牛蒡苷元体外抗流感病毒活性

目的：体外观察牛蒡苷元（arctigenin,ACT)抗甲1流感病毒作用，为进一步确认ACT是牛蒡子Fructus arctii解表功能有效成分提供实验依据。方法：采用MDCK细胞培养法，通过红细胞凝集实验，以流感病毒血浆滴度为指标，观察ACT对流感病毒复制的抑制作用。结果：ACT浓度(mmol/L)为6．7，13．4，26．8和53．6的血凝滴度抑制率（％）分别为0．75，87．5和100。结论：ACT在体外有直接抑制流感病毒复制的作用，是牛蒡子解表功能的有效成分，对其进行含量测定作为牛蒡子质量标准的定量指标是适宜和可行的。     

HPLC测定清热解毒复方抗流感病毒有效部位群中牛蒡子苷的含量

清热解毒复方经临床实验证明是治疗流行性感冒、麻疹、流脑等的有效方剂,它由金银花、牛蒡子、连翘、薄荷4味中药组成.我们对它的抗流感病毒活性进行研究,结果显示良好的抗病毒作用,并筛选出了清热解毒复方的抗流感病毒有效部位群.根据文献报道[1],黄酮类和木脂素类化合物均具有抗流感病毒的作用.为了有效控制该方剂抗流感病毒有效部位群的内在质量,选用该方剂抗流感病毒有效部位群中含量较高的木脂素类化合物牛蒡子苷为指标成分,用高效液相色谱方法来测定其含量.     

牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的超声提取工艺研究

目的:研究牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的超声提取工艺。方法:考察超声功率、药材粒径、液固比、提取时间、提取温度以及占空比等因素对牛蒡苷及牛蒡苷元提取率的影响,并采用正交试验设计优化提取工艺。结果:在本试验条件内,超声提取的最优条件如下:药材粒径为80～100目,提取温度为50℃,液固比为14mL/g,超声功率为400W,提取时间为10min。结论:按照优化正交试验确定的最佳工艺条件合理、可靠。     

牛蒡子苷元的制备工艺研究

目的通过对牛蒡子Arctii Fructus中提取分离牛蒡子苷元产业化过程中的技术难点进行攻关研究,为牛蒡子苷元的产业化提供一种切实可行的制备工艺,以促进牛蒡子苷元的产业化发展。方法采用酸解醇提法得到干膏,用醋酸乙酯提取,分得粗品,对粗品进行乙醇结晶,得高质量分数牛蒡子苷元。结果经简单提取分离可得到质量分数75.0%的牛蒡子苷元粗品,再经乙醇结晶,即可得到质量分数99.0%的牛蒡子苷元成品。结论本研究得到一种适合牛蒡子苷元工业化生产的制备工艺。     

HPLC法测定牛蒡中牛蒡子苷、牛蒡子苷元、绿原酸的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定牛蒡中牛蒡子苷、牛蒡子苷元、绿原酸含量的方法,比较3种成分在不同部位以及牛蒡子不同炒制时间的含量。方法:采用Welchrom C_(18)柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱;流速为1.0m L/min;检测波长为280nm;柱温为30℃。结果:3种成分的进样量分别在4.2844~51.4128μg,0.3254~3.9048μg,0.3072~3.6864μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.64%,100.81%,97.92%,RSD值均小于1.5%;牛蒡叶和牛蒡根中几乎没有牛蒡子苷和牛蒡子苷元;牛蒡子所有炒制品与生品比较,三者的总含量均下降,炒制时间从10~40min时,牛蒡子苷、绿原酸的含量下降,牛蒡子苷元的含量增加。结论:该方法简便、准确,精密度、重复性良好,可为牛蒡子质量控制提供依据,不同部位、炒制时间结果可以为牛蒡综合开发提供依据。     

