17β-雌二醇对乳腺癌细胞迁移的影响及CANP-FN通路的介导作用

目的探讨17β-雌二醇(E2)对人乳腺癌细胞迁移活动的影响及其信号机制。方法以雌激素受体(ER)阳性MCF-7和ER阴性MDA-MB-468乳腺癌细胞为研究模型,E2处理诱导细胞迁移。采用划痕实验检测细胞迁移能力,小分子RNA(siRNA)转染模型细胞沉默纤连蛋白(FN)基因表达,Western blot法检测蛋白水平,钙蛋白酶(CANP)特异性抑制剂Calpeptin(Cal)预处理细胞干预胞内CANP活性。结果(1)E2(50 nmol·L~(-1))处理24 h可明显促进MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,迁移率分别增加(51.55±5.50)%(P<0.05)和(40.78±4.78)%(P<0.01);(2)E2明显上调MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞FN蛋白表达水平,分别为对照组的2.11倍(P<0.05)和1.86倍(P<0.01);(3)Cal(10μmol·L~(-1))可明显抑制E2诱导的MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,抑制率分别为(49.55±6.44)%(P<0.05)和(36.85±4.40)%(P<0.01);(4)Cal能明显抑制MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞FN蛋白表达上调,抑制率分别为(80.12±4.55)%和(78.84±5.70)%(P<0.01);(5)siRNA沉默FN能抑制E2诱导MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,抑制率分别为(40.65±5.80)%(P<0.01)和(40.88±6.02)%(P<0.05)。结论E2可促进ER阳性或阴性乳腺癌细胞的迁移,而CANP-FN信号通路可能参与介导E2的促细胞迁移效应。     

17β-雌二醇对人牙髓细胞增殖影响的体外研究

目的：观察不同浓度17β-雌二醇对体外培养人牙髓细胞增殖的影响。方法选取年轻恒牙,采用组织块酶消化法获取人牙髓细胞并进行原代培养。取第4代对数生长期人牙髓细胞SABC法进行波形蛋白和角蛋白免疫组化染色鉴定细胞来源。将处于对数生长期的第4代人牙髓细胞随机分为5个实验组、1个对照组和1个空白对照组,96孔培养板每组选6个孔。实验组：在有细胞孔内分别加入含2％活性碳吸附胎牛血清的无酚红高糖DMEM培养液配置的终末浓度为10－5、10－6、10－7、10－8、10－9 mol／L的17β-雌二醇。对照组：在有细胞孔内仅加入培养液。空白对照组：在无细胞孔内仅加入培养液。分别于培养48 h和72 h时用MTT比色法检测17β-雌二醇对人牙髓细胞增殖的影响。采用流式细胞术检测各浓度组17β-雌二醇对人牙髓细胞的细胞周期的影响。结果与对照组比较,在一定浓度范围内17β-雌二醇能促进人牙髓细胞的增殖和细胞周期进程,以10－8 mol／L的17β-雌二醇作用最为明显（ P＜0．05）。结论17β-雌二醇对人牙髓细胞细胞增殖有一定的诱导作用。     

17β-雌二醇后处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的研究

目的：探讨17β-雌二醇（17β-estradiol,E2）后处理对缺血再灌注损伤离体大鼠心肌的影响。方法：采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型,随机分3组,其中后处理组（Pos组）在复灌时给予3次30s短暂开放／30s阻断,雌激素组（E2组）灌注液中含有17B-雌二醇。定时收集冠脉流出液测定冠脉流量（CF）;检测缺血前及复灌后冠脉流出液中LDH、SOD、CK的含量;测定缺血区心肌梗死面积,电镜下观察心肌超微结构变化。结果：复灌后各时点CF值在Pos,E2组较Isc组恢复好（P〈0．05）,复灌30min后Pos,E2组中CK、LDH漏出量较少,SOD含量较高伙0．05）,Pos,E2组心肌梗死面积减小（P〈0．05）。结论：机械后处理、17β-雌二醇后处理,对离体大鼠心肌有保护作用．雌激素抗氧化功能是后处理的重要机制之一。     

