家蚕近交系遗传纯度的RAPD检测

目的分析家蚕近交系IS-c108A的遗传纯度,为家蚕实验动物化的培育工作提供指导。方法应用经过筛选的20条随机引物对家蚕近交系IS-c108A(F10)的3个蛾区各30个个体和该近交系的亲本系统c108、对照实用化品种871各30个个体的基因组DNA进行RAPD扩增,计算个体间和蛾区间的相似系数及遗传距离。结果家蚕近交系IS-c108A(F10)的3个蛾区内的多态性带频率分别为1.807%、1.841%、1.841%,平均为1.830%;起点亲本c108个体间多态性带频率为7.207%,对照品种871个体间的多态性带频率为7.08%;而近交系IS-c108A与c108之间的多态性带频率为49.20%,c108和871品种之间的多态性带频率为58.33%。家蚕近交系IS-c108A10的3个蛾区内个体之间遗传相似系数的平均值分别为0.99581、0.99555、0.99551,总平均为0.99562。结论家蚕近交系IS-c108A(F10)已具有较高的遗传纯合度,家蚕具有易于获得高纯的有利条件。     

利用RAPD标记分析长白山越桔的遗传多样性及亲缘关系

目的分析长白山越桔遗传多样性及其亲缘关系。方法用随机扩增多态DNA(RAPD)标记方法对1种野生越桔和2种不同的栽培越桔进行遗传多样性检测和遗传分析。结果采用40个随机引物共检测72个位点,其中多态位点27个,占37.5%;相似系数矩阵表明野生越桔和栽培越桔Ⅰ、栽培越桔Ⅱ的遗传距离分别为0.764和0.809;聚类图表明野生越桔和栽培越桔Ⅱ亲缘关系较近。结论长白山越桔的遗传多样性水平较低,野生越桔和栽培越桔之间的遗传变异不大,遗传因素在越桔形态变异上的作用小于环境因素。     

3个鼠源性肿瘤线粒体DNA编码区基因RFLP分析

目的了解线粒体DNA突变在肿瘤发生发展中的作用.方法应用PCR-限制性片段长度多态性分析技术对LA795、CT26和SCC891等3个肿瘤细胞系mtDNA编码区基因片段进行了分析.结果 mtDNA编码区的tRNAMet Glu Ⅰle及NDI基因核酸片段经HaeⅢ等16种内切酶消化后,这些肿瘤细胞系表现出完全相同的酶切图谱,其酶切格局及酶切片段大小完全相同.结论本组肿瘤细胞系mtDNA编码区基因结构相对稳定.     

贵州省同一产地野生和栽培天麻的RAPD分析

目的: 对贵州省同一产地野生和栽培天麻的遗传多态性进行分析.方法: 采用随机扩增多态性DNA标记技术.结果: 从30个随机引物中筛选到6个多态性强、重复性好的引物.该6个引物的扩增结果表明,贵州省同一产地野生和栽培天麻的指纹图谱有明显差异,差异系数为40%～60%,而栽培天麻之间的差异并不显著.结论: 本实验为天麻的分子生物学鉴定及天麻种质资源合理利用及科学的栽培育种提供了一定的科学依据.     

两个不同地区东方田鼠杂交子代RAPD标记分析

目的研究不同地区东方田鼠杂交后产下的子代的遗传特性.方法筛选4条10bp随机引物对宁夏和洞庭湖地区东方田鼠杂交子代的基因组进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,并对不同地区亲代以及子代相互之间的基因组DNA进行相似性分析.结果①所有东方田鼠均有相同的扩增片段出现;②两个不同地区的亲代分别有特异性片般;③亲代的DNA带型均能在子代中找到;④同一胎次东方田鼠之间基因共享度大约在72%～96%之间.结论RAPD分析能在一定程度上反映出东方田鼠种的特性以及亚种的特异性,而且同一胎次之间基因共享度较高.     

山医群体中国地鼠近交E家系RAPD分析

目的　分析山医群体中国地鼠E家系的遗传纯度。方法　应用经过筛选的 3 1条随机引物对中国地鼠E家系 12只个体基因组DNA进行RAPD扩增 ,计算近交个体间的相似系数。结果　所有样品的相似系数0 943 1到 0 9978之间变动 ,平均相似系数为 0 9749,聚类分析得到了这些个体的同源树资料。结论　山医群体E家系有较高的遗传纯度     

对5个S180克隆细胞株RAPD特征的研究

目的运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术建立S180的5个克隆细胞株的特异性图谱。方法运用23条引物对S180-S2D9、S180-S2D7、S180-S1F11、S180-S1H10、S180-S1B115个克隆细胞株的基因组DNA进行RAPD-PCR扩增,以琼脂糖电泳观察结果。结果筛选出3条在各克隆株扩增产物间有差异的引物。结论5个S180克隆细胞株的RAPD特征有明显区别。     

