碱和阿托品均有对抗吗啡依赖小鼠的痛阈下降的现象。结论:莨菪类生物碱中,东莨菪碱在提高吗啡依赖小鼠痛阈的作用最强。     

莨菪类生物碱对吗啡依赖小鼠痛阈影响的比较

目的：观察莨菪类生物碱对吗啡依赖小鼠痛阈的影响。方法：连续腹腔注射吗啡(10mg／kg，1次／d，共7d)建立小鼠依赖模型，并腹腔注射莨菪类生物碱(4mg／kg，1次／d，共7d)。结果：吗啡组小鼠痛阈明显下降。东莨菪碱能显著提高吗啡依赖小鼠的痛阈。同剂量山莨菪碱和阿托品均有对抗吗啡依赖小鼠的痛阈下降的现象。结论：莨菪类生物碱中，东莨菪碱在提高吗啡依赖小鼠痛阈的作用最强。     

纳洛酮对吗啡依赖小鼠条件性位置偏爱及戒断症状的影响

目的:了解阿片受体拮抗剂纳洛酮在吗啡依赖及其戒断症状中的作用。方法:实验于2003-09/12在中南大学湘雅二医院医学实验动物中心完成。①分组:Balb/C小鼠30只,随机分为生理盐水组、吗啡组、吗啡 纳络酮组,每组10只。②干预:吗啡组:盐酸吗啡每天两次腹腔注射,起始剂量为每次10mg/kg,逐日递增,直至第7天时每次70mg/kg;吗啡 纳洛酮组:吗啡注射方式方法同吗啡组,但在每次吗啡注射前5min,皮下注射纳洛酮1mg/kg;生理盐水组:按照同期对照的原则注射生理盐水作为阴性对照。③进入实验程序前一天及实验处理因素终止后6h测评各组小鼠条件性位置偏爱,即观察30min内小鼠在位置偏爱实验箱白侧(伴药侧)的停留时间。④于末次注射吗啡后6h观察各组小鼠30min内跳跃反应次数、戒断反应前后1h内跳跃潜伏期、直立、躯体拉伸、体质量丧失量及腹泻等症状。结果:30只小鼠均进入结果分析。①终止处理因素后6h时,吗啡组小鼠30min内在位置偏爱实验箱白侧的停留时间为(457±304)s,吗啡 纳洛酮组小鼠30min内在位置偏爱实验箱白侧的停留时间为穴154±118雪s,与生理盐水组穴121±111雪s比较,差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。②吗啡注射同时给予纳洛酮干预减轻了戒断体征:在终止处理因素后6h,吗啡组和吗啡 纳洛酮组小鼠均表现跳跃次数增加、起跳潜伏期缩短、躯体拉伸次数增加、腹泻和体质量丧失量增加,与生理盐水组比较,差异均具有显著性(P<0.05);吗啡组还出现直立次数增多。结论:纳洛酮能有效对抗吗啡所致的小鼠吗啡依赖,并且能有效减轻吗啡撤药时戒断体征。     