17-β雌二醇对SKOV3细胞HOXA10基因表达及甲基化的影响

目的 探讨17-β雌二醇(17-β E2)对人卵巢癌细胞株SKOV3中HOXA10基因表达及基因启动子区CpG岛DNA甲基化的影响.方法 体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3,按实验目的分别加入1×10-6、1×10-7、1×10-8 mol/L的17-β E2培养48 h后,收集细胞,分别采用实时荧光定量RT-PCR反应和Western blot检测HOXA10 mRNA和蛋白表达;提取SKOV3细胞基因组DNA,纯化、修饰后用甲基化特异性聚合酶链反应检测HOXA10基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态.结果 与对照组相比,不同浓度的17-βE2可显著提高SKOV3细胞中HOXA10基因mRNA和蛋白表达(P＜0.05).同时17-β E2作用后HOXA10基因呈部分甲基化状态.结论 17-β 2可以逆转SKOV3细胞中HOXA10基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态,使HOXA10基因的表达上调.     

17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的抑制作用

目的观察17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响及其与雌激素受体(estrogen receptor,ER)的关系。方法酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞;膜片钳全细胞模式观察17β-雌二醇对单个心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的影响,并通过加入雌激素受体阻断剂tamoxifen(TAM)研究该作用与雌激素受体的关系。结果 17β-雌二醇(10-9～10-7mol.L-1)使ICa-L峰电流密度值从(-3.5±0.6)pA.pF-1分别减少至(-2.4±0.3)pA.pF-1、(-1.9±0.3)pA.pF-1和(-1.1±0.3)pA.pF-1(与对照组比较,均为P<0.01,n=5)。TAM(10-7 mol.L-1)预处理后,17β-雌二醇(10-7mol.L-1)使ICa-L峰电流密度值从(-3.5±0.6)pA.pF-1减少到(-1.0±0.2)pA.pF-1(与对照组比较,P<0.01,n=5),与未应用TAM(10-7 mol.L-1)预处理时比较,ICa-L峰电流密度值无变化(P>0.05,n=5)。结论 17β-雌二醇抑制豚鼠心室肌细胞ICa-L的作用呈浓度依赖性,雌激素受体阻断剂TAM不能阻断17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞ICa-L的抑制作用,提示17β-雌二醇对ICa-L的抑制作用可能与ER作用无关。     

高浓度17β-雌二醇诱导巨噬细胞凋亡

目的　考察高浓度 17β 雌二醇 (E2 )对巨噬细胞的影响。方法　用Hoechst332 5 8进行染色质荧光染色 ;扫描电子显微镜观察细胞形态 ;激光共聚焦显微镜检测胞质内钙离子浓度 [Ca2 + ]i 及线粒体膜电位。结果　荧光染色及扫描电镜显示E2 (≥ 1μmol·L-1)作用后巨噬细胞出现多种凋亡表现。E2 1μmol·L-1作用后 ,细胞 [Ca2 + ]i 明显升高 ,且有剧烈的波动。E2 1μmol·L-1使线粒体膜电位下降。结论　高浓度的E2 (≥ 1μmol·L-1)能诱导巨噬细胞的凋亡 ,并且与[Ca2 + ]i 的变化及线粒体膜电位的下降有关     

17β-雌二醇对骨骼肌代谢、发育以及功能的影响

17β-雌二醇(17β-estradiol)是卵巢分泌的类固醇激素,其不仅对生殖和性功能有重要作用,也影响肌肉、骨骼等其他器官的发育和功能。骨骼肌存在着明显的性别差异,17β-雌二醇是导致骨骼肌性别差异的主要因素之一。本文综述了17β-雌二醇与骨骼肌内糖与脂肪代谢,骨骼肌发育和17β-雌二醇与骨骼肌疾病之间的关系,并探讨17β-雌二醇与骨骼肌目前研究未解决的问题及近期及远期研究方向。     

