藏红花素调节Hippo信号通路对病理性瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的:初步探讨藏红花素(Crocin)调节Hippo信号通路对病理性瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外分离培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF),免疫荧光鉴定成纤维细胞;MTT法计算细胞增殖抑制率,筛选Crocin最佳干预浓度,将HKF细胞分为control组和Crocin低、中、高剂量组(Crocin浓度分别为20、50、100μmol/L);细胞转染实验中将HKF细胞分为control组、Crocin组(100μmol/L)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1+Crocin组(转染pcDNA3.1+100μmol/L Crocin干预)、pcDNA3.1-YAP/TAZ组(转染pcDNA3.1-YAP/TAZ)、pcDNA3.1-YAP/TAZ+Crocin组(转染pcDNA3.1-YAP/TAZ+100μmol/L Crocin干预)。qRT-PCR法检测YAPmRNA、TAZ mRNA表达;EdU染色、流式细胞仪分别检测细胞增殖、凋亡情况;Western blot检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞抗凋亡因子B...     

灯盏花素对大鼠心室肌细胞钠通道的影响

目的： 研究灯盏花素对大鼠心室肌细胞膜钠通道的影响,在离子通道水平探讨灯盏花素的抗心律失常作用机制。方法： 用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录钠通道电流(INa)。结果： (1) 灯盏花素呈浓度依赖性抑制INa,在-30 mV时,含1、3、30、100 mg·L-1灯盏花素的细胞外液分别灌流细胞3 min,分别阻断INa峰电流(7.98±0.60)%、(37.73±2.31)%、(65.58±2.90)% 和(88.09±5.60)%。INa激活电位为-70 mV,最大峰电位为-30 mV,翻转电位为5 mV,激活和失活过程呈电压和时间依赖性。30 mg·L-1灯盏花素使电流电压曲线明显上移,峰值电流从（13.49±1.25）pA/pF 减少至（4.78±0.85）pA/pF,n=8,P<0.05,冲洗后可以不完全恢复。（2）灯盏花素能使钠电流失活曲线明显左移。（3）灯盏花素使钠电流激活曲线明显右移。（4）灯盏花素使钠电流复活明显减慢。结论： 灯盏花素能够抑制心肌细胞钠通道电流,并呈浓度依赖性。     

灯盏花素对大鼠出血性脑损伤的保护作用

目的:探讨灯盏花素注射液对大鼠出血性脑损伤的保护作用。方法:用胶原酶和肝素混合液注入大鼠尾壳核建立脑出血(ICH)模型,然后将大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。治疗组动物于注射灯盏花素注射液后第3、5、7 d后处死。应用Berdson评分标准对各组大鼠进行神经功能评分,应用免疫组织化学方法检测出血灶周围TNF-α和IL-8的表达,应用流式细胞术检测神经细胞凋亡率。结果:与模型组比较,治疗组大鼠神经功能评分明显增加(P<0.05);灯盏花素治疗组脑细胞的凋亡率明显减低(P<0.05);治疗组出血灶周围炎症因子TNF-α,IL-8明显减少(P<0.05);结论:灯盏花素注射液能保护神经元,促进神经功能恢复。     

灯盏花素对肺胀患者的疗效观察

目的 探讨灯盏花素对肺胀患者的治疗效果.方法 将70例肺胀患者随机分为对照组和治疗组,每组35例,对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用灯盏花素治疗,灯盏花素40mg静脉滴注,1次/d,疗程14d.观察其临床疗效,检测血气及肺功能指标变化.结果 治疗组总有效率明显高于对照组(P＜0.05);两组治疗前后血气指标无明显改善(P＞0.05),治疗组血气指标治疗前后改善程度较对照组血气指标改善程度无明显差异(P＞0.05),治疗组肺功能指标治疗前后改善程度明显高于对照组(P＜0.05).结论 灯盏花素对于肺胀患者症状和肺功能改善有明显效果,值得在临床上推广应用.     