青风藤和青藤碱在体外及体内对吗啡依赖模型纳洛酮催促戒断反应的影响

背景青风藤临床用于治疗阿片类戒断综合征有明显的疗效,但该药的作用及作用机制尚未明确.目的探讨中药青风藤及其有效成分青藤碱对吗啡依赖动物模型催促戒断反应的影响.设计完全随机对照实验研究.单位解放军第一军医大学中医系.对象体外实验研究对象为豚鼠离体回肠,分为正常回肠对照组,吗啡依赖回肠组,青风藤系列剂量组,青藤碱系列剂量组和尼莫地平组.体内实验研究对象为昆明种小鼠,共100只,雌雄各半,体质量18～24 g,随机分为正常对照组,吗啡依赖模型组,青风藤组,青藤碱组和丁丙诺啡组.干预体外实验,在吗啡依赖豚鼠回肠段的恒温浴槽中,预先加入青风藤醇提液(1,2,4g/L),青藤碱(10,50,150μmol/L)或尼莫地平(0.3μmol/L),1 min后再用纳洛酮催促.体内实验,对吗啡依赖小鼠分别给予青风藤醇提液(20 g/kg,灌胃),青藤碱(60 mg/kg,腹腔注射),丁丙诺啡(0.4 mg/kg,腹腔注射),或同体积生理盐水(腹腔注射),连续给药3 d,药后30min给予纳洛酮催促.豚鼠离体回肠实验采用PCLAB生物信号采集系统测定豚鼠回肠收缩张力变化.吗啡依赖小鼠催促戒断试验观察纳洛酮催促后30 min内各组小鼠跳跃反应的动物数及小鼠体质量的改变,连续观察4 d.主要观察指标①豚鼠回肠收缩张力.②小鼠跳跃反应的动物数.③大鼠体质量的变化.结果在离体豚鼠回肠实验中,纳洛酮催促引起的回肠收缩张力在正常对照组和吗啡模型组分别是(0.46±0.167),(2.11±0.566)g,差异有显著性意义(t=7.933,P＜0.01).青风藤3个剂量组的催促回肠收缩张力分别是(1.37±0.33),(0.85±0.271),(0.62±0.137)g,与吗啡模型组比较,差异有显著意义(t=3.203,5.701,7.268,P＜0.01).青藤碱3个剂量组的回肠收缩张力分别是(1.78±0.355),(1.28 ±0.233),(0.88±0.232)g,其中中、高剂量组与吗啡模型组比较,差异有显著意义(t=3.843,5.694,P＜0.01).在纳洛酮催促的吗啡依赖小鼠模型中,在实验的第7,8,9天(吗啡已撤退),吗啡模型组小鼠的跳跃只数最多,青风藤组和青藤碱组跳跃的动物较少.各组间差异有非常显著意义(x2=42.776,37.960,22.355,P=0.000).在给予吗啡造模的7 d中,小鼠体质量明显下降.撤离吗啡后,在第9,10天,小鼠体质量逐渐恢复并增加.与吗啡模型组相比,青风藤组和青藤碱组小鼠体质量恢复较快.在实验的第10天,丁丙诺啡组小鼠体质量较青风藤组和青藤碱组明显减少,差异有显著性意义(t=5.871,P＜0.01,t=2.819,P＜0.05).结论青风藤和青藤碱在体内外均能有效抑制吗啡依赖模型纳洛酮催促的戒断反应.     

纳洛酮对吗啡依赖小鼠条件性位置偏爱及戒断症状的影响

目的：了解阿片受体拮抗剂纳洛酮在吗啡依赖及其戒断症状中的作用。 方法：实验于2003-09／12在中南大学湘雅二医院医学实验动物中心完成。①分组：Balb／C小鼠30只，随机分为生理盐水组、吗啡组、吗啡＋纳络酮组，每组10只。②干预：吗啡组：盐酸吗啡每天两次腹腔注射，起始剂量为每次10mg／kg，逐日递增，直至第7天时每次70mg／kg；吗啡＋纳洛酮组：吗啡注射方式方法同吗啡组，但在每次吗啡注射前5min。皮下注射纳洛酮1mg／kg；生理盐水组：按照同期对照的原则注射生理盐水作为阴性对照。③进入实验程序前一天及实验处理因素终止后6h测评各组小鼠条件性位置偏爱，即观察30min内小鼠在位置偏爱实验箱白侧（伴药侧）的停留时间。④于末次注射吗啡后6h观察各组小鼠30min内跳跃反应次数、戒断反应前后1h内跳跃潜伏期、直立、躯体拉伸、体质量丧失量及腹泻等症状。 结果：30只小鼠均进入结果分析。①终止处理因素后6h时，吗啡组小鼠30min内在位置偏爱实验箱白侧的停留时间为（457＋304）s，吗啡＋纳洛酮组小鼠30min内在位置偏爱实验箱白侧的停留时间为（154＋118）s，与生理盐水组（121&;#177;111）s比较，差异有显著性（P〈0．01，P〈0．05）。②吗啡注射同时给予纳洛酮干预减轻了戒断体征：在终止处理因素后6h，吗啡组和吗啡＋纳洛酮组小鼠均表现跳跃次数增加、起跳潜伏期缩短、躯体拉伸次数增加、腹泻和体质量丧失量增加，与生理盐水组比较，差异均具有显著性（P〈0．05）；吗啡组还出现直立次数增多。 结论：纳洛酮能有效对抗吗啡所致的小鼠吗啡依赖，并且能有效减轻吗啡撤药时戒断体征。     