当归药材道地性的RAPD分析

目的 从DNA分子水平上探讨当归药材道地性的生物学基础。方法 对来自不同产地的18个当归样品,提取其基因组DNA,并进行PAPD分析。对筛选出的10个引物的RAPD结果进行聚类分析,得出18个当归样品的聚合树状图。结果 显示地理分布距离越小,当归的遗传差异越小;反之,越大。但生态环境特别是小生境对当归遗传差异的作用亦不可忽视。结论 为我们从分子生物学角度研究当归药材道地性提供了新的启示。     

RAPD技术在实验动物遗传育种中的应用

提高实验动物育种的选择效率和减少育种过程中的盲目性是实验动物遗传育种工作者的追求目标。近年来 ,分子标记技术的发展为加速实验动物育种进程带来了新的契机。与以往的表型性状、同工酶分析等方法相比 ,分子标记直接从DNA水平检测基因组的遗传变异 ,不受组织、发育时期、环     

RAPD技术及其在肿瘤研究领域中的应用

遗传标记是一类易于识别．遵循孟德尔遗传模式．具有个体特异性或其分布规律具有种系特征的表型特征或遗传物质,早期的遗传标记涉及的基因位点数目少,多态水平低,随着分子生物学和分子遗传学的发展,多态性丰富的DNA分子遗传标记大量出现并被广泛应用。1990年Williams和     

应用RAPD引物区分小鼠品系

目的 用随机扩增多态DNA（Random amplidfed polymorphic DNA,RAPD）方法区分10个常用小鼠品系。方法 从120条随机引物中筛选出稳定性、重复性好的4条多态性引物对10个常用小鼠品系进行RAPD扩增。扩增产物在含溴化乙锭的1．5％琼脂糖凝胶中电泳,紫外透射仪上观察照相。结果 仅用这4条引物就可将10个品系小鼠完全区分开来,其中包括遗传背景或外观形态很相似的品系,如BALB／c与BALB／c-nu、KM与BALB／c也能区分出来。结论 筛选出的4条引物对实际工作具有指导意义,适用于小鼠常规遗传监测。     

正品龙胆遗传多样性的RAPD及ISSR分析

目的用RAPD和ISSR方法分析了4种正品龙胆的亲缘关系及遗传多样性，为正品龙胆的品种鉴定及栽培育种提供了分子生物学依据。方法优化RAPD及ISSR的PCR反应体系，对产物琼脂糖凝胶电泳结果进行数据统计。结果从100个RAPD引物和32个ISSR引物中分别筛选出10个RAPD引物和4个ISSR引物。通过遗传距离系数UPGMA聚类法分析数据，构建类聚关系树系图。结论RAPD及ISSR的PCR反应体系可以获得理想的实验结果，适用于龙胆品种遗传多样性及亲缘关系的分析。     

巴戟天遗传多样性的RAPD研究

目的应用随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)标记技术对广东产5个类群的栽培巴戟天进行遗传多样性研究。方法应用15种引物对64个个体进行检测,应用Popgen32软件分析群体的遗传多样性。结果共得到224条带,其中多态位点112个,多态百分率为50.00%。种群内多态位点百分率在37.05%～53.13%,平均为45.86%。Shannon指数和Nei指数均反映出巴戟天各类群遗传多样性有一定的变化。Shannon指数为0.287 6,各类群的Shannon指数在0.103 3～0.236 2,Nei指数为0.175 6,各类群的Nei指数在0.074 5～0.154 0。结论目前栽培巴戟天居群间有一定的分化,并产生了多种农家类型,其中小叶巴戟天(POP2)遗传多样性明显高于其他类型,这些可能是导致目前栽培巴戟天质量产生变异的主要原因。     

丽江山慈菇RAPD遗传变异初探

目的研究丽江山慈菇Iphigenia indica遗传变异及遗传结构。方法采用RAPD技术，对产自云南的3个居群进行DNA指纹检测。结果筛选出20个随机引物，对3居群扩增共产生120条DNA片段，在0．2～3kb，其中71条谱带具有遗传多态性，约占59．17％，平均每个引物扩增的DNA带数是3．55。Shannon index在丽江玉龙雪山居群(Ca)为0.1994，大理宾川鸡足山居群(Cb)为0．2007，丽江永胜片角镇居群(Cc)为0.2548；居群平均水平为0．2183，物种水平为0．2886。Nei’sgeneticidentity在Ca和Cb居群间为0．9309；在Ca和Cc居群间为0．9327；在Cb和Cc居群间为0，9466。居群间基因分化系数Gst为0．2044。结论RAPD分析可为丽江山慈菇保护对策和措施的制定，遗传育种和GAP种植方法及标准的制定，提供理论依据和基础资料。     