17β-雌二醇对离体猪基底动脉的影响

目的与方法研究17β_雌二醇(E2)对KCl和5_羟色胺(5_HT)引起离体猪基底动脉收缩的拮抗及保护作用。结果E2 浓度依赖性地对抗KCl引起的最大收缩作用 ,IC50 为10-4.8mol/L。E2 预处理后 ,浓度依赖性地抑制KCl引起的最大收缩 ,IC50 为10-4.8 mol/L ,并降低5_HT引起收缩的浓度效应曲线的最大反应 ,其 pD2’为4 57。结论E2 对离体猪基底动脉有舒张作用     

比较鳗鱼降钙素与17β-雌二醇对体外培养成骨细胞增殖与分化的影响

目的比较鳗鱼降钙素(CT)与17β-雌二醇对大鼠体外培养成骨细胞增殖和分化的影响。方法用酶消化法分离培养新生SD大鼠成骨细胞(OB),取第2继代,在培养液中分别加入不同浓度的CT和17β-雌二醇(E2);用MTT法观察OB的增殖能力(A值)及分化功能(ALP)。结果CT组较对照组从1×10-12mol·L-1起A值增加,且呈剂量依赖关系,当浓度≥1×10-9mol·L-1时,差异才有显著意义(P<0.05);E2组较对照组在1×10-9～1×10-7mol·L-1,A值均增加(P<0.001),以1×10-8mol·L-1作用最明显。CT组较对照组从1×10-12mol·L-1起ALP活性均增加,也呈剂量依赖关系,当浓度≥1×10-10mol·L-1差异有显著性意义(P<0.05);E2组较对照组在1×10-9～1×10-7mol·L-1,ALP活性均增加(P<0.05),以1×10-8mol·L-1作用最强。结论鳗鱼降钙素与17-β雌二醇均可促进大鼠体外培养OB增殖和分化。     

三羟基异黄酮和17-β雌二醇对自由基缩血管效应的影响

目的 :研究自由基引发血管收缩的机制 ,并通过血管静息张力的变化探讨三羟基异黄酮和 17 β雌二醇对自由基缩血管效应的影响。方法 :制备猪冠状动脉血管环 ,固定于恒温肌槽内 ,待平衡后 ,加入各种药物观察血管张力的变化。结果 :内皮完整的血管环在O2· -作用下产生明显的收缩 ,去除内皮后无明显反应。 1μmol·L-1三羟基异黄酮对O2· -引发血管收缩有明显的抑制作用 (P <0 .0 1,n =16 ) ,1μmol·L-117 β雌二醇无明显作用。H2 O2 使去内皮血管环产生明显的收缩作用 ,对内皮完整的血管环缩血管效应不明显 ,30 μmol·L-1三羟基异黄酮可明显抑制H2 O2 的缩血管作用。结论 :三羟基异黄酮可明显抑制O2· -和H2 O2 的缩血管效应 ,其作用明显强于 17 β雌二醇。     

17β-雌二醇抑制麻醉雄性大鼠颈动脉窦压力感受器的活动(英文)

目的:观察17β-雌二醇对颈动脉窦压力感受器活动的影响。方法:在麻醉雄性大鼠隔离灌流颈动脉窦条件下记录窦神经传入放电,观察17β-雌二醇(E_2)对压力感受器机能曲线和机能参数的影响。结果:E_23,10和30μmol/L使压力感受器机能曲线向右下方移位,曲线最大斜率和窦神经传入放电积分最大值均明显减小,表明E_2可抑制颈动脉窦压力感受器活动。雌激素受体抑制剂他莫昔芬10μmol/L不能阻断E_2的效应。一氧化氮合酶阻断剂L-NAME100μmol/L完全阻断E_2对压力感受器活动的抑制效应。一氧化氮供体SIN-1 10μmol/L能加强E_2的效应。结论:E_2抑制雄性大鼠颈动脉窦压力感受器的活动,此效应系其使内皮细胞释放一氧化氮所致。     