Notch1表达下调抑制病理性瘢痕成纤维细胞增殖并诱导其凋亡

目的探讨慢病毒介导的Notch1表达下调对病理瘢痕成纤维细胞(PSF)中caspase-9活化水平及线粒体膜电位的影响。方法分离培养增生性PSFs,感染Notch1 siRNA慢病毒和阴性对照慢病毒。分别采用RT-qPCR和Western blot检测细胞中Notch1mRNA和蛋白表达;MTT法检测细胞增殖;PI单染法检测细胞周期;Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡;Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK4)、活化的caspase-3(c-caspase-3)和caspase-9(c-caspase-9)蛋白及胞质和线粒体中细胞色素C(cytochrome C)蛋白;JC-1法检测细胞线粒体膜电位。结果Notch1 siRNA慢病毒感染后的PSFs中Notch1表达水平明显低于阴性对照慢病毒和未感染的PSFs的表达水平(P<0.05)。下调Notch1后的PSFs增殖能力降低(P<0.05);细胞G0/G1期比例升高(P<0.05);细胞凋亡率升高(P<0.05);c-caspase-3和c-caspase-9蛋白表达升高(P<0.05);细胞线粒体膜电位明显下降(P<0.05);细胞中cyclin D1和CDK4蛋白水平降低(P<0.05);胞质内的cytochrome C蛋白含量升高(P<0.05)及线粒体中cytochrome C蛋白水平降低(P<0.05)。结论Notch1表达下调抑制PSFs增殖并诱导凋亡。     

灯盏花素对肢体缺血再灌注骨骼肌影响的实验研究

目的：探讨灯盏花素对肢体缺血再灌注骨骼肌的保护作用.方法：健康成年家兔20只,随机分为对照组和实验组,每组10只,建立兔肢体缺血再灌注损伤动物模型.在即将恢复血流灌注时,两组分别自耳缘静脉注射生理盐水（对照组）、灯盏花素注射液（实验组）.分别在缺血前、缺血后2h,再灌注后1h、再灌注后3h采集术侧股静脉血样,测定血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）的含量.取上述各时相点动物胫前肌组织,测定骨骼肌组织湿/干重比值并观察肌组织微细和超微结构变化.结果：实验组再灌注后LDH、CK明显低于对照组（P＜0.01）,骨骼肌组织湿/干重比值低于同期对照组（P＜0.05）.光镜及电镜下观察实验组骨骼机损伤轻于对照组.结论：灯盏花素能够缓解组织水肿,保护缺血再灌注骨骼机.     

灯盏花素脂质体前体与灯盏花素片抗血栓作用比较研究

目的我们前期研究结果表明灯盏花素脂质体前体(PS)减少大脑中动脉栓塞引起的脑梗死面积,改善脑缺血再灌注损伤作用明显优于灯盏花素片(BreT),本文对PS和BreT对血栓形成和溶栓作用进行比较研究。方法线栓法制作大脑中动脉阻塞脑缺血-再灌注损伤模型,经2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,检测大鼠脑梗死面积;建立大鼠动-静脉旁路血栓模型、下腔静脉血栓模型、颈总动脉血栓溶栓模型检测血栓湿重;毛细玻管法检测大鼠血小板数目及小鼠凝血时间。结果 PS及BreT均显著减少脑梗死面积(P0.05),PS作用强于同等剂量的BreT(P0.05)。PS及BreT组均不同程度降低大鼠动-静脉旁路、下腔静脉及颈总动脉血栓湿重。血栓形成抑制率及溶栓率,PS作用强于同等剂量的BreT。PS及BreT显著延长小鼠凝血时间(P0.01),PS与同等剂量的BreT相比具有显著性差异(P0.01)。各组给药前后血小板数量无显著性差异(P0.05)。结论灯盏花素脂质体前体抑制血栓形成和溶栓作用明显优于灯盏花素片,该作用与其增强抗脑缺血-再灌注损伤作用有关。     

灯盏花素对血脂检验项目的干扰

目的 研究灯盏花素对甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)检测方法的干扰作用.方法 严格按照CLSI制定的EP7-A2分析干扰实验方案,通过干扰筛选和剂量效应实验,研究注射用灯盏花素对TG、TCHO、HDL和LDL检测方法是否存在干扰,并明确干扰程度与药物浓度之间的关系.结果 注射用灯盏花素对TG、TCHO、HDL、LDL的常用检测方法有较强的负向干扰.结论 注射用灯盏花素对TG、TCHO、HDL和LDL常用检测方法的测定会产生干扰,且最小干扰浓度分别为129.5μg/mL、16.16μg/mL、32.38μg/mL和32.38μg/mL.     

