金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因qacA的研究

目的 检测我院近年来临床分离的金葡菌耐消毒剂的qacA基因水平，为动态监测细菌耐药性的变化趋势、有效控制细菌耐药性的传播提供对策。方法 收集我科临床分离的金葡菌共252株，并经本实验室重新鉴定确认。参照美国CLSI／NCCLS标准，用6μg／ml苯唑西林和4％NaCl平板，筛选出耐苯唑西林金葡菌和对苯唑西林敏感的金葡菌。应用PCR基因扩增试验检测金葡菌中耐消毒剂的qacA基因水平。随机抽取一株MRSA阳性株进行基因测序，作qacA基因验证。作qacA基因阳性株的MIC检测，了解阳性株是否有耐药性的表达。结果 共检测金葡菌252株，其中MRSA84株（带有qacA基因4株），MSSA168株（带有qacA基因1株）。MRSA阳性菌株对消毒剂的MIC值明显高于MSSA菌株。结论 携带含有耐消毒剂基因qacA的金葡菌未在我院流行．     

广州三所医院鲍曼不动杆菌携带耐消毒剂基因及耐药基因的调查

目的 了解临床分离鲍曼不动杆菌携带耐消毒剂基因及耐药基因的情况.方法 收集广州地区3所三甲医院60株鲍曼不动杆菌,采用琼脂扩散法检测菌株对13种抗菌药物的药敏结果;聚合酶链反应（PCR）方法检测qacA/B、qacG、smr、qacEA1等4种耐消毒剂基因和Isabal、tnp513、PER-1和armA等4种耐药基因.结果 60株鲍曼不动杆菌主要见于重症监护病房（ICU）、烧伤科和呼吸内科,分别为33株（55.0％）、11株（18.3％）、8株（13.3％）,其余为重症监护病房1株（1.7％）、神经外科1株（1.7％）、其他6株（10.0％）.其中40株（66.7％）标本来自下呼吸道,另有创面分泌物9株（15.0％）、血7株（1 1.7％）、尿2株（3.3％）、引流物2株（3.3％）.60株鲍曼不动杆菌均为多重耐药菌,对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、四环素、环丙沙星、阿米卡星和复方新诺明等抗菌药物耐药率分别为91.7％ （55/60）、98.3％（59/60）、98.3％（59/60） 、96.6％（58/60）、96.7％ （58/60）、78.3％ （47/60）和86.7％（52/60）,对其他抗菌药物耐药率大于70.0％;PCR结果显示,qacE△1、Isaba1、PER-1和armA基因阳性率分别为78.3％ （47/60） 、85.0％（51/60）、16.7％（10/60）和88.3％ （53/60）;qacA/B、qacG、tnp513和smr 4种基因检测结果为阴性.结论 鲍曼不动杆菌对广谱抗菌药物耐药严重,并携带了耐消毒剂基因.应规范此类抗菌药物的使用并采取相应的消毒措施防止多重耐药菌株在院内传播.     

多重耐药MRSA耐消毒剂基因及抗生素耐药相关基因检测

目的明确浙江湖州解放军第98医院临床分离的多重耐药耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin—resistant Staphylococcus aureus，MRSA)耐消毒剂基因及抗生素耐药相关基因存在状况。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测20株多重耐药MRSA中耐消毒剂基因(qacA)、β-内酰胺类耐药相关基因(mecA、blaTEM)、氨基糖苷类耐药相关基因(氨基糖苷类修饰酶基因)[aac(6’)／aph(2″)、aph(3’)-Ⅲ、ant(3″)-1、ant(4′，4″)、ant(6)-1]、四环素耐药相关基因(terM)、红霉素耐药相关基因(erm)和万古霉素耐药相关基因(vanA、vanB)。结果20株MRSA中，qacA、mecA、blaTEM、aac(6’)／aph(2″)、aph(3’)-Ⅲ、tetM和eyYn基因PCR扩增均阳性，1株ant(4’，4″)基因阳性，而ant(3″)-1、ant(6)-1、vanA和vanB4种基因均阴性。结论临床分离的多重耐药MRSA中qacA、mecA、blaTEM、aac(6′)／aph(2″)、aph(3’)-Ⅲ、tetM和PM基因携带率均很高；在MRSA中发现qacA基因为我国首次报道，应引起医院感染监控部门高度重视。     