高效液相色谱法测定不同采购地牛蒡子中牛蒡子苷和苷元的含量

目的 :同时测定牛蒡子药材中牛蒡子苷和牛蒡子苷元的含量。方法 :采用高效液相色谱法。HP110 0液相色谱系统四元泵 ,色谱柱 Kromasil ODS(4 .6 mm× 2 5 0 mm,5 μm) ;流动相 :甲醇 -乙腈 -水 -四氢呋喃 10∶ 2 4∶ 6 5∶ 1至 10∶ 39∶ 5 0∶ 1线性梯度 ,检测波长 2 2 0 nm。结果 :牛蒡子苷及牛蒡子苷元的平均回收率分别为 10 2 .4 % ,10 2 .9% ,RSD分别为0 .6 % ,1.3% (n=5 ) ,线性方程分别为 Y=0 .0 0 0 7X- 0 .176 3(r=0 .9999) ,Y=0 .0 0 0 5 X+0 .0 14 1(r=0 .9998)。结论 :该方法快速准确 ,可同时测定牛蒡子药材中牛蒡子苷和牛蒡子苷元的含量 ,可用作牛蒡子药材的质量控制方法。     

高效液相色谱法测定牛蒡药材不同部位牛蒡子苷和苷元的含量

目的:对牛蒡药材不同部位牛蒡子苷和牛蒡子苷元含量测定.方法:采用高效液相色谱法的测定.Agilent 1100液相色谱系统四元泵,Agilent色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);甲醇一水二元梯度洗脱,检测波长280nm.结果:牛蒡的根、茎、叶中几乎不含牛蒡子苷和牛蒡子苷元.绒毛和花序中含少量牛蒡子苷和牛蒡子苷元,而牛蒡子在牛蒡中二者含量均高.结论:该方法简便、准确,为更好的开发利用牛蒡提供依据.     

星点设计-效应面法优化牛蒡子中牛蒡子苷和牛蒡子苷元提取工艺

目的：优化牛蒡子中双指标成分最佳提取工艺。方法：采用星点设计-效应面法,在3个主要因素作用下,以牛蒡子苷及牛蒡子苷元提取率为评估指标,经过多元线性回归和二项式拟合,利用岭嵴分析法优化牛蒡子苷及其苷元提取工艺。结果：确定牛蒡子苷及牛蒡子苷元最佳提取工艺为：70%乙醇,24倍量,超声提取15 min。结论：上述工艺能够大量提取牛蒡子苷及牛蒡子苷元,为制备牛蒡子苷及其苷元提供试验依据,也为充分开发利用牛蒡资源提供参考。     

牛蒡子甙元体内抗甲1型流感病毒作用的研究

目的:从体内抗病毒实验观察牛蒡子抗甲1型流感病毒作用.方法:以病毒滴鼻感染小鼠,观察肺指数、病毒致小鼠死亡率等的影响.结果:牛蒡子甙元在100 μg/kg及10 μg/kg口服均明显抑制甲1型流感病毒引起的小鼠肺炎实变;牛蒡子甙元100 μg/kg浓度组对甲1型流感病毒感染的小鼠有死亡保护作用.结论:牛蒡子甙元是一种治疗流行性感冒的有效药物.     

基质固相分散法提取牛蒡子中牛蒡子苷和牛蒡子苷元

目的: 探析基质固相分散法提取牛蒡子中牛蒡子苷和牛蒡子苷元的可行性。 方法: 以牛蒡子苷和牛蒡子苷元总提取量为评价指标,采用HPLC测定指标成分含量,通过单因素试验考察分散剂、洗脱剂、压实程度及洗脱流速对牛蒡子有效成分提取率的影响,并与甲醇超声提取法进行比较。 结果: 选取4倍量硅胶为分散剂,100倍量甲醇为洗脱剂,洗脱流速约40滴/min,压实程度为中度挤压;牛蒡子苷和牛蒡子苷元的总提取率达7.94%,略高于甲醇超声提取法的7.89%。 结论: 基质固相分散法操作简单、快速,可作为牛蒡子主要成分的提取方法,并为中药材有效成分的提取提供参考。     

菘蓝有效成分抗流感病毒作用的实验研究

目的研究菘蓝有效成分在体内外抗甲型流感病毒的作用。方法体外用MTT法检测菘蓝有效成分对传代狗肾细胞(MDCK)的毒性浓度,观察菘蓝有效成分抑制甲型流感病毒的致细胞病变作用(CPE),MTT法检测菘蓝有效成分对流感病毒的抑制率;建立在体流感病毒感染小鼠肺炎模型,通过观察小鼠肺病变程度指标,测定肺组织内流感病毒血凝滴度判定菘蓝有效成分对小鼠肺炎的治疗作用。结果菘蓝有效成分在体外主要抑制甲型流感病毒在细胞内的复制,其对病毒的半数抑制率浓度为64μg.mL-1,治疗指数达28.88;口服菘蓝有效成分能明显减轻小鼠肺组织病变程度,对肺组织内病毒的增殖有明显抑制作用。结论菘蓝有效成分具有较好的抗甲型流感病毒的作用,且呈剂量效应关系。     