蛇床子素干预人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及转化生长因子β1的表达

背景：蛇床子素对体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和细胞分泌的转化生长因子β1有抑制作用,但其具体作用机制尚待进一步研究。 目的：体外观察蛇床子素对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖以及对细胞转化生长因子β1的影响。 方法：体外原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞,以不同浓度的蛇床子素作用于成纤维细胞,观察细胞形态的变化,应用MTT法和生长曲线法检测蛇床子素对细胞增殖活性的影响。免疫组织化学检测细胞转化生长因子β1的表达。 结果与结论：蛇床子素能明显抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的生长。MTT法检测的IC50为(15.2±2.0) μmol/L,可以明显下调细胞转化生长因子β1的表达(P < 0.05)。说明蛇床子素对人增生性瘢痕成纤维细胞有很强的生长抑制作用并可以下调转化生长因子β1的表达。     

不同浓度富硒温泉水对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

背景：临床研究证实,富硒温泉水对增生性瘢痕有明显的抑制作用。 目的：观察富硒温泉水对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。 方法：组织块法体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,取第3~5代细胞,用含10%,20%,30%富硒温泉水及自来水和蒸馏水的培养基培养48 h,测细胞增殖情况。 结果与结论：富硒温泉水培养的人增生性瘢痕成纤维细胞数量减少,突起不同程度的变短或者缺失,细胞质及胞核浓缩。不同浓度的富硒温泉水、自来水、蒸馏水均对成纤维细胞的增殖有抑制作用,以富硒温泉水培养基的抑制作用最明显 (P < 0.05),且随浓度的升高,抑制率增大。说明富硒温泉水可以剂量依赖性地抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。     

巨噬细胞移动抑制因子促进肺成纤维细胞增殖和胶原合成

目的： 观察重组巨噬细胞移动抑制因子(rMIF)对人胚肺成纤维细胞（MRC-5）的作用,探讨哮喘气道重塑的发生机制。方法:不同浓度的rMIF (25-100 μg/L)分别作用于MRC-5细胞12 h、24 h或48 h,用CCK-8法测细胞增殖率,羟脯氨酸法检测细胞上清胶原水平,RT-PCR法检测Ⅰ型胶原mRNA表达,Western blotting检测成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原。结果: 与对照组比,50 μg/L和100 μg/L的rMIF刺激24 h和48 h,显著促进MRC-5增殖(P<0.05或P<0.01)。刺激48 h后,细胞培养上清中,对照组及实验组均可检测到羟脯氨酸,100 μg/L rMIF显著促进羟脯氨酸分泌(P<0.01); rMIF能够剂量依赖地刺激Ⅰ型胶原mRNA 和蛋白合成(P<0.05或P<0.01)。结论:rMIF通过刺激成纤维细胞增殖及胶原合成,可能在哮喘气道重塑的发病机制中发挥关键作用。     

胰岛素促进心肌成纤维细胞增殖和心肌细胞肥大的作用

目的:研究胰岛素对心脏细胞增殖和心肌细胞肥大的影响,探讨其在心肌肥厚中的作用。方法:①乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞的培养及光镜、电镜和免疫细胞化学染色的鉴定。②测定细胞的数量、代谢活性(WST-1)与DNA合成(BrdUELISA法)及细胞周期百分比(流式细胞仪)以反映细胞增殖。③用细胞蛋白含量(考马斯亮蓝法)评估细胞肥大。结果:①培养的细胞分别为心肌细胞和心肌成纤维细胞。②胰岛素处理后,心肌成纤维细胞数量、WST-1与BrdU的吸光值及S+G₂+M期细胞百分比明显升高(P＜0.01或P＜0.05),而心肌细胞的上述参数无明显变化(P＞0.05)。③胰岛素作用下,心肌细胞蛋白含量明显增加,且在10^-10mol/L-10^-7mol/L范围内呈量效关系(P＜0.01或P＜0.05)。结论:在体外胰岛素有促进心肌成纤维细胞增殖和增加心肌细胞蛋白含量(诱导心肌细胞肥大)的作用,可能在体内心肌肥厚的发生发展过程中起重要作用。     

FBP1 is highly expressed in human hypertrophic scars and increases fibroblast proliferation,apoptosis, and collagen expression