2006—2011年60株血感染的金黄色葡萄球菌毒素及耐药基因分析

【摘要】目的 了解2006-2011年临床分离的60株血感染金黄色葡萄球菌的耐药情况及毒素基因和耐药基因的流行情况。方法 VITEK 2-compact全自动细菌鉴定仪及配套鉴定卡、药敏卡对细菌进行鉴定及药敏试验;头孢西丁纸片扩散法筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）;应用聚合酶链反应（PCR）检测mecA、耐消毒剂基因（qacA）、杀白细胞素基因(pvl)、肠毒素基因（sea、seb、sec1、sed、see）及中毒休克综合征毒素-1基因( tst)。结果 60株金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率最高（91.7%）,其次为红霉素（65.0%）、克林霉素（65.0%）、庆大霉素（40.0%）。未发现万古霉素、利奈唑胺、替加环素耐药菌株。其中携带耐药基因mecA 13株（21.7%）、qacA 3株（5.0%）、检出毒素基因pvl 4株（6.7%）、肠毒素基因sea 20株（33.3%）、seb 3株（5.0%）、sec 9株（15.0%）及sed 7株（11.7%）,未检出see 及tst。结论 血感染的金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、克林霉素、庆大霉素耐药率高,同时携带多种毒素及耐药基因,临床应加强毒素及耐药基因检测。     

长春市金葡菌耐药状况及耐甲氧西林金葡菌基因分型

目的调查长春地区临床分离金葡菌的耐药状况及Panton—Valentine杀白细胞素（PVL）分布情况；确定耐甲氧西林金葡菌（MRSA）染色体及葡萄球菌me~盒式染色体（SCCmec）基因分型。方法琼脂稀释法测定苯唑西林等17种抗菌药物对2004年6月～2005年1月长春市3家教学医院临床标本分离的83株金葡菌的最低抑菌浓度（MIC）；聚合酶链式反应（PCR）进行金葡菌的PVL基因检测；脉冲场凝胶电泳（PFGE）对MRSA菌株作染色体同源性分析。多重PCR方法检测MRSA的SCCmec基因分型。结果83株金葡菌中MRSA12株（占14．5％）；金葡菌PVL的基因阳性7株（占8．4％）。MRSA对β-内酰胺类、红霉素、克林霉素、庆大霉素、四环素、氟喹诺酮类耐药率均超过90％，对氯霉素、利福平耐药率分别为8．3％、58．3％。未发现对糖肽类及复方磺胺甲嗯唑耐药的MRSA。甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）对青霉素G、红霉素、克林霉素、四环素、庆大霉素耐药率分别为95．8％、67．6％、49．3％、45．1％、26．8％，对头孢菌素、氯霉素、利福平、氟喹诺酮类、复方磺胺甲曙唑耐药率均低于20％。MRSA的PFGE显示为A、B两种类型，以A型为主，占92％（11／12），三家医院均有分布。MRSA的SCCmec分型．Ⅲ型为主75％（9／12）。结论长春市MRSA发生率低于国内报道平均水平；MRSA为两种不同类型克隆株，在不同医院间存在克隆传播；未发现社区获得性MRSA菌株。     

临床分离鲍曼不动杆菌耐消毒剂基因携带情况分析及消毒对策

目的了解临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药特性和耐消毒剂基因qacEΔ1-sull的携带情况及其对含氯消毒剂的敏感性。方法采用K-B琼脂纸片扩散法检测抗茵药物的敏感性,采用聚合酶链反应（PCR）检测耐消毒剂基因qacEΔ1-sull,用肉汤稀释法检测茵株的最低抑茵浓度（MIC）。结果73株鲍曼不动杆菌中,37株（50．68％）qacEΔ1-sull阳性,含氯消毒剂对鲍曼不动杆菌的平均MIC值为365．07mg／L。结论临床分离的鲍曼不动杆菌为多重耐药茵,qacEΔ1-sull基因携带率较高,但临床常用浓度的含氯消毒剂可将鲍曼不动杆菌杀灭。     

社区与医院环境分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌相关耐药基因及耐消毒剂基因特点对比分析