瑞香素对醋酸、热板及电刺激致痛小鼠的镇痛作用

目的:探讨瑞香科植物提取物瑞香素对醋酸、热板测痛仪、电刺激致痛小鼠的镇痛作用。方法:实验于2004-03/07在赣南医学院科研中心实验室完成。①选取昆明种小鼠75只,予以醋酸致痛后随机分为5组,每组各15只,分别为生理盐水组、盐酸吗啡组、瑞香素50mg/kg组、瑞香素25mg/kg组、瑞香素12.5mg/kg组。各组灌胃给药40min后腹腔注射6g/L冰醋酸0.01mL/g,5min后再分别记录各组小鼠10min内的扭体次数。②另选取小鼠75只,随机分为5组,分组同前,采用热板法用GJ-8402型热板测痛仪致痛,准确调节热板温度在(55.0±0.5)℃,并用水银温度计校对。以放入至小鼠舔后足的时间作为痛反应的指标,此时间即为痛阈值,选择痛阈值不超过30s的小鼠。各组腹腔注射给药(药物同前)30min后,测痛阈值。③采用电刺激法观察小鼠80只,随机分为4组,每组20只,生理盐水组、盐酸吗啡组、瑞香素50mg/kg组,瑞香素25mg/kg组。将小鼠固定,用750mL/L乙醇擦去尾部皮脂,待乙醇挥发后,尾部涂一薄层导电胶。用电压3V,连续A脉冲,频率1Hz,波宽为0.04s的方波刺激小鼠尾部,连续3次,每次间隔为5min.连续刺激3次内有2次嘶叫反应者可予采用。给药后15,30,45,60,90min用同样条件重复刺激,凡连续2次不引起嘶叫者,表示药物有镇痛作用,最后分别求各组镇痛抑制率。结果:3种实验275只小鼠均进入结果分析。①扭体反应次数:醋酸致痛后,生理盐水组为(54.28±8.14)次,盐酸吗啡组0次,瑞香素50mg/kg组(8.36±1.63)次,瑞香素25mg/kg组(17.52±4.39)次,瑞香素12.5mg/kg组(30.81±6.76)次,与生理盐水组比较差异显著。②热板测痛仪痛阈反应:生理盐水组痛阈值为(20.41±2.41)s,盐酸吗啡组(42.68±2.47)s,瑞香素50mg/kg组(35.89±2.14)s,瑞香素25mg/kg组(31.67±3.10)s,瑞香素12.5mg/kg组(28.80±3.17)s,与生理盐水组比较差异显著。③对电刺激疼痛的反应率:生理盐水组15,30,45,60,90min镇痛抑制率分别为5%,5%,5%,5%,0,盐酸吗啡组95%,100%,100%,65%,15%,瑞香素50mg/kg组25%,55%,85%,45%,0,瑞香素25mg/kg组15%,30%,35%,20%,0,与生理盐水组比较差异显著。结论:瑞香素具有较明显的镇痛作用,对不同致痛模型显示了对抗作用,同时瑞香素对醋酸诱发的扭体反应,对热板所致疼痛镇痛效果较好,对电刺激引起的疼痛效果稍差,且其镇痛作用以大剂量好,并明显呈剂量依赖关系。     