云南铁线莲属12种药用植物的RAPD分析

目的:通过对12种铁线莲属药用植物进行遗传多样性和亲缘关系分析,为生药鉴定提供依据.方法:随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析遗传多样性,UPGMA类平均法进行聚类分析.结果:利用筛选出的10个随机引物对供试材料DNA进行随机扩增,共得到89条带,其中多态性带有89条,多态性百分率为100%.采用UPGM聚类法对扩增出的谱带进行遗传聚类分析,得出反映各种间亲缘关系的树状图.对多数种而言,种间差异明显,同种不同分布点也存在差异,但同一分布点的不同个体差异较小.结论:该标记技术对铁线莲属植物的生药鉴定是可行的,在系统学方面的应用有待进一步研究.     

山东平邑金银花三个品系RAPD分析及绿原酸含量分析

目的：分析山东平邑金银花3个品系的遗传信息和绿原酸含量,为金银花品系的研究开发提供科学数据。方法：运用RAPD分析技术和HPLC方法采集数据。结果 ：金银花3种品系的RAPD遗传距离结果是：新品种与鸡爪花的遗传距离较近,在聚类分支图上归为一类;毛花与鸡爪花的遗传距离稍远。绿原酸含量结果 ：毛花品系〉新品种〉鸡爪花品系。结论：山东平邑金银花的新品种从遗传距离上分析与鸡爪花品系的亲缘关系较近,与毛花品系的稍远;新品种的绿原酸含量介于毛花品系与鸡爪花品系之间。     

黄花蒿种质资源的RAPD分析

目的研究青蒿素高产的黄花蒿植株的遗传多样性特征。方法结合青蒿素量的测定,应用RAPD技术对10个产地黄花蒿进行遗传多样性分析。结果发现RAPD多态位点为53.6%,证明在黄花蒿野生群体中存在较丰富的遗传多样性。UPGMA分析表明:在黄花蒿中可能至少存在具有遗传分化的4个分支,黄花蒿遗传分化与青蒿素量的变化及地理分布有一定的相关性。结论黄花蒿具有明显的遗传分化,这些遗传分化是黄花蒿种质资源筛选的关键,是青蒿素“高量育种”和生物技术开发的基础。     

对约氏疟原虫不同易感性的大劣按蚊和斯氏按蚊基因组RAPD序列比较

目的分析对约氏疟原虫不易感的大劣按蚊和易感的斯氏按蚊基因组RAPD谱带并测序,探讨媒介按蚊基因型与疟原虫基因型间的相互关系。方法用已筛选的一条随机引物,随机扩增大劣按蚊和斯氏按蚊成蚊的基因组DNA,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,对相同迁移率的DNA条带克隆、测序,并采用相关在线程序及软件进行序列比较分析。结果大劣按蚊和斯氏按蚊RAPD谱带具有明显的种间差异,但有4对相同迁移率的条带。序列分析显示4对DNA条带在序列长度和组成上呈现多态性,序列的GC含量和简单重复序列存在差异,序列相似性介于48％～52％之间。结论大劣按蚊和斯氏按蚊之间存在不同的遗传背景,其基因多态性可能与产生对约氏疟原虫的易感性不同有关,为进一步研究按蚊与疟原虫之间的相互作用奠定了基础。     

Transportation characteristics of nolatrexed in three tumor cell lines

Objective：To investigate the association of the transportation characteristics of nolatrexed in tu-mor cells with its drug sensitivity. Methods: The sensitivity of 3 tumor cell lines, C6, SRS82 and LoVo, to nolatrexed were determined by growth inhibition study. After exposure to 20μmol/L nolatrexed at different time intervals ranging from 0 to 30 rain, or to nolatrexed at different concentrations ranging from 0 to 40μmol/L for 10 min, the intracellular drug concentration was measured using high-performance liquid chro-matography. Results: C6 was the most sensitive cell line among the three, with sensitivity 6.8-fold and 13.8-fold those of SRS-82 and LoVo cells respectively. Transportation of nolatrexed in the 3 cell lines were qualitatively similar, which rapidly achieved steady-state within 5 min, and linear relationship between the in-tracellular and extracellular drug concentration was observed. The intracellular steady-state level achieved in C6 was significantly higher than those in the other two cell lines, the latter having comparable levels. Con-clusion: Nolatrexed enters the cell very quickly and different transport capacities are involved in the genera-tion of varied sensitivity to nolatrexed in tumor cells.