青天葵抗甲、乙型流感病毒作用研究

目的研究青天葵在体外抗甲、乙型流感病毒株作用。方法选用狗肾细胞培养法考察青天葵不同极性部位对甲型(FM1)、乙型(昆40B)流感病毒的作用。结果青天葵水溶性部位对甲型流感病毒FM1有抑制作用。结论青天葵具有体外抗甲型流感病毒作用。     

克感复方对流感病毒抑制作用的实验研究

目的:探讨克感复方在MDCK细胞上抗流感病毒的作用并对其机制进行初步研究。方法:以利巴韦林为阳性对照药物,运用抑制试验、预防试验、中和试验3种方法,以MTT法检测细胞存活率,研究克感复方抗流感病毒的作用并判断其作用原理。同时,通过药物血凝抑制实验分析其抗流感病毒作用是否与病毒血凝素相关。结果:克感复方对MDCK细胞的半数毒性浓度(CC50)为(2.84±0.65)mg/mL,抑制流感病毒增殖的半数有效浓度(EC50)为(0.18±0.12)mg/mL,选择性指数(SI)为15.78。有细胞外杀流感病毒作用,但作用较弱,最高抑制率未超过50%。无阻断流感病毒吸附的作用。无药物血凝抑制作用。结论:克感复方在MDCK细胞上具有抗流感病毒的作用,其中抑制流感病毒增殖的能力最强。     

预防性中药防治流感病毒作用及其免疫调节机制探讨

目的:研究预防性中药抗流感病毒及其黏膜免疫调节机制。方法:56只雌性SPF级BALB/C小鼠,随机分为造模组(48只)和正常组(8只),建立小鼠流感病毒H1N1/FM/1感染模型,造模成功后随机分为模型组、病毒唑组(0.1 g·kg-1),银翘散组(40 g·kg-1),玉屏风散组(60 g·kg-1),冰香散雾化组(0.6 g·kg-1),冰香散滴鼻组(0.03 g·kg-1),ig给药,5 d后处死小鼠,测定病毒载量,同时进行肺组织病理学检查;检测对气管黏膜树突状细胞(DC)数量(OX-62),成熟度:以CD80,趋化因子激素受体7(CCR7)阳性表达面积表示及抗原识别受体Toll样受体2(TLR2)和TLR4的影响;对鼻通道淋巴组织细胞CD4+,CD8+进行相应的检查。结果:与模型组比较,预防性中药对病毒载量及肺组织病理学有显著的抑制作用,流感病毒感染小鼠气管黏膜OX-62增加,冰香散(雾化)能使流感病毒感染鼠DC数降低,CD80和CCR7明显下降,而病毒唑和银翘散制剂能提升CCR7阳性表达面积,流感病毒感染鼠黏膜TLR2,TLR4表达增强,冰香散能抑制流感病毒感染鼠TLR2的表达,冰香散滴鼻给药能提高CD4+,CD8+的水平,均具有明显的统计学差异(P0.05,P0.01)。结论:三类防治流感的中药均有较好的抑制流感病毒作用,其作用可能与其调节呼吸道黏膜免疫作用有关。     

小儿宝泰康颗粒对流感病毒感染细胞的抗病毒作用研究

目的：观察小儿宝泰康颗粒对流感病毒感染细胞的抑制作用。方法：通过细胞培养技术观察不同浓度的小儿宝泰康颗粒对Madin-Darby犬肾（MDCK）细胞的细胞毒性作用,采用MTT法并结合CPE法检测细胞成活率和病毒抑制率,计算药物的抗病毒指数TI,以利巴韦林作为阳性对照药物,评价该药物对甲、乙型流感病毒的抗病毒活性。结果：小儿宝泰康颗粒对MDCK细胞的半数细胞毒性浓度（CC50）为5.6 mg/mL,对甲型H1N1流感病毒感染MDCK细胞的半数有效浓度（EC50）为2.1 mg/mL,而对乙型流感病毒的EC50为1.44 mg/mL,抗病毒指数分别为2.64和3.89。在阳性对照药物实验中,利巴韦林在200 μg/mL时,对甲、乙型流感病毒的抑制率均达到70%以上。结论：小儿宝泰康颗粒是一种对不同型流感病毒感染有抗病毒作用的药物,有临床应用前景和进一步研究的价值。     