东莨菪碱消除吗啡所致条件位置偏爱的形成

目的：研究记忆损害对条件位置偏爱的影响。方法：20只小鼠随机分为2组,一组给予吗啡（9mg/kg,s.c.）,并随机与条件位置偏爱箱的黑箱或白箱搭配20分钟,8小时后给予等量生理盐水,与另一箱体搭配同样时间。另一组在给予吗啡前20分钟给予注射东莨菪碱（2mg/kg,i.p.),其余同第一组。训练5天,第6天进行位置偏爱检测,以头部位置为准记录小鼠在黑白箱体内停留的时间。结果：吗啡组的小鼠在药物搭配箱体内停留的时间显著长于在另一侧箱体内停留的时间,吗啡加东莨菪碱组的小鼠在两侧箱体内停留的时间无显著差异。结论：东莨菪碱能消除条件位置偏爱的形成。     

Quantitative opioid withdrawal signs in rats: effects exerted by clothiapine administration

Summary— An opioid withdrawal syndrome, which causes alteration of several physiological signs, was induced in rats by repeated morphine administration and final naloxone injection. The aim of this study was prevention of the altered physiological profiles by utilising clothiapine, which is capable of affecting fecal and urinary excretion, rectal temperature, pain threshold levels and salivatory behaviour. Morphine was administered in three daily intraperitoneal (ip) injections for 4 days at doses of 9, 16 and 25 mg/kg (d 1), 25, 25 and 50 mg/kg (d 2), 50, 50 and 50 mg/kg (d 3) and 50, 50 and 100 mg/kg (d 4). Naloxone was injected (30 mg/kg) ip 180 min after the last morphine injection. Clothiapine was administered orally 0.7, 2 and 6 mg/kg 2 hours before the naloxone administration. Signs such as fecal and urine excretion, rectal temperature and latency times to thermal stimulus, salivation, jumping and wet dog shakes were affected in different ways by morphine, naloxone, clothiapine and combination of them. Notably the administration of clothiapine in rats receiving morphine and naloxone decreased the intensity of certain withdrawal symptoms, such as altered excretion of feces, temperature values, salivation, jumping and wet dog shakes behaviour, and elevated the nociceptive threshold values. The effects exhibited by clothiapine administration may be explained through its antimuscarinic, antiadrenergic and antidopaminergic activities interfering with the mechanisms involved in the regulation of these previously mentioned withdrawal symptoms. The use of this drug is thus suggested as a possible control of the acute phase of opioid withdrawal in heroin addicts.     

纳洛酮对三氯化铝致急性衰老小鼠记忆障碍的保护作用及其机制

背景老年性痴呆患者脑细胞中铝的含量普遍增高.大脑铝中毒与老年性痴呆有一定内在联系.纳洛酮是阿片受体特异性拮抗剂,国外有用于老年性痴呆治疗的报道.目的探讨纳洛酮对三氯化铝所致急性衰老小鼠记忆障碍的保护作用及其机制.设计随机对照观察.单位吉林医药学院.材料实验于2001-02/2003-02在吉林医药学院(原吉林军医学院)药理学实验室完成,选择健康成年昆明种小鼠100只,随机分为5组,每组20只,即对照组,模型组,纳洛酮0.1,0.3,0.9mg/kg组,除对照组外,每组小鼠每天皮下注射1次氯化铝70 mg/kg,连续注射7 d;纳洛酮组每只鼠除皮下注射氯化铝外,腹腔分别注射纳洛酮0.1,0.3,0.9 mg,/kg,对照组皮下注射等量的生理盐水.方法用跳台、避暗等实验方法测定小鼠学习记忆能力,同时测定小鼠肝丙二醛、脑B型单胺氧化酶的含量.主要观察指标①三氯化铝所致衰老模型跳台实验结果.②三氯化铝所致急性衰老模型避暗法实验结果.③各组丙二醛和B型单胺氧化酶的比较.结果①三氯化铝所致衰老模型跳台实验结果与模型组相比较,对照组及纳洛酮0.1,0.3,0.9 mg/kg剂量组能够明显减少三氯化铝小鼠5 min内受电击次数和受电击的动物数,24 h重复实验,纳洛酮能够明显延长小鼠第1次跳下平台潜伏期(P＜0.01),同时,纳洛酮能够降低三氯化铝小鼠3 min内错误总数和错误频率(P＜0.01).②三氯化铝所致急性衰老模型避暗法实验结果与模型组相比,对照组及纳洛酮0.1,0.3,0.9 mg/kg剂量组能够明显延长三氯化铝小鼠进入暗箱的潜伏期及小鼠5 min内受电击次数(P＜0.01).③各组丙二醛和B型单胺氧化酶的比较模型组丙二醛明显高于对照组和纳洛酮各剂量组(P＜0.01).模型组B型单胺氧化酶活性明显高于其他各组(P＜0.01).结论纳洛酮对三氯化铝所致急性衰老小鼠记忆障碍具有保护作用,能增强学习记忆能力.其作用机制可能和降低B型单胺氧化酶、清除过氧化脂质作用有关.     