Purpose: FBP1, one of the far-upstream element binding proteins(FBPs), is a distal upstream binding protein of c-myc, which is highly expressed in tumor tissues. This study aimed to investigate FBP1 expression in human hypertrophic scars and to determine the effects of FBP1 on fibroblasts. Materials and methods: Human normal skin and scar specimens were collected during clinical surgery. One portion of each tissue specimen was embedded in paraffin and sliced to observe differences in histological features and FBP1 expression by immunohistochemistry and western blotting. The other portion of each tissue specimen was cultured to obtain fibroblasts. Fibroblasts from the second to the sixth passage were used for the experiments, which were divided into the following two groups: an experimental group, whose cells were transfected with an siRNA targeting FBP1, and a control group, whose cells where not transfected. MTT and TUNEL assays were performed, respectively, to assess fibroblast proliferation and apoptosis, and western blotting was performed to assess protein expression. Results: We obtained fibroblasts by primary tissue culture and found that FBP1 was highly expressed in hypertrophic scars. MTT assay showed that an siRNA targeting FBP1 significantly reduced fibroblast proliferation in siRNA-treated cells compared to control cells. TUNEL assay showed that there was no difference in apoptosis between the two groups; however, western blotting showed that collagen I, collagen III, c-myc, caspase-3, and caspase-9 expression levels were all decreased in the experimental group. Conclusion: FBP1 is highly expressed in human hypertrophic scars and increases fibroblast proliferation, apoptosis and collagen expression.     

高浓度花生四烯酸诱导小鼠成纤维细胞L929凋亡的研究

目的：探讨花生四烯酸是否能诱导小鼠成纤维细胞L929凋亡及其可能机制。方法：噻唑蓝（MTT）法检测细胞存活率,比色法测定乳酸脱氢酶（LDH）释放率,硫代巴比妥酸法测定细胞脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量,Hoechst 33258染色观察凋亡细胞核形态变化,DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNA降解。结果：L929细胞在40-160 μmol/L花生四烯酸作用24 h后,细胞存活率明显下降,LDH释放率和细胞MDA含量显著增加（P<0.01）。经160 μmol/L花生四烯酸处理后的L929细胞呈现典型的凋亡核固缩表现。琼脂糖凝胶电泳显示DNA凋亡梯带。结论：高浓度花生四烯酸（80-160 μmol/L）能诱导小鼠成纤维细胞L929凋亡,可能与其促脂质过氧化作用有关。     

碱性调宁蛋白对糖尿病大鼠烧伤创面成纤维细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨碱性调宁蛋白在糖尿病大鼠烧伤创面愈合过程中的表达情况及其对成纤维细胞增殖与凋亡的影响。 方法选64只雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分为实验组和对照组,每组32只。实验组大鼠,腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg,制作糖尿病大鼠模型;对照组大鼠,腹腔注射0.9%氯化钠溶液1.0 mL。适应性饲养2周后将2组大鼠均制作为深Ⅱ度烫伤模型(以下称为烧伤),伤后立即液体复苏、常规治疗。观察两组大鼠的创面愈合时间及在伤后第7、14、21、28天的创面愈合率,创周切取组织、制作切片,行苏木精-伊红染色观察组织形态学变化,免疫组织化学SP法分析碱性调宁蛋白表达,成纤维细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,原位末端转移酶标记(TUNEL)法测定成纤维细胞凋亡情况。对数据行方差分析和t检验。 结果实验组大鼠创面平均愈合时间[(25.6±2.8) d]长于对照组大鼠创面平均愈合时间[(19.1±2.1) d],差异有统计学意义(t＝10.49,P<0.05);在伤后第7、14、21、28天,实验组大鼠创面愈合率分别为(18.8±4.6)%、(37.6±7.9)%、(66.3±11.4)%、(85.4±4.8)%,明显小于对照组[(40.8±4.5)%、(62.1±6.7)%、(90.2±9.7)%、(95.4±5.5)%,差异均有统计学意义(t＝9.69、6.69、4.51、3.87,P值均小于0.05)。伤后第7、14、21天,两组大鼠创面逐渐愈合,创面组织中成纤维细胞、新生微血管均逐渐增多,且对照组大鼠未愈合创面组织中成纤维细胞、新生微血管均较实验组增多。伤后第7、14、21、28天,实验组大鼠碱性调宁蛋白在烧伤创面组织中的表达分别为1.43±0.07、1.17±0.11、0.73±0.06、0.77±0.07,均高于对照组大鼠(0.75±0.09、0.60±0.10、0.63±0.06、0.64±0.10),差异均有统计学意义(t＝17.58、10.92、3.44、3.10,P值均小于0.05)。实验组大鼠成纤维细胞PCNA在烧伤创面组织中表达分别为654.19±102.80、820.84±112.86、766.68±156.63、232.75±55.37,较对照组(766.85±73.30、1322.22±121.44、1112.35± 142.32、740.79±106.90)低,差异均有统计学意义(t＝2.52、8.55、4.62、11.94,P值均小于0.05)。伤后第7、14、21、28天,实验组细胞凋亡数分别为58.51±10.89、41.53±9.95、27.28±6.58、20.13±4.23,较对照组(30.70±6.41、25.31±5.74、17.46±5.36、15.29±4.10)高,差异均有统计学意义(t＝6.23、4.00、3.27、2.32,P值均小于0.05)。 结论碱性调宁蛋白在糖尿病大鼠烧伤创面愈合过程中表达水平增高,可能调控创面组织中成纤维细胞的增殖和(或)凋亡水平,是糖尿病创面延迟愈合的原因之一。     