流感病毒裂解效果研究

目的 不同时间裂解甲乙型流感病毒，测定血凝效价，找出最佳裂解条件。方法 甲乙型单价病毒液中分别加入0．5％—0．6％TritonN—101，室温振荡一定时间后取样，电镜观察结果。结果 经过观察Al和A3型流感病毒在3—4h、乙型流感病毒在4—5h效果较好。结论 流感疫苗生产中甲乙型流感病毒的裂解应采取不同时间以获得最佳效果。     

银翘散抗流感病毒有效部位群化学成分的分离与鉴定

目的 :对银翘散抗流感病毒作用的物质基础进行研究。方法 :运用色谱技术进行分离 ,波谱等方法鉴定化合物的结构。结果 :从银翘散抗流感病毒有效部位群中分离得到 11种成分 ,鉴定为牛蒡子苷 (Ⅰ )、连翘苷(Ⅱ )、连翘酯苷 (Ⅲ )、甘草苷 (Ⅳ )、甘草素 (Ⅴ )、染料木素 (Ⅵ )、芒柄花素 (Ⅶ )、大豆素 (Ⅷ )、6 甲氧基大豆素 (Ⅸ )、3,3′ ,4 三甲氧基鞣花酸 (Ⅹ )和绿原酸 (Ⅺ )。结论 :染料木素、大豆素、6 甲氧基大豆素和 3,3′,4 三甲氧基鞣花酸为首次从银翘散群药中获得。     

银荆感冒颗粒抗乙型流感病毒的药效学研究

目的 研究银荆感冒颗粒对乙型流感病毒(B/京防98-96)的抑制作用.方法 体外接种乙型流感病毒鼠肺适应株于狗肾细胞(MDCK),观察银荆感冒颗粒体外抗病毒作用;体内实验①以乙型流感病毒鼠肺适应株滴鼻感染小鼠,观察14 d,计算小鼠存活率及存活天数;体内实验②以乙型流感病毒鼠肺适应株滴鼻感染小鼠,观察肺指数.结果 银荆感冒颗粒体外抗乙型流感病毒EC50为3.68 mg/ml.银荆感冒颗粒10 g/kg和20 g/kg剂量组可明显延长乙型流感病毒感染小鼠存活天数,降低死亡率;银荆感冒颗粒20 g/kg剂量组可明显抑制肺指数值,抑制率为36.7%.结论 银荆感冒颗粒对乙型流感病毒有一定的抑制作用.     

复方一枝蒿不同剂型对甲型H1N1流感病毒体外作用研究

目的研究复方一枝蒿不同剂型(颗粒剂、微丸、滴丸)对甲型H1N1流感病毒的体外作用,反应药效与提取工艺、剂型的关系。方法进行复方一枝蒿不同剂型(颗粒剂、微丸、滴丸)体外抗病毒试验。利巴韦林、奥司他韦为阳性对照药,通过甲型H1N1流感病毒致人喉癌上皮细胞(Hep-2)病变实验,研究指标TC50、TC0、IC50、SI(即半数有毒浓度、最大无毒浓度、半数抑制浓度、治疗指数),以上研究指标均通过Reed-Muench法计算所得。结果复方一枝蒿不同剂型(颗粒剂、微丸、滴丸)对流感病毒(甲型)均有抑制作用,其抑制作用表现为:提取工艺优化后制备的微丸、滴丸与提取工艺优化前制备的颗粒剂相比,体外抗病毒作用效果增强;相同提取工艺条件下,复方一枝蒿微丸的体外抗病毒作用优于复方一枝蒿滴丸。结论复方一枝蒿不同剂型(颗粒剂、微丸、滴丸)具有不同程度的抗H1N1(甲型流感病毒)作用,复方一枝蒿微丸作用效果优于其他两种剂型。