Effects of Cannabinoid Type 2 Receptor Agonist AM1241 on Morphine-Induced Antinociception,Acute and Chronic Tolerance,and Dependence in Mice

Morphine is a potent opioid analgesic used to alleviate moderate or severe pain, but the development of drug tolerance and dependence limits its use in pain management. Previous studies showed that cannabinoid type 2 (CB₂) receptor ligands may modulate opioid effects. However, there is no report of the effect of CB₂ receptor agonist on acute morphine tolerance and physical dependence. We therefore investigated the effect of a CB₂ receptor agonist (AM1241) on morphine-induced morphine tolerance and physical dependence in mice. Repeated coadministration of AM1241 (1 or 3mg/kg intraperitoneally) and morphine (10mg/kg subcutaneously) for 7days increased the mechanical paw withdrawal threshold in mice as measured by the von Frey filament test, and 3mg/kg AM1241 in combination with morphine increased the thermal paw withdrawal latency as measured by the hot-plate test. Combination with 3mg/kg AM1241 and morphine increased acute morphine antinociception. Coadministration of 1 or 3mg/kg AM1241 and morphine reduced acute morphine tolerance, and 3mg/kg AM1241 reduced chronic morphine tolerance. Coadministration of 1 or 3mg/kg AM1241 and morphine reduced naloxone-precipitated withdrawal jumping, but not diarrhea. Coadministration of AM1241 and morphine did not inhibit spontaneous locomotor activity. Pretreatment with 3mg/kg AM1241 decreased the chronic morphine-induced Iba1 expression in spinal cord. Coadministration of AM1241 (3 mg/kg) reduced the production of interleukin-1β, tumor necrosis factor-α, and interleukin-6 induced by long-term and acute morphine treatment. Our findings suggest that the coadministration of the CB₂ receptor agonist and morphine could increase morphine antinociception and reduce morphine tolerance and physical dependence in mice.Perspective:The combination of a CB₂ agonist and morphine may provide a new strategy for better treatment of acute and chronic pain and prevention of opioid tolerance and dependence. This finding may also provide a clue for the treatment of opioid tolerance and dependence in clinics.     

鞘内注射醋酸泼尼松龙对背根节压迫大鼠的镇痛作用及其机制的探讨

目的：研究鞘内注射醋酸泼尼松龙（PA）对背根节慢性压迫（CCD）大鼠痛阈和脊髓背角nNOS表达的影响及其镇痛机制.方法：鞘内置管手术成功雄性SD大鼠100只,随机分为7天组和15天组两组,每组再随机分为假手术（Sham）组,人工脑脊液（ACSF）组,鞘内注射PA 0.5、1.0、2.0mg/kg组（n=10）.分别于CCD术前（0）及术后1,3,5,7,9,11,13,15天采用von Frey纤毛机械刺激法和热辐射刺激法评定大鼠机械刺激缩足反射阈值（PWMT）和热刺激缩足反射潜伏期（PWTL）;术后第7天和第15天运用免疫组织化学法和Western blot法观察脊髓背角nNOS表达的变化.结果：与术前基础阈值相比,除假手术组外,CCD术后各组的PWMT和PWTL均出现明显地下降（P＜0.01）,各组间无明显差异（P＞0.05）.术后第5天开始,PA 2.0 mg/kg组与ACSF组相比,PWMT和PWTL显著升高（P＜0.05）.免疫组织化学方面,背根节压迫后第7和第15天,ACSF组与PA 0.5、1.0 mg/kg组脊髓背角阳性神经元数量明显增多,三组之间比较无显著差异（P＞0.05）.PA 2.0 mg/kg组和ACSF相比,第7天和第15天均显著降低（P＜0.01）.脊髓背角Westernblot检测与免疫组织化学的结果基本一致.结论：鞘内注射PA有镇痛作用,其作用机制可能与抑制脊髓背角nNOS的表达有关.     