17β雌二醇对氯胺酮所致神经元凋亡的影响

目的：研究17β雌二醇对氯胺酮所致原代培养皮质神经元凋亡的影响及其机制。方法原代培养皮质神经元,体外培养7 d,随机分为空白对照组（给予相同体积的DMSO）,雌二醇组（17β雌二醇终浓度为0.1μmol·L-1）,氯胺酮组（氯胺酮终浓度为100μmol·L-1）,氯胺酮＋雌二醇组（氯胺酮,17β雌二醇终浓度分别为100μmol·L-1,0.1μmol·L-1）。噻唑蓝（ MTT）法检测神经元存活率,Hoechest33258染色法检测皮质神经元凋亡,Western-blot 法测定cleaved-Caspase-3及Bcl-2蛋白表达。结果氯胺酮组神经元存活率（54.02±7.78）%,明显低于空白对照组;氯胺酮＋雌二醇组神经元存活率（88.09±6.54）%,明显高于氯胺酮组。神经元经Hoechest33258染色在荧光显微镜下观察,氯胺酮组神经元凋亡[凋亡率（49.50±4.34）%]较空白对照组明显增加,氯胺酮＋雌二醇组[凋亡率（15.74±3.40）%]较氯胺酮组神经元凋亡下降。氯胺酮组 cleaved-Caspase-3表达明显增加,Bcl-2明显下降,而氯胺酮＋雌二醇组较氯胺酮组cleaved-Caspase-3表达明显下降,Bcl-2表达明显升高。结论17β雌二醇通过抑制神经元凋亡对抗氯胺酮诱导的皮质神经元损伤,产生保护作用。     

17β-雌二醇增加卵巢切除大鼠心肌内皮型一氧化氮合酶的表达和一氧化氮生成

目的 :观察 17β 雌二醇替代治疗对卵巢切除大鼠心肌组织中一氧化氮 (NO)和内皮源性一氧化氮合酶 (eNOS)的影响。方法 :成年雌性SD大鼠经双侧卵巢切除术 ,假手术组作为对照 ,术后 3周随机分为假手术组 ,模型对照组 ,17β 雌二醇(0 .1mg·kg-1·d-1)和溶媒 (芝麻油 )皮下注射治疗组 ,处理 6周 ,记录大鼠的血压、心率、子宫重量 ;检测血中雌二醇的含量 ;亚硝酸还原酶法检测心肌匀浆中NO含量 ;Westernblot分析心肌中eNOS及eNOS调节蛋白小凹蛋白 1(caveolin 1)的蛋白表达情况。结果 :17β 雌二醇治疗组的心率 (314± 16次 分 )较其他各组低 ,与溶媒对照组比较 ,雌二醇替代治疗组心肌匀浆中NO的含量增加一倍 ,eNOS蛋白表达明显增加 (P <0 .0 1) ,而作为eNOS的内源性抑制物caveolin 1的表达却明显减少 (P <0 .0 5 )。结论 :雌激素替代治疗直接增加卵巢切除大鼠心肌eNOS的表达量以及NO的产生 ,减少抑制eNOS活性的小凹蛋白 1表达。     

17β-雌二醇对人的类成骨细胞株TE85和U2功能的调节

目的：以人的类成骨细胞株TE85和U2为细胞模型,观察雌激素对细胞功能的影响。方法：³H-胸腺嘧啶参入法测细胞增殖;ELISA法测细胞因子IL-6含量;精氨酸转化法测iNOS活性。结果：IL-1(20 U.mL^-1)和TNFα(50 U.mL^-1)刺激细胞分泌IL-6,并抑制细胞增殖。在TE85细胞,17β-雌二醇(E₂)可抑制IL-6分泌并能对抗IL-1和TNFα对细胞增殖的影响。NOS抑制剂L-NMMA使细胞³H-胸腺嘧啶的参入降低,E₂(1 nmol.L^-1)可对抗L-NMMA的抑制作用。结论：E₂通过减少IL-6分泌和影响iNOS活性而调节细胞功能。     