黄芪多糖对细胞增殖及血管内皮细胞与白细胞粘附作用的影响

目的:观察黄芪多糖对成纤维细胞与血管内皮细胞增殖效应及对血管内皮细胞与白细胞粘附作用的影响。方法:采用MTT法观察体外培养的人正常成纤维细胞和慢性创面的创缘成纤维细胞的增殖和人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖;采用虎红法、荧光免疫组化法在TNF刺激的HUVEC模型上观察黄芪多糖对人外周血中性粒细胞(PMN)、单核细胞TPH-1与HUVEC粘附及HUVEC表面粘附分子的表达。结果:在2.44-156 mg/L范围内,黄芪多糖作用下创缘成纤维细胞增殖率明显高于对照组(P<0.01);2.44-39 mg/L黄芪多糖作用下人正常皮肤的成纤维细胞增殖率明显高于对照组(分别P<0.01,P<0.05);在9.75-156 mg/L浓度范围内对HUVEC未表现出明显的增殖作用。在4 h时25 mg/L黄芪多糖组PMN与HUVEC的粘附量明显低于TNF组(P<0.05);25 mg/L和100 mg/L黄芪多糖组TPH-1与HUVEC的粘附量明显低于TNF组(分别P<0.01和P<0.05);作用12 h时,25-100 mg/L黄芪多糖组HUVEC与PMN粘附量明显低于TNF组(分别P<0.05,P<0.01和P<0.01);50 mg/L和100 mg/L也使TPH-1与HUVEC粘附量明显低于TNF组(分别P<0.01和P<0.05)。与TNF组比较,在25-100 mg/L黄芪多糖作用4 h能明显降低VCAM-1、ICAM-1的荧光强度(分别P<0.01和P<0.05)。作用12 h,与TNF组比,50 mg/L黄芪多糖组CD44的荧光强度明显低于TNF组(P<0.05)。结论:在一定浓度范围内黄芪多糖具有抑制白细胞与HUVEC粘附作用,提示黄芪多糖具有抗炎作用;并促进成纤维细胞增殖。结果体现了黄芪"托毒生肌"的作用基础,这将为临床治疗慢性创面提供理论依据。     

精-甘-天冬-丝氨酸4肽对肝星状细胞增殖及凋亡的影响

目的: 探讨精-甘-天冬-丝氨酸(RGDS) 4肽对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSCs)增殖、凋亡及caspase-3表达的影响。方法: 应用体外HSCs培养技术, 采用[³H]-胸腺嘧啶核苷([³H]-TdR)掺入法测定HSCs增殖;膜联蛋白(Annexin-V)/碘化丙啶(PI)双标记流式细胞术、TUNEL、扫描电镜及透射电镜等方法测定HSCs凋亡;采用甲苯胺兰染色方法测定细胞粘附率;应用流式细胞方法测定caspase-3蛋白表达。结果: ①25 mg·L^-1、50mg·L^-1、100mg·L^-1浓度RGDS 4肽剂量、时间依赖性抑制HSCs增殖, P＜0.01。②RGDS 4肽对HSCs凋亡的诱导作用亦呈剂量和时间依赖关系, P＜0.01。扫描电镜、透射电镜观察, RGDS 4肽组出现典型的凋亡征象。③RGDS 4肽作用于HSCs 2 h, 25 mg·L^-1、50mg·L^-1、100mg·L^-1组粘附抑制率分别是8.82%、29.41%、45.59%, 而RGES 4肽组的粘附抑制率仅为4.41%, P＜0.01。④RGDS 4肽处理组caspase-3表达明显高于FN、RGES 4肽组。结论: RGDS 4肽剂量和时间依赖性抑制HSCs增殖并诱导其凋亡。RGDS 4肽抑制增殖及诱导凋亡效应, 依赖于caspase-3, 也与其抗粘附作用有关。     