拳参水提取物的镇痛作用

背景:拳参别名草河车,具有清热、镇惊、理湿、消肿的功效,也有报道称其水提取物有抗心律失常作用、中枢抑制作用,其镇痛需进一步研究。目的:观察拳参水提取物的镇痛作用,并与吗啡和氨基比林进行比较。设计:完全随机数字表法,随机对照动物实验。单位:赣南医学院药理教研室。材料:实验于2004-03/05在赣南医学院科研中心实验室完成。①选取健康成年昆明种小鼠150只用于以下4个独立实验。②药品:拳参水提取物由沈阳药科大学植化教研室提供(批号:2003061001);盐酸吗啡注射液(沈阳第一制药厂,批号000305);盐酸纳洛酮注射液(盐侨(湖南)制药有限公司,批号20021109)。方法:①拳参水提取物对醋酸引起小鼠扭体反应的实验:取小鼠40只,随机数字表法分为4组:生理盐水组,拳参水提取物0.10,0.15mg/g组,氨基比林组,每组10只;分别腹腔注射0.02mL/g生理盐水,0.10,0.15mg/g拳参水提取物水溶液,0.10mg/g氨基比林溶液。注药后15min腹腔注射6g/L冰醋酸0.01mL/g,记录15min内各组小鼠扭体反应次数。②拳参水提取物对小鼠热板法致痛作用的实验:取雌性小鼠40只,随机数字表法分为4组:生理盐水组,0.10,0.15mg/g拳参水提取物组,吗啡组,每组10只,分别腹腔注射生理盐水、拳参水提取物(剂量同前)水溶液,0.01mg/g吗啡溶液。用GJ-8402型热板测痛仪,致痛温度调节至(55.0±0.5)℃,以舔后足作为痛反应指标,痛阈潜伏期均不超过60s。给药后15,30,60min各测1次痛觉反应。用热板法测定给药后15,30,60min的痛觉反应。③纳洛酮对吗啡、拳参水提取物对小鼠热板法致痛作用的实验:取雌性小鼠30只,采用随机数字表法分为3组:生理盐水组,纳洛酮 吗啡组,纳洛酮 拳参水提取物组,每组10只,分别腹腔注射0.02mL/g生理盐水,0.004mg/g纳洛酮溶液 0.01mg/g吗啡溶液,0.004mg/g纳洛酮溶液 0.15mg/g拳参水提取物,热板法测定给药后15,30,60min的痛觉反应。④拳参水提取物对电刺激致痛的实验:小鼠40只,随机数字表法分为4组,10只/组,分别腹腔注射0.02mL/g生理盐水,0.10,0.15mg/g拳参水提取物,1g/L吗啡,于给药后20,35,50,70min重复电刺激,电刺激法测定痛觉反应。主要观察指标:①小鼠扭体反应次数。②热板法致小鼠痛觉反应的时间。③电刺激法致小鼠镇痛率。结果:共选取健康成年昆明种小鼠150只用于4个独立实验,全部进入结果分析。①小鼠扭体反应次数:拳参水提取物0.10,0.15mg/g组及氨基比林组小鼠给药后15min扭体反应次数均少于生理盐水组[(15.1±11.1),(8.0±6.5),(6.3±3.2),(54.1±20.2)次,t=3.532～3.681,P<0.01]。②热板法致小鼠痛觉反应的时间:拳参水提取物0.10,0.15mg/g组和吗啡组小鼠给药后15,30,60min痛觉反应的时间均长于生理盐水组(t=2.676～3.683,P<0.05～0.01)。③纳洛酮 拳参水提取物组小鼠给药后各时间点痛觉反应的时间均长于生理盐水组(t=2.676～3.563,P<0.05～0.01),但纳洛酮 吗啡组与生理盐水组相接近(P>0.05)。④电刺激法致小鼠镇痛率:拳参水提取物0.10,0.15mg/g组及吗啡组给药后20,35,50,70min镇痛率均高于生理盐水组(t=3.455～3.634,P<0.01)。结论:①拳参水提取物具有明显的镇痛作用,其镇痛强度与氨基比林、吗啡相当。②阿片受体拮抗剂纳洛酮可拮抗吗啡的镇痛作用,但不能拮抗拳参水提取物的镇痛作用,这表明拳参水提取物的镇痛作用并非通过激动阿片受体而发挥。     