17β—雌二醇对体外培养成年雌兔关节软骨细胞的作用及其与一氧化氮的关系

目的研究17β-雌二醇(E2)对成年雌兔关节软骨细胞的作用,探查一氧化氮(NO)是否在其中发挥中介作用。方法不同浓度E2(10-12M～10-3M)与软骨细胞共同孵育后一定时间后检测结果。用化学比色法分别检测软骨细胞增殖与能量代谢、细胞间质中胶原含量以及培养液中一氧化氮合酶(NOS)活力;硝酸还原酶法检测培养液中NO含量。结果在10-12M～10-6M剂量组,E2对软骨细胞增殖与能量代谢起剂量依赖性的抑制作用(P<0.01);在10-12M～10-9M剂量组,E2对软骨细胞合成胶原无显著性作用(P>0.05);在10-8M～10-6M剂量组,E2起剂量依赖性的抑制作用(P<0.05);在10-7M和10-6M剂量组,E2对细胞培养液中NOS活力及NO含量均无显著性作用(P>0.05);在10-5～10-3M剂量组,E2能显著性地增加培养液中NOS活力及NO的含量(P<0.05)。结论E2对软骨细胞具有“直接”调节作用,该作用与雌激素浓度呈显著性相关。NO可能是雌激素对软骨发挥抑制作用的中介因素之一。     

7α和7β-甲基-10β,17β-二乙酰氧基-4-雌甾烯-3-酮的合成

由于7α-甲基或10β-乙酰氧基4(5)烯-3-酮雌(雄)甾化合物具有显著的抗着床或抗蜕膜活性,我们合成了既具有7α-甲基或7β-甲基又具有10β-乙酰氧基的两个新甾族化合物(1_a)和(1_b)。经药理试验表明(1_a)和(1_b)对孕鼠均有抗早孕作用。     

17β-雌二醇对抗癫痫药物造成的未成熟脑损伤的保护作用

目的:探讨17β-雌二醇对抗癫痫药物短期应用导致的未成熟脑受体表达降低的保护作用。方法:3 d、7 d、14 d、21 d SD大鼠各7窝,共28窝,随机分为对照组、抗癫痫药物组及雌二醇组,抗癫痫药物组又分为苯巴比妥组、托吡酯组以及联合用药组,每组SD大鼠12只。HE染色了解海马CA1区结构,免疫组化标记海马CA1区谷氨酸受体(GluR1、NR2B),灰度分析检测受体表达情况。结果:各年龄段17β-雌二醇药物保护组较未使用17β-雌二醇保护的抗癫痫药物组GluR1、NR2B受体表达均增多(P<0.01);但各17β-雌二醇保护组受体表达较对照组仍有降低(P<0.01)。结论:17β-雌二醇对抗癫痫药物造成的脑损伤有保护作用,但保护作用尚有限。     

非小细胞肺癌患者血清中白介素-6和白介素-17的水平测定

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）血清中白介素-6和IL-17的水平及临床意义。方法采用双抗体夹心ELISA法检测52例NSCLC患者和25例健康体检者血清中IL-6和IL-17的水平。〈br〉 结果 NSCLC患者血清中IL-6和IL-17水平均高于健康体检者（P〈0.05）。NSCLC患者血清中IL-6和IL-17水平高低与患者的临床分期、分化程度、淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论 IL-6和IL-17可能参与了NSCLC发生发展的病理生理学过程,两者水平检测可用于HIE的病情监测和预后评估。     

7α-和7β-甲基-10β,17β-二乙酰氧基-△~4-雌甾烯-3酮的抗早孕作用

7α-和7β-甲基-10β,17β-二乙酰氧基-△~4-雌甾烯-3酮(简称7α-和7β-甲-乙氧雌酮)对小鼠抗早孕ED_(50)分别为1.6和5.5 mg/kg。7α-甲-乙氧雌酮在大鼠也有抗早孕作用并使血浆孕酮浓度降低,应用10 μg/ml浓度能抑制离体妊娠大鼠卵巢孕酮合成。7α-和7β-甲-乙氧雌酮与兔子宫胞浆雌二醇受体的相对结合亲和力(RBA)分别为10.8和1.5,与孕酮受体的RBA均<1.7α-和7β-甲-乙氧雌酮都有较弱的雌激素和抗雌激素活性。