银杏内酯B对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖与凋亡的影响

目的银杏内酯B(GB)是已知的天然而强效的血小板激活因子(PAF)受体(PAFR)拮抗剂,本文研究GB对小鼠T淋巴细胞活化、增殖及凋亡3大体外行为的影响,初步探讨其潜在的免疫调节作用与机制,从而为临床应用提供可靠的实验依据。方法分离小鼠淋巴细胞,培养前以不同浓度的GB预孵;以刀豆蛋白A(Con A)诱导细胞的活化与增殖,以荧光抗体双色标记(anti-CD3 mAb-PE/anti-CD69 mAb-FITC、anti-CD3 mAb-PE/anti-CD25 mAb-FITC)结合流式细胞术分别检测T淋巴细胞早、中期活化标志--表面抗原CD69与CD25的表达,以活体荧光染料CFDA-SE标记结合流式细胞术检测细胞增殖并用MTT法佐证;以地塞米松(Dex)诱导细胞的凋亡,以荧光染料双色标记[DiOC6(3)/PI]结合流式细胞术区别凋亡、死亡与活细胞群。结果 Con A刺激后6 h和24 h,T细胞早期活化标志CD69和中期活化标志CD25分别大量表达,Con A刺激后48 h活化的T细胞增殖至第4代,而经终浓度为5、10、20μmol/L GB在Con A刺激前对细胞进行4 h预孵处理可以显著下调T细胞表面抗原CD69、CD25的表达并能有效抑制细胞增殖。Dex诱导后12 h细胞凋亡和死亡群显著增大,而经同样的GB预孵处理可以在一定程度上抑制细胞的凋亡进程,对细胞凋亡显示出一定的保护作用。结论 GB能有效抑制小鼠T淋巴细胞的活化与增殖,并且对细胞凋亡起到一定的保护作用,凭借GB对T细胞此3大行为出色的调节作用,理应将其作为天然的免疫抑制剂候选者进行更深入的研究。     

巨细胞病毒感染对人胚肺成纤维细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）感染对宿主细胞增殖及凋亡的影响。方法用HCMV AD169感染人胚肺成纤维细胞（human embryonic lung fibroblast cells,HEL）,倒置显微镜观察不同感染时间细胞病变,采用MTT法检测HCMV感染对HEL细胞增殖的抑制作用,同时采用流式细胞术检测HCMV感染细胞对照组细胞凋亡指数。结果在HCMV感染48h内,细胞增殖及凋亡指数与细胞对照组无明显差异。自HCMV感染72h后,细胞增殖明显受抑制,凋亡指数明显增高,细胞病变逐渐加重。结论在HCMV感染早期,对宿主细胞的增殖及凋亡影响不明显,在感染后期,HCMV通过抑制宿主细胞增殖,加重细胞病变,促进感染细胞的凋亡而发挥致病作用。     

重组人内抑素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞形态及增殖的影响

目的 观察重组人内抑素(rhEndostatin)对体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)增殖的影响。方法 体外培养及鉴定人KFs; 应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法分别检测不同浓度rhEndostatin (6.25×10^-6、1.25×10^-5、2.50×10^-5、5.00×10^-5、1.00×10^-4mg/L)作用24h、48h、72h后对KFs增殖的影响,并同时观察其形态变化。结果 组织块接种7~8d后,其周边可见少许梭形细胞,继之细胞逐渐增多并以组织块为中心呈放射状生长;传2代培养的细胞单层排列,形态均一,呈长梭状,折光性好。细胞波形蛋白免疫化学染色显示胞质均呈棕黄色。rhEndostatin(6.25×10^-6 mg/L浓度组除外)能明显抑制KFs的增殖(P <0.05),抑制效应与rhEndostatin浓度和作用时间呈一定的依赖关系; 其中,5.00×10-⁵ mg/L 和1.00×10^-4 mg/L组rhEndostatin作用48 h后,细胞生长缓慢,体积变小,数目减少,排列紊乱。结论 重组人内抑素对人KFs增殖具有抑制作用。