MPTP诱导多巴胺能神经元凋亡规律和尼古丁神经保护作用的研究

目的:探讨1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导小鼠多巴胺能神经元凋亡的规律以及尼古丁对其的保护作用。方法:取28只小鼠(PD组)腹腔注射MPTP 30 mg/(kg·d),共7 d,建立小鼠帕金森病模型;取4只小鼠(Nic组)腹腔注射尼古丁(2 mg/kg,每天5次,共17 d);取4只小鼠(Nic+MPTP组)给予尼古丁预处理和MPTP;取4只小鼠(对照组)仅给予等量生理盐水。应用酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色和TUNEL染色,观察各组黑质多巴胺能神经元数目改变和凋亡细胞的变化规律。结果:慢性MPTP处理过程中,小鼠黑质TH阳性细胞数逐渐减少,于MPTP注射第3天开始出现TUNEL阳性细胞,并于第8天达到高峰。与PD组相比,Nic+MPTP组TH阳性细胞丢失和TUNEL阳性细胞增多的程度显著降低(P<0.05)。结论:采用慢性MPTP处理的模式,可诱导小鼠黑质多巴胺能神经元凋亡;尼古丁对这类神经元具有明显保护作用。     

氯胺酮对神经病理性疼痛大鼠脊髓P2X_4受体mRNA表达的影响

目的:研究氯胺酮对神经病理性疼痛大鼠脊髓P2X_4受体mRNA表达的影响.方法:雄性SD大鼠45只,体重180～220g,随机分为假手术组(S组)、对照组(C组)和氯胺酮Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(KⅠ、Ⅱ、Ⅲ组),每组9只.S组大鼠仅分离坐骨神经但不结扎,其余组建立坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型,K Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于CCI后3d开始至取材点每天腹腔注射氯胺酮5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg;S组和C组注射相同体积的生理盐水.各组大鼠分别于术前1d,术后3d、7d、14d、21d测定大鼠机械性痛觉过敏(MWT)和热痛觉过敏(TWL).各组均分别于CCI术后7d、14d、21d取3只大鼠,测定痛阈后处死,取L_(4～5)脊髓组织,用逆转录PCR(RT-PCR)方法测定P2X_4受体mRNA表达水平.结果:与术前及S组比较,C组、K Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组术后3d开始热痛阈及机械痛阈显著降低(P＜0.05).与C组比较,K Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组术后7d,14d,21d热痛阈及机械痛阈显著升高(P＜0.05).与S组比较,C组、K Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组大鼠脊髓P2X_4受体表达在术后7d、14d、21d均显著增加(P＜0.05);与C组大鼠比较,K Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组脊髓P2X_4受体表达明显减少(P＜0.05).结论:腹腔注射氯胺酮可抑制慢性神经痛大鼠痛觉过敏,该作用可能是通过作用于P2X_4受体介导的.     