目的探讨社区与医院环境分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）相关耐药基因及耐药消度剂基因携带特点。方法检测并分析98株MRCNS相关耐药基因及耐消毒剂基因特点,其中46株来自门诊患者,52株来自同期住院患者。结果社区与医院环境分离MRCNS以溶血性葡萄球菌、表皮葡萄球菌为主,占所有葡萄球菌的70%。社区与医院分离的MRCNS m ecA基因均阳性;社区MRCNS携带耐消毒剂基因率、MRCNS gyrA基因携带率、左氧氟沙星耐药率高于医院,医院阿米卡星耐药率高于社区。结论不同环境分离出的MRCNS耐药性不同,不同用药习惯决定了抗菌药物耐药性存在差别。     

医院感染鲍曼不动杆菌耐消毒剂基因及同源性分析

目的分析从我院院感病人分离的多重耐药鲍曼不动杆菌中耐消毒剂基因qacEΔ1的存在情况及其阳性菌株的同源性。方法采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析75株多重耐药鲍曼不动杆菌中qacEΔ1基因,用重复序列PCR技术(REP-PCR)分析阳性菌株的同源性。结果 75株多重耐药鲍曼不动杆菌中,33株qacEΔ1基因阳性,阳性率44%:25株泛耐药菌株,13株qacEΔ1基因阳性,阳性率52%。33株阳性菌株分为5个基因型,其中A型29株,为主要流行型别,B、C、D、E型各1株。结论我院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌qacEΔ1基因携带率较高可能是该菌检出率逐年增多的原因之一,且阳性菌株中存在着以A型为主的感染流行。qacEΔ1阳性菌株可能易发生多重耐药。     

社区与医院环境分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌相关耐药基因及耐消毒剂基因特点对比分析

目的 探讨社区与医院环境分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)相关耐药基因及耐药消度剂基因携带特点.方法 检测并分析98株MRCNS榴关耐药基因及耐消毒剂基因特点,其中46株来自门诊患者,52株来自同期住院患者.结果 社区与医院环境分离MRCNS以溶血性葡萄球菌、表皮葡萄球菌为主,占所有葡萄球菌的70%.社区与医院分离的MRCNS mecA基因均阳性;社区MRCNS携带耐消毒剂基因率、MRCNS gyrA基因携带率、左氧氟沙星耐药率高于医院,医院阿米卡星耐药率高于社区.结论 不同环境分离出的MRCNS耐药性不同,不同用药习惯决定了抗菌药物耐药性存在差别.     

Analysis of drug resistance and five drug resistance genes in MRSA from differeut populations in Naning district

目的 探讨南京地区成年健康人群鼻咽部携带的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和医院下呼吸道感染患者痰液中分离的MRSA的耐药性及耐药基因分布特点.方法 收集南京地区成年健康人群(健康组)鼻咽部分离的19株MRSA和医院下呼吸道感染患者(临床组)痰液中分离的51株MRSA,K-B法测定其药敏情况,多重PCR法检测mecA基因,氨基糖苷修饰酶基因aacA-aphD,大环内酯类23s rRNA甲基化酶基因ermA、ermC,四环素类核糖体保护蛋白基因tetM、tetK.结果 所有菌株对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺敏感,对多种抗生素的耐药率在90％以上,携带mecA基因；aacA-aphD、ermA、ermC、tetM、tetK五种耐药基因的MRSA菌株在健康组和临床组的检出率分别为94.8％、100.0％、21.0％、100.0％、10.5％和98.0％、96.1％、19.6％、96.1％、23.5％.结论 南京地区成年健康人群鼻咽部携带的MRSA和医院下呼吸道感染患者分离的MRSA均表现出多重耐药,相关耐药基因检出率高.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及其Panton-Valentine杀白细胞素基因的检测

目的:了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对抗菌药物的耐药性及其Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因的检出情况。方法:收集2007年1月～2008年6月分离自河北医科大学第一医院临床患者的MRSA45株,采用Kerby-Bauer纸片扩散法测定细菌对17种抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链反应(PCR)技术检测PVL基因。结果:MRSA对青霉素G、红霉素、克林霉素、环丙沙星、四环素的耐药率均在70%以上,有12株MRSA检出PVL基因,检出率为26.7%。结论:MRSA呈多重耐药,PVL基因是MRSA的重要致病因子。     