Changes in morphine analgesia and side effects during daily subcutaneous administration in healthy volunteers

Tolerance to the anti-nociceptive effects of opioids develops rapidly in animals. In contrast, humans with chronic pain show little or no loss of pain relief in prospective opioid trials of 4-8 weeks duration. Employing the Brief Thermal Sensitization model to induce transient cutaneous secondary hyperalgesia, we tested the hypothesis that opioid analgesic tolerance would develop rapidly. In this outpatient randomized placebo-controlled study, subjects in the MMMMP group received two injections of subcutaneous morphine 6 mg (150 min apart) on Monday-Thursday (total 48 mg over 4 days) and matching saline placebo on Friday. Subjects in the PPPPM group received placebo on Monday-Thursday and morphine (total 12 mg) on Friday. Sixty-one healthy volunteers were enrolled; morphine side effects accounted for all nine non-completions. Compared to the first placebo day, the reduction in the area of secondary hyperalgesia on the first morphine day was significant and robust in both groups. Morphine suppression of the painfulness of skin heating and elevation of the heat pain detection threshold were also significant. During 4 days of twice-daily injections, the decline in anti-hyperalgesic effects of morphine did not reach statistical significance (p=0.06) compared to placebo. Morphine side effects did not correlate with anti-hyperalgesic effects and withdrawal symptoms did not emerge. As 4 days is the threshold for demonstrating analgesic tolerance to twice-daily morphine in animal models, a longer period of opioid exposure in healthy volunteers might be needed to detect analgesic tolerance.     

野罂粟碱镇痛作用及其机制研究

背景镇痛是野罂粟主要功效之一.以往的研究证明其具有显著镇痛作用的主要有效部位为总生物碱.野罂粟碱是从其总生物碱中分离出来的一种新的生物碱.目的探讨野罂粟碱的镇痛作用及其作用机制.设计以实验动物为观察对象的随机对照实验.单位承德医学院中药研究所材料实验于2001-08/2003-12在承德医学院中药研究所(河北省中药研究与开发重点实验室)完成.选用140只小鼠,随机分为14组,每组10只.方法①镇痛效果比较.随机分5组盐水对照组,罂粟碱2.5,5.0和10.0mg/kg组和吗啡组.②与内啡肽关系比较.随机分5组盐水对照组,野罂粟碱组,野罂粟碱+纳洛酮组,吗啡组和吗啡+纳洛酮组.③与一氧化氮关系比较.随机分4组,盐水对照组,野罂粟碱组,野罂粟碱+L-精氨酸400mg/kg组和L-硝基精氨酸甲酯37.5mg/kg组.致痛方法为小鼠右后足掌皮下注射10 g/L甲醛20μL,疼痛观察项目为行走自如得0分;跛行,不动时撑地得1分;抬足得2分;抖足或舔足得3分.观察分两个时相致痛后0～10min为第1时相,20～30min为第2时相.主要观察指标不同药物作用下各组小鼠的疼痛反应评分.结果①野罂粟碱可显著的降低甲醛致痛小鼠第2时相的疼痛反应评分(P＜0.05～0.01).大剂量对第1时相的疼痛反应也有一定的抑制作用(P＜0.05).吗啡对两个时相的疼痛反应均有显著的抑制作用(P＜0.01).②纳洛酮可完全拮抗吗啡的镇痛作用,而对野罂粟碱的镇痛作用无明显影响.③L-精氨酸可减弱野罂粟碱对第2相疼痛反应的抑制作用,L-硝基精氨酸甲酯可增强野罂粟碱的镇痛作用.结论野罂粟碱有显著的镇痛作用,阿片拮抗剂纳络酮可完全拮抗吗啡的镇痛作用,但不能改变野罂粟碱的作用,提示野罂粟碱的镇痛作用与内源性阿片系统无关.L-精氨酸可部分的抑制野罂粟碱的镇痛作用,而L-硝基精氨酸甲酯对野罂粟碱的镇痛作用有一定的增强作用.提示野罂粟碱的镇痛可能部分的与抑制一氧化氮的生成或释放有关.