南京地区不同人群呼吸道耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及五种耐药基因分析

目的探讨南京地区成年健康人群鼻咽部携带的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和医院下呼吸道感染患者痰液中分离的MRSA的耐药性及耐药基因分布特点。方法收集南京地区成年健康人群(健康组)鼻咽部分离的19株MRSA和医院下呼吸道感染患者(临床组)痰液中分离的51株MRSA,K-B法测定其药敏情况,多重PCR法检测mecA基因,氨基糖苷修饰酶基因aacA-aphD,大环内酯类23srRNA甲基化酶基因ermA、ermC,四环素类核糖体保护蛋白基因tetM、tetK。结果所有菌株对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺敏感,对多种抗生素的耐药率在90%以上,携带mecA基因;aacA-aphD、ermA、ermC、tetM、tetK五种耐药基因的MRSA菌株在健康组和临床组的检出率分别为94.8%、100.0%、21.0%、100.0%、10.5%和98.0%、96.1%、19.6%、96.1%、23.5%。结论南京地区成年健康人群鼻咽部携带的MRSA和医院下呼吸道感染患者分离的MRSA均表现出多重耐药,相关耐药基因检出率高。     

Transduction of the plasmid encoding antiseptic resistance gene qacB in Staphylococcus aureus

The plasmid-borne qacA and qacB genes encode a multidrug efflux protein. The proteins encoded by qacA and qacB mediate efflux of cationic antiseptic agents such as quaternary ammonium compounds. In methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), qacA and qacB are widely prevalent and decrease antiseptic susceptibility. However, it is difficult to find the plasmids encoding qacA or qacB in community-associated MRSA (C-MRSA) isolated from patients with impetigo. Most MRSA, the strains causative of impetigo, carry the plasmid-borne exfoliative toxin-producing gene etb. To find the reason for the paucity of qacA or qacB in MRSA isolated from patients with impetigo, we performed transfer experiments of the plasmid pTZ2162qacB encoding qacB. The pTZ2162qacB was transferred to S. aureus strain RN4220 by transduction, although no pTZ2162qacB was transferred by conjugation. Additionally, pTZ2162qacB was transduced to MRSA carrying etb, and was coexistence with the plasmid encoding etb. Our results showed that pTZ2162qacB was horizontally transferred by transduction and was compatible with the plasmid encoding etb. Consequently, there will be risk of the emergence of C-MRSA with decreased antiseptic susceptibility among patients with impetigo.     

Expression of multidrug resistance efflux pump genes in clinical and environmental isolates of Staphylococcus aureus

Increased expression of multidrug resistance efflux pump (MDR-EP) genes in clinical isolates of Staphylococcus aureus occurs frequently, but its temporal and geographic variability is unknown. Such strains may contaminate the hospital environment, posing an infection control problem. Nearly 700 clinical isolates from different geographic locales as well as 91 environmental isolates recovered from two Detroit hospitals were studied. Ethidium bromide (EtBr) minimum inhibitory concentration (MIC), quantitative expression of all characterised chromosomal MDR-EP genes, and the presence of qacA/B and smr were determined for all strains. In addition, for norA- and/or mepA-overexpressing strains, the spa type was established. MDR-EP gene overexpression varied temporally and geographically, and overexpressing strains were present in the hospital environment. Increased expression of norA was associated with meticillin resistance and spa type t002, a rare type among control strains, consistent with widespread dissemination of a norA-overexpressing, meticillin-resistant S. aureus (MRSA) clone. Clonal spread also played a role for spa type t008, mepA-overexpressing, meticillin-susceptible strains. An EtBr MIC of ≤12.5μg/mL was highly specific (>90%) in identifying strains lacking MDR-EP gene overexpression.     

Identification of the plasmid-encoded qacA efflux pump gene in meticillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strain HPV107, a representative of the MRSA Iberian clone

Meticillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is a major nosocomial bacterium for which prevention and control measures consist mainly of the application of biocides with antiseptic and disinfectant activity. In this study, we demonstrated the presence of the plasmid-located efflux pump gene qacA in MRSA strain HPV107, a clinical isolate representative of the MRSA Iberian clone. The existence of efflux activity in strain HPV107 due to the QacA pump was also established and this QacA efflux activity was linked with a phenotype of reduced susceptibility towards several biocide compounds. No association could be made with antibiotic resistance. This work emphasises the potential of QacA pump activity in the maintenance and dissemination of important MRSA strains in the hospital setting and, increasingly, in the community.     

41株金黄色葡萄球菌耐药性分析及PVL基因检测

目的了解临床分离金葡菌对常用抗生素的耐药性和杀白细胞毒素(PVL)基因携带情况。方法采用头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),K-B法检测临床分离的41株金葡菌对常用抗生素的敏感性,PCR法检测mecA基因和PVL基因携带情况。结果 41株金葡菌中MRSA占51.2%,MRSA对克林霉素、红霉素、氨基糖苷类和喹诺酮类耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),MRSA和MSSA对复方新诺明敏感率分别为90.5%和95%,未发现对万古霉素、替考拉林和利奈唑胺耐药株。21株MRSA mecA基因均阳性,41株金葡菌中共检出2株携带PVL基因,MRSA与MSSA各占1株,均分离自骨科病房。结论该院临床分离MRSA耐药率高,应规范临床用药,加强MRSA耐药性监测,加强PVL基因的检测,防止此类菌株的播散。     

哺乳期乳腺脓肿分离的金黄色葡萄球菌耐药性与毒力基因研究

目的研究哺乳期乳腺脓肿分离的金黄色葡萄球菌耐药性和毒力基因,为临床治疗提供参考依据。方法收集2015年1月至2017年12月我院乳腺科哺乳期妇女发生乳腺脓肿后分离到的金黄色葡萄球菌,包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)60株和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)64株,用聚合酶链反应(PCR)的方法分析mecA、hla、pvl、clfA、nuc、sea、psm-mec基因。结果 MRSA和MSSA菌株对青霉素(≥90.6%)和红霉素(≥59.4%)的耐药率较高,对利福平、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、莫西沙星、替加环素、万古霉素和利奈唑烷的敏感性较高(≥98.3%)。MRSA对克林霉素、四环素的耐药率明显高于MSSA (P<0.05)。60株MRSA经mecA基因检测均为阳性,64株MSSA均为阴性。Hla、clfA、nuc毒力因子在MSSA和MRSA中均具有较高的携带率(≥98.3%),MRSA携带毒力因子pvl明显低于MSSA (P<0.05)。结论 MRSA携带mecA基因,对克林霉素、四环素的耐药率高于MSSA;MRSA毒力因子pvl携带率低于MSSA,临床应针对哺乳期乳腺脓肿进行MRSA防控,同时需监测MSSA携带毒力基因的状况,评估患者的预后。     

耐甲氧西林金葡菌对抗菌药物的耐药表型和基因型分析

目的 了解来自汕头和北京地区的67株耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的耐药情况及耐药机制,并分析耐药表型与基因型的一致情况.方法 以琼脂稀释法测定24种抗菌药物对MRSA的体外抗菌活性,PCR扩增MRSA的耐药基因,nitrocefin测定细菌产β-内酰胺酶的情况.结果 67株MRSA除了对氯霉素和多西环素的耐药率较低,分别为3%和7.5%,对万古霉素、米诺环素和利凡诺100%敏感外,对利福平的耐药率为52.2%,对四环素的耐药率为77.6%,而对于其它包括青霉素、第1～4代头孢菌素、单环β-内酰胺类、碳青霉烯类、氨基糖苷类和磺胺类的耐药率均在80%～90%以上,氨苄西林加酶抑制剂以后则耐药程度有所降低.qacA/B、mecA、tetM、NorA、gyrA、aac(6')/aph(2")、aph(3')Ⅲ和β-内酰胺酶检出率分别为11.9%、95.5%、70.1%、4.5%、10.4%、82.1%、73.1%和92.5%,未检出qacC、ant(6)-I、ant(2")-I、VanA和VanB耐药基因.67株MRSA均携带有多种耐药基因:同时携带2种耐药基因的有7株,3种的有10K,4种的有11株,5种的29株,6种的10株.结论 67株MRSA耐药情况严重,并同时携带多种耐药基因.     

Ⅰ类切口处皮肤金黄色葡萄球菌的带菌率和耐药性调查

目的:了解Ⅰ类切口处皮肤上的金黄色葡萄球菌(SA)带菌率及耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法:用皮肤拭子采集Ⅰ类切口处皮肤标本,对培养出的SA按K-B法进行药敏试验,遵照《临床微生物检验手册》进行操作。结果:共采集样本991份,检出23株SA,检出率为2.32%;其中17株对苯唑西林敏感,6株对苯唑西林耐药,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)带菌率为0.61%,耐药率为26.09%。结论:我院Ⅰ类切口患者皮肤SA的检出率相对较低,耐药率较高,需加强感染控制管理,采取有效措施,防止MRSA的院内传播。